11《 dna重組技術(shù)的基本工具》課件

2016.11.20---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------生物選修三《現(xiàn)代生物科技專題》專題1基因工程2016.11.20---Zhao‘a(chǎn)nExperime1---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------１.１《ＤＮＡ重組技術(shù)的基本工具》---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh2---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------學(xué)習(xí)目標(biāo)：1、了解基因工程的概念2、了解基因工程的誕生3、理解基因工程中三種基本工具的作用---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh3---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------一、基因工程的概念1、原理：2、操作水平：3、又稱：4、優(yōu)點(diǎn)：基因重組DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)⑴定向改造生物性狀⑵克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙⑶育種周期短---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh4---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------二、基因工程的誕生（一）基礎(chǔ)理論：1、DNA是遺傳物質(zhì)的證明2、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立3、遺傳密碼的破譯（二）技術(shù)發(fā)明：---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh5---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------1、基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)2、工具酶的發(fā)明3、DNA合成和測(cè)序技術(shù)的發(fā)明4、DNA體外重組的實(shí)現(xiàn)5、重組DNA表達(dá)實(shí)驗(yàn)的成功6、第一例轉(zhuǎn)基因生物的問(wèn)世7、PCR技術(shù)的發(fā)明（二）技術(shù)發(fā)明：---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh6---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------三、基因工程的基本工具請(qǐng)同學(xué)們看書(P4-6)，思考以下問(wèn)題：1、基因工程中三種基本工具的作用分別是什么？2、工具酶的作用部位分別在哪？3、具備什么條件才能充當(dāng)“分子運(yùn)輸車”？---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh7---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------（一）“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶1、來(lái)源：主要來(lái)自原核生物2、特點(diǎn)：具有專一性（特異性）表現(xiàn)在兩方面：(1)識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列(2)切割特定序列中的特定位點(diǎn)3、作用：特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)4、結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHigh8SmaⅠ平末端平末端---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------SmaⅠ平末端平末端---Zhao‘a(chǎn)nExper9

EcoRⅠ黏性末端黏性末端---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------EcoRⅠ黏性末端黏性末端---Zhao‘a(chǎn)n10（二）“分子縫合針”——DNA連接酶1、種類：⑴E·coliDNA連接酶⑵T4DNA連接酶2、作用：---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------大腸桿菌T4噬菌體只連接黏性末端既連接黏性末端，又連接平末端。（二）“分子縫合針”——DNA連接酶1、種類：⑴E·col11可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶即恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，E·coliDNA12

DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，但效率較低---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還13（三）“分子運(yùn)輸車”——運(yùn)載體2、種類：1、需要具備的條件：（1）在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，能自我復(fù)制（2）有一個(gè)或多個(gè)切割位點(diǎn)（3）有標(biāo)記基因（4）對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒等---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------天然質(zhì)粒需經(jīng)人工改造后方可用作運(yùn)載體。（三）“分子運(yùn)輸車”——運(yùn)載體2、種類：1、需要具備的條件：14最常用的質(zhì)粒——大腸桿菌的質(zhì)粒試分析其作為載體的優(yōu)點(diǎn)？---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------最常用的質(zhì)?！竽c桿菌的質(zhì)粒試分析其作為載體的優(yōu)點(diǎn)？---151、關(guān)于限制酶說(shuō)法中，正確的是（）A．限制酶是一種酶，只識(shí)別GAATTC堿基序列B．EcoRI切割的是G—A之間的氫鍵C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD．限制酶只存在于原核生物中課堂反饋---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------------C1、關(guān)于限制酶說(shuō)法中，正確的是（）課堂反饋---Zha162.（多選）有關(guān)基因工程的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A、基因工程技術(shù)能定向地改造生物的遺傳性狀，培育生物新品種B、重組DNA的形成在細(xì)胞內(nèi)完成C、目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D、質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體---Zhao‘a(chǎn)nExperimentalHighSchool---詔安縣實(shí)驗(yàn)高級(jí)中學(xué)-------------