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微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量掌握準(zhǔn)則質(zhì)量掌握相關(guān)定義質(zhì)量掌握:滿意質(zhì)量要求的操作技術(shù)和活動(dòng)。質(zhì)量保證:為了滿意實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求,制定相應(yīng)的計(jì)劃,實(shí)施證明(記錄)所進(jìn)行的一系列的系統(tǒng)活動(dòng)外部質(zhì)量掌握:通過(guò)相互校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室的操作和結(jié)果所進(jìn)行的掌握內(nèi)部質(zhì)量掌握:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部實(shí)行的以對(duì)比分析、跟蹤以及相關(guān)方法,對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的連續(xù)性掌握計(jì)劃。質(zhì)量手冊(cè):是描述質(zhì)量系統(tǒng)元素的文件或文件的集合。實(shí)驗(yàn)室要求組織:按國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的概念,是指一個(gè)能夠擔(dān)當(dāng)法律責(zé)任的實(shí)體。這里所指的是實(shí)驗(yàn)室(微檢室)內(nèi)建立的質(zhì)量管理的保證體系。人員房屋滿意檢測(cè)工作需要。設(shè)備人員要求實(shí)驗(yàn)室人員的分類:管理人員、技術(shù)人員、技術(shù)支持人員等。相應(yīng)崗位的人員,應(yīng)具備相應(yīng)的技術(shù)能力,相應(yīng)的技術(shù)能力證明(證書(shū)及證件)。微生物檢驗(yàn)室因有相應(yīng)技術(shù)能力的人負(fù)責(zé)室內(nèi)的技術(shù)工作。并設(shè)立質(zhì)量監(jiān)督員。房屋條件要求房屋要求:具有適宜、足夠?qū)挸ā⑼L(fēng)有良好的照明。房屋內(nèi)墻面及地等應(yīng)采納易于清潔的材料,保持房間清潔。房間的設(shè)置,以其開(kāi)展的工作內(nèi)容加以分用,設(shè)立專用房間。房間的大小還應(yīng)依據(jù)從事實(shí)驗(yàn)人員的進(jìn)入數(shù)量上加以考慮。環(huán)境設(shè)施要求專用房間的溫濕度掌握與記錄(樣品存放室)特殊環(huán)境的微生物指標(biāo)掌握與記錄(無(wú)菌室等)專用工作室的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和定期的檢測(cè)校準(zhǔn)程序。(干凈室等)特殊環(huán)境中的專用設(shè)施質(zhì)量掌握應(yīng)符合有關(guān)要求(凈化工作臺(tái))環(huán)境設(shè)施的相關(guān)技術(shù)指標(biāo)凈化室、凈化工作區(qū)域、干凈環(huán)境按國(guó)家及部頒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)??諝飧蓛舳戎笜?biāo):檢測(cè)頻率及檢測(cè)方法。一次/月;空氣細(xì)菌檢測(cè)(沉降法)。級(jí)別≥0.5μm塵粒(個(gè)/L)≥5μm塵粒(個(gè)/L)活菌顆粒平均數(shù)(cfu/平板)100≤3.5≤0.0≤1.010000≤350.0≤2.5≤3.0設(shè)備/儀器要求總則滿意開(kāi)展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的要求。制定相關(guān)設(shè)備/儀器的作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。設(shè)備/儀器的檢定校準(zhǔn),格外室新購(gòu)儀器的檢定。設(shè)備/儀器分別以送檢、送校、自檢、自校表示其所檢定的狀態(tài)。。設(shè)備/儀器的運(yùn)行檢查計(jì)劃。設(shè)備/儀器的運(yùn)行狀況及適用記錄維修后設(shè)備/儀器的再校準(zhǔn)或檢查,并具有完整的檢查記錄。設(shè)備掌握和程序微生物檢驗(yàn)常用需監(jiān)控的設(shè)備和儀器1培育箱(生化培育箱或CO2培育箱等)、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tái)、pH計(jì)、冰箱,(低溫冰箱或冷柜)溫度計(jì)、紫外燈、顯微鏡、離心機(jī)、天平、。2小計(jì)量容器3微生物測(cè)定儀器、微生物檢定儀器、空氣采樣器、酶標(biāo)儀專用等。溫度計(jì)實(shí)驗(yàn)室必必要有工作溫度計(jì)和參照溫度計(jì)。工作溫度計(jì):用于日常溫度檢查。參照溫度計(jì):用于校正工作的溫度計(jì)。溫度計(jì)運(yùn)行檢查:一般可采納一次/半年的運(yùn)行檢查。日常檢查、校準(zhǔn)檢查、運(yùn)行檢查等都應(yīng)做好相應(yīng)的技術(shù)記錄。培育箱、水浴箱和冰箱的溫度掌握依據(jù)培育物性質(zhì)及溫度要求,培育箱應(yīng)分別設(shè)置(以用途和溫度分)培育箱的溫差要求,一般顯示值與實(shí)測(cè)值相差不大于±1℃,箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差(內(nèi)部的溫度均衡性)以及溫度波動(dòng)同樣不大于±1℃。溫度監(jiān)控方法:可將工作溫度計(jì)置甘油中,放入待測(cè)箱體內(nèi),觀察工作溫度計(jì)的溫度,最好1-2次/天監(jiān)控記錄,高壓滅菌鍋的溫度掌握(一)高壓滅菌鍋;生物指示菌法(常用)、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法進(jìn)行檢測(cè)。生物指示菌法是一種高壓滅菌鍋的效果顯示法。高壓滅菌鍋由專人按作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作,并做好每一次的作業(yè)記錄。高壓滅菌鍋使用時(shí),內(nèi)置物品不能太多,單位體積內(nèi)的內(nèi)容物(每瓶?jī)?nèi)的培育基)不能太多。同時(shí)應(yīng)注意內(nèi)容物不同耐受溫度??偟谋┞稌r(shí)間最好不要超過(guò)45min。高壓滅菌鍋的溫度掌握(二)高壓滅菌鍋日常工作記錄應(yīng)包含以下信息:高壓滅菌的材料、開(kāi)頭時(shí)間、壓力/溫度、取出時(shí)間、高壓滅菌膠帶的顏色變化(日常常用無(wú)菌培育代替)高壓滅菌鍋溫度波動(dòng)范圍:110,115和121±2℃。高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期一般在半年。干燥滅菌箱溫度掌握干燥滅菌箱日常工作記錄中應(yīng)包括以下信息:開(kāi)頭的時(shí)間、到達(dá)滅菌溫度時(shí)的時(shí)間、取出的時(shí)間(或關(guān)閉時(shí)間)。干燥滅菌箱的溫度校準(zhǔn);用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試。干燥滅菌箱溫度要求與精確度:160±5℃或180±5℃。前者為滅菌2h,后者為30min。干燥滅菌箱校準(zhǔn)時(shí)間一般為一年。培育基配制用蒸餾水的掌握對(duì)于蒸餾水器來(lái)說(shuō):按設(shè)備說(shuō)明,定期清潔離子交換器和更換離子交換材料。檢測(cè)要求:西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸餾水的特定電導(dǎo)率<0.5ms/m;細(xì)菌數(shù)<50cfu/ml。我們?nèi)粘S玫臉?biāo)準(zhǔn)為<10ms/m,未見(jiàn)有細(xì)菌指標(biāo)。檢測(cè)頻率:1次/每月。蒸餾水定點(diǎn)供應(yīng),并做好相應(yīng)的質(zhì)量掌握,記錄檢測(cè)結(jié)果。天平的管理天平放置要求:無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響及水平臺(tái)面上。天平要有使用及運(yùn)行檢查記錄。天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定的范圍,一般1次/年進(jìn)行檢定。運(yùn)行檢查頻率按運(yùn)行計(jì)劃或按產(chǎn)品(天平生產(chǎn)廠家)給出的標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對(duì)比。容積的掌握(一)通過(guò)肯定的掌握方法,保證高壓滅菌后的稀釋劑滿意標(biāo)準(zhǔn)用量。實(shí)行稱中法來(lái)測(cè)定蒸發(fā)量,體積100ml的稀釋劑起重量為101g。高壓夠體積偏差不得超過(guò)1%。實(shí)行先高壓后定量分裝,可避開(kāi)因高壓造成的體積誤差。對(duì)保存的定量液體應(yīng)在使用時(shí),注意補(bǔ)充容積。容積的掌握(二)吸管的掌握:通過(guò)小計(jì)量容器校準(zhǔn),后使用。小計(jì)量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿,校準(zhǔn)周期一般為1-2次/一年。小計(jì)量容器日常使用檢查可每周進(jìn)行一次,包括容器的完整性。并做好相應(yīng)的記錄。pH計(jì)pH計(jì)使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。緩沖液使用有效期:PH4.00約1年P(guān)H7.00約6個(gè)月pH9.00約6個(gè)月pH計(jì)的維護(hù):電極外表的定期清洗;電極敏感性檢測(cè)及極性恢復(fù)。凈化工作臺(tái)的掌握水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域,要求干凈度為100級(jí)??諝獬两?0min,細(xì)菌數(shù)<1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái),細(xì)菌數(shù)<0.49個(gè)/皿.凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢查頻次:1次/月主要是細(xì)菌沉降檢測(cè)。凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜一般為一年更換一次,并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。紫外線燈的掌握檢測(cè)方法:儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。前者是通過(guò)專用儀器檢測(cè)紫外燈管放射的紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中表明在距離照耀無(wú)1米處,要求其強(qiáng)度為90。生物測(cè)試法:采納肯定的菌培育物,經(jīng)肯定比例稀釋,菌量掌握在200-250個(gè)/0.5ml,涂布平板在紫外燈光下照耀,2min,同時(shí)設(shè)置一般光源的對(duì)比組,后置37℃48h,計(jì)算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。顯微鏡的掌握顯微鏡應(yīng)制定作業(yè)指導(dǎo)書(shū),日常維護(hù)記錄及自校記錄。顯微鏡應(yīng)置于無(wú)振動(dòng),避開(kāi)灰塵,防潮等要求的環(huán)境。其它微生物檢測(cè)專用儀器的掌握細(xì)菌鑒定儀、酶標(biāo)儀等設(shè)備,工作中常用陽(yáng)性對(duì)比檢測(cè)其功能的正常性。儀器的檢定則按有關(guān)的部門(mén)檢定或按自校作業(yè)指導(dǎo)書(shū)進(jìn)行。儀器的使用登記、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)記錄等文件存檔。儀器專人使用、操作者應(yīng)取得相應(yīng)的崗位培訓(xùn)合格,持證上崗。培育基質(zhì)量掌握正確進(jìn)行培育基質(zhì)量掌握,并作為一項(xiàng)常常性的工作,建立完整的檢驗(yàn)資料,是實(shí)驗(yàn)室今后通過(guò)相應(yīng)級(jí)別的認(rèn)證,在整個(gè)檢驗(yàn)質(zhì)量掌握體系中所必須具備的文件資料?,F(xiàn)有的依據(jù):衛(wèi)生部1993年發(fā)布的食品檢驗(yàn)用干燥培育基生產(chǎn)質(zhì)量掌握。但這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)不完善。培育基的分類按其成分分類:有天然培育基和合成培育基。按用途分類:基礎(chǔ)培育基、增菌培育基、選擇性培育基、鑒別培育基及厭氧培育基。按培育基的形態(tài)分類:液體培育基、流體培育基、半固體培育基及固體培育基。依據(jù)培育基的劑型不同分類:新奇配制培育基和干燥培育基兩種。檢驗(yàn)中常用的培育基水質(zhì)檢測(cè)用培育基:7種化妝品檢驗(yàn)用培育基:8種食品檢驗(yàn)用培育基:常用的有37種,110種被列入了GB4789中,其中生化試驗(yàn)培育基23種,一般和專用培育基89種。食品、化妝品及涉水產(chǎn)品等產(chǎn)品微生物檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目中所用的增菌分離培育基有所不同,對(duì)于菌種鑒定所用的培育基,各類產(chǎn)品分離的菌種其鑒定所用的培育基基本相同。
常用培育基的質(zhì)量掌握(一)檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法:對(duì)新批號(hào)的干燥培育基物理、化學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)鑒定A:感官(外觀)研細(xì)程度和顏色(溶解前后),透明度,雜質(zhì)等;B:PH測(cè)定,按各種培育基要求的PH±0.2,蒸餾水的PH應(yīng)在6.4-7.0之間。C:生物學(xué)指標(biāo)檢定,被檢培育基相應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)率測(cè)試;菌落大小及特征的檢測(cè)。常用培育基的質(zhì)量掌握(二)生長(zhǎng)率測(cè)試:適用與液體和固體培育基:將菌培育液,用生理鹽水做倍比稀釋,取合適稀釋度進(jìn)行平板計(jì)數(shù)或接種被檢的培育基試管,同時(shí)以按相關(guān)的培育基國(guó)標(biāo)配方新奇配制的培育基進(jìn)行對(duì)比。不低與10%。常用培育基的質(zhì)量掌握(三)菌落大小測(cè)試:劃線分離測(cè)試菌,取10個(gè)菌落測(cè)量直徑大小,其直徑均值與新奇配制的培育基無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。常用培育基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株甲型副傷寒沙門(mén)菌50002傷寒沙門(mén)菌50096乙型副傷寒沙門(mén)茵鴨沙門(mén)茵50083鼠傷寒沙門(mén)氏菌痢疾志賀菌1型5157O福氏志賀菌2大腸埃希菌25922(ATCC)金黃色葡萄球菌25923(ATCC一般變形桿菌肺炎克雷伯菌肺炎亞種弗勞地枸櫞酸桿菌4197綠膿桿菌27853(ATCC)副溶血性弧菌常用培育基質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
外觀和理化標(biāo)準(zhǔn):干粉顏色:淡黃色粉末或呈現(xiàn)本培育基特有的顏色溶解后培育基色澤:清楚透明(含瓊脂除外)淡黃色或特有的色澤;滅菌后的培育基PH:7.2±2℃為多;個(gè)別弧菌檢驗(yàn)用培育基pH值偏高為:8.0±2℃生物學(xué)指標(biāo):菌落特征及菌落大小。培育基保存環(huán)境
制成的培育基保存環(huán)境為4℃冰箱,如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保存,干燥培育基干粉含有活性物質(zhì)、遇熱易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)查看存放條件,多數(shù)也須放在2-8℃條件保存。有的培育基則以存放于10-15℃條件為易。如含有高濃度膽鹽的培育基。養(yǎng)基制備掌握程序
培育基配制所用的儀器設(shè)備培育基配制所用的儀器設(shè)備必須經(jīng)過(guò)相應(yīng)的鑒定。配制培育基所用的用具及容器配制培育基所用的用具及容器必須是清潔或是滅菌的,一些特殊不易洗刷清潔的玻璃器皿,必要時(shí)可用重鉻酸鉀硫酸清潔浸泡后,取出置5%氫氧化鈉溶液浸泡數(shù)分鐘,再用3%鹽酸溶液進(jìn)行中和,然后用清水沖洗,烘干后備用。培育基配制原料,試劑質(zhì)量掌握培育基的配制程序(一)不同的培育基配制的程序有所不同,但一般培育基配制程序主要有以下7個(gè)步驟、調(diào)配、融化、矯正pH、澄清過(guò)濾、分裝、滅菌及鑒定。注意點(diǎn):配制時(shí)注意各類成分的用途。pH測(cè)定干燥培育基在工廠生產(chǎn)時(shí),對(duì)培育基PH進(jìn)行了肯定的調(diào)試,在實(shí)際工作中,由于配制的環(huán)境、配制所用的溶劑(蒸餾水)PH等條件有所不同,都會(huì)對(duì)所用的培育基PH要有所影響。因此對(duì)于干燥培育基配制,同樣需要進(jìn)行PH測(cè)驗(yàn)。培育基的配制程序(二)配制好的培育基(尤其是糖發(fā)酵管)不宜久放。,由于培育培育基汲取空氣中的二氧化碳,會(huì)使培育基變酸,從而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。培育基中的抑制劑及指示劑肯定要精確稱量,抑制劑要注意合理配伍。培育基主要原料的質(zhì)量掌握,
配制培育基的主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、膽鹽、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂等,這些主要原料的有劣,直接影響到培育基的質(zhì)量,由此也將影響檢驗(yàn)質(zhì)量。指標(biāo)有感官、理化、物理、生物學(xué)。培育基相關(guān)試劑的質(zhì)量掌握培育基相關(guān)試劑的質(zhì)量掌握及陰、陽(yáng)性對(duì)比菌株試驗(yàn)。對(duì)做生化反應(yīng)的各類試劑,在配就后均應(yīng)進(jìn)行各項(xiàng)必要的鑒定。用已知陰、陽(yáng)性菌株進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。對(duì)于其它如氧化酶、觸酶、染色液等也同樣需要經(jīng)鑒定后用于試驗(yàn)。不合格培育基可能的緣由(一)
干燥培育基結(jié)塊l
培育基過(guò)于陳舊l
培育基處于潮濕環(huán)境中l(wèi)
培育基生產(chǎn)時(shí)水分過(guò)高PH偏離規(guī)定值l
培育基過(guò)于陳舊l
配制時(shí)所使用的蒸餾水非中性l
培育基過(guò)度滅菌不合格培育基可能的緣由(二)培育基不清亮l
使用了劣質(zhì)水l
培育基PH值不對(duì)l
使用了不同的容器制備l
生產(chǎn)原料精度不夠l
培育基過(guò)度滅菌凝固溫度過(guò)高l
培育基干粉用的太多l(xiāng)
瓊脂質(zhì)量發(fā)生了變化不合格培育基可能的緣由(三)凝膠強(qiáng)度過(guò)低l
培育基干粉用的太少l
培育基未完全溶解l
培育基過(guò)度滅菌l
傾注前未振搖培育基瓶l
瓊脂粉凝固強(qiáng)度較低顏色不對(duì)l
PH不正確(帶指示劑的培育基)l
培育基過(guò)度滅菌l
使用了不潔的容器制備不合格培育基可能的緣由(四)培育基被污染l
培育基滅菌不徹底l
滅菌后存放不當(dāng)而污染l
實(shí)驗(yàn)時(shí)使用了污染的器皿生長(zhǎng)不良l
可能由制備容器設(shè)備、水或樣品帶入抑制物l
樣品中含有亞致死性損傷的微生物l
PH不正確l
添加物(抑制劑)等濃度不當(dāng)l
培育基過(guò)度滅菌l
實(shí)驗(yàn)時(shí)培育基或溶解樣品時(shí)溫度過(guò)高不合格培育基可能的緣由(五)過(guò)分生長(zhǎng)l
培育基過(guò)度滅菌,選擇性物質(zhì)受到了破壞l
添加物濃度不當(dāng)菌落擴(kuò)散l
瓊脂表面過(guò)濕l
使用了過(guò)多的接種體積l
培育基過(guò)度滅菌非典型生長(zhǎng)l
培育基制備不當(dāng)l
干燥培育基存放陳舊l
制備成的培育基存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)l
生長(zhǎng)條件不當(dāng)(溫度、時(shí)間、氣體)檢測(cè)質(zhì)量保證
定期使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(參考物質(zhì))進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量掌握。實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)或能力驗(yàn)證利用相同或不同方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)對(duì)留存的樣品進(jìn)行在檢測(cè)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控方法(一)菌落計(jì)數(shù)精密度掌握直接計(jì)數(shù)選擇同一標(biāo)本,要求檢驗(yàn)人員進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。將大腸菌(25922)或經(jīng)檢定標(biāo)化的菌片,通過(guò)合適的梯度稀釋,選擇合適的稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作。36±1℃培育24h進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。微生物檢驗(yàn)質(zhì)控方法(二)菌落計(jì)數(shù)精密度掌握重復(fù)計(jì)數(shù)法選擇十個(gè)平板,每個(gè)平板具有合適的菌落數(shù)(100以內(nèi))。將平板編號(hào),由實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行計(jì)數(shù)并記錄結(jié)果。去掉平板編號(hào),將平板置冰箱保存過(guò)夜,次日取出,重新給予編號(hào),由實(shí)驗(yàn)人員重復(fù)計(jì)數(shù)并記錄。計(jì)算每位實(shí)驗(yàn)人員每對(duì)結(jié)果的平均數(shù)(X)。X=(a+b)/2;相對(duì)誤差(rd)計(jì)算:rd=|a+b|/X×100%。其它實(shí)驗(yàn)人員間的相對(duì)誤差范圍計(jì)算:先計(jì)算全部實(shí)驗(yàn)人員的平均菌落數(shù),X=[Σx]/n,要求每一結(jié)果均應(yīng)在X±18.2%范圍內(nèi)。重復(fù)計(jì)數(shù)要求自身同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差小于7.7%實(shí)驗(yàn)人員之間同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差±18.2%自身同一梯度平行加樣兩皿間相對(duì)誤小于7.7%實(shí)驗(yàn)人員之間同一梯度計(jì)數(shù)誤差X±18.2%范圍不同梯度間菌落計(jì)數(shù)最終誤差小于7.7%菌種鑒定質(zhì)控菌種鑒定質(zhì)控要求,對(duì)所給的微生物菌種,按有關(guān)的方法及指標(biāo)進(jìn)行生化、血清等方面的鑒定。鑒定質(zhì)量評(píng)價(jià):鑒定程序是否正確;鑒定方法是否正確;簡(jiǎn)略操作技術(shù)是否嫻熟,結(jié)果報(bào)告是否正確。每一項(xiàng)設(shè)立分值為25分??偡譃?00分。內(nèi)部質(zhì)量掌握的推舉頻率菌落計(jì)數(shù)精密度掌握:1次/3月;菌種鑒定掌握:1次/半年或1年盲樣測(cè)定丟失的對(duì)比1次/半年實(shí)驗(yàn)室平安防護(hù)1
培訓(xùn)與告之實(shí)驗(yàn)室管理人員及實(shí)驗(yàn)人員必須了解相關(guān)工作有關(guān)的危險(xiǎn)。對(duì)招收
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