藥物分析第2章 藥物的鑒別試驗

第二章

藥物的鑒別試驗藥物分析教研室IdentificationtestofdrugContents概述1物理常數(shù)測定法2化學鑒別試驗3光譜鑒別法4色譜鑒別法5第一節(jié)概述一、藥物的鑒別試驗(IdentificationTest)內(nèi)涵

根據(jù)藥物的分子結構，采用化學、物理化學或生物學方法來判斷其真?zhèn)?。鑒別試驗用方法僅用于證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物，而非對未知物的鑒別。鑒別試驗方法應專屬，每個品種一般2～4條。第一節(jié)概述二、鑒別試驗的分類一般鑒別試驗（GeneralIdentificationTest）只能證實是某一類藥物，而不能證實是哪一種藥物！只適用于純品，混合藥物或有干擾時不適用！

依據(jù)某一類藥物的化學結構或物化性質(zhì)的特征，通過化學反應來鑒別藥物的真?zhèn)巍?/p>

中國藥典附錄收載項目

丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機氟化物類、無機金屬鹽類、有機酸鹽、無機酸鹽2.專屬鑒別試驗（SpecificIdentificationTest）原料藥鑒別制劑鑒別外觀和物理常數(shù)確認鑒別項下規(guī)定的試驗鑒別項下規(guī)定的試驗鑒別對象分類鑒別原理分類鑒別方法化學法光譜生物學法色譜HPLC、GC鑒別法薄層色譜鑒別法紙色譜鑒別法呈色反應鑒別法沉淀生成反應鑒別法氣體生成反應鑒別法測定生成物的熔點熒光反應鑒別法紫外光譜鑒別法紅外光譜鑒別法物理法物理化學法第一節(jié)概述三、鑒別試驗設計的依據(jù)

根據(jù)藥物的化學結構、理化性質(zhì)設計

鑒別試驗的要求：

靈敏度（sensitivity）：最低檢出量、最低檢出濃度

專屬性（specificity）：排除干擾

空白試驗(BlankTest)：目標物對照

對照試驗（ReferenceTest）：反應體系對照第一節(jié)概述四、鑒別試驗的條件溶液的濃度溶液的溫度溶液的酸堿度反應的溶劑干擾成分試驗時間第二節(jié)物理常數(shù)測定法1.外觀

藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。

VB1的描述：本品為白色結晶或結晶型粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅速吸收約4%的水分。性狀（Description）反映藥物特有的物理性質(zhì)尼莫地平

在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中幾乎不溶。2.

溶解度一定程度上反映了藥品的純度。3.物理常數(shù)評價藥物質(zhì)量的重要指標之一，用于藥品鑒別，反映其純雜程度。

藥典收載的物理常數(shù)包括：相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。(1)熔點固體熔化成液體的溫度熔融同時分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度(2)比旋度在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度。反映手性藥物特性及其純度的主要指標。(3)吸收系數(shù)

在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數(shù)。

中國藥典收載是同一臺儀器RSD<1%不同儀器RSD<1.5%A最適宜范圍0.3~0.7化學鑒別法呈色反應鑒別法沉淀生成反應鑒別法氣體生成反應鑒別法測定生成物的熔點熒光反應鑒別法一、化學鑒別試驗的分類第3節(jié)化學鑒別試驗呈色反應鑒別三氯化鐵：酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基異羥污酸鐵：芳酸及其酯、酰胺茚三酮：脂肪氨基重氮化-偶合：芳伯胺或能產(chǎn)生芳伯胺氧化還原及其他沉淀生成與重金屬離子與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）：生物堿或具芳香環(huán)的有機堿氣體胺（銨）類、酰脲類、酰胺類，強堿處理---氨氣含硫：強酸處理-硫化氫含碘：加熱—碘蒸氣熒光本身熒光硫酸介質(zhì)中，產(chǎn)生熒光和溴反應，產(chǎn)生熒光和間苯二酚反應，產(chǎn)生熒光1.有機氟化物無機氟化物＋茜素氟藍＋硝酸亞鈰pH4.3藍紫色絡合物第3節(jié)化學鑒別試驗二、常見無機離子的鑒別2.其他無機酸根離子氯離子：酸性下加硝酸銀-白色沉淀可溶于氨水；與二氧化錳酸性下產(chǎn)生氯氣，使水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍色。溴離子：加硝酸銀-淡黃色沉淀可溶于氨水；通入Cl2，置換出Br2，三氯甲烷吸收顯黃色或紅棕色。碘離子：加硝酸銀-黃色沉淀不溶于氨水或硝酸溶液；通入Cl2，置換出I2，三氯甲烷吸收顯紫色，使淀粉變藍。第3節(jié)化學鑒別試驗2.其他無機酸根離子硫酸鹽：酸性下加氯化鋇-白色沉淀，沉淀酸中不溶解；加醋酸鉛→白色沉淀，沉淀在醋酸銨或氫氧化鈉中溶解；硝酸鹽：硫酸介質(zhì)中，加入硫酸亞鐵，接界面-棕色環(huán)（Fe(NO)SO4）；加硫酸、銅絲，紅棕色蒸氣（NO2）;磷酸鹽：中性條件下，加硝酸銀，生成淺黃色沉淀，溶于氨溶液或稀硝酸；和氯化銨鎂反應—白色結晶沉淀（MgNH4PO4）；和鉬酸銨試液、硝酸反應—黃色沉淀（溶于氨）第3節(jié)化學鑒別試驗3.無機金屬鹽鈉鹽-火焰焰色黃色，與焦銻酸鉀生成焦銻酸鈉沉淀；鉀鹽-火焰焰色紫色，與四硼酸鈉、醋酸形成白色沉淀；銨鹽-分解氨臭，使石蕊試紙變藍；鈣鹽-火焰焰色磚紅色，草酸銨白色沉淀；鋇鹽-火焰黃綠色，與硫酸根白色沉淀；亞鐵鹽-與鐵氰化鉀生成深藍色沉淀（騰氏藍Fe3[Fe(CN)6]2），沉淀在氫氧化鈉中顯棕色（Fe(OH)3）；鐵鹽-與亞鐵氰化鉀生成深藍色沉淀(普魯士藍Fe4[Fe(CN)6]3)，沉淀在氫氧化鈉中顯棕色(Fe(OH)3)；在鹽酸條件下，加入過硫酸銨?和硫氰酸銨，呈血紅色（Fe(SCN)63+）銀鹽-與氯離子反應白色沉淀，沉淀溶于氨試液。第3節(jié)化學鑒別試驗1.水楊酸鹽FeCl3反應弱酸性中性②加稀HCl，即析出白色沉淀；分離，沉淀溶于醋酸銨溶液。①第3節(jié)化學鑒別試驗三、常見有機酸根的鑒別2.酒石酸鹽供試品中性溶液+氨制硝酸銀→銀鏡第3節(jié)化學鑒別試驗三、常見有機酸根的鑒別3.苯甲酸鹽堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）FeCl3反應①②加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色第3節(jié)化學鑒別試驗三、常見有機酸根的鑒別枸櫞酸鹽加稀硫酸、高錳酸鉀，溶液褪色，分別加入硫酸汞及溴，均生成白色沉淀；醋酸鹽加硫酸和乙醇，形成乙酸乙酯（香氣）；加三氯化鐵，溶液顯深紅色，無機酸可使其褪色；乳酸鹽加溴、稀硫酸、硫酸銨、亞硝基鐵氰化鈉，接界面暗綠色環(huán)第3節(jié)化學鑒別試驗三、常見有機酸根的鑒別芳香第一胺類--芳伯胺酸性下加亞硝酸鈉與β-萘酚產(chǎn)生橙黃色至猩紅色沉淀托烷生物堿-莨菪酸結構加發(fā)煙硝酸黃色，冷后加氫氧化鉀醇溶液顯紫色第3節(jié)化學鑒別試驗四、其他類第4節(jié)光譜鑒別法1.紫外光譜鑒別法(Ultravioletspectrometry)美法侖

測定λmax，或同時測定λmin；測定一定濃度的供試液在λmax處的A規(guī)定λ和E規(guī)定λ和Aλ1/Aλ2經(jīng)化學處理后，測定其反應產(chǎn)物的吸收光譜特性。λ1λ22.紅外光譜鑒別法(Infraredspectrometry)

用于組分單一、結構明確的原料藥，特別適合不易區(qū)別的同類藥物，專屬性強，應用廣泛。

Ch.P和BP均采用標準圖譜對照法USP采用對照品法試樣制備方法：壓片法、糊法、膜法、溶液法第4節(jié)光譜鑒別法特征區(qū)指紋區(qū)第4節(jié)光譜鑒別法3.近紅外光譜法(Near-Infraredspectrometry)第4節(jié)光譜鑒別法第4節(jié)光譜鑒別法4.原子吸收法(AtomicAbsorption)

利用原子蒸氣可以吸收由該元素作為陰極的空心陰極燈發(fā)出的特征譜線的特性，根據(jù)供試溶液在特征譜線處的最大吸收和特征譜線的強度減弱程度進行定性、定量分析。5.X射線粉末衍射法第4節(jié)光譜鑒別法第5節(jié)色譜鑒別法

利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為（比移值或保留時間）進行的鑒別試驗。