KHB ST-360酶標(biāo)儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序

KHBST-360酶標(biāo)儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的通過(guò)對(duì)ST-360酶標(biāo)儀的規(guī)范操作，以獲取準(zhǔn)確的結(jié)果，使其處于良好的工作狀態(tài)，并保證操作人員的人身健康與安全。2儀器簡(jiǎn)介、工作原理2.1基本原理ST-360酶標(biāo)儀依據(jù)了比色法原理用于檢測(cè)體內(nèi)微量的特異性抗原和抗體。酶免反應(yīng)中的顯色反應(yīng)是通過(guò)偶聯(lián)在抗原或者抗體上的酶催化顯色底物進(jìn)行反應(yīng)，從而顯示出顏色，通過(guò)顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測(cè)抗原或抗體的濃度。酶標(biāo)儀利用分光光度計(jì)的原理，讀取酶免實(shí)驗(yàn)中反應(yīng)物的吸光度值，進(jìn)而進(jìn)行分析。ST-360酶標(biāo)儀是一種通道垂直光路光密度檢測(cè)儀，可用來(lái)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)光密度測(cè)定與凝集反應(yīng)檢測(cè)。2.2檢測(cè)原理ST-360酶標(biāo)儀利用了垂直光密度檢測(cè)的概念，即光束經(jīng)過(guò)整個(gè)標(biāo)本的垂直測(cè)光發(fā)，光的吸收與板孔中吸光物質(zhì)的多少呈正比。吸光值由以下公式表示：A=（a/s）×mA為吸光度值；a為物質(zhì)的克分子吸收率；m為吸光物質(zhì)的質(zhì)量；s為垂直于光路的橫切面積。2.3參數(shù)設(shè)置設(shè)置日期，時(shí)間波長(zhǎng)：雙波長(zhǎng)單波長(zhǎng)，版類型：96孔輸入質(zhì)控類型和數(shù)量，輸入陰，陽(yáng)對(duì)照。2.3技術(shù)性能（1）吸光度值可測(cè)范圍：0.000—3.000（0.000—2.000為線性范圍）（2）濾光片波長(zhǎng)，基本配置405，450，492，630。按用戶要求可另配414，546，578，690。（3）測(cè)試速度：96孔/5秒（4）穩(wěn)定性：≤±1%（5）重復(fù)性：≤0.005（A）3儀器運(yùn)行環(huán)境（1）電源條件：AC200V～AC240V，50/60Hz（2）環(huán)境溫度：10℃～30℃（3）相對(duì)濕度：<=80%（4）大氣壓：86—106Kpa（5）工作位置：水平（6）工作時(shí)間：連續(xù)8小時(shí)4授權(quán)操作人適用于生免室經(jīng)授權(quán)的檢驗(yàn)專業(yè)技術(shù)人員，具體見儀器授權(quán)一覽表5程序編制5.1取出附件袋中的電源線，一端接在后面板的電源插座山，一端接在220V電源上。5.2接通儀器后面板的開關(guān)，儀器自檢后，進(jìn)入待機(jī)狀態(tài)。5.2.1測(cè)量方式設(shè)置待機(jī)狀態(tài)下按測(cè)量方式鍵―――選“雙波長(zhǎng)檢測(cè)”―――選當(dāng)前第一波長(zhǎng)為450，第二波長(zhǎng)為630―――選2“多孔試劑空白”―――輸入空白對(duì)照孔位置（選擇完按確定鍵）5.2.2計(jì)算方式設(shè)置待機(jī)狀態(tài)下按計(jì)算方式鍵―――選5“單限檢測(cè)法”―――選2“極限值計(jì)算”―――輸入公式參數(shù)（對(duì)照試劑說(shuō)明書）a=*b=*c=*（選擇完按確定鍵）―――輸入陰陽(yáng)性對(duì)照孔位置（＋/－鍵切換陰陽(yáng)性，輸入完按確定鍵）5.2.3存儲(chǔ)程序待機(jī)狀態(tài)下編輯好程序后按功能鍵―――選擇4“存貯當(dāng)前內(nèi)容”―――選擇A“存貯當(dāng)前設(shè)置程序”―――輸入存儲(chǔ)位置（1～50），輸入完按確定鍵5.2.4調(diào)用程序待機(jī)狀態(tài)下按功能鍵－－－選擇5“調(diào)用當(dāng)前內(nèi)容”―――選擇A“調(diào)用當(dāng)前設(shè)置程序”―――輸入程序位置（1～50），輸入完按確定鍵5.3讀板待機(jī)狀態(tài)下放入檢測(cè)板，打開控制電腦，輸入相應(yīng)的參數(shù)，按開始鍵讀板。6儀器校準(zhǔn)6.1濾光片波長(zhǎng)精度檢查將不同波長(zhǎng)的濾光片從酶標(biāo)儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見分光光度計(jì)（波長(zhǎng)精度±0.3nm）于可見光區(qū)對(duì)每個(gè)濾光片進(jìn)行掃描，其檢測(cè)值與標(biāo)定值之差為濾光片波長(zhǎng)精度。一般酶標(biāo)儀無(wú)585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長(zhǎng)為630nm）。6.2通道差與孔間差檢測(cè)通道差檢測(cè)是取一只酶標(biāo)板小孔杯（杯底須光滑，透明，無(wú)污染以酶標(biāo)板架作載體，將其（內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右）置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，蒸溜水調(diào)零，于490nm處連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道的檢測(cè)器測(cè)量結(jié)果的一致性，可用極差值來(lái)表示?？组g差的測(cè)量是選擇同一廠家，同一批號(hào)酶標(biāo)2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測(cè)，其誤差大小用±1.96s衡量。6.3零點(diǎn)飄移（穩(wěn)定性觀察）取8只小孔杯分別置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，均加入200ul蒸餾水并調(diào)零，于490nm處每隔30分鐘測(cè)一次，觀察各個(gè)通道4小時(shí)內(nèi)吸光度的變化。6.4精密度評(píng)價(jià)每個(gè)通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同濃度的甲基橙溶解，蒸餾水調(diào)零，于490nm作雙份平行測(cè)定，每日測(cè)二次（上下午各一次），連續(xù)測(cè)定20天。分別計(jì)算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。6.5線性測(cè)定用電子天平精確稱取甲基橙配制5個(gè)系列的溶液，于490nm平行測(cè)8次，取其均值。計(jì)算其回歸方程，相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差s，并用±1.96s表示樣品測(cè)量的誤差范圍.雙波長(zhǎng)測(cè)定評(píng)價(jià)：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測(cè)定波長(zhǎng)為490nm，校正波長(zhǎng)為585nm），先后于8個(gè)通道檢測(cè)，每個(gè)通道測(cè)3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以考察雙波長(zhǎng)消除干擾組分的效果。7樣品測(cè)定7.1打開電源開關(guān)。儀器自檢。7.2把檢測(cè)板放入運(yùn)載臺(tái)上。7.3進(jìn)入主菜單，按“READ”鍵。7.4選擇要做項(xiàng)目的編號(hào)及名稱，按“ENTER”鍵，輸入要測(cè)的樣本數(shù)量，“ENTER”鍵。7.5再按“READ”鍵。測(cè)讀，儀器自動(dòng)打印儀器自動(dòng)打印報(bào)告進(jìn)行匯總。7.6取出微孔板，關(guān)閉電源。8維護(hù)與保養(yǎng)8.1保養(yǎng)8.1.1為保證儀器持續(xù)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性，應(yīng)干擾光學(xué)系統(tǒng)的任何部件。光路的調(diào)校錯(cuò)誤會(huì)影響測(cè)量結(jié)果。8.1.2保持光學(xué)系統(tǒng)的清潔，以確保正常功能和結(jié)果的準(zhǔn)確，應(yīng)避免任何液體流入儀器內(nèi)部，并防塵、防止其它外源性物質(zhì)，不要用手指摸透鏡表面、濾光鏡、光電檢測(cè)器。8.2儀器常規(guī)清潔8.2.1關(guān)掉儀器，并拔掉電源插頭。8.2.2使用一次性手套，用一次性擦布沾水或溫和去污劑，清潔儀器外部、導(dǎo)軌和板架。8.2.3清潔光學(xué)系統(tǒng)：詳見儀器使用說(shuō)明書。8.3消毒方法：在使用危險(xiǎn)性的傳染性物質(zhì)后，用以下方法消毒儀器。8.3.1關(guān)掉儀器，并拉掉電源插頭。8.3.2使用一次性手套，用一次性擦布沾70%乙醇，清潔儀器外部、軌道和板架。8.3.4儀器內(nèi)部消毒，詳見儀器使用說(shuō)明書。9故障處理錯(cuò)誤原因建議采取的方法開機(jī)后電源不通檢查電源是否接好，保險(xiǎn)絲是否燒斷濾光片盤出錯(cuò)濾光片盤定位出錯(cuò)1.檢查是否有東西阻礙盤轉(zhuǎn)動(dòng)或電機(jī)壞2.電機(jī)插頭松3.請(qǐng)與服務(wù)商聯(lián)系樣品盤出錯(cuò)1.檢查酶標(biāo)板是否裝平在板架上2.檢查是否有異物阻礙板架3.導(dǎo)軌是否干凈，有無(wú)彎曲，齒型帶是否破損4.返回光耦找不到5.請(qǐng)與服務(wù)商聯(lián)系無(wú)燈燈泡壞換燈泡濾光片出錯(cuò)濾光片能量低換濾光片前置出錯(cuò)能量太高、暗信號(hào)低1.檢查電纜線是否插好,電源插座是否接地2外來(lái)電源不穩(wěn)（可自配穩(wěn)壓器）3.與服務(wù)商聯(lián)系設(shè)備故障修復(fù)后，應(yīng)首先分析故障原因，如果設(shè)備故障影響了分析性能，應(yīng)通過(guò)以下合適的方式進(jìn)行相關(guān)的檢測(cè)和驗(yàn)證：9.1可校準(zhǔn)的項(xiàng)目實(shí)施校準(zhǔn)驗(yàn)證，必要時(shí)，實(shí)施校準(zhǔn)；9.2質(zhì)控物檢測(cè)結(jié)果在允許范圍內(nèi)；9.3與其他儀器的檢測(cè)結(jié)果比較；要求：樣本數(shù)n≥5，濃度應(yīng)覆蓋測(cè)量范圍，包括醫(yī)學(xué)決定水平，至少4份樣品測(cè)量結(jié)果的偏差＜1/2TEa，或小于規(guī)定的偏倚。9.4使用留樣再測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷。要求：依據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目樣品穩(wěn)定性要求選取長(zhǎng)期限樣品，n≥5，濃度應(yīng)覆蓋測(cè)量范圍，包括醫(yī)學(xué)決定水平，至少4份樣品測(cè)量結(jié)果的偏差＜1/3T