甾體類化合物最全課件

第八章甾體類化合物第八章甾體類化合物12教學(xué)基本要求1、熟悉甾體類化合物的結(jié)構(gòu)與分類。2、掌握強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)類型、理化性質(zhì)、檢識(shí)及提取分離方法。3、掌握甾體皂苷結(jié)構(gòu)、分類、理化性質(zhì)、檢識(shí)及提取分離方法。4、熟悉碳－21甾體化合物及植物甾醇。5、熟悉膽汁酸類化合物。2教學(xué)基本要求1、熟悉甾體類化合物的結(jié)構(gòu)與分類。23第八章

甾體類化合物（steroids）概述

強(qiáng)心苷類化合物甾體皂苷C21甾體化合物

植物甾醇膽汁酸類化合物昆蟲變態(tài)激素3第八章甾體類化合物概述強(qiáng)心苷類化合物甾體皂苷C2134第一節(jié)

概述

甾體類化合物是廣泛存在于自然界中的一類天然化學(xué)成分，包括植物甾醇、膽汁酸、C21甾類、強(qiáng)心苷、甾體皂苷、甾體生物堿等。盡管種類繁多，但它們的結(jié)構(gòu)中都具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾體母核。4第一節(jié)概述甾體類化合物是廣泛存在于自然界中45一、甾體化合物的結(jié)構(gòu)與分類

各類甾體成分C17位均有側(cè)鏈。根據(jù)側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的不同，又分為許多種類，如表9-1所示。表9-1天然甾體化合物的種類及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)名稱A/BB/CC/DC17-取代基植物甾醇順、反反反8～10個(gè)碳的脂肪烴膽汁酸順反反戊酸C21甾醇反反順C2H5昆蟲變態(tài)激素順反反8～10個(gè)碳的脂肪烴強(qiáng)心苷順、反反順不飽和內(nèi)酯環(huán)蟾毒配基順、反反反六元不飽和內(nèi)酯環(huán)甾體皂苷順、反反反含氧螺雜環(huán)甾體生物堿

5一、甾體化合物的結(jié)構(gòu)與分類名稱A/BB/CC/DC17-取56甾體化合物可分為兩種類型：A/B環(huán)順式稠合的稱正系；A/B環(huán)反式稠合的稱別系。通常這類化合物的C10、C13、C17側(cè)鏈大都是β構(gòu)型，C3上有羥基，且多為β構(gòu)型。甾體母核的其他位置上也可以有羥基、羰基、雙鍵等官能團(tuán)。天然甾體化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)6甾體化合物可分為兩種類型：A/B環(huán)順式稠合的稱正系；A/B67甾體化合物是由甲戊二羥酸的生物合成途徑轉(zhuǎn)化而來，可以衍生成甾醇類、C21甾類、強(qiáng)心苷元類、甾體皂苷元類等等。如圖9-1(p249)所示。

乙酰輔酶A角鯊烯（squalene）

2，3-氧化角鯊烯（2，3-oxidosqualene）

羊毛甾醇二、甾體化合物的生物合成途徑7甾體化合物是由甲戊二羥酸的生物合成途徑轉(zhuǎn)化而來，可以衍生成7三、甾體類化合物的顏色反應(yīng)甾體類化合物在無水條件下用酸處理，能產(chǎn)生各種顏色反應(yīng)。這類顏色反應(yīng)的機(jī)理較復(fù)雜，是甾類化合物與酸作用，經(jīng)脫水、縮合、氧化等過程生成有色物。1．Liebermann-Burchard反應(yīng)

將樣品溶于氯仿，加硫酸-乙酐（1:20），產(chǎn)生紅→紫→藍(lán)→綠→污綠等顏色變化，最后褪色。8三、甾體類化合物的顏色反應(yīng)甾體類化合物在無水條件下用酸處理，89第二節(jié)

強(qiáng)心苷類化合物

（cardiacglycosides）一、強(qiáng)心苷概述是生物界中存在的一類對(duì)心臟有顯著生理活性的甾體苷類，是由強(qiáng)心苷元與糖縮合的一類苷。它們主要分布于夾竹桃科、玄參科、百合科、蘿摩科、十字花科等十幾個(gè)科的一百多種植物中。常見的有毛花洋地黃、紫花洋地黃、黃花夾竹桃、毒毛旋花子、鈴藍(lán)、海蔥、羊角拗等。

9第二節(jié)強(qiáng)心苷類化合物一、強(qiáng)心苷概述910強(qiáng)心苷的存在部位強(qiáng)心苷可以存在于植物體的葉、花、種子、鱗莖、樹皮和木質(zhì)部等不同部位。在同一植物體中往往含有幾個(gè)或幾十個(gè)結(jié)構(gòu)類似、理化性質(zhì)近似的苷，同時(shí)還有相應(yīng)的水解酶存在。另外，強(qiáng)心苷結(jié)構(gòu)復(fù)雜，性質(zhì)不夠穩(wěn)定，易被水解生成次生苷，給提取分離工作帶來一定的困難。10強(qiáng)心苷的存在部位強(qiáng)心苷可以存在于植物體的葉、花、種子、鱗1011強(qiáng)心苷的生物活性強(qiáng)心苷是一類選擇性作用于心臟的化合物。臨床上主要用于治療慢性心功能不全，以及一些心率失常等心臟疾患。據(jù)報(bào)道，某些強(qiáng)心苷有細(xì)胞毒活性，動(dòng)物試驗(yàn)表明可抑制腫瘤。此外，強(qiáng)心苷類化合物有一定的毒性，它能致惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)，能影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生眩暈、頭痛等癥。11強(qiáng)心苷的生物活性強(qiáng)心苷是一類選擇性作用于心臟的化合物。臨11將強(qiáng)心苷置于含1%氯化氫的丙酮溶液中，20℃放置兩周，糖分子中2-OH與3-OH與丙酮反應(yīng)，進(jìn)而水解，可得到原來的苷元和糖的衍生物。構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖有20多種。蟾毒素綠海蔥苷元紫花洋地黃苷Aβ-D葡萄糖2、按苷元3位連接糖的類型不同，強(qiáng)心苷可分為I、II、III，I型結(jié)構(gòu)為A/B環(huán)反式稠合的稱別系。2．鉛鹽法：是一種比較有效的純化方法，但鉛鹽與雜質(zhì)形成的沉淀能吸附強(qiáng)心苷。主要用作合成甾體避孕藥和激素類藥物的原料。甾體化合物可分為兩種類型：A/B環(huán)順式稠合的稱正系；121、苷元部分的結(jié)構(gòu)

強(qiáng)心苷由強(qiáng)心苷元與糖縮合而成。天然存在的強(qiáng)心苷元是C17側(cè)鏈為不飽和內(nèi)酯環(huán)的甾體化合物。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)如下：（1）環(huán)的稠合方式為A/B環(huán)有順、反兩種形式，但多為順式；B/C環(huán)均為反式；C/D環(huán)多為順式。二、強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)與分類將強(qiáng)心苷置于含1%氯化氫的丙酮溶液中，20℃放置兩周，糖分子1213C10、C13、C17的取代基均為β型。C3、C14位有羥基取代。母核其它位置也可能有羥基取代，其中16β-OH有時(shí)與小分子有機(jī)酸，如甲酸、乙酸等以酯的形式存在。在C11、C12和C19位可能出現(xiàn)羰基。有的母核含有雙鍵，雙鍵常在C4、C5位或C5、C6位。（2）取代基13C10、C13、C17的取代基均為β型。C3、C14位1314①C17側(cè)鏈為五元不飽和內(nèi)酯環(huán)（△αβ-γ-內(nèi)酯），稱強(qiáng)心甾烯類，即甲型強(qiáng)心苷元。在已知的強(qiáng)心苷元中，大多數(shù)屬于此類。（3）強(qiáng)心苷元分類強(qiáng)心甾

強(qiáng)心甾烯14①C17側(cè)鏈為五元不飽和內(nèi)酯環(huán)（△αβ-γ-內(nèi)酯），稱強(qiáng)1415（3）強(qiáng)心苷元分類②C17側(cè)鏈為六元不飽和內(nèi)酯環(huán)（△αβ，γδ-δ-內(nèi)酯），稱海蔥甾二烯類或蟾蜍甾二烯類，即乙型強(qiáng)心苷元。自然界中僅少數(shù)苷元屬此類，如中藥蟾蜍中的強(qiáng)心成分蟾毒配基類。海蔥甾

海蔥甾二烯（蟾蜍甾二烯）

15（3）強(qiáng)心苷元分類②C17側(cè)鏈為六元不飽和內(nèi)酯環(huán)（△αβ1516強(qiáng)心苷元實(shí)例

洋地黃毒苷元3-表洋地黃毒苷元蟾毒素綠海蔥苷元16強(qiáng)心苷元實(shí)例洋地黃毒苷元3-表洋地1617構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖有20多種。根據(jù)它們C2位上有無羥基可以分成兩類。（1）α-羥基糖：除D-葡萄糖、L-鼠李糖外，還有6-去氧糖如L-夫糖、D-雞納糖等；6-去氧糖甲醚如L-黃花夾竹桃糖、D-洋地黃糖等。

2．糖部分的結(jié)構(gòu)17構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖有20多種。根據(jù)它們C2位上有無羥基可以分1718D-雞納糖D-弩箭子糖D-6-去氧阿洛糖D-洋地黃糖

L-黃花夾竹桃糖L-夫糖18D-雞納糖D-弩箭子糖D1819（2）α-去氧糖：

常見于強(qiáng)心苷類，是區(qū)別于其它苷類成分的一個(gè)重要特征。有2，6-二去氧糖如D-洋地黃毒糖等；2，6-二去氧糖甲醚如L-夾竹桃糖、D-加拿大麻糖等。D-洋地黃毒糖D-加拿大麻糖19（2）α-去氧糖：常見于強(qiáng)心苷類，是區(qū)別于其它苷類成分1920

強(qiáng)心苷大多是低聚糖苷，少數(shù)是單糖苷或雙糖苷。通常按糖的種類以及和苷元的連接方式，可分為以下三種類型：I型：苷元-（2，6-去氧糖）x－（D-葡萄糖）y

，3．苷元和糖的連接方式R紫花洋地黃苷Aβ-D葡萄糖洋地黃毒苷H20強(qiáng)心苷大多是低聚糖苷，少數(shù)是單糖苷或雙糖苷2021II型苷元-（6-去氧糖）x－（D-葡萄糖）y，如黃夾苷甲。21II型苷元-（6-去氧糖）x－（D-葡萄糖）y，如2122III型苷元-（D-葡萄糖）y，如綠海蔥苷。植物界存在的強(qiáng)心苷，以I、II型較多，III型較少。22III型苷元-（D-葡萄糖）y，如綠海蔥苷。22練習(xí)1、強(qiáng)心苷元是甾體母核C-17側(cè)鏈為不飽和內(nèi)酯環(huán)，甲型強(qiáng)心苷元17位側(cè)鏈為A.六元不飽和內(nèi)酯環(huán)

B.五元不飽和內(nèi)酯環(huán)C.五元飽和內(nèi)酯環(huán)

D.六元飽和內(nèi)酯環(huán)E.七元不飽和內(nèi)酯環(huán)23練習(xí)1、強(qiáng)心苷元是甾體母核C-17側(cè)鏈為不飽和內(nèi)酯環(huán)，甲型強(qiáng)23A.苷元-（葡萄糖）yB.苷元-2，6-二去氧糖C.苷元-（2，6-二去氧糖）x-（D-葡萄糖）yD.苷元E.苷元-（6-去氧糖）x-（D-葡萄糖）y2、按苷元3位連接糖的類型不同，強(qiáng)心苷可分為I、II、III，I型結(jié)構(gòu)為3、II型結(jié)構(gòu)為4、III型結(jié)構(gòu)為24A.苷元-（葡萄糖）y242425大量的研究證明，強(qiáng)心苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)對(duì)其生理活性有較大影響。強(qiáng)心苷的強(qiáng)心作用取決于苷元部分，主要是甾體母核的立體結(jié)構(gòu)、不飽和內(nèi)酯環(huán)的種類及一些取代基的種類及構(gòu)型。糖部分本身不具有強(qiáng)心作用，但可影響強(qiáng)心苷強(qiáng)心作用的強(qiáng)度。強(qiáng)心苷的強(qiáng)心作用強(qiáng)弱常以對(duì)動(dòng)物的毒性（致死量）來表示。三、強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系25大量的研究證明，強(qiáng)心苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)對(duì)其生理活性有較大影響。2526

甾體母核的立體結(jié)構(gòu)與強(qiáng)心作用關(guān)系密切的是C/D環(huán)須順式稠合。一旦這種稠合被破壞，將失去強(qiáng)心作用。若C14羥基為β構(gòu)型時(shí)即表明C/D環(huán)順式稠合，若為α構(gòu)型或脫水形成脫水苷元，則強(qiáng)心作用消失。

A/B環(huán)為順式稠合的甲型強(qiáng)心苷元，必須具C3-β羥基，否則無活性。A/B環(huán)為反式稠合的甲型強(qiáng)心苷元，無論C3是β-羥基還是α-羥基均有活性。1.甾體母核26甾體母核的立體結(jié)構(gòu)與強(qiáng)心作用關(guān)系密切的是C/D環(huán)須順式2627C17側(cè)鏈上α、β-不飽和內(nèi)酯環(huán)為β-構(gòu)型時(shí)，有活性；為α構(gòu)型時(shí)，活性減弱。若α、β不飽和鍵轉(zhuǎn)化為飽和鍵，活性大為減弱，但毒性也減弱；若內(nèi)酯環(huán)開裂，活性降低或消失。

2.不飽和內(nèi)酯環(huán)27C17側(cè)鏈上α、β-不飽和內(nèi)酯環(huán)為β-構(gòu)型時(shí)，有活性；為27283.取代基強(qiáng)心苷元甾核中一些基團(tuán)的改變亦將對(duì)生理活性產(chǎn)生影響。如C10位的角甲基轉(zhuǎn)化為醛基或羥甲基時(shí)，其生理活性增強(qiáng)；C10位的角甲基轉(zhuǎn)為羧基或無角甲基，則生理活性明顯減弱。283.取代基強(qiáng)心苷元甾核中一些基團(tuán)的改變亦將對(duì)生理活性產(chǎn)生28294.糖部分

強(qiáng)心苷中的糖本身不具有強(qiáng)心作用，但它們的種類、數(shù)目對(duì)強(qiáng)心苷的毒性會(huì)產(chǎn)生一定的影響。一般來說，苷元連接糖形成單糖苷后，毒性增加。隨著糖數(shù)的增多，分子量增大，苷元相對(duì)比例減少，又使毒性減弱。如毒毛旋花子苷元組成的三種苷的毒性比較，結(jié)果見表9-2。294.糖部分強(qiáng)心苷中的糖本身不具有強(qiáng)心作2930表9-2

毒毛旋花子苷元組成的三種苷的毒性比較

化合物名稱LD50（貓，mg/kg）毒毛旋花子苷元0.325加拿大麻苷（毒毛旋花子苷元-D-加拿大麻糖）0.110k-毒毛旋花子次苷-β（毒毛旋花子苷元-D-加拿大麻糖-D-葡萄糖）0.128k-毒毛旋花子苷（毒毛旋花子苷元-D-加拿大麻糖-D-（葡萄糖）20.186

從上表可知，一般甲型強(qiáng)心苷及苷元的毒性規(guī)律為：三糖苷＜二糖苷＜單糖苷＞苷元。30表9-2毒毛旋花子苷元組成的三種苷的毒性比較3031表9-3洋地黃毒苷元與不同單糖結(jié)合的苷的毒性化合物名稱LD50（貓，mg/kg）洋地黃毒苷元0.459洋地黃毒苷元-D-葡萄糖0.125洋地黃毒苷元-D-洋地黃糖0.200洋地黃毒苷元-L-鼠李糖0.278洋地黃毒苷元-加拿大麻糖0.288甲型強(qiáng)心苷中，同一苷元的單糖苷，其毒性的強(qiáng)弱取決于糖的種類。單糖苷的毒性次序?yàn)椋浩咸烟擒眨炯籽趸擒眨?-去氧糖苷＞2，6-去氧糖苷31表9-3洋地黃毒苷元與不同單糖結(jié)合的苷的毒性化合3132在乙型強(qiáng)心苷及苷元中，苷元的作用大于苷，其毒性規(guī)律為：苷元＞單糖苷＞二糖苷。比較甲、乙兩型強(qiáng)心苷元時(shí)發(fā)現(xiàn)，通常乙型強(qiáng)心苷元的毒性大于甲型強(qiáng)心苷元。乙型強(qiáng)心苷的毒性32在乙型強(qiáng)心苷及苷元中，苷元的作用大于苷，其毒性規(guī)律為：苷3233(一)

性狀

強(qiáng)心苷多為無定形粉末或無色結(jié)晶，具有旋光性，C17位側(cè)鏈為β構(gòu)型者味苦，為α構(gòu)型者味不苦。對(duì)粘膜具有刺激性。

四、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì)33(一)

性狀四、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì)3334一般可溶于水、醇、丙酮等極性溶劑（強(qiáng)心苷的原生苷和次生苷，在溶解性上有親水性、弱親脂性、親脂性之分，但均能溶于甲醇、乙醇中），微溶于乙酸乙酯、含醇氯仿，幾乎不溶于乙醚、苯、石油醚等極性小的溶劑。強(qiáng)心苷的溶解性與分子所含糖的數(shù)目、種類、苷元所含的羥基數(shù)及位置有關(guān)。此外，分子中是否形成分子內(nèi)氫鍵，也影響強(qiáng)心苷溶解性。（二）溶解性34一般可溶于水、醇、丙酮等極性溶劑（強(qiáng)心苷的原生苷和次生苷3435實(shí)例洋地黃毒苷（水溶性小，易溶于氯仿）

烏本苷（水溶性大，難溶于氯仿）35實(shí)例洋地黃毒苷烏本苷3536強(qiáng)心苷用混合強(qiáng)酸進(jìn)行酸水解時(shí)，苷元往往發(fā)生脫水反應(yīng)。C14、C5位上的β羥基最易發(fā)生脫水

(D-洋地黃毒糖)3+3D-洋地黃毒糖羥基洋地黃毒苷

脫水羥基洋地黃毒苷元（三）脫水反應(yīng)36強(qiáng)心苷用混合強(qiáng)酸進(jìn)行酸水解時(shí)，苷元往往發(fā)生脫水反應(yīng)。C136（四）苷鍵的水解（酸水解、堿水解、酶解）

1.酸水解A.

溫和酸水解：用稀酸（0.02-0.05mol/L)的鹽酸或硫酸在含水醇中經(jīng)短時(shí)間（半小時(shí)至數(shù)小時(shí)）加熱回流，可水解去氧糖的苷鍵。（選擇性）主要水解苷元和α-去氧糖之間的苷鍵或

α-去氧糖與α-去氧糖之間的糖苷鍵。不水解：

α-去氧糖與α-羥基糖，α-羥基糖之間的苷鍵（四）苷鍵的水解（酸水解、堿水解、酶解）

1.酸水解A.37紫花洋地黃苷A洋地黃毒苷元D-洋地黃毒糖D-洋地黃雙糖紫花洋地黃苷A洋地黃毒苷元D-洋地黃毒糖D-洋地黃雙糖382-羥基糖的苷此條件不易水解。2-羥基糖的苷此條件不易水解。39B.

強(qiáng)烈酸水解Ⅱ型和Ⅲ型強(qiáng)心苷，需增高酸的濃度（3%～5%），延長作用時(shí)間或同時(shí)加壓，才能使α-羥基糖定量地水解下來，但常引起苷元結(jié)構(gòu)的改變，失去一分子或數(shù)分子水形成脫水苷元。B.

強(qiáng)烈酸水解Ⅱ型和Ⅲ型強(qiáng)心苷，需增高酸的濃度（3%～540甾體類化合物最全課件41C.氯化氫丙酮法(Mannich）將強(qiáng)心苷置于含1%氯化氫的丙酮溶液中，20℃放置兩周，糖分子中2-OH與3-OH與丙酮反應(yīng)，進(jìn)而水解，可得到原來的苷元和糖的衍生物。適合于多數(shù)Ⅱ型強(qiáng)心苷的水解。但是，多糖苷因極性太大，難溶于丙酮中，則水解反應(yīng)不易進(jìn)行或不能進(jìn)行。此外，也并非所有能溶于丙酮的強(qiáng)心苷都可用此法進(jìn)行酸水解。C.氯化氫丙酮法(Mannich）將強(qiáng)心苷置于含1%氯化氫42甾體類化合物最全課件43

如果苷元分子中亦有兩個(gè)相鄰羥基，也能被丙酮化而生成苷元丙酮化物，如烏本苷的水解，需再用稀酸加熱而得到烏本苷元。如果苷元分子中亦有兩個(gè)相鄰羥基，也能被丙酮化而生成苷元丙44

特點(diǎn)：專屬性強(qiáng)。不同的酶作用于不同的苷鍵。2.酶水解法特點(diǎn)：專屬性強(qiáng)。不同的酶作用于不同的苷鍵。2.酶水解法45酶解法在強(qiáng)心苷產(chǎn)生中有很重要的作用。由于甲型強(qiáng)心苷的強(qiáng)心作用與分子中的糖基數(shù)目有關(guān)，即苷的強(qiáng)心作用強(qiáng)度為：單糖苷

二糖苷

三糖苷，所以常利用酶解法使植物體內(nèi)的原生苷水解成強(qiáng)心作用更強(qiáng)的次生苷。酶解法在強(qiáng)心苷產(chǎn)生中有很重要的作用。由46紫花洋地黃苷A酶水解洋地黃毒苷紫花洋地黃苷A酶水解洋地黃毒苷47蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液經(jīng)處理而得）幾乎能水解所有的苷鍵，能將強(qiáng)心苷分子的糖逐步水解，直至獲得苷元，常用來研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液經(jīng)處理而得）幾乎能水解所有48493.堿水解強(qiáng)心苷的苷鍵不被堿水解。但強(qiáng)心苷分子中的?；?、內(nèi)酯環(huán)會(huì)受堿的影響，發(fā)生水解或裂解、雙鍵移位、苷元異構(gòu)化等反應(yīng)。（1）?；乃鈴?qiáng)心苷的苷元或糖上常有?；嬖?，它們遇堿可水解脫去?；?。一般用碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋇等。上述四種堿只水解?；?，不影響內(nèi)酯環(huán)。氫氧化鈉、氫氧化鉀由于堿性太強(qiáng)，不僅使所有?；猓疫€會(huì)使內(nèi)酯環(huán)開裂。493.堿水解強(qiáng)心苷的苷鍵不被堿水解。但強(qiáng)心苷分子中的?；?、4950（2）內(nèi)酯環(huán)的水解在水溶液中，氫氧化鈉、氫氧化鉀溶液可使內(nèi)酯環(huán)開裂，加酸后可再環(huán)合；在醇溶液中，氫氧化鈉、氫氧化鉀溶液使內(nèi)酯環(huán)開環(huán)后生成異構(gòu)化苷，酸化亦不能再環(huán)合成原來的內(nèi)酯環(huán)，為不可逆反應(yīng)。

50（2）內(nèi)酯環(huán)的水解在水溶液中，氫氧化鈉、氫氧化鉀溶液可使5051乙型強(qiáng)心苷異構(gòu)化苷甲型強(qiáng)心苷

內(nèi)酯型異構(gòu)化苷

開鏈型異構(gòu)化苷（2）內(nèi)酯環(huán)的水解51乙型強(qiáng)心苷51五、強(qiáng)心苷的提取分離強(qiáng)心苷的提取分離困難：強(qiáng)心苷種類比較復(fù)雜，大多含量又較低。2.原生苷、次生苷多種強(qiáng)心苷共存。3.與糖類、皂苷、色素、鞣質(zhì)等共存，可影響強(qiáng)心苷在溶劑中的溶解度。4.強(qiáng)心苷不穩(wěn)定，易分解。五、強(qiáng)心苷的提取分離強(qiáng)心苷的提取分離困難：52此外，植物中還含有能酶解強(qiáng)心苷類的酶，植物原料在保存或提取過程中均可促使強(qiáng)心苷的酶解，產(chǎn)生次級(jí)苷，增加了成分的復(fù)雜性。因此提取過程中，要注意酶的問題。

因酸堿可使強(qiáng)心苷發(fā)生水解、脫水和異構(gòu)化，故提取分離時(shí)應(yīng)注意控制酸堿性。此外，植物中還含有能酶解強(qiáng)心苷類的酶，植物原料在保存或53如果要提取原生苷，必須抑制酶的活性，原料要新鮮，采集后要低溫快速干燥（50~60℃）。如果提取次級(jí)苷，可利用酶的活性，進(jìn)行酶解（25~40℃，還可加適量水）可獲得次級(jí)苷。如果要提取原生苷，必須抑制酶的活性，原料要新鮮，采集后要低溫54（一）提取①如以提取原生苷為目的時(shí)，要抑制酶的活性，防止酶解；如以提取次生苷為目的時(shí)，要利用酶的活性，進(jìn)行部分酶解。②避免接觸酸、堿。

（一）提取55一般原生苷易溶于水而難溶于親脂性溶劑，次級(jí)苷則相反，易溶于親脂性溶劑而難溶于水。提取時(shí)可根據(jù)強(qiáng)心苷的性質(zhì)選擇不同溶劑，例如乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶劑、甲醇、乙醇等。但最常用的為甲醇或70%乙醇，提取效率高且能使酶破壞失去活性。一般原生苷易溶于水而難溶于親脂性溶劑，次56（二）純化1．溶劑法原料如為種子或含油脂類雜質(zhì)較多時(shí)，一般宜進(jìn)行脫脂處理。醇提取，濃縮，殘留水提液用石油醚、苯萃取，除去親脂性雜質(zhì)。水液再用氯仿-甲醇混合液萃取，提出強(qiáng)心苷，親水性雜質(zhì)則留在水層而棄去。（二）純化57若原料為地上部分，葉綠素含量較高，可將醇提液濃縮，保留適量濃度的醇，放置使葉綠素等脂溶性雜質(zhì)成膠狀沉淀析出，過濾除去。若原料為地上部分，葉綠素含量較高，可將醇提液濃縮，保留適量濃582．鉛鹽法：是一種比較有效的純化方法，但鉛鹽與雜質(zhì)形成的沉淀能吸附強(qiáng)心苷。這種吸附和溶液中醇的含量有關(guān)。3．吸附法：活性炭→葉綠素等脂溶性色素等。氧化鋁→糖類、水溶性色素、皂苷等。2．鉛鹽法：是一種比較有效的純化方法，但鉛鹽與雜質(zhì)形成的沉淀59（三）分離

1、兩相溶劑萃取法利用強(qiáng)心苷在兩種互不相溶的溶劑中的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離。

２、層析分離分離親脂性單糖苷、次級(jí)苷、苷元，一般采用吸附層析，常以硅膠為吸附劑，用正己烷-乙酸乙酯、苯-丙酮、氯仿-甲醇、乙酸乙酯-甲醇為溶劑，進(jìn)行梯度洗脫。（三）分離60對(duì)弱親脂性成分宜選用分配層析，可用硅膠、硅藻土、纖維素為支持劑，常以乙酸乙酯-甲醇-水或氯仿-甲醇-水進(jìn)行梯度洗脫。對(duì)弱親脂性成分宜選用分配層析，可用硅膠、硅藻土、纖維素為支持6162鈴蘭毒苷的分離方法如下：鈴蘭全草粗粉苯-乙醇（9:1）提取提取液先常壓，后減壓濃縮，回收溶劑，加水析膠水溶液氯仿-乙醇（9:1）萃取膠質(zhì)沉淀（樹脂、葉綠素等）氯仿層濃縮至小體積，用水多次萃取水層（水溶性雜質(zhì)）水層氯仿層濃縮至小體積，靜置15～20日，抽濾粗晶甲醇重結(jié)晶鈴蘭毒苷62鈴蘭毒苷的分離方法如下：鈴蘭全草粗粉苯-乙醇（9:1）62Xanthydrol反應(yīng)E.另外，強(qiáng)心苷結(jié)構(gòu)復(fù)雜，性質(zhì)不夠穩(wěn)定，易被水解生成次生苷，給提取分離工作帶來一定的困難。主要用作合成甾體避孕藥和激素類藥物的原料。此外，分子中是否形成分子內(nèi)氫鍵，也影響強(qiáng)心苷溶解性。甾體化合物是由甲戊二羥酸的生物合成途徑轉(zhuǎn)化而來，可以衍生成甾醇類、C21甾類、強(qiáng)心苷元類、甾體皂苷元類等等。除D-葡萄糖、L-鼠李糖外，還有6-去氧糖如L-夫糖、D-雞納糖等；LD50（貓，mg/kg）對(duì)親水性較強(qiáng)的強(qiáng)心苷，宜用水浸透濾紙作固定相，以水飽和的丁酮或乙醇-甲苯-水、氯仿-甲醇-水作移動(dòng)相，展開效果較好。反應(yīng)陽性可肯定α-去氧糖的存在，反應(yīng)陰性不可否定α-去氧糖的存在。反應(yīng)陽性可肯定α-去氧糖的存在，反應(yīng)陰性不可否定α-去氧糖的存在。各類甾體成分C17位均有側(cè)鏈。對(duì)弱親脂性成分宜選用分配層析，可用硅膠、硅藻土、纖維素為支持劑，常以乙酸乙酯-甲醇-水或氯仿-甲醇-水進(jìn)行梯度洗脫。05mol/L)的鹽酸或硫酸在含水醇中經(jīng)短時(shí)間（半小時(shí)至數(shù)小時(shí)）加熱回流，可水解去氧糖的苷鍵。劍麻治療高血脂癥、糖尿病餐后高脂及由此引起的疾病（水溶性大，難溶于氯仿）蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液經(jīng)處理而得）幾乎能水解所有的苷鍵，能將強(qiáng)心苷分子的糖逐步水解，直至獲得苷元，常用來研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。洋地黃毒苷元-D-葡萄糖63六、強(qiáng)心苷的檢識(shí)（一）理化檢識(shí)強(qiáng)心苷的理化鑒別主要是利用強(qiáng)心苷分子結(jié)構(gòu)中甾體母核、不飽和內(nèi)酯環(huán)、α-去氧糖的顏色反應(yīng)。常用的反應(yīng)有Liebermann-Burchard反應(yīng)、Keller-Killiani反應(yīng)、Legal反應(yīng)和Kedde反應(yīng)等。Xanthydrol反應(yīng)E.63六、強(qiáng)心苷的檢識(shí)631.C17位上不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng)甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，由于五元不飽和內(nèi)酯環(huán)上的雙鍵移位產(chǎn)生C22活性亞甲基，能與活性亞甲基試劑作用而顯色。這些有色化合物在可見光區(qū)常有最大吸收，故亦可用于定量。乙型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，不能產(chǎn)生活性亞甲基，無此類反應(yīng)。所以利用此類反應(yīng)，可區(qū)別甲、乙型強(qiáng)心苷。641.C17位上不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng)甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶6465乙型強(qiáng)心苷異構(gòu)化苷甲型強(qiáng)心苷

內(nèi)酯型異構(gòu)化苷

開鏈型異構(gòu)化苷內(nèi)酯環(huán)的堿水解65乙型強(qiáng)心苷65（1）Legal反應(yīng)又稱亞硝酰鐵氰化鈉試劑反應(yīng)?，F(xiàn)象：反應(yīng)液呈深紅色并漸漸褪去。66活性亞硝基活性亞甲基異亞硝酰衍生物的鹽（1）Legal反應(yīng)又稱亞硝酰鐵氰化鈉試劑反應(yīng)。66活性亞硝66（2）Raymond反應(yīng)又稱間二硝基苯試劑反應(yīng)。樣品以少量50％乙醇溶解后加入間二硝基苯乙醇溶液，搖勻后再加入20％氫氧化鈉，呈紫紅色。其它間二硝基化合物如3，5-二硝基甲酸（Kedde反應(yīng)）、苦味酸（Baljet反應(yīng)）等也具有相同的反應(yīng)機(jī)制。67（2）Raymond反應(yīng)又稱間二硝基苯試劑反應(yīng)。樣品以少量67

活性次甲基顯色反應(yīng)

反應(yīng)名稱

試劑

顏色λmax（nm）Legal反應(yīng)亞硝酰鐵氰化鈉深紅或藍(lán)470Kedde反應(yīng)3、5-二硝基苯甲酸深紅或紅590Raymond

反應(yīng)間-二硝基苯紫紅或藍(lán)620Baljet反應(yīng)

苦味酸橙或橙紅490活性次甲基顯色反應(yīng)反應(yīng)名稱682.α-去氧糖顏色反應(yīng)（1）Keller-Kiliani（K-K）反應(yīng)

樣品用冰乙酸溶解，加20%的三氯化鐵水溶液1滴，混勻后傾斜試管，沿管壁緩慢加入濃硫酸5ml，觀察界面和乙酸層的顏色變化。如有α-去氧糖，乙酸層顯藍(lán)色。界面的呈色，逐漸向下層擴(kuò)散，其顯色隨苷元羥基、雙鍵的位置和數(shù)目不同而異，可顯紅色、綠色、黃色等，但久置后均轉(zhuǎn)為暗色。692.α-去氧糖顏色反應(yīng)（1）Keller-Kiliani（K69此反應(yīng)只對(duì)游離的α-去氧糖或α-去氧糖與苷元連接的苷顯色，對(duì)α-去氧糖與葡萄糖或其他羥基糖連接的二糖、三糖及乙?；摩?去氧糖不顯色。反應(yīng)陽性可肯定α-去氧糖的存在，反應(yīng)陰性不可否定α-去氧糖的存在。70此反應(yīng)只對(duì)游離的α-去氧糖或α-去氧糖與苷元連接的苷顯色，對(duì)70（2）呫噸氫醇（Xanthydrol）反應(yīng)

取樣品少許，加呫噸氫醇試劑（呫噸氫醇10mg溶于冰乙酸100ml中，加入濃硫酸1ml），置水浴上加熱3分鐘，只要分子中有α-去氧糖即顯紅色。此反應(yīng)極為靈敏，還可用于定量分析。71（2）呫噸氫醇（Xanthydrol）反應(yīng)取樣品少許，加呫71強(qiáng)心苷的理化檢識(shí)總結(jié)結(jié)構(gòu)反應(yīng)現(xiàn)象強(qiáng)心苷Liebermann-Burchard反應(yīng)紅→紫→藍(lán)→綠→污綠褪色甲型強(qiáng)心苷Legal，Raymond，Kedde,Baljet反應(yīng)陽性α-去氧糖K-K,Xanthydrol反應(yīng)陽性強(qiáng)心苷的理化檢識(shí)總結(jié)結(jié)構(gòu)反應(yīng)現(xiàn)象強(qiáng)心苷Lieberman7273（二）色譜檢識(shí)色譜法是檢識(shí)強(qiáng)心苷的一種重要手段，主要有紙色譜、薄層色譜等。1.紙色譜

一般對(duì)親脂性較強(qiáng)的強(qiáng)心苷及苷元，多將濾紙預(yù)先以甲酰胺或丙二醇浸漬數(shù)分鐘作為固定相，以苯或甲苯（用甲酰胺飽和）為移動(dòng)相，便可達(dá)到滿意的分離效果。如果強(qiáng)心苷的親脂性較弱，可改為極性較大的溶劑系統(tǒng)作為移動(dòng)相。對(duì)親水性較強(qiáng)的強(qiáng)心苷，宜用水浸透濾紙作固定相，以水飽和的丁酮或乙醇-甲苯-水、氯仿-甲醇-水作移動(dòng)相，展開效果較好。73（二）色譜檢識(shí)色譜法是檢識(shí)強(qiáng)心苷的一種重要手段，主要有紙7374一般色譜濾紙不預(yù)先用固定相處理，也能適用于強(qiáng)心苷類的分離。常用的溶劑系統(tǒng)為氯仿、乙酸乙酯、苯、甲苯等有機(jī)溶劑與水組成的混合溶劑，因水在這些溶劑中的溶解度較小，可加入適量的乙醇以增加溶劑系統(tǒng)的含水量，便于適應(yīng)親脂性較弱的強(qiáng)心苷類的分離。74一般色譜濾紙不預(yù)先用固定相處理，也能適用于強(qiáng)心苷類的分離74752.薄層色譜強(qiáng)心苷的薄層色譜有吸附薄層色譜和分配薄層色譜。在吸附薄層色譜上，常用硅膠作吸附劑，以氯仿-甲醇-冰乙酸、乙酸乙酯-甲醇-水等溶劑系統(tǒng)作展開劑。也可用反相硅膠薄層色譜分離強(qiáng)心苷類化合物，常用的溶劑展開系統(tǒng)有甲醇-水、氯仿-甲醇-水等。752.薄層色譜強(qiáng)心苷的薄層色譜有吸附薄層色譜和分配薄層色7576分配薄層對(duì)分離強(qiáng)心苷的效果較吸附薄層更好，所得斑點(diǎn)集中，承載分離的樣品量較大。常用于分離極性較強(qiáng)的強(qiáng)心苷類化合物。76分配薄層對(duì)分離強(qiáng)心苷的效果較吸附薄層更好，所得斑點(diǎn)集中，7677常用顯色劑①2%3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與2mol/L氫氧化鉀溶液等體積混合，噴后強(qiáng)心苷顯紅色，幾分鐘后褪色（Kedde反應(yīng)）

。②1%苦味酸水溶液與10%氫氧化鈉水溶液（95：5），噴后于90℃～100℃烘4～5分鐘，強(qiáng)心苷呈橙紅色（Baljet反應(yīng)）

。③2%三氯化銻的氯仿溶液，噴后于100℃烘5分鐘，各種強(qiáng)心苷及苷元顯不同的顏色（Kahlenberg反應(yīng)）

。77常用顯色劑①2%3，5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與2m77練習(xí)1、鑒別三萜皂苷和甾體強(qiáng)心苷的顯色反應(yīng)為A.LiebermannBurchard反應(yīng)B.Kedde反應(yīng)

C.Molish反應(yīng)D.1％明膠試劑

E.三氯化鐵反應(yīng)2、鑒別甲型強(qiáng)心苷元與乙型強(qiáng)心苷元的反應(yīng)為A.Tschugaev反應(yīng)

B.三氯醋酸-氯胺T反應(yīng)C.Raymond反應(yīng)

D.Salkowski反應(yīng)E.三氯化銻反應(yīng)78練習(xí)1、鑒別三萜皂苷和甾體強(qiáng)心苷的顯色反應(yīng)為78783.鑒別I型強(qiáng)心苷與II型或III型強(qiáng)心苷的反應(yīng)為A.Legal反應(yīng)

B.Baljet反應(yīng)

C.Kedde反應(yīng)D.Xanthydrol反應(yīng)

E.Salkowski反應(yīng)793.鑒別I型強(qiáng)心苷與II型或III型強(qiáng)心苷的反應(yīng)為7979

第三節(jié)甾體皂苷一、甾體皂苷的概述１．概念：甾體皂苷（steroidalsaponins）是一類由螺甾烷類化合物與糖結(jié)合的寡糖苷。該苷類化合物多數(shù)可溶于水，水溶液振搖后產(chǎn)生似肥皂水溶液樣泡沫，故被稱為甾體皂苷。該類皂苷不具有羧基，呈中性，所以又稱之為中性皂苷。

第三節(jié)甾體皂苷一、甾體皂苷的概述802．分布：在植物中有著廣泛的分布，迄今發(fā)現(xiàn)的甾體皂苷類化合物已達(dá)10000種以上，主要分布在薯蕷科、百合科、玄參科等植物中。2．分布：在植物中有著廣泛的分布，迄今發(fā)現(xiàn)的甾體皂苷類化合物81甾體類化合物最全課件82甾體類化合物最全課件83可的松是腎上腺皮質(zhì)激素類藥，主要應(yīng)用于腎上腺皮質(zhì)功能減退癥及垂體功能減退癥的替代治療，亦可用于過敏性和炎癥性疾病?？傻乃墒悄I上腺皮質(zhì)激素類藥，主要應(yīng)用于腎上腺皮質(zhì)功能減退癥及84氫化可的松是人工合成也是天然存在的糖皮質(zhì)激素，抗炎作用為可的松的1．25倍，也具有免疫抑制作用、抗毒作用、抗休克等作用。氫化可的松是人工合成也是天然存在的糖皮質(zhì)激素，抗炎作用為可的853.生物活性

抗生育：殺滅精子、抗早孕主要用作合成甾體避孕藥和激素類藥物的原料。降血糖:偽原知母皂苷AⅢ和原知母皂苷AⅢ降低膽固醇和免疫調(diào)節(jié)抗真菌、殺蟲等

3.生物活性抗生育：殺滅精子、抗早孕86

防治心腦血管疾?。?/p>

地奧心血康膠囊——含8種由黃山藥中提取的甾體皂苷，總量在90%以上，治療冠心病。心腦舒通——由蒺藜果實(shí)中提取的總甾體皂苷，用于心腦血管疾病的防治。盾葉冠心寧——從盾葉薯蕷中提取的水溶性皂苷。防治心腦血管疾?。?7二、化學(xué)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

1.27個(gè)C，具螺縮酮的結(jié)構(gòu)

2.A/B順、反;B/C,C/D反

3.C10,C13具

-CH3

4.C3有-OH取代

5.C5、C6有時(shí)具雙鍵；C