實驗3 化膿性球菌的分離鑒定

化膿性球菌的分離鑒定微生物學實驗三微生物學教研室郭棵棵（綜合性試驗）錄像：消毒滅菌操作：紫外線殺菌實驗（普通平板1塊/3人）抗生素敏感試驗（普通平板1塊/3人）化膿性球菌分離鑒定（一）——

接種血平板材料：抗生素紙片（青霉素、鏈霉素、慶大霉素、黃連素1套/6人）大腸桿菌、敏感金葡菌（1支/6人）膿汁標本（乙型鏈球菌、致病性金葡菌各1支/6人）普通平板、血平板、黑紙片等實驗內容了解：各種消毒滅菌的方法及應用無菌操作技術掌握：1.化膿性球菌分離鑒定的方法和步驟

2.紫外線殺菌的原理

3.抗生素敏感實驗的方法[教學目標][重點難點]重點：化膿性球菌分離鑒定——接種血平板難點：化膿性球菌分離鑒定——接種血平板消毒與滅菌概念：消毒(disinfection):殺死物體上病原微生物，并不一定能殺死含芽孢的細菌和非病原微生物。用以消毒的藥品稱為消毒劑。滅菌(sterilization):殺滅物體上所有微生物的方法。防腐(antisepsis):防止或抑制細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。同一種化學藥品在高濃度時稱為消毒劑，低濃度時為防腐劑。無菌(asepsis):不含活菌的意思。防止細菌進入人體或其他物品的操作技術，稱無菌操作。熱力滅菌法濕熱滅菌法：巴氏消毒法、流動蒸汽消毒法、煮沸法、間歇蒸汽滅菌法、高壓蒸汽滅菌法干熱滅菌法：焚燒、燒灼、干烤（170℃/2h）電磁波輻射殺菌法紫外線電離輻射濾過除菌法超聲波殺菌干燥物理消毒滅菌法：化學消毒滅菌法：使用消毒劑原理：1.使菌體蛋白質變性或凝固：酚類、醇類、重金屬鹽等。如石炭酸、來蘇、洗必泰

2.干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝：氧化劑，如過氧化氫，高錳酸鉀，過氧乙酸等

3.損傷細菌細胞膜：表面活性劑，如新潔爾滅二、抗生素敏感試驗

隨著抗生素的廣泛應用，耐藥變異菌株日益增加（尤其是金葡、腸道桿菌），給醫(yī)療工作帶來了不少的困難。

為正確使用抗生素，臨床上常在分離致病細菌的同時做藥物敏感試驗，以了解該細菌對常用各種抗生素的敏感性。藥敏試驗的常用方法：紙片法操作：貼紙片敏感金葡結果分析：

如果細菌對藥物敏感，則在藥片周圍有抑菌圈形成，敏感度越高抑菌圈直徑越大：>20mm：極度敏感15-20mm：中度敏感10-15mm：輕度敏感<10mm:不敏感無抑菌圈：耐藥抑菌圈直徑化膿性炎癥是臨床上常見病，除了病原性球菌外，其他微生物也可以引起化膿性感染。常見的標本有膿汁、咽拭子、痰、血液、腦脊液等。本次實驗是以膿汁標本進行病原性球菌的分離鑒定三、化膿性球菌分離鑒定（一）化膿性球菌分離鑒定步驟

膿汁血平板菌落葡萄狀排列鏈狀排列血漿凝固酶試驗甘露醇發(fā)酵試驗血清肉湯管接種劃線法37℃24h革蘭染色成對排列操作：1.接種血平板（1