微生物的生理生化反應1

微生物的生理生化反應在生活細胞中存在的化學反應稱之為代謝。各種微生物在代謝類型上表現(xiàn)出很大的差異。微生物生理生化反應的多樣性。微生物的生理生化反應大分子物質的水解試驗糖發(fā)酵實驗吲哚試驗、甲基紅試驗、V.P.反應(乙酰甲基甲醇反應)淀粉的水解試驗

一、目的要求

二、實驗原理

三、器材

四、操作步驟

五、結果

一、目的要求

證明不同微生物有著不同的酶系統(tǒng)。掌握微生物大分子水解試驗的原理和方法。二、基本原理

微生物對大分子的淀粉不能直接利用，必須靠產生的胞外酶將大分子物質分解才能被微生物吸收利用。微生物的胞外酶（如淀粉酶、脂肪酶等）將大分子物質的分解過程可以通過觀察細菌菌落周圍的物質變化來證實。淀粉遇碘液會產生藍色，但細菌水解淀粉的區(qū)域，用碘測定不再產生藍色，表明細菌產生淀粉酶。三、器材

菌種：枯草芽孢桿菌，大腸桿菌（金黃色葡萄球菌）。培養(yǎng)基：固體淀粉培養(yǎng)基。溶液或試劑：盧戈氏碘液。儀器或其他用具：無菌平板，無菌試管，接種環(huán)，接種針，試管架。四、操作步驟

（1）將固定淀粉培養(yǎng)基融化后冷卻至50℃左右，無菌操作制成平板。（2）用記號筆在平板底部劃成二部分。（3）將枯草芽孢桿菌,大腸桿菌（金黃色葡萄球菌）分別在不同的部分劃線接種，在平板的反面分別寫上菌名。（4）將平板倒置在37℃溫箱中培養(yǎng)24h。（5）觀察各種細菌的生長情況,將平板打開蓋子,滴入少量盧戈氏碘液于平皿中,輕輕旋轉平板,使碘液均勻鋪滿整個平板。五、實驗報告

1.結果將結果填入下表?！埃北硎娟栃?，“－”表示陰性。菌名枯草芽孢桿菌大腸桿菌金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌淀粉水解實驗2.思考題不利用碘液，你怎么證明淀粉水解的存在?糖發(fā)酵試驗

一、目的要求

二、實驗原理

三、器材

四、操作步驟

五、結果

一、目的要求1.了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用。2.掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。二、基本原理糖發(fā)酵試驗是常用的鑒別微生物的生化反應。某些細菌能利用糖類作為碳源和能源，使糖類分解而產酸產氣或產酸不產氣。不同種的細菌對于各種糖類利用能力不同，分解產物也不同。大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產酸并產氣；普通變形桿菌只能分解葡萄糖產酸產氣，不能分解乳糖。傷寒桿菌分解葡萄糖產酸不產氣，不能分解乳糖。二、基本原理酸的產生可利用指示劑:溴甲酚紫pH6.8呈紫色，pH5.2呈黃色氣體產生：德漢氏小管產酸指示劑、倒置小管

三、器材

1.菌種：大腸桿菌，普通變形桿菌斜面各一支。2.培養(yǎng)基：葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管各3支（內裝有倒置的德漢氏小管）。3.儀器或其他用具：試管架，接種環(huán)等。四、操作步驟1.用記號筆在各試管外壁上分別標明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的細菌菌名。2.取葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，分別接入大腸桿菌，普通變形桿菌，第三支不接種，作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支，同樣分別接入大腸桿菌，普通變形桿菌，第三支不接種，作為對照。在接種后，輕緩搖動試管，使其均勻，防止倒置的小管進入氣泡。3.將接種過和作為對照的6支試管均置37℃培養(yǎng)24～48h。4.觀察各試管顏色變化及德漢氏小管中有無氣泡。五.實驗報告1.結果將結果填入下表?！?”表示產酸或產氣，“-”表示不產酸或不產氣。

糖類發(fā)酵大腸桿菌普通變形桿菌對照葡萄糖發(fā)酵乳糖發(fā)酵

2.思考題假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖，發(fā)酵試驗應該出現(xiàn)什么結果？吲哚試驗、甲基紅試驗與V.P.反應吲哚試驗（indoltest）甲基紅試驗（methylredtest）V.P.反應（Voges-Prokauertest）一、目的要求了解試驗原理及其在腸道菌鑒定中的意義和方法。二、基本原理吲哚試驗、甲基紅試驗、伏-普試驗主要用來鑒別大腸桿菌與產氣腸桿菌（Enterobacteraerogenes）。主要是用于水的細菌學檢查，因為大腸桿菌雖非致病菌，但在飲水中若大腸桿菌超過一定數量則表示受糞便污染；而產氣腸桿菌則廣泛存在于自然界中，因此，檢查水時要將二者區(qū)分開來。有些細菌含有色氨酸酶