綜合實(shí)驗(yàn)七、九

橄欖油中角鯊烯的分析鑒定、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私忾蠙煊椭薪酋徬┑亩ㄐ詸z測方法掌握樣品前處理的方法及步驟二、實(shí)驗(yàn)原理角鯊烯是一種脂質(zhì)不皂化物，最初是從鯊魚的肝油中發(fā) 現(xiàn)的,1914年被命名為Squalene,其化學(xué)名稱為2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，屬開鏈三萜，又稱魚肝油萜。具有提高體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能，是一種無毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物質(zhì)。圖I角鯊烯化學(xué)結(jié)構(gòu)角鯊烯在植物中分布很廣，但含量不高，多低于植物油中不皂化物的5%,僅少數(shù)含量較多。如橄欖油。橄欖油是所有油類中唯一可不經(jīng)提煉而直接以原始液態(tài)食用的油品，高質(zhì)量的特級初榨橄欖油含有大量的角鯊烯物質(zhì)。它增加了橄欖油自身的穩(wěn)定性，延長了食用有效期和保持鮮美口味。橄欖油的色澤隨榨油機(jī)壓力的增加而加深：淺黃、黃綠、藍(lán)綠、藍(lán)至藍(lán)黑色。色澤深的橄欖油酸值高，酸值大于3時(shí)，油味變濃并帶有刺激性，不宜食用。深色橄欖油比重增大。如果淺色油的相對密度(15°C/15°C)大于0.918時(shí)，說明摻雜有其它油脂。橄欖油為高級食用油脂，售價(jià)較高，所以常有摻偽現(xiàn)象。為了鑒別，可用下列試驗(yàn)：冷凍試驗(yàn)、硝酸試驗(yàn)、測定油脂的克雷斯美爾值以及紅外表征。而由于橄欖油中油脂成分復(fù)雜，本實(shí)驗(yàn)采用氫氧化鉀-乙醇溶液皂化，石油醚萃取凈化，紅外光譜分析檢測。三、實(shí)驗(yàn)部分3.1材料與儀器橄欖油、角鯊烯標(biāo)準(zhǔn)品、KOH、NaCl、無水硫酸鈉、正己烷、乙醇；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、恒溫水浴鍋；紅外光譜儀(島津IRAffinity-1傅立葉變換紅外光譜儀)。3.2實(shí)驗(yàn)步驟I.橄欖油樣品前處理稱取1.0g左右橄欖油樣品，放入250mL磨口錐形瓶中，加入50mL的2.5moL/LKOH-乙醇溶液，置于85oC恒溫水浴鍋中皂化1h,移出冷卻，轉(zhuǎn)移至500mL分液漏斗中，加入50mL飽和NaCl溶液，再加入50mL石油醚，震搖萃取2min,靜置，待分層后將上層有機(jī)相轉(zhuǎn)入250mL分液漏斗中，下層皂化液再分別加入50mL、30mL石油醚，萃取兩次，合并3次的石油醚層于250mL分液漏斗中，每次加入50mL去離子水洗有機(jī)相，洗至中性，有機(jī)相過無水硫酸鈉脫水（1?2hr）后，于35oC水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干，用正己烷溶解并定容至10mL,待測定。II.樣品中角鯊烯的分析鑒定3.2.1冷凍試驗(yàn)無水橄欖油在2°C的條件下放置5.5小時(shí)仍澄清透明。如若在5.7°C的條件下放置24小時(shí)出現(xiàn)混濁，則橄欖油中一定有多量的摻雜油脂。3.2.2硝酸試驗(yàn)橄欖油與硝酸作用不呈顯色反應(yīng)。其它油脂與硝酸作用呈棕色。取2mL左右橄欖油樣品放入比色管中，加入幾滴硝酸進(jìn)行觀察。3.2.3測定油脂的克雷司美爾值純凈橄欖油的克雷司美爾值在68.5~71.6C之間。否則其有摻雜?？死姿久罓栔凳窃诮o定的條件下，取5mL橄欖油樣品放入比色管中，加入5mL等量乙醇（92%）和戊醇混合溶劑，在水浴中（80C左右）加熱溶解，逐漸冷卻至溶液發(fā)生混濁時(shí)的溫度數(shù)值。3.2.4紅外表征將測定的橄欖油樣品IR圖與標(biāo)準(zhǔn)譜圖比較，并標(biāo)出主要吸收帶的歸屬，進(jìn)行定性分析。四、思考題1.什么是皂化反應(yīng)？試述在本實(shí)驗(yàn)中皂化反應(yīng)的目的？

2.分析所測橄欖油樣品中紅外譜結(jié)果，標(biāo)出主要吸收帶的歸屬。附件表1工業(yè)角鯊烯特性分子式CjqHjo410.7碘直371皂化值<0.5酸值<0.5比251C)0.85—0J95折光抬數(shù)（IPiT/D）1.457—1.496<-55閃點(diǎn)2)8沸點(diǎn)（D212?213/3mmHg；248/5mmHg紅外峰1670,1450,1390HUU.870原料含￡凍梅鯊魚肝油54—86橄欖油0.2—0.4疏菜紅油（覓鍛植物種子油）3.0~6.0(5—S)羅漢果種仁油12.5左右棕