細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)方法驗(yàn)證方案

細(xì)菌內(nèi)毒素檢驗(yàn)方法驗(yàn)證方案2023GMP內(nèi)毒素檢查方法進(jìn)展驗(yàn)證。20233符合要求。2023細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法檢查項(xiàng)下要求逐一進(jìn)展。重現(xiàn)性穩(wěn)定性是否符合要求。適用性是否抱負(fù)。驗(yàn)證機(jī)構(gòu)組成驗(yàn)證委員會(huì)依據(jù)驗(yàn)證工作需要，常設(shè)驗(yàn)證委員會(huì)，負(fù)責(zé)全部驗(yàn)證工作的領(lǐng)與協(xié)調(diào)，負(fù)責(zé)驗(yàn)證結(jié)果記錄與評(píng)定，負(fù)責(zé)完成驗(yàn)證報(bào)告。6.2驗(yàn)證委員會(huì)組成:職責(zé):驗(yàn)證委員會(huì):負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的審批。6.4.1.3責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。6.4.1.4負(fù)責(zé)發(fā)放驗(yàn)證證書。驗(yàn)證小組:負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的制定和實(shí)施。負(fù)責(zé)驗(yàn)證工作的組織與協(xié)調(diào)。負(fù)責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)的收集和結(jié)果評(píng)定。7所需文件已預(yù)備齊全。確分工。培訓(xùn)記錄:8分以下幾個(gè)階段完成。:從年月日至年月日;培訓(xùn)9考文獻(xiàn)培訓(xùn)內(nèi)容日期培訓(xùn)人承受培訓(xùn)人注射用水細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法驗(yàn)證方案9.12023XVIIIA中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則驗(yàn)證方案的編寫、實(shí)施、結(jié)果的評(píng)價(jià)。驗(yàn)證內(nèi)容:試藥與試劑://試劑準(zhǔn)品水確認(rèn)結(jié)果是否到達(dá)標(biāo)準(zhǔn):檢查人:確認(rèn)人:時(shí)間:時(shí)間:儀器設(shè)備:周密儀器及需校驗(yàn)的儀器/電子天平檢查人:確認(rèn)人:時(shí)間:時(shí)間:一般工器具/移液管試管時(shí)鐘剪刀檢查人:確認(rèn)人:時(shí)間:時(shí)間:注射用水內(nèi)毒素檢查方法驗(yàn)證試驗(yàn)預(yù)備:試驗(yàn)室及人員等條件均滿足內(nèi)毒素試驗(yàn)試驗(yàn)條件。10.3.1.1.器內(nèi)，放置入烤箱。10.3.1.2.除去玻璃器皿外表可能存在的外源性內(nèi)毒素玻璃250?，待烤箱溫度升至設(shè)定的溫度后開頭計(jì)時(shí)，干烤1小時(shí)。到達(dá)規(guī)定時(shí)間后，關(guān)斷電源，待烤箱溫度自然降至室溫。在不翻開金屬容器的狀況下，可在兩天內(nèi)使用;假設(shè)玻璃器皿用錫箔紙包裝，在不翻開包裝的狀況下可在兩周內(nèi)使用，否則須再次干烤除去可能存在的外源性內(nèi)毒素。驗(yàn)證內(nèi)容具體驗(yàn)證步驟果看結(jié)果是否穩(wěn)定重復(fù)性是否良好。試驗(yàn)操作細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備取細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品一支，輕彈瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂輪在瓶頸上部輕輕劃痕，75%酒精棉球擦拭后啟開，啟開過程中應(yīng)防止玻璃屑落入瓶內(nèi)。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品說明書，參與規(guī)定量的細(xì)菌1542λ、λ、30秒鐘。18壁，使粉末落入輕輕劃痕，75%0.1ml檢查用水溶解，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)瓶壁，使內(nèi)容物充分溶解，避開產(chǎn)生氣泡。1854支(管)40.1ml的、λ、0.5λ0.25λ20.1ml10.3.2.2.4.加樣完畢后，將鱟試劑用封口膜封口，輕輕振動(dòng)混勻，37??1?水浴或適宜恒溫器中，試管架保持水平狀態(tài)，保溫60?2分鐘。10.3.2.2.5.觀看并記錄結(jié)果。將試管架從水浴中輕輕取180?脫者為陰性，記錄為(,)。(備注:保溫存拿取試管的過程中應(yīng)避開受到振蕩造成假陰性結(jié)果)2λ40.25λ4即為鱟試劑靈敏度的復(fù)核結(jié)果(λc)。λc=lg-1(?X/4)式中x(lg)。反響終點(diǎn)濃度是系列遞減的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液中最終一個(gè)呈陽性結(jié)果的濃度。結(jié)果推斷推斷標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)時(shí)判定該批鱟試λ(標(biāo)示靈敏度)為該批鱟試劑的靈敏度。鱟試劑靈敏度復(fù)合試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果如下表:檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)日期檢驗(yàn)依據(jù)室溫試劑名稱:生產(chǎn)單位批號(hào)靈敏度/效價(jià)規(guī)格鱟試劑EU/mlEU/EU/ml(稀釋序號(hào)倍數(shù))2λ1234*12340.5*12340.25λ12341照2結(jié)果計(jì)算λc=lg-1(?X/4)=結(jié)果推斷當(dāng)λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)時(shí)判定該批鱟試劑靈敏度復(fù)步驗(yàn)證檢驗(yàn)人員:復(fù)合人員:日期日期檢查人:確認(rèn)人:日期:日期:/效價(jià)規(guī)格鱟試劑EU/mlEU/EU/ml(稀釋序號(hào)倍數(shù))2λ1234*12340.5*12340.25*123412λclg-1(?X/4)=λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)復(fù)步驗(yàn)證檢驗(yàn)人員:復(fù)合人員:日期日期檢查人:確認(rèn)人:日期:日期:檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)日期/EU/mlEU/EU/ml(稀釋序號(hào)倍數(shù))2λ1234*12340.5*12340.25*123412λclg-1(?X/4)=結(jié)果推斷當(dāng)λc0.5λ,2λ(0.5λ2λ)時(shí)判定該批鱟試劑靈敏度復(fù)步驗(yàn)證檢驗(yàn)人員:復(fù)合人員:日期日期求檢查人:確認(rèn)人:日期:日期:鱟試劑靈敏度復(fù)合試驗(yàn)三次驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)如下表:λcλcλc=確認(rèn)結(jié)果是否符合要求:是?否?檢查人;確認(rèn)人:日期:日期干擾試驗(yàn)預(yù)試驗(yàn):同法操作檢查三次試驗(yàn)記錄試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)展比照。目的:溶液應(yīng)為未檢驗(yàn)出內(nèi)毒素且不超過所使用的鱟試劑的最大有效稀釋倍數(shù)的溶液。10.3.3.1倍數(shù)不得超過MVD=CL/λ(λ為現(xiàn)在市面最高靈敏度，這里選公司能買到的最高靈10.3.3.22220.3ml4.0λEU/ml的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液+0.3ml20.6ml含2λEU/ml內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋倍數(shù)為4的供試品稀釋液。保溫(60min)?2min后觀看，并記錄結(jié)果。10.3.3.322品陽性比照管不為陽性時(shí)，說明該供試品對(duì)內(nèi)毒素與鱟試劑的反響村子啊存在干MVD，)或者通過其他方式排出毒素限值單位為,,,,,或,,,,時(shí)。應(yīng)將做小不干擾稀釋倍數(shù)換算成最大不干濃度10.3.3.,這里干擾試驗(yàn)預(yù)試驗(yàn)0.125EU。0.03EU/mlMVD0.25EU/ml第一次稀釋倍數(shù)原液倍倍倍觀看供試品溶液+或--其次次稀釋倍數(shù)觀看供試品溶液+或--觀看供試品陽性比照+或--觀看供試品溶液+或--結(jié)論確認(rèn)結(jié)果是否符合要求:是?否?檢查人;確認(rèn)人:結(jié)論確認(rèn)結(jié)果是否符合要求:是?否?物干擾作用。試驗(yàn)重復(fù)三次。操作方法:142λ、λ、0.5λ、0.25λ(方法同)。確定的不干擾稀釋倍數(shù)，10.3.3.1.1420.25λ0.1ml/36落入瓶底，用砂輪在瓶頸輕輕劃痕，75%酒精棉球擦拭后啟開備用，防止玻璃屑落產(chǎn)生氣泡。185440.1ml2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ20.1ml5，44支(管)，12440.1ml2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ20.1ml37?1?60?210.3.4.22.0λ0.25λ(Es)和用供試品溶液或稀釋液制成的內(nèi)毒素溶液的反響終點(diǎn)濃度的幾何平均值(Et).Es=lg-1(?Xs/4)Et=lg-1(?Xt/4)濃度的對(duì)數(shù)值(lg)。10.3.4.310.3.4.3.1.Es0.5λ,2.0λ(包括0.5λ2.0λ)Et0.5Es,2.0Es(0.5Es2.0Es)時(shí)，則認(rèn)為供試品在EtEs2.0Es)時(shí)，則認(rèn)為供試品在該濃度下干擾試驗(yàn)。10.3.4.3.2.推斷結(jié)果:干擾試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果第一次檢驗(yàn)依據(jù)室溫/效規(guī)格價(jià)鱟試劑EU/ml細(xì)菌內(nèi)毒EU/支素標(biāo)準(zhǔn)品細(xì)菌內(nèi)毒EU/ml素檢查用水反響結(jié)果保溫時(shí)間(,)準(zhǔn)溶液打(—)陽供試品溶打(—)陽性打(+)液性打(+)參與內(nèi)毒2λ1素標(biāo)準(zhǔn)品2EU/ml34λ12數(shù))340.5λ12340.25λ1234陰性比照12-1Es=lg(?Xs/4)=-1Et=lg(?Xt/4)=結(jié)果推斷當(dāng)Es0.5λ,2.0λ(0.5λ2.0λ)Et0.50.5Es2.0Es)內(nèi)毒素檢查。0.5Es2.0Es)時(shí)，則認(rèn)為供試品在該濃度下日期日期日期:干擾試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果其次次檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)日期檢驗(yàn)依據(jù)室溫/效規(guī)格EU/mlEU/細(xì)菌內(nèi)毒EU/ml素檢查用水反響結(jié)果保溫時(shí)間(,)準(zhǔn)溶液打(—)陽供試品溶打(—)陽性打(+)液性打(+)參與內(nèi)毒2λ1素標(biāo)準(zhǔn)品2EU/ml34λ12數(shù))340.5λ12340.25λ1234陰性比照12-1Es=lg(?Xs/4)=-1Et=lg(?Xt/4)=結(jié)果推斷當(dāng)Es0.5λ,2.0λ(0.5λ2.0λ)Et0.50.5Es2.0Es)內(nèi)毒素檢查。0.5Es2.0Es)時(shí)，則認(rèn)為供試品在該濃度下日期日期日期:干擾試驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)果第三次檢驗(yàn)?zāi)康臋z驗(yàn)日期檢驗(yàn)依據(jù)室溫/效規(guī)格價(jià)EU/mlEU/支素標(biāo)準(zhǔn)品細(xì)菌內(nèi)毒EU/ml素檢查用水反響結(jié)果保溫時(shí)間(,)準(zhǔn)溶液打(—)陽供試品溶打(—)陽性打(+)液性打(+)參與內(nèi)毒2λ1素標(biāo)準(zhǔn)品2EU/ml34λ12數(shù))340.5λ12340.25λ1234陰性比照12-1Es=lg(?Xs/4)=-1Et=lg(?Xt/4)=結(jié)果推斷當(dāng)Es0.5λ,2.0λ(0.5λ2.0λ)Et0.50.5Es2.0Es)內(nèi)毒素檢查。0.5Es2.0Es)時(shí)，則認(rèn)為供試品在該濃度下日期日期檢查人;確認(rèn)人:日期日期:(NC)，20.1ml(PPC)。37??1?水浴10.3.4.5.5推斷標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)陽性比照都為陽性、供試品陽性比照都為陽性且陰性221，1管為陰性，按441MVD221MVD。驗(yàn)證結(jié)果如下表:第一次供試品名稱供試品陽性比照結(jié)果陽性比照(+)陰性比照(+)121212結(jié)果是否有效0.125EU，才符合規(guī)定檢驗(yàn)人員:復(fù)核人員:日期日期日期:其次次供試品名稱供試品陽性比照結(jié)果陽性比照(+)陰性比照(+)121212結(jié)果是否有效0.125EU，才符合規(guī)定檢驗(yàn)人員:復(fù)核人員:日期日期日期:第三次供試品名稱供試品陽性比照結(jié)果陽性比照(+)陰性比照(+)121212結(jié)果是否有效0.125EU，才符合規(guī)定檢驗(yàn)人員: