細胞計數(shù)儀怎么操作

細胞計數(shù)儀怎么操作你知道細胞計數(shù)儀怎么操作呢?很多研究人員都在使用血球計數(shù)器，使用起來不方便，而自動的細胞計數(shù)儀使用方便，時間短，那么你知道細胞計數(shù)儀怎么操作嗎?一起來看看。文章目錄一、細胞計數(shù)儀怎么操作二、如何選購細胞計數(shù)儀三、使用細胞計數(shù)儀的注意事項細胞計數(shù)儀怎么操作1、細胞計數(shù)儀怎么操作將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上。輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布;吸出少許細胞懸液滴在細胞入口,使細胞懸液充滿蓋玻片和計數(shù)板之間,靜置1-2山皿,使細胞沉降;注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細胞懸液進入旁邊的槽中。在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內(nèi)的細胞進行計數(shù),壓在大格四周邊線上的細胞只計數(shù)壓在2條邊線上的細胞（如右側(cè)和下方）;若鏡下有2個細胞組成的細胞團,則應(yīng)按單個細胞計算;若細胞團數(shù)量較多,占細胞總量的10%左右,則說明細胞分散不好會導致計算不準確,需要重新制備細胞懸液。按公式計數(shù)細胞數(shù)量:細胞數(shù)/mL=四個大格內(nèi)細胞總數(shù)X104/4?（每一個大格的體積為長1mmX寬1mmX高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此計算時需X104）。2、細胞計數(shù)儀的原理電阻抗檢測原理血細胞是相對不良導體,當血細胞懸浮電解質(zhì)中,將小孔管插入細胞懸液,使其管內(nèi)充滿稀釋液,當一個細胞通過小孔時,瞬間引起電壓變化出現(xiàn)一個脈沖信號,細胞體積越大,引起脈沖越大,產(chǎn)生脈沖振幅越高。流式細胞術(shù)加光學檢測原理利用流式細胞術(shù)使單個細胞隨著流體動力聚集的鞘流液在通過激光照射的檢測區(qū)時,使光束發(fā)生折射、衍射和散射,散射光光檢測器接受后產(chǎn)生脈沖,脈沖大小與被照細胞的大小成正比,脈沖的數(shù)量代表了被照細胞的數(shù)量。3、白細胞分類原理白細胞三分類原理:根據(jù)電阻抗法原理,不同體積的白細胞通過小孔時產(chǎn)生的脈沖大小有明顯差異,儀器根據(jù)脈沖的大小將白細胞進行分群。標本中加入溶血劑,將紅細胞溶解,儀器將從白細胞計數(shù)池中測量得到的大于35fl電子脈沖的數(shù)量作為白細胞計數(shù)。同時根據(jù)脈沖的大小將血內(nèi)白細胞分為三群:小細胞群（35?90fl,主要為淋巴細胞）、中間細胞群（91?160fl，包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞及幼稚細胞等）和大細胞群（161?450fl,以中性粒細胞為主）。

其特點是檢測速度快,操作簡便,可大大提高工作效率。此類儀器可用于常規(guī)檢查標本白細胞分類的篩選,對儀器檢測出的陽性標本應(yīng)該進一步做顯微鏡檢查。如有懷疑血液病的病人,即便儀器沒提示異常,也應(yīng)作血涂片,顯微鏡檢查。如何選購細胞計數(shù)儀1、要考慮細胞計數(shù)儀的性價比:如果您的目的只是代替手工計數(shù),節(jié)省操作者的時間,操作簡便,完全沒有必要花幾十萬買一臺僅能進行細胞計數(shù)的儀器,花大錢辦小事。2、要考慮細胞計數(shù)儀的穩(wěn)定性和重復性:如果您對細胞計數(shù)的準確性和重復性要求高,那儀器的高性能和穩(wěn)定性是首要考慮因素,儀器的硬件以及配套軟件的穩(wěn)定都要考慮,不能一味的追求低價格。3、要考慮根據(jù)細胞類型選擇適合的型號:如果您的樣本是原代細胞,背景復雜,紅細胞和血小板污染嚴重,你又希望快速精確計數(shù)有核細胞且進行精確細胞活力分析,計數(shù)結(jié)果的準確性直接影響后續(xù)實驗的成功和重現(xiàn)性。4、要考慮實驗室多功能檢測需求:如果細胞計數(shù)和活力分析只是實驗室的部分需求,而實驗室還要進行凋亡、細胞周期、GFP等功能檢測,且實驗室也無配套的儀器,那為實驗室裝備一款多功能的細胞計數(shù)儀是您的最佳之選。

使用細胞計數(shù)儀的注意事項1、務(wù)必使分散成單個細胞,取樣計數(shù)前,充分混勻細胞懸液。2、顯微鏡下計數(shù)時,遇到2個以上細胞組成的細胞團,應(yīng)按單個細胞計算。如果細胞團＞10%,說明細胞分散不充分。3、如果計數(shù)時細胞密度較大,數(shù)起來較麻煩也不容易計準,所以如果感覺細胞數(shù)量較多時,可以從細胞懸液中吸取10至100u1,用少量PBS稀釋后再作計數(shù)。4、注意蓋玻片下不要有氣泡,