常規(guī)組織病理學(xué)技術(shù)課件

常規(guī)組織病理學(xué)技術(shù)1常規(guī)組織病理學(xué)技術(shù)1固定取材脫水，透明，浸蠟包埋切片鏡下觀察，診斷常規(guī)病理學(xué)技術(shù)（病理工作流程）快速冰凍取材常規(guī)組織處理OCT包埋細(xì)胞學(xué)檢查取材染色固定2固定取材脫水，透明，浸蠟包埋切片鏡下觀組織固定目的：保持組織和細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征，防止因?yàn)槊富钚曰蛭⑸锒菇M織壞死，自溶及腐敗。保持組織和細(xì)胞中可溶性成分不被溶解。減少蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等細(xì)胞成分丟失。維持細(xì)胞膜，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，核膜等細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整。3組織固定目的：3組織固定目的：使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來，產(chǎn)生不同的折射率，造成光學(xué)上的差異，以便染色后易于鑒別和觀察。固定劑兼有硬化作用，使組織硬化增加組織硬度，便于制片。防止細(xì)胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu)。經(jīng)過固定的組織，能對染料產(chǎn)生不同的親和力而著色清晰，便于辯認(rèn)。4組織固定目的：4組織固定固定的機(jī)制和原理有很多種，包括:反應(yīng)基團(tuán)間的共價(jià)結(jié)合交聯(lián)的共價(jià)結(jié)合脫水與酸性物質(zhì)作用鹽的形成和熱能共同作用5組織固定固定的機(jī)制和原理有很多種，包括:5組織固定理想的固定劑：保留蛋白，mRNA以及DNA的生化特征。支持組織化學(xué)染色，免疫組化，原位雜交和各種其他技術(shù)。能快速滲透和固定組織。適合各種不同的組織和不同大小標(biāo)本的固定。固定劑易于回收和處理，價(jià)格合理。無毒，無害，無可燃性。6組織固定理想的固定劑：6組織固定固定劑的種類：1、按照化學(xué)性質(zhì)分類Ⅰ類：醛類：甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。Ⅱ類：氧化劑類：四氧化鋨（奧酸），高錳酸鉀，重鉻酸鉀等。Ⅲ類：蛋白變性類：甲醇，乙醇，醋酸等Ⅳ類：其他：氯化汞，苦味酸等。2、按照成分分類：單一固定液：如甲醛，酒精，醋酸，鋨酸，丙酮等混合固定液：中性甲醛，AF液等7組織固定固定劑的種類：7組織固定常用的固定方法蒸汽固定法：甲醛或鋨酸可產(chǎn)生蒸汽。用于保存可溶性成分；小而薄的組織，冷凍干燥組織灌注固定法：肺，腎臟，肝臟等細(xì)胞涂片的固定：浸入法和滴加法，浸入法應(yīng)注意相互污染的問題微波固定法：微波加熱可縮短固定時(shí)間，但時(shí)間和溫度掌握困難8組織固定常用的固定方法8常用固定液介紹9常用固定液介紹9甲醛（分子式:HCHO）固定:純甲醛是一種蒸汽溶于水后成為37%~40%的甲醛溶液（又稱福爾馬林溶液）固定液為10%的中性福爾馬林（即約含4%W/V的甲醛溶液）甲醛在水溶液中形成HOCH2OH（亞甲基氫氧化合物）復(fù)合物10甲醛（分子式:HCHO）固定:10甲醛（分子式:HCHO）固定:甲醛的亞甲基氫氧化合物能與蛋白質(zhì)末端多種不同的功能基團(tuán)結(jié)合，使蛋白多肽分子間形成橋鍵，使蛋白質(zhì)不再發(fā)生改變，保存原位。-11甲醛（分子式:HCHO）固定:11甲醛（分子式:HCHO）固定的優(yōu)點(diǎn):組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好固定均勻，穿透性強(qiáng)組織收縮少增加組織硬度，便于切片價(jià)格便宜12甲醛（分子式:HCHO）固定的優(yōu)點(diǎn):12甲醛（分子式:HCHO）固定的缺點(diǎn):封閉抗原決定簇：醛基與抗原蛋白氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的空間構(gòu)象發(fā)生改變，可能部分和完全遮蓋抗原決定簇，使之不能完全暴露，導(dǎo)致免疫組織化學(xué)染色產(chǎn)生假陰性。

處理措施：

固定后能夠充分水洗，可減少分子間交聯(lián)。抗原修復(fù)還可使抗原再現(xiàn)。縮短固定時(shí)間(8～24小時(shí))，降低固定溫度(4℃)可減少交聯(lián)。13甲醛（分子式:HCHO）固定的缺點(diǎn):13甲醛（分子式:HCHO）固定的缺點(diǎn):甲醛內(nèi)雜質(zhì)含量多，影響酶染色含甲酸，固定液酸化，影響染色產(chǎn)生甲醛顆粒，影響觀察，尤以多血的肝，脾組織常見易揮發(fā)，污染環(huán)境14甲醛（分子式:HCHO）固定的缺點(diǎn):1410%中性緩沖福爾馬林固定液：

100ml40%福爾馬林900ml蒸餾水NaH2PO44gNa2HPO46.5g最常用的固定液，抗原保存好，合適免疫組化染色。常用甲醛固定液1510%中性緩沖福爾馬林固定液：常用甲醛固定液15優(yōu)點(diǎn)：

--保存組織中易溶于水的物質(zhì)，如尿酸結(jié)晶和糖原

---常與其他試劑配制成多種混合固定液：加快固定時(shí)兼有脫水的作用

缺點(diǎn)：

--可溶解脂類物質(zhì)，要求保留脂類物質(zhì)時(shí)不能使用酒精

--對組織收縮較大，單純酒精固定組織收縮明顯，變硬變脆，制片困難

--滲透力差，組織表面已固定，組織中間固定不佳

--沉淀核蛋白，球蛋白，白蛋白，影響核染色

--價(jià)格貴乙醇（alcohol）固定

16優(yōu)點(diǎn)：

--保存組織中易溶于水的物質(zhì)，如尿酸結(jié)晶和糖原

--醋酸（Ａceticacid）固定

--對染色質(zhì)固定較好。

---對脂肪、糖元不能固定。

--能使組織膨脹，可抵償因乙醇、升汞、甲醛等固定液引起的組織收縮和硬化，故常配成5%混合固定液。

--穿透速度最快，固定時(shí)間短。

--5％醋酸的pＨ值在2≈8，此時(shí)可停止細(xì)菌和酶的活動，可防止組織自溶變性。

17醋酸（Ａceticacid）固定

--對染色質(zhì)固定較好。

--能沉淀蛋白質(zhì)，它不能固定脂肪、類脂和糖類。

--穿透力較弱，單獨(dú)使用可使組織收縮。多與醋酸和鉻鹽（重鉻酸鉀）配成混合固定液。

--固定后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，特別是核的細(xì)微結(jié)構(gòu)顯示清晰。

--易產(chǎn)生汞鹽的沉著，損害切片刀，因此染色前必須脫汞。氯化汞（Ｍercurybichloride）

18--能沉淀蛋白質(zhì)，它不能固定脂肪、類脂和糖類。

--穿透力較--能沉淀蛋白質(zhì)，但對脂肪和類脂無固定作用。

--穿透力很慢，細(xì)胞收縮顯著，但不會使組織硬化。

--有軟化皮膚的作用，配制的Bouin氏液對頭皮及全身皮膚制片效果甚好。

--固定時(shí)間太久會影響HE染色。

--糖元較好的固定劑?？辔端幔ǎ衖cricacid）

19--能沉淀蛋白質(zhì)，但對脂肪和類脂無固定作用。

--穿透力很慢

--可以作固定劑，又可作脫水劑，穿透速度快，可使蛋白質(zhì)沉淀凝固，2毫米以下的組織固定半小時(shí)至1小時(shí)即可。

--可引起組織較強(qiáng)的收縮使之變硬，對核固定不佳。

--對某些酶的固定很好，如堿性磷酸酶、酸性磷酸酶等。

--一般多與氯化汞、甲醛混合液使用，先用低濃度丙酮再經(jīng)高濃度丙酮固定以減少組織收縮和過度硬化。丙酮

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--可以作固定劑，又可作脫水劑，穿透速度快，可使蛋白質(zhì)沉淀--強(qiáng)氧化劑，不能與酒精等還原劑混合，常配成0.5%水溶液固定組織。

--單獨(dú)固定組織不能沉淀蛋白質(zhì)，但加入冰醋酸轉(zhuǎn)變?yōu)殂t酸，（即酸化重鉻酸鉀），可使蛋白質(zhì)凝固沉淀。

--與甲醛混合是固定線粒體、高爾基復(fù)合體和嗜鉻細(xì)胞等優(yōu)良固定劑，若配成Eenker氏液，能很好的固定細(xì)胞質(zhì)、胞核及染色體。

--穿透速度快，組織收縮小，固定的組織必須流水充分洗滌（6—12h），否則影響染色。

對酸性染料染色良好，對堿性料染較差，若加入升汞及醋酸等，則對細(xì)胞核染色極佳。重鉻酸鉀

21--強(qiáng)氧化劑，不能與酒精等還原劑混合，常配成0.5%水溶液固乙醇-甲醛液（AF液）

配制：95%或無水乙醇90ml加入40%瓶裝甲醛10ml，常用固定液。

兼有脫水作用，用于固定肥大細(xì)胞和糖元較好，米粒大小固定4—6h，大塊組織12—24h，固定后不經(jīng)水洗，直接放入95%酒精開始脫水。22乙醇-甲醛液（AF液）

配制：95%或無水乙醇90ml加入4Ｚenker氏液

配制:重鉻酸鉀2.5g+升汞5g+蒸餾水100ml，加溫溶解，冷卻過濾，貯于棕色瓶內(nèi)，成為貯存液。

用時(shí)取此液95ml再加入冰醋酸5ml即成。

Ｚenker氏液固定后，細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色較為清晰，特別顯示骨骼肌的橫紋

固定時(shí)間12-24h，然后沖洗24h，切片脫臘后需脫汞（浸入5%碘酒精10’），脫碘（5%硫代硫酸鈉）→流水洗。23Ｚenker氏液

配制:重鉻酸鉀2.5g+升汞5g+蒸餾水1Bouin氏液

配制：苦味酸飽和液75ml+甲醛25ml+冰醋酸5ml

此液滲透快，組織收縮小，固定均勻，為常用固定液。它對肝、皮膚、胰臟特染效果好，但固定過久對堿性染料的著色有影響。24Bouin氏液

配制：苦味酸飽和液75ml+甲醛25ml+冰Garnay氏液

配制：純酒精60ml+氯仿30ml+醋酸10ml

細(xì)胞極好的固定液，對淋巴組織及腺體固定很好，米粒大的組織固定1—2h，也適宜RNA、DNA及糖元的固定。25Garnay氏液

配制：純酒精60ml+氯仿30ml+醋酸1Helly氏液

配制：重鉻酸鉀25g+升汞50g+蒸餾水1000ml+甲醛50ml

白細(xì)胞顆粒良好的固定劑，可用于造血器官，如骨髓，脾臟的固定。26Helly氏液

配制：重鉻酸鉀25g+升汞50g+蒸餾水10B5固定液

配制：儲備液：氯化汞12g+醋酸鈉2.5g+蒸餾水200ml。使用前加2ml甲醛到20ml儲備液中

常用于骨髓，淋巴結(jié)，脾和其他造血組織的固定。27B5固定液

配制：儲備液：氯化汞12g+醋酸鈉2.5g+蒸餾組織固定注意事項(xiàng)組織離體后盡早放入固定液中固定液體的體積應(yīng)大于標(biāo)本的4~5倍，甚至20倍固定的容器口要方便組織固定后取出組織固定時(shí)間不宜太長，一般不超過72小時(shí)，固定不足和固定時(shí)間太久都可能影響染色，免疫組化等28組織固定注意事項(xiàng)組織離體后盡早放入固定液中28組織取材尸檢組織取材外科切除標(biāo)本取材活檢小組織取材29組織取材尸檢組織取材29組織取材要求：取材組織厚度小于3mm，長度和寬度大約2cm為宜。取材刀鋒利，避免組織損傷。剔除標(biāo)本中的線頭，吻合釘。有鈣化和骨化的組織要脫鈣。保持取材臺的干凈，流水沖洗。避免小標(biāo)本丟失，可用伊紅染料標(biāo)記。腫瘤標(biāo)本取材應(yīng)注意相互關(guān)系。核對標(biāo)本，以免張冠李戴30組織取材要求：30組織處理1、脫水：將組織內(nèi)的水分用某些化學(xué)試劑置換出來的過程稱脫水。脫水是透明前必要的過程。所用試劑為能與透明劑相混溶的試劑。常用脫水劑有乙醇，正丁醇，丙酮。脫水過程從低濃度到高濃度，時(shí)間一般為20min~120min。高濃度乙醇中不能放置太久時(shí)間31組織處理1、脫水：31--尸檢及活檢：有條件時(shí)，將組織分別進(jìn)行脫水，因?yàn)椴煌M織脫水時(shí)間有差異。

--動物組織：應(yīng)區(qū)分動物大、小，如狗組織接近新生兒組織，大白鼠和小白鼠也有差異，前者需時(shí)稍長，后者則較短。

--脫水時(shí)間與脫水劑的關(guān)系：脫水劑的新舊（純度）影響脫水時(shí)間，必須靈活掌握。

--穿刺組織：如腎穿刺、活檢小組織，常規(guī)用擦鏡紙包裹，涂伊紅，以防丟失。1、脫水時(shí)的注意事項(xiàng)：32--尸檢及活檢：有條件時(shí)，將組織分別進(jìn)行脫水，因?yàn)椴煌M織脫

--非石蠟溶劑的脫水劑：如乙醇和丙酮等，其組織在脫水后必須再經(jīng)二甲苯透明才能浸蠟。

--脫水兼石蠟溶劑的脫水劑：如正丁醇等組織在脫水后即可直接浸蠟，不經(jīng)過中間溶劑如二甲苯之類的試劑。脫水劑的種類和效果33

--非石蠟溶劑的脫水劑：如乙醇和丙酮等，其組織在脫水后必須組織處理2、透明：用化學(xué)試劑，通常為二甲苯將組織內(nèi)的脫水劑置換出來的過程稱透明。透明發(fā)揮了一個(gè)橋梁作用，透明劑可以與包埋劑和脫水劑相溶。常用透明劑有二甲苯，笨，三氯甲烷等。一般置換2~3次透明劑，每次時(shí)間15~40min。透明劑易使組織變硬變脆，所以不能讓組織在透明劑內(nèi)放置時(shí)間太長。34組織處理2、透明：34組織處理3、浸蠟與包埋：經(jīng)過前期處理的標(biāo)本，再置入支持物中，使支持物滲透入組織，并將組織埋入，包裹的過程。常用支持物有石蠟，樹脂，碳蠟，明膠，火棉膠。一般采用熔點(diǎn)為56℃~58℃,經(jīng)三道溶化的石蠟浸漬后,透明劑被全部置換出來。浸蠟溫度高于蠟的熔點(diǎn)2℃~3℃。35組織處理3、浸蠟與包埋：35石蠟：石蠟有高熔點(diǎn)和低熔點(diǎn)之分，一般普遍應(yīng)用熔點(diǎn)為56℃以上的石蠟。低熔點(diǎn)在54℃以下，用于酶的顯示和保存抗原活性。

石蠟分軟蠟（52℃—54℃），硬蠟（56℃—58℃），蜂蠟60℃。一般氣溫用硬蠟，氣溫低時(shí)用軟蠟。

火棉膠：

碳蠟

明膠浸蠟劑的種類36石蠟：石蠟有高熔點(diǎn)和低熔點(diǎn)之分，一般普遍應(yīng)用熔點(diǎn)為56℃以上組織處理3、浸蠟與包埋：將蠟液注入包埋的模具中，放好組織后，移至冷臺，使組織和蠟液凝固在一起的過程。包埋應(yīng)注意組織的埋面，保持組織在一個(gè)平面上，間距合適，避免氣泡，包埋要迅速，防止組織與蠟分離。

37組織處理3、浸蠟與包埋：37組織處理手工處理全封閉柜式自動脫水機(jī)（室溫）全封閉柜式自動脫水機(jī)（加溫）全封閉柜式自動脫水機(jī)（真空負(fù)壓）

38組織處理手工處理38全封閉柜式自動脫水機(jī)（櫻花tissue-tekVIP6）

試劑時(shí)間溫度℃壓力10%中性福爾馬林2h40on80%酒精45min40On95%酒精1h40On95%酒精1h40On100%酒精1h40On100%酒精1h40On100%酒精1h40On二甲苯45min40On二甲苯45min40On石蠟45min62On石蠟45min62On石蠟45min62On石蠟45min62on39全封閉柜式自動脫水機(jī)（櫻花tissue-tekVIP6）常規(guī)石蠟切片多采用輪式切片機(jī)，一次性刀片切片厚度為4um~6um展片水溫42~48℃注意清潔，避免污染易脫片組織可用防脫片的涂膠載破片防止切片裂痕，厚薄不均的現(xiàn)象40常規(guī)石蠟切片多采用輪式切片機(jī)，一次性刀片40常規(guī)石蠟切片防脫片的涂膠載破片多聚賴氨酸：0.1%水溶液，使用時(shí)再1:10稀釋，涂片3-氨丙基三已氧基硅烷（APES）帶電荷玻片或陽玻片

41常規(guī)石蠟切片防脫片的涂膠載破片41冰凍切片常用于術(shù)中快速病理診斷組織不經(jīng)脫水，透明等步驟，對蛋白，脂肪，各種酶保存好，合適做組織化學(xué)，免疫組化等染色，尤其對不合適石蠟組織的抗體組織會膨脹，細(xì)胞變大，出現(xiàn)與常規(guī)切片的一些差異42冰凍切片常用于術(shù)中快速病理診斷42常規(guī)HE染色染色的意義和目的：用染液對組織切片進(jìn)行處理，使組織中的不同成分被染上相應(yīng)的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，以利于光鏡觀察和分析。43常規(guī)HE染色染色的意義和目的：43常規(guī)HE染色HE是蘇木素（haematoxylin）和伊紅（eosin）的縮寫蘇木素是從蘇木素樹的樹心中提煉的天然堿性染料，蘇木素經(jīng)過氧化后變成蘇木紅，在媒染劑作用下形成藍(lán)色色精，對細(xì)胞核具有良好的染色能力伊紅屬酸性染料，化學(xué)名稱四溴熒光素二鈉，分為水溶性和醇溶性兩種，常規(guī)HE使用的是水溶性伊紅44常規(guī)HE染色HE是蘇木素（haematoxylin）和伊紅（常規(guī)HE染色染色的原理細(xì)胞核染色的原理：細(xì)胞核主要是DNA，帶負(fù)電荷，呈酸性，容易與帶正電荷的堿性染料結(jié)合，蘇木素氧化呈蘇木紅，蘇木紅與媒染劑中金屬陽離子結(jié)合形成藍(lán)色色精，以離子鍵或氫鍵與核結(jié)合。細(xì)胞質(zhì)的染色的原理：細(xì)胞質(zhì)主要是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，等電點(diǎn)為pH4.7~5.0。當(dāng)染液的pH值低于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)帶正電荷，伊紅是一種酸性染料，水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白的氨基正電荷結(jié)合而使細(xì)胞質(zhì)著色。45常規(guī)HE染色染色的原理細(xì)胞核染色的原理：細(xì)胞核主要是DNA，常規(guī)HE染色染色步驟1、脫蠟二甲苯Ⅰ脫蠟10分鐘左右二甲苯ⅡⅢ脫蠟5分鐘左右無水酒精(乙醇)Ⅰ洗去二甲苯1分鐘無水酒精(乙醇)Ⅱ洗去二甲苯1分鐘95%酒精1分鐘85%酒精1分鐘自來水洗片刻46常規(guī)HE染色染色步驟1、脫蠟46

除去汞鹽沉淀物:對于用升汞固定或含有升汞混合固定液的切片，切片脫臘后需脫汞（浸入5%碘酒精10’），脫碘（5%硫代硫酸鈉）→流水洗→染色。

除鉻沉著物:有些組織用含鉻的Ｚenker氏液等固定，致有鉻沉淀物?？蓱?yīng)用鹽酸乙醇溶液，或用5%碘酒和5%硫代硫酸鈉水溶液處理。常規(guī)HE染色染色步驟47

除去汞鹽沉淀物:對于用升汞固定或含有升汞混合固定液的切片脫甲醛色素:甲醛固定組織時(shí)間較長及溫度較高情況下，甲醛易氧化自行分解產(chǎn)生甲酸，導(dǎo)致組織成酸性，此時(shí)可能有甲醛色素產(chǎn)生。此種色素?zé)o光澤，不溶于水，乙醇，二甲苯等。對于這種色素可用下列方法除去。

1濃氨水1ml，75%乙醇200ml。切片脫蠟后置溶液中30

’或較久→流水洗→染色。

21%氫氧化鉀1ml，80%乙醇100ml。切片脫蠟后置溶液中10

’→流水洗5

’→80%乙醇5

’→蒸餾水洗→染色。

常規(guī)HE染色染色步驟48脫甲醛色素:甲醛固定組織時(shí)間較長及溫度較高情況下，甲醛易氧常規(guī)HE染色染色步驟2、染色蘇木素染色1～5分鐘左右自來水洗片刻1%或0.5%或0.25%鹽酸水分化3～5秒鐘自來水洗，溫水藍(lán)化片刻伊紅酒精染液浸染20秒～2分鐘

49常規(guī)HE染色染色步驟2、染色49常規(guī)HE染色染色步驟3、脫水、透明、封固85%的酒精脫水20秒95%的酒精1分鐘無水酒精Ⅰ染1～2分鐘無水酒精Ⅱ染2分鐘二甲苯Ⅰ浸2分鐘二甲苯Ⅱ浸2分鐘中性樹膠或加拿大樹膠封片50常規(guī)HE染色染色步驟3、脫水、透明、封固50常規(guī)HE染色結(jié)果細(xì)胞核呈藍(lán)色鈣鹽和各種微生物呈藍(lán)色或紫藍(lán)色細(xì)胞質(zhì)，肌纖維，纖維結(jié)締組織，紅細(xì)胞和伊紅色顆粒呈不同程度的紅色51常規(guī)HE染色結(jié)果細(xì)胞核呈藍(lán)色51常規(guī)HE染色質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)切片完整，厚度4~6um，厚薄均勻，無皺褶，無刀痕細(xì)胞核，質(zhì)染色分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封固美觀52常規(guī)HE染色質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)切片完整，厚度4~6um，厚薄均勻，無皺細(xì)胞病理學(xué)細(xì)胞病理學(xué)（cytopathology）是通過觀察細(xì)胞類別，形態(tài)和性質(zhì)，協(xié)助臨床篩查，診斷和研究疾病的科學(xué)。是病理學(xué)得分支學(xué)科。

53細(xì)胞病理學(xué)53細(xì)胞學(xué)檢查的材料來源體腔抽出液體的脫落細(xì)胞粘膜表面的脫落細(xì)胞針吸細(xì)胞內(nèi)鏡刷洗細(xì)胞細(xì)胞印片培養(yǎng)細(xì)胞爬片54細(xì)胞學(xué)檢查的材料來源體腔抽出液體的脫落細(xì)胞54細(xì)胞學(xué)檢查的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：

方法簡單安全，受檢者痛苦小設(shè)備簡單，標(biāo)本來源容易，可以反復(fù)獲取。制片技術(shù)簡單，可以快速診斷缺點(diǎn)：存在假陽性好假陰性無法分辨細(xì)胞結(jié)構(gòu)無法明確細(xì)胞來源55細(xì)胞學(xué)檢查的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：55細(xì)胞學(xué)檢查基本技術(shù)標(biāo)本采集：刮片，抽吸，沖洗，針吸。涂片技術(shù)：動作輕巧，力度均勻，厚薄適宜涂片方法：退片，涂抹，印片，噴射，膜式沉淀，離心沉淀式薄層細(xì)胞學(xué)，爬片固定：95%酒精固定，15~30min染色：HE染色，巴氏染色，瑞士染色細(xì)胞蠟塊56細(xì)胞學(xué)檢查基本技術(shù)標(biāo)本采集：刮片，抽吸，沖洗，針吸。56標(biāo)本采集注意事項(xiàng)痰液應(yīng)收集晨起深部咳出的痰尿液取中段尿尿液，胸腹水應(yīng)當(dāng)盡快制片，防止細(xì)胞自溶57標(biāo)本采集注意事項(xiàng)痰液應(yīng)收集晨起深部咳出的痰57

哈瑞氏（harris）蘇木素染液

最常應(yīng)用染色時(shí)間為5’—10’

配制