DB34T 4534-2023 植物源性產(chǎn)品中氰氟草酯及其代謝物殘留量的測定

發(fā)布安徽省市場監(jiān)督管理局2023發(fā)布安徽省市場監(jiān)督管理局2023083120230731Determinationofcyhalofop-butylandmetabolitesresiduesinproduceofplantorigin34CCSX0434安 徽 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB34/T4534—2023植物源性產(chǎn)品中氰氟草酯及其代謝物殘留量的測定DB34/T4534DB34/T4534—2023II前 言本文件按照GB/T《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由安徽省食品質(zhì)量安全檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出。本文件由安徽省市場監(jiān)督管理局歸口。（國家農(nóng)副加工食品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測中心驗(yàn)研究院。明娜、劉宇、彭藝、周迪、黃孟凱、李靜。DB34/T4534DB34/T4534—2023DB34/T4534DB34/T4534—202311除非另有說明，在分析中僅使用分析純的試劑，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。試劑無水硫酸鎂（MgSO4）。乙酸乙酯（C4H8O2）：色譜純。標(biāo)準(zhǔn)品5 試劑與材料試樣用乙酸乙酯提取，提取液經(jīng)PSA凈化，氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測，基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量。本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。方法一 植物源性產(chǎn)品中氰氟草酯的測定4 原理3 術(shù)語和定義植物源性產(chǎn)品中氰氟草酯及其代謝物殘留量的測定范圍本文件方法一規(guī)定了植物源性糙米、小麥中氰氟草酯殘留量的測定方法。本文件方法一適用于植物源性糙米、小麥中氰氟草酯殘留量的測定。本文件方法二規(guī)定了植物源性糙米、小麥中氰氟草酯主要代謝物氰氟草酸和氰氟草二酸殘留量的測定方法。本文件方法二適用于植物源性糙米、小麥中氰氟草酯主要代謝物氰氟草酸和氰氟草二酸殘留量的測定。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB2763 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限GB/T6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法22試樣的制備與貯藏按照GB2763的規(guī)定執(zhí)行。隨機(jī)取不少于500g樣品，粉碎后充分混勻，放入聚乙烯瓶或袋中，置于4℃及以下冷藏條件保存。試樣處理5g（0.01g）50mL5mL30min，再加入10mL乙酸乙酯（5.1.2），3g無水硫酸鎂（5.1.1）及1顆陶瓷均質(zhì)子（5.4.1），恒溫（40℃）振蕩1min，5000r/min離心5min，吸取上清液5mL加到內(nèi)含750mg無水硫酸鎂（5.1.1）和250mgPSA粉（5.4.3）的15mL塑料離心管中，渦旋混勻1min，5000r/min離心5min，吸取上清液過微孔濾膜（5.4.2），待測定。測定儀器參考條件色譜柱：（5％-苯基）-甲基聚硅氧烷的苯基芳基聚合物毛細(xì)管柱，30m×0.25mm×0.25μm，或相當(dāng)者；7 分析步驟恒溫振蕩器。渦旋裝置。離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥5000r/min。（C20H20FNO4，CAS純度≥95.0％，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（1000μg/mL）：精密稱取氰氟草酯（5.2）10mg（0.1mg）10mL1000μg/mL3（100μg/mL）（5.3.1）2.50.1mL）25mL100μg/mL保存，1材料陶瓷均質(zhì)子。0.22μm乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）40μm～60μm。6 主要儀器和設(shè)備（EI）0.01g0.1mg。337.3.4 定量mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，供氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定。以氰氟草酯定量離子的質(zhì)量色譜圖峰面積為縱坐標(biāo)，相對應(yīng)的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。氰氟草酯的多反應(yīng)監(jiān)測圖見附錄A。定性保留時間被測試樣中氰氟草酯色譜峰的保留時間與相應(yīng)氰氟草酯標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時間相比較，相對誤差應(yīng)在±2.5％之內(nèi)。定量離子、定性離子計子離子豐度比則可判斷樣品中存在目標(biāo)農(nóng)藥。表2 定性時相對離子豐度比的最大允許偏差單位：％b) 色譜柱溫度：40℃1min40℃/min120℃5℃/min240℃，再以12℃/min300℃，保持5min；c) 載氣：氦氣，純度≥99.999％，1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度：280℃；進(jìn)樣體積：1μL；10∶1；離子轟擊源：70eV；離子源溫度：230℃；傳輸線溫度：280℃；溶劑延遲：5min；1：表1 氰氟草酯的保留時間、定量離子對、定性離子對和碰撞電壓名稱保留時間min定量離子對碰撞電壓V定性離子對碰撞電壓V氰氟草酯30.25256.1-120.112357.1-256.1107.3.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線7.1-7.20.01mg/L0.02mg/L0.05相對離子豐度＞50＞20-50（含）＞10-20（含）≤10允許相對偏差±20±25±30±50定量。4靈敏度本方法氰氟草酯的定量限為0.02mg/kg。精密度在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的20％。方法二 植物源性產(chǎn)品中氰氟草酯代謝物的測定10 原理9 方法的靈敏度和精密度式中：ω——試樣中氰氟草酯殘留量的數(shù)值，單位為毫克每千克（mg/kg）；C——從基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中得到的試樣溶液中氰氟草酯的質(zhì)量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升（mg/L）；V——樣液最終定容體積的數(shù)值，單位為毫升（mL）；f——試樣溶液稀釋倍數(shù)；m——稱取試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。注：計算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字。外標(biāo)法定量。試樣溶液的測定內(nèi)，超過線性范圍時應(yīng)根據(jù)測定濃度用乙酸乙酯進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)稀釋后再進(jìn)行分析。平行試驗(yàn)按以上步驟對同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測定?？瞻自囼?yàn)除不加試樣外，采用完全相同的測定步驟進(jìn)行平行操作。8 結(jié)果計算試樣中的氰氟草酯殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計，單位為毫克每千克（mg/kg），按公式(1)計算：CVf(1)m 試劑和材料除非另有說明，在分析中僅使用分析純的試劑，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。試劑乙腈（CH3CN）：色譜純。（CH3OH）：色譜純。乙腈-水溶液（1∶1，體積比）：50mL50mL甲酸（HCOOH）：色譜純。0.1％1.0mL1000mL，混勻。標(biāo)準(zhǔn)品11.2.1 （C16H12FNO4，CAS11.2.2 （C16H13FO62，CAS52564-94-6≥98.0％，或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（100約10.01mg）10mL（11.1.1）溶解并定容，配制成濃度為100μg/mL3（100約10.01mg）10mL（11.1.1）溶解并定容，配制成濃度為100μg/mL3（10（11.3.1）1.050％1010μg/mL1（10（11.3.2）1.010mL，10μg/mL，―18℃保存，有效期1材料陶瓷均質(zhì)子。微孔濾膜(有機(jī)相)：0.22μm或性能相當(dāng)者。主要儀器和設(shè)備ESI0.01g、0.1mg0.01mg離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥5000r/min。分析步驟56613.3.2 質(zhì)譜參考條件（ESI）；掃描方式：負(fù)離子掃描；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；霧化氣流速：3.0L/min；加熱氣流速：10.0L/min;干燥氣流速：8.0L/min;離子源接口電壓：3.0kV；脫溶劑管溫度：250℃；接口溫度：350℃；加熱模塊溫度：400℃4。試樣的制備與貯藏同7.1。試樣處理稱取5g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，加5mL水混勻，渦旋2min，靜置10min10mL（11.1.3）1（11.4.1）（37℃）15min，5000r/min5min，上清液轉(zhuǎn)入20mL5mL（11.1.3）重復(fù)提取一次，合并兩次提取液，用乙腈-水（11.1.3）定容至刻度。吸取上清液過微孔濾膜（11.4.2），待測定。測定13.3.1 液相色譜參考條件a) 色譜柱：C18色譜柱（2.1×100mm，1.7μm）或性能相當(dāng)者；b) 柱溫：40℃；流動相：A0.1％甲酸溶液，B3；流速：0.30mL/min；進(jìn)樣體積：1μL。表3 流動相梯度洗脫條件時間min流動相A％流動相B％0.09551.09553.050506.030709.059510.059510.595513.3.5 定量13.3.5 定量外標(biāo)法定量。試樣溶液的測定內(nèi)，超過線性范圍時應(yīng)根據(jù)測定濃度用乙腈-水（11.1.3）進(jìn)行適當(dāng)倍數(shù)稀釋后再進(jìn)行分析。平行試驗(yàn)7被測試樣中目標(biāo)農(nóng)藥色譜峰的保留時間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時間相比較，相對誤差應(yīng)在+2.5％之內(nèi)。13.3.4.2 離子豐度比則可判斷樣品中存在目標(biāo)農(nóng)藥。表5 定性時離子豐度比的最大允許偏差單位：％表4 定性離子對、定量離子對和質(zhì)譜分析參數(shù)化合物名稱定性離子對m/z定量離子對m/z前四級桿電壓V碰撞能量eV后四級桿電壓V氰氟草酸299.95＞228.00299.95＞228.00111313299.95＞208.00222130氰氟草二酸319.00＞247.00319.00＞247.00161415319.00＞203.00172219基質(zhì)匹配工作標(biāo)準(zhǔn)曲線13.1-13.2用空白基5.0ng/mL10ng/mL20ng/mL50ng/mL、100ng/mL，氰氟草二酸濃度依次為12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、125ng/mL、200ng/mL的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，供液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定。以農(nóng)藥定量離子的質(zhì)量色譜圖峰面積為縱坐標(biāo)，相對應(yīng)的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。氰氟草酸和氰氟草二酸的多反應(yīng)監(jiān)測圖見附錄B。定性保留時間相對離子豐度＞50＞20-50（含）＞10-20（含）≤10允許相對偏差±20±25±30±5088靈敏度本方法氰氟草酯代謝物氰氟草酸、氰氟草二酸的定量限分別為0.02mg/kg、0.05mg/kg。精密度在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的20％。15 方法的靈敏度和精密度按以上步驟對同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測定?？瞻自囼?yàn)除不加試樣外，采用完全相同的測定步驟進(jìn)行平行操作。結(jié)果計算ω按公式(2)計算：CVf(2)式中：ω——試樣中氰氟草酸或氰氟草二酸殘留量的數(shù)值，單位為毫克每千克（mg/kg）；C——位為納克每毫升（ng/mL）；V——樣液最終定容體積（mL）；f——試樣溶液稀釋倍數(shù)；m——稱取試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。注：計算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字。99附錄A（資料性）氰氟草酯色譜圖如圖A.1。(x100)5.0256.10>120.10(x100)5.0256.10>120.104.03.02.01.00.51.01.5357.10>256.102.029.5 30.0 30.5 31.0 29.5 30.0 30.5 31.0圖A.1氰氟草酯MRM色譜圖（0.01mg/L）附錄B（資料性）氰氟草二酸和氰氟草酸的色譜圖氰氟草二酸和氰氟草酸的MRM色譜圖如圖B.1。

1:氰氟草二酸319.0000>247.0000(-)CE:14.01:氰氟草二酸319.0000>247.0000(-)CE:14.01:氰氟草二酸319.0000>203.0000(-)CE:22.010000

02:氰氟