中藥當(dāng)歸干燥塊根-cd包合物的提取及包合工藝研究

中藥當(dāng)歸干燥塊根-cd包合物的提取及包合工藝研究

當(dāng)歸是一門干燥的學(xué)科，具有活血、補氣、調(diào)經(jīng)、滋潤、腸道等功效。1復(fù)合提取器:hh-sKQ2200B型超聲清洗器(40kHz,60W,昆山市超聲儀器有限公司),HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋(江蘇金壇醫(yī)療儀器廠),揮發(fā)油提取器(藥典規(guī)定),JJ-1型定時電動攪拌器(江蘇金壇市正基儀器有限公司)。當(dāng)歸飲片(產(chǎn)于甘肅,由校中藥房提供),β-環(huán)糊精(成都科龍化工試劑廠),所用試劑均為分析純。2方法和結(jié)果2.1油鹽溶液的制備稱取一定量的當(dāng)歸飲片,加12倍量水,用水蒸氣蒸餾法提取10h,收集揮發(fā)油,其密度為0.917g·mL2.2包組分評價指標的測定2.2.1包合物油包合率、包合物收得率、包合物含油率的測定取干燥包合物精密稱重,按《中國藥典》2005年版一部附錄XD揮發(fā)油測定項下甲法測定其中揮發(fā)油含量,按下式分別計算包合物油包合率、包合物得率及包合物含油率,其計算方法如下:揮發(fā)油包合率(%)=包合物中揮發(fā)油量/投油量×100%包合物收得率(%)=包合物重量/(β-CD加入量+揮發(fā)油加入量)×100%包合物含油率(%)=包合物中揮發(fā)油量/包合物重量×100%2.2.2收得率、包合率、含油率包合率為衡量包合效果的主要指標,包合率越高,揮發(fā)油包合效果越好,權(quán)重系數(shù)定為0.6;收得率在實際生產(chǎn)中具有重要意義,在投入量一定的情況下,收得率越高,包合率越高,權(quán)重系數(shù)定為0.2;而含油率是控制制劑質(zhì)量的關(guān)鍵因素,權(quán)重系數(shù)也定為0.2。綜合評分=0.6×(包合率/包合率2.3揮發(fā)油-cd包合物的制備工藝采用正交實驗法考察影響超聲包合效果的主要因素如超聲時間,油與β-CD的比例,水與β-CD比例等因素的最佳工作條件。按照4因素3水平正交設(shè)計原理進行實驗,稱取一定量β-CD,溶于適當(dāng)溫度的純化水中,加入上述揮發(fā)油乙醇溶液1mL,混勻,超聲處理一定時間,冰箱(4℃)冷藏24h,抽濾,石油醚5mL洗滌3次,40℃恒溫干燥4h,得白色粉末狀揮發(fā)油β-CD包合物。因素和水平見表1,按照2.2.2項下方法算得包合工藝綜合評價指標作為考察標準優(yōu)選工藝條件,結(jié)果見表2,方差分析見表3。由方差分析可以看出各因素對包合效果的影響程度為B>A>C,因素A,B影響顯著。從級差結(jié)果可以推斷出工藝條件A2.4研磨時間及-cd用量對包合效果的影響稱取β-CD適量,置研缽中,加入適量純化水,充分研磨,然后緩慢滴加上述揮發(fā)油乙醇溶液1.0mL,研磨規(guī)定時間后,置冰箱中冷藏24h,取出,抽濾,石油醚5mL洗滌3次,在40℃時恒溫干燥即得包合物。因素和水平見表4,結(jié)果見表5,方差分析見表6。方差分析結(jié)果表明:研磨時間和β-CD用量對包合效果均有顯著影響,影響次序為A>B>C。根據(jù)極差分析,研磨法包合工藝的最佳條件為A2.5包合溫度對d因素和水平的影響稱取一定量β-CD,溶于適當(dāng)溫度的蒸餾水配制成飽和溶液,加入上述揮發(fā)油無水乙醇液1mL,在不同的溫度下攪拌包合不同的時間,冰箱冷藏24h,抽濾,石油醚5mL洗滌3次,40℃恒溫干燥4h,即得。考察指標同上,因素和水平見表7,結(jié)果見表8,方差分析見表9。方差分析表明,A,D因素對包合效果均有顯著影響,影響次序為A>D>C>B。根據(jù)極差分析,飽和溶液法包合工藝的最佳條件為A2.6包合物得率按照超聲法、研磨法和飽和水溶液法優(yōu)選出的最優(yōu)工藝條件重復(fù)實驗3次,按包合率、含油率和收得率綜合評價指標確定最佳包合方法。由表10可知,超聲包合法的包合率和含油率均較高,說明包合效果較好,由于β-CD有一定的溶解損失,包合物收率與加水量的大小有關(guān),所以包合物收率略低于研磨法。飽和溶液法實驗過程中加水量大,β-CD在溶解和洗滌過程中損失較大,因而包合物得率最低。綜上所述,超聲法具有操作簡便,條件易于控制,包合效果好等優(yōu)點,故以超聲包合法包合當(dāng)歸揮發(fā)油最優(yōu)。2.7包組分x的衍射和層析成像2.7.1x射線試驗條件銅靶,石墨單色器,掃描速度6.0°·min2.7.2x衍射峰與揮發(fā)油-cd包合物的x衍射特征峰由X衍射圖可以看出,β-CD衍射峰較弱,揮發(fā)油β-CD物理混合物的衍射峰與β-CD相比多了一些尖銳的晶體衍射峰,二者較為相似,這可能是由于物理混合物中β-CD所占比例較大(約90.9%),這種簡單的混合方式在X衍射分析時主要表現(xiàn)出β-CD的X衍射特征峰,而揮發(fā)油β-CD包合物的衍射峰與前兩者有顯著性差別,部分衍射峰減弱或消失,部分衍射峰加強或生成,說明揮發(fā)油已包結(jié)在β-CD的分子空穴中,形成了新的物相。2.7.3對照藥材溶液的制備取當(dāng)歸揮發(fā)油包合物按照上述方法提取揮發(fā)油,吸取一定量,用醋酸乙酯稀釋成10%的溶液作為供試品溶液,另取當(dāng)歸藥材同法制備作為對照藥材溶液。用含0.5%CMC-Na溶液的硅膠G勻漿鋪板,以醋酸乙酯-石油醚(15:85)為展開劑2.8揮發(fā)油保留率測定分別將按照最佳超聲包和工藝包和1mL當(dāng)歸揮發(fā)油制得的包和物和將1mL揮發(fā)油與環(huán)糊精混合后的物理混合物放置于蒸發(fā)皿中,于60℃烘箱烘24h,取出,作為加速試驗樣品,測定揮發(fā)油保留率。揮發(fā)油經(jīng)包合保留了93.7%,未經(jīng)包合的物理混合物保留了21.5%。3包合工藝的選擇3.1上述3種包合方法使揮發(fā)油均勻的包合于β-CD的分子空穴中,形成分子膠囊,即可以避免揮發(fā)油與外界分子接觸,發(fā)生分解/氧化等反應(yīng),又可以減少揮發(fā)油在制劑即存儲過程中的損失,增加制劑的穩(wěn)定性,提高揮發(fā)油的利用率。3.2由于操作方法的差異,3種方法的包合效果各不相同。研磨法的包合率較低,取決于研磨時所加溶劑是否適量,揮發(fā)油溶液是否呈分子分散:飽和水溶液法有一部分揮發(fā)油分散在水中,包合率很低,同時β-CD