微免病毒總論

醫(yī)學(xué)微生物學(xué)許文7A208基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室溫州醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)分類原核細(xì)胞型:細(xì)菌、四體（螺旋體、支原體、立克次體、衣原體）真核細(xì)胞型:真菌非細(xì)胞型：病毒等

HBV、HIV病毒(virus)體積小(nm)無完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)一種核酸(RNA或DNA)，朊病毒只有蛋白在敏感的活細(xì)胞內(nèi)增殖

定義：體積小，結(jié)構(gòu)簡單，含一種類型的核酸，只能在活的、敏感細(xì)胞內(nèi)增殖的非細(xì)胞型微生物。主要特點(diǎn)：病毒體結(jié)構(gòu)模式HIV病毒真核細(xì)胞1886年德國人麥爾證實(shí)了煙草花葉病的傳染性1892年俄國人伊萬諾夫斯基證實(shí)其病原是新的病原因子1896年荷蘭貝葉林克給這種病原命名為virus（病毒）病毒是如何發(fā)現(xiàn)的？臨床病毒學(xué)現(xiàn)狀引起多種感染性疾?。号R床表現(xiàn)多樣性：輕微疾病:鼻病毒和冠狀病毒引起感冒流行性疾病:流感病毒引起流感急性感染和慢性感染:急性、慢性肝炎致畸作用:孕期感染風(fēng)疹病毒引起胎兒先天性心臟病與腫瘤相關(guān)：EBV，HBV，HPV

新現(xiàn)與重現(xiàn)病原體增多：SARS病毒、禽流感病毒接種人痘或牛痘預(yù)防天花琴納給小兒接種牛痘3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥病毒的大小與形態(tài)病毒體：具有傳染性的、結(jié)構(gòu)完整的病毒顆粒。病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)病毒的測(cè)量單位——納米（nm）。

細(xì)菌---微米20-300nm大、中、小三型微生物的大小比較葡萄球菌(1000nm）

牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體

(65×95nm)B、腺病毒

(70nm)C、脊髓灰質(zhì)炎病毒

(30nm)D、乙腦病毒

(40nm)E、蛋白分子

(10nm)F、流感病毒

(100nm)G、煙草花葉病毒

病毒的形態(tài)有球形、磚形、桿形、彈狀和蝌蚪形等。動(dòng)物病毒多為球形。球形病毒（多見動(dòng)物病毒）桿狀病毒（植物病毒）蝌蚪形(噬菌體)磚形病毒子彈狀病毒（狂犬病毒)病毒的結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成病毒結(jié)構(gòu)

基本結(jié)構(gòu)（核衣殼）核心衣殼（殼?！職ぃ┌ぢ悴《景げ《静《窘Y(jié)構(gòu)與化學(xué)組成核酸蛋白:

結(jié)構(gòu)蛋白:衣殼蛋白包膜蛋白非結(jié)構(gòu)蛋白:與復(fù)制有關(guān)的酶等病毒結(jié)構(gòu)示意圖核心衣殼包膜無包膜病毒有包膜病毒核心只含一種核酸，DNA或RNA除去病毒衣殼仍具有感染性的核酸稱感染性核酸控制病毒的增殖、變異、毒力等性狀單鏈(ssRNA,ssDNA)、雙鏈(dsRNA,dsDNA)、分節(jié)段（分別稱DNA病毒和RNA病毒）核酸本身能夠進(jìn)入細(xì)胞，啟動(dòng)復(fù)制病毒核心外的蛋白質(zhì)層

衣殼殼粒(多肽)由一定數(shù)量的殼粒組成；分為二十面體立體對(duì)稱型、螺旋對(duì)稱型和復(fù)合對(duì)稱型；有維持外形、保護(hù)核酸、介導(dǎo)感染和決定抗原性等作用。螺旋對(duì)稱型20面體立體對(duì)稱型復(fù)合對(duì)稱型包膜包膜蛋白形成刺突包膜的作用：具有抗原性維護(hù)病毒的完整性決定病毒的感染途徑介導(dǎo)病毒的感染化學(xué)成分：脂質(zhì)和蛋白質(zhì)包膜病毒不能經(jīng)消化道感染脂質(zhì)來自宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)由病毒基因編碼--衣殼外的脂雙層膜

病毒的增殖

病毒增殖條件：活細(xì)胞、敏感細(xì)胞增殖方式：復(fù)制

以病毒基因?yàn)槟０?，籍DNA多聚酶或RNA多聚酶復(fù)制病毒的基因組，轉(zhuǎn)錄、翻譯出病毒蛋白，組裝成病毒顆粒并釋放出子代病毒。

病毒增殖方式病毒的復(fù)制周期吸附穿入脫殼生物合成組裝與釋放吸附穿入脫殼宿主細(xì)胞核酸游離mRNA轉(zhuǎn)錄翻譯早期蛋白質(zhì)病毒ＤＮＡ

復(fù)制mRNA轉(zhuǎn)錄晚期蛋白質(zhì)

轉(zhuǎn)譯組裝與成熟釋放吸附

病毒表面蛋白質(zhì)與細(xì)胞接觸→結(jié)合→特異性吸附（病毒表面蛋白與細(xì)胞膜特異受體結(jié)合）

——決定病毒的嗜組織性非特異吸附穿入融合---病毒包膜與細(xì)胞膜融合后釋放核酸：有包膜病毒吞飲---先形成吞噬小體，再釋放核酸病毒體穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的過程。有包摸病毒無包摸病毒吞飲---多數(shù)無包膜病毒直接進(jìn)入–噬菌體穿入penetration融合胞飲直接穿入脫殼uncoating

核酸從衣殼中釋放出來的過程。

穿入胞質(zhì)中的核衣殼脫去蛋白質(zhì)，使基因組核酸裸露的過程

細(xì)胞溶酶體酶

脫殼酶生物合成Biosynthesis

利用宿主細(xì)胞提供的小分子物質(zhì)合成病毒核酸和蛋白質(zhì)不同病毒的生物合成方式不同，按照核類型分：雙鏈DNA病毒；單鏈DNA病毒；正單鏈RNA病毒；負(fù)單鏈RNA病毒；雙鏈RNA病毒；逆轉(zhuǎn)錄病毒早期：基因組在細(xì)胞內(nèi)合成非結(jié)構(gòu)蛋白（病毒復(fù)制酶及抑制細(xì)胞正常生物合成的抑制酶）晚期：根據(jù)基因組的指令在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制病毒核酸，合成結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白生物合成的過程：1、DNA病毒（雙鏈）：細(xì)胞核內(nèi)合成DNA，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)合成病毒蛋白早期：病毒DNA依賴DNA的RNA多聚酶早期mRNA轉(zhuǎn)譯早期蛋白DNA多聚酶脫氧胸腺嘧啶激酶調(diào)控病毒基因組轉(zhuǎn)錄的酶抑制宿主細(xì)胞生物合成的酶藥物作用的靶晚期：解鏈正鏈DNA負(fù)鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉(zhuǎn)錄晚期mRNA晚期蛋白病毒衣殼蛋白及其他結(jié)構(gòu)蛋白2、RNA病毒（單鏈）：多數(shù)在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)合成子代RNA及病毒蛋白正單鏈RNA病毒（有mRNA功能）：正單鏈RNA復(fù)制子代RNA結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白等）非結(jié)構(gòu)蛋白（依賴RNA的RNA多聚酶）

雙鏈RNA（復(fù)制中間型）藥物作用的靶3.逆轉(zhuǎn)錄病毒（有逆轉(zhuǎn)錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）單鏈RNA逆轉(zhuǎn)錄酶RNADNA（復(fù)制中間型）進(jìn)入細(xì)胞核雙鏈DNA整合（前病毒）子代病毒RNA病毒mRNA病毒蛋白質(zhì)DNA腫瘤發(fā)生藥物作用的靶逆轉(zhuǎn)錄病毒的合成RNA逆轉(zhuǎn)錄酶互補(bǔ)DNARNA:DNA雙股DNA整合宿主細(xì)胞DNARNA

逆轉(zhuǎn)錄病毒的復(fù)制周期組裝與釋放

assemblyandrelease

裝配細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)核膜上胞質(zhì)膜上釋放

裂解細(xì)胞釋放（無包膜病毒）出芽釋放（有包膜病毒）裝配（assembly）釋放（release）無包膜病毒釋放：

——一次大量釋放

——致細(xì)胞破裂死亡有包膜病毒釋放：

---出芽方式

——病毒核衣殼出芽時(shí)套上宿主細(xì)胞的核膜或細(xì)胞膜——細(xì)胞不死

——逐個(gè)釋放病毒復(fù)制周期

裝配與釋放

assemblyandrelease

病毒的異常增殖與干擾現(xiàn)象1）病毒方面：缺陷病毒（defectivevirus

）：基因組不完整的病毒體。缺陷干擾顆粒缺損病毒不能復(fù)制，但卻能干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞輔助病毒：輔助缺損病毒復(fù)制具有感染力的完整病毒1。病毒的異常增殖

---病毒增殖過程被切斷，出現(xiàn)異結(jié)果。丁型肝炎病毒--乙型肝炎病毒

非容納性細(xì)胞——頓挫感染容納性細(xì)胞細(xì)胞條件不合適，病毒進(jìn)入細(xì)胞但不能復(fù)制頓挫感染（流產(chǎn)感染）：2)宿主細(xì)胞方面:

宿主細(xì)胞不能為病毒增殖提供必要條件,導(dǎo)致病毒不能增殖.干擾現(xiàn)象interference

當(dāng)兩種病毒同時(shí)或先后感染同一細(xì)胞時(shí)，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象產(chǎn)生原因

——干擾素interferon，IFN

干擾現(xiàn)象的意義1、非特異性免疫的構(gòu)成部分——抗病毒作用2、指導(dǎo)正確使用疫苗理化因素對(duì)病毒的影響

從細(xì)胞中釋放出來的病毒體，受到外界理化作用后，會(huì)失去感染性，稱病毒的滅活。

一、物理因素：（一）溫度加熱50-60℃30min或100℃幾秒鐘即可滅活。在-70℃或-196℃條件下，可存活數(shù)月至數(shù)年。（二）酸堿度：

多數(shù)病毒在pH5-9范圍內(nèi)穩(wěn)定，強(qiáng)酸強(qiáng)堿可滅活病毒。（三）射線：X射線、γ射線和紫外線都能滅活病毒。射線可使病毒核酸鏈發(fā)生斷裂，核苷酸結(jié)構(gòu)形式改變，影響病毒復(fù)制。二、化學(xué)因素：

（一）脂溶劑：乙醚、氯仿、去氧膽酸鹽、陰離子去污劑等能使病毒包膜溶解

（二）化學(xué)消毒劑：酚類、氧化劑、鹵類、醇類對(duì)病毒均有滅活作用。

（三）抗生素與中草藥：病毒對(duì)抗生素不敏感；中草藥對(duì)病毒有一定的抑制作用。本章小結(jié)病毒是由核酸（核心）及蛋白構(gòu)（衣殼）成的非細(xì)胞型微生物。其完整形態(tài)稱病毒體。嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生：進(jìn)入特定的靶細(xì)胞產(chǎn)生核酸及蛋白—

復(fù)制周期出現(xiàn)異常（缺陷病毒、非容許細(xì)胞）、受到干擾頓挫感染病毒的感染與免疫病毒的感染病毒進(jìn)入機(jī)體,并在易感染細(xì)胞內(nèi)增殖的過程.病毒的感染方式

一、水平傳播病毒在人群不同個(gè)體間的傳播一、水平傳播1、通過黏膜表面?zhèn)鞑?、通過皮膚傳播昆蟲叮咬——乙腦病毒動(dòng)物咬傷——狂犬病毒3、醫(yī)源性傳播注射、輸血、拔牙——乙肝、丙肝呼吸道——流感病毒消化道——甲肝病毒泌尿生殖道—艾滋病毒

二、垂直傳播通過胎盤或產(chǎn)道，病毒由母親傳給胎兒的方式胎盤：風(fēng)疹病毒、CMV、HIV、HBV產(chǎn)道:HIV、HSV-II

病毒

母體

新生兒胎盤

顯隱胎受先流性性兒染天產(chǎn)感感正胎畸死染染常兒形胎病毒在體內(nèi)的播散方式局部播散血液播散神經(jīng)播散病毒在感染組織增殖、擴(kuò)散，而不侵入血流。脊髓灰質(zhì)炎病毒水痘－帶狀皰疹病毒脊髓后根神經(jīng)節(jié)或顱神經(jīng)的感覺神經(jīng)節(jié)內(nèi)入侵細(xì)胞中增殖–入血–到達(dá)靶器官入侵細(xì)胞中增殖––沿神經(jīng)末鞘散播至中樞神經(jīng)–傳出神經(jīng)末鞘--到達(dá)外周組織器官流感病毒病毒感染的類型

隱性感染：不引起臨床癥狀的感染。獲得免疫；成為病毒攜帶者顯性感染：急性感染持續(xù)性感染--由于病毒種類、毒力強(qiáng)弱、機(jī)體免疫力的不同，可表現(xiàn)不同的臨床類型。引起明顯臨床癥狀的感染。病毒數(shù)量多，毒力強(qiáng)，機(jī)體免疫力弱

潛伏期短、發(fā)病急、病程短、愈后好

病毒數(shù)量少，毒力弱，機(jī)體免疫力強(qiáng)慢發(fā)病毒感染：遲發(fā)病毒感染。潛伏期長，一旦癥狀出現(xiàn)，多為亞急性，且進(jìn)行性加重。慢性感染：持續(xù)存在于組織或血液中，并不斷排出體外或經(jīng)血傳播。潛伏感染：以基因形式潛伏于一定的組織或細(xì)胞中，但不增殖（檢測(cè)不出病毒，也無臨床癥狀）；可被激活增殖，導(dǎo)致臨床癥狀。持續(xù)性感染病毒持續(xù)存在于機(jī)體內(nèi)。急性病毒發(fā)癥感染的遲發(fā)并發(fā)癥：麻疹病毒/亞急性硬化性腦炎朊粒/瘋牛病病毒的致病機(jī)制一、病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用二、病毒感染的免疫病理損傷病毒的致病機(jī)制一、病毒對(duì)宿主細(xì)胞的直接作用殺細(xì)胞效應(yīng)

1）阻斷細(xì)胞大分子合成

2）細(xì)胞溶酶體膜通透性改變：細(xì)胞自溶

3）細(xì)胞器損傷致細(xì)胞病變作用（CPE）：病毒感染的細(xì)胞經(jīng)一定時(shí)間培養(yǎng)后，可出現(xiàn)細(xì)胞變圓、脫落、壞死等現(xiàn)象。細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。2.穩(wěn)定狀態(tài)感染細(xì)胞膜的改變細(xì)胞融合：多核巨細(xì)胞細(xì)胞表面出現(xiàn)新抗原；

形成包涵體：有些病毒感染的細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下可觀察到胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)圓形或卵圓形的斑塊狀結(jié)構(gòu)。不同病毒包涵體的形態(tài)、染色性、存在的部位不一，可作為診斷依據(jù)如狂犬病毒的內(nèi)基小體狂犬病毒包涵體（Negribody）基因整合與細(xì)胞轉(zhuǎn)化病毒的遺傳物質(zhì)插入宿主細(xì)胞染色體DNA上。全基因組整合；失常式整合（部分片斷）細(xì)胞轉(zhuǎn)化：失去接觸性抑制、出現(xiàn)新抗原、激活癌基因

腫瘤細(xì)胞（宮頸癌、肝癌等）細(xì)胞凋亡二、病毒感染的免疫病理損傷體液免疫損傷通過Ⅱ、Ⅲ型超敏反應(yīng)引起損傷

II型:肝細(xì)胞表面出現(xiàn)新抗原

III型:Ag-Ab復(fù)合物沉積細(xì)胞免疫損傷通過Tc細(xì)胞和Th1細(xì)胞殺傷病毒感染的細(xì)胞，同時(shí)造成組織細(xì)胞損傷病毒直接損傷淋巴細(xì)胞或淋巴器官艾滋病毒直接殺傷CD4+T細(xì)胞抗病毒免疫非特異性免疫:干擾素、NK細(xì)胞特異性免疫干擾素干擾素概念：干擾素是個(gè)體出生后，由病毒或干擾素誘導(dǎo)劑刺激多種細(xì)胞所產(chǎn)生的一種糖蛋白。種類：

Ⅰ型干擾素：α干擾素、β干擾素

Ⅱ型干擾素：γ干擾素（免疫干擾素）干擾素的產(chǎn)生及干擾素的作用機(jī)制干擾素的生物學(xué)活性：抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤病毒干擾素剌激干擾素前體干擾素剌激病毒增殖

被抑制干擾素的產(chǎn)生及抗病毒作用原理抗病毒機(jī)理：細(xì)胞受干擾素作用后，合成抗病毒蛋白（蛋白激酶、2，-5，合成酶、磷酸二酯酶）抗病毒特點(diǎn)廣譜性、間接性、種屬特異性應(yīng)用IFN-α慢性乙肝的治療非特異性殺傷不受MHC限制通過依賴抗體的殺傷作用（ADCC）不依賴抗體的殺傷作用（自然殺傷）干擾素可調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的殺傷作用NK細(xì)胞特異性免疫體液免疫的保護(hù)作用

中和抗體：IgM,IgG,IgA

阻止病毒吸附;

依賴抗體的細(xì)胞毒作用（ADCC）：殺傷病毒感染的細(xì)胞;

激活補(bǔ)體細(xì)胞免疫的保護(hù)作用

Th1：釋放細(xì)胞因子效應(yīng)Tc（CTL）：特異性殺傷病毒寄生的細(xì)胞抗體的中和作用病毒感染的檢查方法與防治原則

病毒感染的檢查方法形態(tài)學(xué)觀察分離培養(yǎng)核酸與抗原檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)

標(biāo)本采集與送檢：用于培養(yǎng)：注意時(shí)間、部位、處理、保存血清學(xué)診斷：

雙份血清標(biāo)本:急性期與恢復(fù)期各一形態(tài)學(xué)檢測(cè)顯微鏡觀察：電鏡、光鏡病毒或包涵體分離培養(yǎng)：動(dòng)物、雞胚、組織細(xì)胞核酸與抗原的檢測(cè):PCR血清學(xué)檢測(cè)特異性抗體（IgM、IgG)；雙份血清

動(dòng)物接種雞胚接種雞胚接種的優(yōu)點(diǎn)雞胚接種的缺點(diǎn)雞胚接種部位卵黃囊接種尿囊腔接種絨毛尿囊膜接種組織培養(yǎng)方法原代培養(yǎng)：如原代猴腎細(xì)胞等二倍體細(xì)胞株：如人胚肺成纖維細(xì)胞傳代株W1-38傳代細(xì)胞系：多為腫瘤細(xì)胞或突變的二倍體細(xì)胞，如Hela細(xì)胞、Hep-2細(xì)胞等核酸與抗原的檢測(cè):PCR血清學(xué)檢測(cè)特異性抗體（IgM、IgG)；雙份血清

血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)血凝試驗(yàn)：血凝素＋雞紅細(xì)胞－→紅細(xì)胞凝集血凝抑制試驗(yàn)：血凝素－抗體＋雞紅細(xì)胞－→紅細(xì)胞不凝集病毒感染的防治原則病毒感染的預(yù)防主動(dòng)免疫1）減毒活病毒疫苗：麻疹、脊髓灰質(zhì)炎2）滅活病毒疫苗：狂犬病毒、流感病毒3）亞單位疫苗4)基因工程疫苗被動(dòng)免疫病毒感染的治療化學(xué)治療中草藥:板藍(lán)根干擾素免疫治療小結(jié)病毒通過水平、垂直方式在人群中傳播;通過局部、血液、神經(jīng)在體內(nèi)擴(kuò)散；不一定發(fā)病：隱性、顯性（潛伏、慢發(fā)）；病毒對(duì)機(jī)體的損傷：直接殺傷（殺細(xì)胞效應(yīng)、包涵體形成）；免疫病理；機(jī)體可針對(duì)病毒：非特異免疫（干擾素）、特異免疫（抗體、效應(yīng)T細(xì)胞）；病毒是細(xì)胞內(nèi)存活：動(dòng)物、雞胚、細(xì)胞來培養(yǎng)；檢測(cè)核酸、抗體；預(yù)防為主掌握內(nèi)容病毒的大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及功能病毒復(fù)制周期及異常增殖現(xiàn)象（頓挫感染、缺陷病毒）病毒的概念及主要特征病毒遺傳與變異病毒的干擾現(xiàn)象了解內(nèi)容物理因素、化學(xué)因素對(duì)病毒的影響病毒的分類原則病毒體：具有傳染性的、結(jié)構(gòu)完整的病毒顆粒。病毒體病毒結(jié)構(gòu)

基本結(jié)構(gòu)（核衣殼）核心衣殼（殼?！職ぃ┌ぢ悴《景げ《揪哂袀魅拘?/p>