2024年臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)中級(jí)職稱考試考點(diǎn)手冊(cè)

第一篇臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)第一單元血液樣本采集和血涂片制備第一節(jié)血液生理概要血液的組成及生理功能（掌握）1．組成：血液由血細(xì)胞（紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板）和血漿組成。血清與血漿相比，血清缺少一部分凝血因子，如Ⅰ（纖維蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等凝血因子。2．血液性質(zhì)：（1）血量：血漿占55%，血細(xì)胞占比45%。（2）酸堿度：pH7.35～7.45。（3）血漿滲透壓：290～310mOsm（kg·H2O）。（4）健康成年人全血黏度為生理鹽水的4～5倍。（5）比密：1.050～1.060，男性：1.055～1.063；女性：1.051～1.060。3．生理功能：運(yùn)輸功能、協(xié)調(diào)功能、維護(hù)機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和防御功能。4．血液特性：紅細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性、黏滯性、凝固性。第二節(jié)采血方法和采血管選擇采血方法（掌握）1．靜脈采血法：成年人靜脈采血常選肘部靜脈（壓脈帶捆綁不超過1分鐘）。2．真空采血法：真空采血法是一種新的靜脈采血法，又稱負(fù)壓采血法。真空采血裝置有套筒式、頭皮靜脈式兩種。3．皮膚采血法：通常選擇耳垂或手指部位。WHO推薦血常規(guī)檢查采集左手無名指指端內(nèi)側(cè)血液，嬰幼兒可選擇大拇趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣血液，嚴(yán)重?zé)齻颊呖蛇x擇皮膚完整處。方法評(píng)價(jià)：真空采血法是ICSH推薦的采血方法，也是臨床常用的采血方法。第三節(jié)抗凝劑選擇常見抗凝劑原理及其用途（熟練掌握）表1-1-1常用抗凝劑比較第四節(jié)血液涂片制備血涂片的制備（掌握）1．手工推片法：涂片時(shí)，推片與載玻片保持25°～30°夾角。2．厚血膜涂片法：臨床上常用厚血膜法檢查瘧原蟲與微絲蚴。3．良好血涂片標(biāo)準(zhǔn)：厚薄適宜、頭體尾分明、細(xì)胞分布均勻、血膜邊緣整齊、兩側(cè)有一定空隙、血膜占玻片的2/3。4．方法學(xué)評(píng)價(jià)：手工推片法用血量少、操作簡(jiǎn)單，是應(yīng)用最廣泛的方法。此外，瘧原蟲、微絲蚴等檢查可采用厚血膜涂片法。5．質(zhì)量控制：血細(xì)胞比容增高，血液黏度較高時(shí)，應(yīng)小血滴、小角度、慢推，反之亦然。新載玻片必須用1mol/L的鹽酸清洗后才能使用。第五節(jié)血液細(xì)胞染色考點(diǎn)一、瑞氏染色（掌握）瑞氏染色是血涂片最常用、最經(jīng)典的染色方法，對(duì)細(xì)胞質(zhì)和顆粒染色效果好。1．染液組成：堿性亞甲藍(lán)、酸性伊紅、甲醇（作為溶劑及固定細(xì)胞形態(tài)）。2．原理：物理吸附和化學(xué)親和作用。3．染色效果：最適pH為6.4～6.8。若緩沖液偏酸，則紅細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞偏紅，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色或不著色。若緩沖液偏堿，細(xì)胞染色染成灰藍(lán)色，顆粒深暗；嗜酸性粒細(xì)胞可染成暗褐色，甚至棕黑色；中性顆粒偏粗，染成紫黑色。4．注意事項(xiàng)：（1）在距玻片另一端2cm處結(jié)束涂抹為宜；（2）血涂片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然后立即用流水沖洗；（3）染色過淡，可復(fù)染，復(fù)染時(shí)先加緩沖液再加染液；（4）新鮮配制的染液染色效果差，應(yīng)貯存一段時(shí)間，時(shí)間越久，染色效果好。考點(diǎn)二、吉姆薩染色（掌握）吉姆薩染色對(duì)細(xì)胞核和寄生蟲著色較好。1．染液組成：天青、伊紅、甲醇、純甘油。2．原理：同瑞氏染色。記憶方法：血紅蛋白，嗜酸性顆粒（堿性蛋白質(zhì)）：具有嗜酸性——伊紅結(jié)合；細(xì)胞核蛋白、淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞胞質(zhì)（酸性蛋白質(zhì)）：具有嗜堿性——亞甲藍(lán)結(jié)合。第二單元紅細(xì)胞檢測(cè)第一節(jié)概要紅細(xì)胞生理（掌握）紅細(xì)胞（RBC）是血液中數(shù)量最多的細(xì)胞成分，成熟RBC的平均壽命為120天、白細(xì)胞與血小板7～14天，衰老的RBC主要在脾破壞。第二節(jié)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞（RBC）計(jì)數(shù)（掌握）1．紅細(xì)胞計(jì)數(shù)常用稀釋液（1）Hayem稀釋液：由NaCl（調(diào)節(jié)滲透壓）、Na2SO4（提高比重防止細(xì)胞粘連）、HgCl2（防腐）和蒸餾水組成；（2）枸櫞酸鈉稀釋液：由NaCl（調(diào)節(jié)滲透壓）、枸櫞酸鈉（抗凝作用）、甲醛（防腐）及蒸餾水組成。2．牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)RBC（1）計(jì)數(shù)公式：紅細(xì)胞/L＝N×25/5×10×200×106＝N（5個(gè)中方格的RBC總數(shù)）/100×1012。（2）牛鮑計(jì)數(shù)板：中央5個(gè)中方格是紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)區(qū)域，四角的4個(gè)大方格是白胞計(jì)數(shù)區(qū)域。3．參考值：成年人：男性4.0～5.5×1012/L；女性3.5～5.0×1012/L；新生兒6～7×1012/L。4．臨床意義（1）生理變化：①新生兒、精神刺激、劇烈運(yùn)動(dòng)、氣壓減低可導(dǎo)致紅細(xì)胞增多；②妊娠期婦女和老年人紅細(xì)胞常減低。（2）病理變化：①急慢性失血、紅細(xì)胞壽命縮短，造血原料不足，骨髓造血功能減退可引起貧血，造成紅細(xì)胞（或血紅蛋白）減少；②紅細(xì)胞增多癥、心血管疾病、肺部疾病、嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、大面積燒傷以及某些藥物均可引起RBC增多。第三節(jié)血紅蛋白測(cè)定血紅蛋白（Hb）測(cè)定（掌握）1．檢測(cè)原理（1）氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）測(cè)定法：血液中除硫化血紅蛋白（SHb）外的各種Hb均可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白，在540nm處測(cè)定吸光度，再換算得到Hb的濃度。（2）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白（SDS）測(cè)定法：血液中SHb外的各種Hb均可與低濃度SDS形成棕紅色化合物，在538nm處測(cè)定吸光度，再換算得到Hb的濃度。評(píng)價(jià)：HiCN是目前國際推薦的參考方法，致命缺點(diǎn)是氰化鉀有劇毒，SDS是次選方法。（3）血紅蛋白成分：HbA：α2β2，占95%，含量最多；HbF：α2γ2，胎兒血紅蛋白，占1%；HbA2：α2σ2，占2%～3%。2．參考值：成年人：男性120～160g/L；女性110～150g/L。新生兒：170～200g/L。3．臨床意義：Hb和RBC臨床意義相似，但在臨床判斷貧血程度上，Hb測(cè)定優(yōu)于RBC計(jì)數(shù)。4．HiCN法測(cè)定注意事項(xiàng)（1）HiCN轉(zhuǎn)化液應(yīng)貯存在棕色有塞玻璃瓶中（不能用塑料瓶）；（2）氰化鉀有劇毒，測(cè)定后的廢液應(yīng)收集于廣口容器中，稀釋后加次氯酸鈉混勻，敞開容器放置15小時(shí)以上再排入下水道；（3）廢液不能與酸性溶液混合，避免產(chǎn)生劇毒氣體。第四節(jié)紅細(xì)胞形態(tài)檢查考點(diǎn)一、正常紅細(xì)胞形態(tài)（掌握）正常紅細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)：雙凹圓盤形，大小一致，平均直徑7.2μm，呈淡粉紅色，中央1/3為生理性淡染區(qū)，胞質(zhì)無異常結(jié)構(gòu)，無細(xì)胞核。大小改變：小紅細(xì)胞直徑＜6μm；大紅細(xì)胞直徑＞10μm；巨紅細(xì)胞直徑＞15μm?？键c(diǎn)二、紅細(xì)胞形態(tài)改變常見疾?。ㄕ莆眨┣蛐蜶BC：遺傳性或獲得性球形紅細(xì)胞增多癥。鐮形RBC：鐮狀細(xì)胞貧血。棘RBC：遺傳性β脂蛋白缺乏癥、尿毒癥。裂RBC：彌散性血管內(nèi)凝血、正常人（＜2%）。有核RBC：溶血性貧血最常見。靶形RBC：珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血。緡錢狀RBC：多發(fā)性骨髓瘤（MM）?？谛蜶BC：遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥、酒精中毒，正常人（＜4%）。淚滴形RBC：骨髓纖維化和正常人?？键c(diǎn)三、紅細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)異常（掌握）1．嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞：細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一，大小不等的藍(lán)色顆粒（殘存變性嗜堿性RNA），常用于鉛中毒的篩查指標(biāo)。2．豪焦小體（H-J）小體：又稱染色質(zhì)小體，是位于成熟或幼稚紅細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的紫紅色小體，已證實(shí)為核的殘余物，見于脾切除后等疾病。3．卡波環(huán)：紫紅色細(xì)線圈狀、呈環(huán)形或“8”字形，可能是核膜殘余物、紡錘體殘余物或脂蛋白變性所致，見于白血病、巨幼細(xì)胞性貧血等疾病。第五節(jié)血細(xì)胞比容測(cè)定血細(xì)胞比容（Hct）測(cè)定1．參考值：溫氏法：男性0.40～0.50；女性0.37～0.48。（微量法為WHO推薦的常規(guī)方法；血液分析儀法：臨床常用；ICSH定為參考方法：放射性核素法）。2．溫氏法操作要點(diǎn)：標(biāo)本加入溫氏管離心分5層：自上而下依次為血漿層、血小板層、白細(xì)胞層和有核紅細(xì)胞層、還原紅細(xì)胞層、帶氧紅細(xì)胞層。計(jì)算時(shí)讀取還原紅細(xì)胞層（紫黑紅色）。第六節(jié)紅細(xì)胞平均指數(shù)考點(diǎn)一、紅細(xì)胞平均指數(shù)（掌握）表1-2-1紅細(xì)胞評(píng)價(jià)指數(shù)考點(diǎn)二、貧血形態(tài)學(xué)分類及意義（掌握）表1-2-2貧血形態(tài)學(xué)分類及意義第七節(jié)紅細(xì)胞體積分布寬度考點(diǎn)一、紅細(xì)胞體積分布寬度（掌握）1．紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）：反映樣本中RBC體積大小的異質(zhì)程度（客觀指標(biāo)），常用變異系數(shù)（CV）表示。2．參考值：11.6～14.6%。3．臨床意義：貧血形態(tài)學(xué)分類：根據(jù)RDW和MCV將貧血分為小細(xì)胞均一性、小細(xì)胞不均一性、正常體積均一性、正常體積不均一性、大細(xì)胞均一性、大細(xì)胞不均一性。紅細(xì)胞直方圖波峰（主峰）左移：小細(xì)胞、MCV↓；波峰右移：大細(xì)胞、MCV↑。峰底變寬：不均一，RDW↑；峰底變窄：均一性，RDW正常?？键c(diǎn)二、貧血MCV/RDW分類法（掌握）表1-2-3貧血MCV/RDW分類第八節(jié)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞（Ret）計(jì)數(shù)1．原理：網(wǎng)織紅細(xì)胞是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過渡細(xì)胞，屬于未完全成熟的紅細(xì)胞。胞質(zhì)內(nèi)殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸（RNA），可被新亞甲藍(lán)、煌焦油藍(lán)等染料活體染色呈網(wǎng)狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)而得名。2．分類：（1）網(wǎng)織紅細(xì)胞根據(jù)形態(tài)特征和成熟程度分為4型：Ⅰ型（絲球型）、Ⅱ型（網(wǎng)型）、Ⅲ型（破網(wǎng)型）和Ⅳ型（點(diǎn)粒型）。（2）正常人外周血可見Ⅲ型和Ⅳ型，Ⅲ型占20%～30%，Ⅳ型占70%～80%，若骨髓增生明顯，可出現(xiàn)Ⅰ、Ⅱ型。3．參考值：顯微鏡計(jì)數(shù)法：成年人0.008～0.02或（25～85）×109/L；新生兒0.02～0.06。Ret絕對(duì)值（×109/L）＝紅細(xì)胞×Ret百分?jǐn)?shù)（%）。4．臨床意義（1）是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)，當(dāng)骨髓Ret增多，而外周血Ret減少時(shí)，提示釋放障礙。Ret增多：常見于溶血性貧血；Ret減少：常見于再生障礙性貧血。（2）觀察貧血療效：缺鐵性貧血（或巨幼細(xì)胞性貧血）給予鐵劑（葉酸和維生素B12）治療，3～5天Ret開始上升，7～10天達(dá)到峰值，2周左右開始下降。Ret是判斷缺鐵性貧血鐵劑治療有效的最快速指標(biāo)。5．操作方法（1）操作步驟：2滴10g/L煌焦油藍(lán)溶液和2滴全血立即混勻，37℃放置15～20分鐘，推片制片后，在油鏡下計(jì)數(shù)至少1000個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。（2）計(jì)算公式：①常規(guī)法：1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)/1000×100%；②Miller窺盤計(jì)數(shù)公式：大方格B內(nèi)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)/（小方格A內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)×9）×100%。該方法為ICSH推薦方法。第九節(jié)點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞（掌握）1．操作方法（1）計(jì)數(shù)：選擇合適部位，用油鏡計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)。（2）計(jì)算：嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞分?jǐn)?shù)＝計(jì)數(shù)的嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞/1000。2．參考值：＜0.03%3．臨床意義增高常見于：①中毒（鉛、汞等）；②各類貧血，如溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血等。第十節(jié)紅細(xì)胞沉降率測(cè)定紅細(xì)胞沉降率（ESR）（掌握）1．原理：ESR是離體抗凝全血靜置后，紅細(xì)胞在單位時(shí)間內(nèi)沉降的速度，分3期：①緡錢狀紅細(xì)胞形成期；②快速沉降期；③細(xì)胞堆積期。2．魏氏法：魏氏法為ICSH推薦方法。3．參考值：魏氏法（正常成年人）：男性0～15mm/h；女性0～20mm/h。4．影響因素：小分子蛋白質(zhì)如清蛋白、卵磷脂等使血沉減慢；大分子蛋白質(zhì)如纖維蛋白原、急性反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白、巨球蛋白、膽固醇和甘油三酯等使血沉加快。5．操作方法（1）加抗凝劑：取109mmol/L枸櫞酸鈉0.4ml于試管中。（2）采靜脈血：取靜脈血1.6ml，加入含抗凝劑的試管中，混勻。（3）裝血沉管：用血沉管吸入混勻全血至刻度“0”處，拭去管外殘留余血。（4）立血沉管：將血沉管直立于血沉架上。（5）讀數(shù)：1h末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后暴露出的血漿段高度，即紅細(xì)胞沉降率。第三單元白細(xì)胞檢查白細(xì)胞（WBC）計(jì)數(shù)（掌握）1．概述：粒細(xì)胞發(fā)育階段：分裂池（原粒、早幼粒、中幼粒細(xì)胞）、成熟池（晚幼、桿狀核粒細(xì)胞）、儲(chǔ)備池（桿狀核、分葉核粒細(xì)胞）、循環(huán)池（白細(xì)胞計(jì)數(shù)值）和邊緣池5個(gè)池。2．原理：白細(xì)胞計(jì)數(shù)是測(cè)定單位體積血液中各種白細(xì)胞總數(shù)，包括顯微鏡計(jì)數(shù)法和血液分析儀計(jì)數(shù)法（多采用電阻抗法和光散射法原理）。3．顯微鏡計(jì)數(shù)法：①白細(xì)胞稀釋液0.38ml加入20ul血液，充分混勻后沖入計(jì)數(shù)池室溫靜置2～3分鐘，在低倍鏡下計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞的總數(shù)；②計(jì)算公式：WBC數(shù)/L＝N（4個(gè)大方格WBC數(shù)）/4×10×20×106＝N/20×109/L。4．參考值：成年人（4～10）×109/L；新生兒（15～20）×109/L；6個(gè)月～2歲（11～12）×109/L；兒童（5～12）×109/L。5．方法學(xué)評(píng)價(jià)：顯微鏡計(jì)數(shù)法是白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的參考方法；血液分析儀計(jì)數(shù)法是白細(xì)胞分類和篩選的首選方法。6．質(zhì)量控制（1）血涂片上WBC分布密度與WBC數(shù)量關(guān)系為：（2～4）/HP≈（4～7）×109/L；（4～6）/HP≈（7～9）×109/L；（6～10）/HP≈（10～12）×109/L；（10～12）/HP≈（13～18）×109/L。（2）大量有核紅細(xì)胞可使白細(xì)胞計(jì)數(shù)值假性增高，此時(shí)，白細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)進(jìn)行校正。公式為：校正后白細(xì)胞數(shù)（L）＝校正前白細(xì)胞數(shù)×100/（100＋y），（y為白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)時(shí)，100個(gè)白細(xì)胞中有核紅細(xì)胞數(shù)量）。7．臨床意義（1）中性粒細(xì)胞：①病理性增多：急性化膿性感染、廣泛組織壞死、急性溶血和惡性腫瘤等疾病。②病理性減少：中性粒細(xì)胞絕對(duì)值＜1.5×109/L稱為粒細(xì)胞減少。③粒細(xì)胞缺乏癥：中性粒細(xì)胞絕對(duì)值＜0.5×109/L稱為粒細(xì)胞缺乏癥。常見于某些感染（傷寒、副傷寒桿菌）、血液病如再生障礙性貧血、慢性理化損傷、自身免疫疾病如SLE、脾功能亢進(jìn)等。④核左移：外周血中性桿狀核粒細(xì)胞增多或（和）幼稚細(xì)胞＞5%。再生性左移：表示機(jī)體反應(yīng)性強(qiáng)、骨髓造血功能旺盛，見于急性化膿性感染、急性中毒、急性溶血和急性失血等；退行性左移：指核左移而WBC不增高甚至減低，見于再生障礙性貧血、粒細(xì)胞減低癥、嚴(yán)重感染（如傷寒和敗血癥等）。⑤核右移：中性粒細(xì)胞核分葉5葉以上超過3%。見于營養(yǎng)性巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、應(yīng)用抗代謝藥物（如阿糖胞苷、6-巰基嘌呤等）、炎癥恢復(fù)期。（2）淋巴細(xì)胞：①生理性增多見于兒童；②病理性增多見于急性傳染?。ㄈ缃Y(jié)核?。?、某些白血病、腎移植術(shù)后等。（3）嗜酸性粒細(xì)胞：①減低見于長期使用腎上腺皮質(zhì)激素、傷寒；②增多見于寄生蟲病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、皮膚病、血液病和某些惡性腫瘤。第四單元血液分析儀及其臨床應(yīng)用血液分析儀檢測(cè)（掌握）1．電阻抗法：（1）血細(xì)胞計(jì)數(shù)：脈沖振幅越高，細(xì)胞體積越大；脈沖數(shù)量越多，細(xì)胞數(shù)量越多。（2）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：將體積為35～450fl的白細(xì)胞分成256個(gè)通道；淋巴細(xì)胞位于35～90fl的小細(xì)胞區(qū)；單核、嗜酸、嗜堿、原始、幼稚細(xì)胞位于90～160fl的單個(gè)核細(xì)胞區(qū)，又稱中間型細(xì)胞；粒細(xì)胞位于160fl以上的大細(xì)胞區(qū)。（3）正常紅細(xì)胞直方圖在36～360fl，血小板直方圖在2～30fl。2．光散射法：（1）白細(xì)胞計(jì)數(shù)：①激光與細(xì)胞化學(xué)染色法；②容量、電導(dǎo)、光散射（VCS）法；③電阻抗與射頻法；④多角度偏振光散射法。（2）紅細(xì)胞檢測(cè)原理：低角度（2°～3°）檢測(cè)單個(gè)紅細(xì)胞體積，高角度（5°～15°）檢測(cè)單個(gè)紅細(xì)胞血紅蛋白濃度。（3）網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)：新亞甲藍(lán)使網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA著色。第五單元血型和輸血第一節(jié)紅細(xì)胞ABO血型系統(tǒng)ABO血型系統(tǒng)（掌握）1．血型鑒定：①正定型：已知抗體（標(biāo)準(zhǔn)血清）＋未知抗原（待測(cè)紅細(xì)胞）；②反定型：已知抗原（標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞）＋未知抗體（待測(cè)血清）；③我國要求標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B的效價(jià)均為≥1：128；④ABO血型共4種表現(xiàn)型（A、B、O、AB），6種基因型（AA、AO、BB、BO、BA、OO）；⑤血型物質(zhì)不僅存在于血液成分中，人體體液、分泌物中也存在，但不存于腦脊液中。2．交叉配血：（1）主側(cè)：受血者血清＋供血者紅細(xì)胞；次側(cè)：受血者紅細(xì)胞十供血者血清。（2）方法：①鹽水法；②抗球蛋白法（Coombs法）；③酶介質(zhì)法；④聚凝胺法（能發(fā)現(xiàn)引起溶血性輸血反應(yīng)幾乎所有的規(guī)則和不規(guī)則抗體）；⑤凝膠法（凝膠微柱卡式）。第二節(jié)紅細(xì)胞Rh血型系統(tǒng)Rh血型系統(tǒng)（掌握）1．概述：Rh遺傳基因位于第1號(hào)染色體的短臂上。Rh抗原中D抗原最強(qiáng)，Rh陰性基因型是cde/cde。2．Rh血型系統(tǒng)鑒定：Rh抗體屬于IgG，不能在鹽水介質(zhì)中與紅細(xì)胞發(fā)生凝集?？刹捎孟铝需b定方法：①低離子強(qiáng)度鹽水實(shí)驗(yàn)；②酶介質(zhì)法；③聚凝胺法；④Coombs法；⑤人源鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn)。3．新生兒溶血?。菏苎呋蛟袐D血漿中含有Rh抗體時(shí)，當(dāng)再與含相應(yīng)抗原血液相遇，將引起嚴(yán)重輸血反應(yīng)或新生兒溶血?。ǔ榈?胎溶血）。第三節(jié)血液制品的保存血液保存液（掌握）1．ACD保存液：A，枸櫞酸；C，枸櫞酸鹽；D，葡萄糖。血液能保存21天。2．CPD保存液：C，枸櫞酸鹽；P，磷酸鹽；D，葡萄糖。血液可保存28天。在CPD保存液基礎(chǔ)上再加腺嘌呤，即為CPDA-1，紅細(xì)胞保存期可達(dá)35天。3．血液保存液主要成分：①枸櫞酸（防止葡萄糖焦化）；②枸櫞酸鹽（抗凝，阻止溶血）；③葡萄糖（提供營養(yǎng)）；④磷酸鹽（提高保存液pH）。4．血液制品貯存溫度和時(shí)間表1-5-1血液制品貯存溫度和時(shí)間第六單元尿液生成和標(biāo)本采集及處理第一節(jié)尿液生成尿液生成機(jī)制（掌握）1．腎小球?yàn)V過：原尿除了無血細(xì)胞及蛋白含量極少外，其他物質(zhì)、酸堿度、滲透壓幾乎與血漿相同。2．腎小管和集合管重吸收：腎近曲小管是重吸收的主要場(chǎng)所；肌酐幾乎不被重吸收。3．腎小管分泌：腎小管和集合管泌H＋、NH4＋的作用和Na＋-H＋交換作用。第二節(jié)尿液標(biāo)本采集及處理考點(diǎn)一、尿標(biāo)本采集（掌握）1．患者準(zhǔn)備：為了正確收集尿標(biāo)本，應(yīng)以口頭和書面形式指導(dǎo)患者正確收集尿標(biāo)本。如：清潔標(biāo)本采集部位；明確標(biāo)記；避免月經(jīng)、陰道分泌物、糞便、清潔劑等各種物質(zhì)的污染；使用合格容器，細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本，應(yīng)使用消毒培養(yǎng)瓶或無菌、有蓋的容器。2．標(biāo)本容器：容器材料不與尿液反應(yīng)；容器大于50ml；干燥、清潔、無污染；帶蓋、無菌容器。3．尿標(biāo)本采集種類：（1）晨尿：適合尿細(xì)胞或管型成分檢查（尿沉渣、β-hCG等）。（2）隨機(jī)尿：用于急診檢查。（3）計(jì)時(shí)尿：①3小時(shí)尿：收集6點(diǎn)～9點(diǎn)尿液，用于檢測(cè)尿有形成分，如1小時(shí)尿排泄率檢查；②餐后尿：收集餐后到14點(diǎn)的尿液，適合肝膽疾病、腎病、糖尿病、溶血性疾病檢查；③24小時(shí)尿：收集早上8點(diǎn)至次日早上8點(diǎn)全部尿液，適合肌酐、蛋白質(zhì)、電解質(zhì)等檢測(cè)；④無菌尿（中段尿、導(dǎo)管尿、恥骨上穿刺尿）：細(xì)菌培養(yǎng)。考點(diǎn)二、尿標(biāo)本處理（掌握）1．檢測(cè)時(shí)限：尿標(biāo)本采集后應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)及時(shí)送檢，最好在30分鐘內(nèi)完成檢測(cè)。2．保存：2～8℃冰箱保存，但最好不超過6小時(shí)。3．常用防腐劑：（1）甲醛：尿細(xì)胞、管型等有形成分檢測(cè)。（2）甲苯：尿糖、尿蛋白等化學(xué)成分定性或定量檢測(cè)。（3）麝香草酚：尿濃縮結(jié)核桿菌檢查及化學(xué)成分保存。（4）濃鹽酸：17-羥、17-酮，腎上腺素、兒茶酚胺、Ca2＋。（5）冰乙酸：5-羥色胺，醛固酮等。（6）戊二醛：尿沉淀物的固定和防腐。第七單元尿理學(xué)檢驗(yàn)考點(diǎn)一、尿液理學(xué)檢查（掌握）1．尿量：正常成年人為（1～2）L/24h。①多尿：尿量＞2.5L/24h；②少尿：尿量＜400ml/24h或尿量＜17ml/h；③無尿：尿量＜100ml/24h或＜17ml/h。2．尿比密與尿滲量：在4℃時(shí)，尿與同體積純水重量之比，比密又稱尿比重（SG）。一般情況下SG的參考值為1.015～1.025。折射計(jì)法是NCCLS推薦的參考方法。3．臨床意義：糖尿病患者尿量增多，尿比密增高；尿崩癥患者尿量增多，尿比密減低；急性腎小球腎炎患者尿量減少，尿比密增高。尿滲量在評(píng)價(jià)腎濃縮和稀釋功能上優(yōu)于尿比密?？键c(diǎn)二、血尿與膿尿（掌握）1．鏡下血尿：尿沉渣鏡檢紅細(xì)胞＞3個(gè)/HP（高倍視野）。2．肉眼血尿：每升尿含血量≥1ml。3．肉眼膿尿：尿呈乳白色，含有大量WBC甚至出現(xiàn)凝塊。4．鏡下膿尿：尿沉渣鏡檢WBC＞5個(gè)/HP?？键c(diǎn)三、尿氣味（掌握）表1-7-1常見尿液特殊氣味及相關(guān)疾病第八單元尿有形成分檢查第一節(jié)尿有形成分檢測(cè)方法表1-8-1尿有形成分檢查的要求及pH和滲透壓的影響（了解）第二節(jié)尿細(xì)胞檢查尿細(xì)胞檢查（掌握）1．紅細(xì)胞（RBC）（1）正常RBC為雙凹圓盤狀，淡黃色，直徑大約為8μm；（2）根據(jù)尿中RBC形態(tài)可將血尿分類均一性、非均一性、混合性紅細(xì)胞血尿；（3）鑒別：①腎性血尿，異形RBC≥80%；②非腎性血尿，異形紅細(xì)胞≤50%的，大部分為正常RBC。2．白細(xì)胞（WBC）（1）形態(tài)：①正常白細(xì)胞：加入1%乙酸處理，可清晰看見細(xì)胞核；②閃光細(xì)胞：急性腎盂腎炎可見中性粒細(xì)胞內(nèi)顆粒呈布朗運(yùn)動(dòng)，由于光的折射出現(xiàn)似發(fā)光現(xiàn)象，稱為閃光細(xì)胞；③膿細(xì)胞：壞死的中性粒細(xì)胞。（2）臨床意義：①腎盂腎炎，尿培養(yǎng)陽性，多數(shù)有白細(xì)胞管型；②膀胱炎，尿白細(xì)胞增多，常伴膿尿，但無管型；③腎移植排斥反應(yīng)，尿中有大量淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞；④某些間質(zhì)性腎炎、藥源性變態(tài)反應(yīng)可見嗜酸性粒細(xì)胞尿。3．上皮細(xì)胞（1）腎小管上皮細(xì)胞：來自腎小管立方上皮，多為圓形或多邊形，尿中增多提示腎小管病變。有時(shí)細(xì)胞內(nèi)可見數(shù)量不等的含鐵血黃素顆粒或脂肪小滴，稱復(fù)粒細(xì)胞。（2）移行上皮細(xì)胞：大圓上皮細(xì)胞增多見于膀胱炎；尾形上皮細(xì)胞增多見于腎孟腎炎。（3）鱗狀上皮細(xì)胞：來自輸尿管下段、膀胱和尿道，是尿液中體積最大的細(xì)胞；女性患者多見于尿道炎。第三節(jié)尿管型檢查表1-8-2尿液管型（掌握）第四節(jié)尿結(jié)晶檢查表1-8-3常見生理性和病理性結(jié)晶（掌握）第五節(jié)尿沉渣定量檢查表1-8-4尿有形成分參考值（掌握）第九單元尿液化學(xué)檢查考點(diǎn)一、尿液酸堿度測(cè)定（掌握）常用檢測(cè)方法：（1）試帶法：最廣泛的篩檢方法。（2）指示劑法：常用指示劑為0.4g/L溴麝香草酚藍(lán)溶液，該法檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。（3）滴定法：操作復(fù)雜。考點(diǎn)二、尿液蛋白質(zhì)檢查（掌握）1．定義：尿蛋白含量超過0.15g/24h或超過0.1g/L時(shí)，蛋白定性試驗(yàn)呈陽性。2．參考值：定性試驗(yàn)：陰性；定量試驗(yàn)：＜0.15g/24h或＜0.1g/L。3．常用方法：（1）定性試驗(yàn)：①試帶法：對(duì)清蛋白敏感，對(duì)球蛋白不敏感。本法快速、簡(jiǎn)便、易于標(biāo)準(zhǔn)化，適合于健康普查和臨床篩檢；②加熱乙醇法：傳統(tǒng)經(jīng)典方法，能同時(shí)檢出清蛋白和球蛋白，但敏感度較低；③磺基水楊酸法：與清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能發(fā)生反應(yīng)，被NCCLS作為干化學(xué)法檢查尿蛋白的參考方法和確證試驗(yàn)。（2）定量試驗(yàn)：沉淀法、比色法、染料結(jié)合法、免疫測(cè)定法和尿蛋白電泳法。考點(diǎn)三、尿液糖檢查（掌握）1．定義：當(dāng)血糖濃度超過腎糖閾（＞8.88mmol/L）或腎小管重吸收能力下降時(shí)，尿糖定性試驗(yàn)呈陽性，稱為糖尿。2．方法評(píng)價(jià)：①班氏法：易受其他還原物質(zhì)如維生素C干擾，導(dǎo)致假陽性；②試帶法：特異性強(qiáng)、靈敏度高、簡(jiǎn)便快速，適用于自動(dòng)化分析，維生素C會(huì)導(dǎo)致假陰性。3．參考值：定性試驗(yàn)，陰性?？键c(diǎn)四、尿液酮體檢查（掌握）1．定義：酮體是乙酰乙酸（占20%）、β-羥丁酸（占78%）及丙酮（占2%）的總稱。2．檢測(cè)方法：①試帶法：原理為亞硝基鐵氰化鈉法，是臨床上最常用的篩檢方法；②濕化學(xué)法：Rothera法、Gerhardt法；③片劑法。上述方法均不與β-羥丁酸起反應(yīng)?？键c(diǎn)五、尿液膽紅素檢查（掌握）檢測(cè)方法：重氮法，定性篩檢試驗(yàn)，當(dāng)高濃度維生素C和亞硝酸鹽存在，可導(dǎo)致假陰性。考點(diǎn)六、尿血紅蛋白檢查（掌握）檢測(cè)方法：（1）化學(xué)法：常用鄰聯(lián)甲苯胺、匹拉米酮法，但試劑穩(wěn)定性差，特異性低。（2）試帶法：過氧化物酶可導(dǎo)致假陽性，維生素C可導(dǎo)致假陰性。（3）膠體金單克隆抗體法：靈敏度高、特異度高、操作簡(jiǎn)單?？键c(diǎn)七、其他尿蛋白檢查（掌握）1．尿本周蛋白：本周蛋白加熱至40～60℃發(fā)生凝固，升溫至90～100℃時(shí)可溶解，而當(dāng)溫度降低至56℃左右時(shí)，又重新凝固，故又稱凝溶蛋白。2．尿蛋白電泳：常用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS）。3．尿肌紅蛋白：隱血試驗(yàn)（OBT）法、80%飽和硫酸銨法、單克隆抗體免疫法（確診試驗(yàn)）。4．微量白蛋白：尿微量清蛋白多采用放射免疫法和免疫比濁法，主要用于早期腎損傷的診斷?？键c(diǎn)八、尿hCG和乳糜尿（了解）1．尿hCG：檢查應(yīng)采集首次晨尿（中段尿）100ml；尿中FSH、LH、TSH等可與hCG產(chǎn)生交叉反應(yīng)，出現(xiàn)假陽性。參考值：定性為陰性。2．乳糜尿：有機(jī)溶劑抽取法（用乙醚）可確診為乳糜尿，蘇丹Ⅲ染色可見橘紅色脂肪球。第十單元尿液分析儀及其臨床應(yīng)用表1-10-1尿干化學(xué)檢測(cè)（掌握）表1-10-2尿干化學(xué)分析儀和顯微鏡檢查比較（掌握）第十一單元糞便檢驗(yàn)考點(diǎn)一、糞便檢查質(zhì)量控制（掌握）1．采集容器：①常規(guī)：清潔、干凈、無吸水滲漏有蓋容器；②細(xì)菌學(xué)檢測(cè)：無菌，有蓋容器。2．標(biāo)本采集：①選取含黏液、膿血等病變成分糞便，量3～5g；②寄生蟲和蟲卵檢查應(yīng)收集24小時(shí)糞便；③阿米巴標(biāo)本要注意保溫；④標(biāo)本采集后應(yīng)1小時(shí)內(nèi)檢驗(yàn)完畢。3．隱血試驗(yàn)：①化學(xué)法檢測(cè)前3天內(nèi)禁止食用動(dòng)物血或肉及藥物（如VitC）；②要嚴(yán)格控制操作時(shí)間，避免結(jié)果誤判；③為了避免免疫法后帶效應(yīng)，應(yīng)稀釋后檢驗(yàn)。考點(diǎn)二、隱血試驗(yàn)化學(xué)法與免疫法比較（掌握）表1-11-1隱血試驗(yàn)化學(xué)法與免疫法比較考點(diǎn)三、糞便改變與相關(guān)疾病（掌握）表1-11-2糞便改變與相關(guān)疾病考點(diǎn)四、糞便顯微鏡檢查（掌握）1．方法：生理鹽水涂片法（最常用）。2．步驟：①低倍鏡查蟲卵、原蟲、包囊等；②高倍鏡詳查病理成分的形態(tài)結(jié)構(gòu)；③染色技術(shù)：碘染鑒別阿米巴滋養(yǎng)體和淀粉顆粒；伊紅鑒別阿米巴滋養(yǎng)體；亞甲藍(lán)便于白細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查；蘇丹Ⅲ便于脂肪檢查；④原則上要觀察10個(gè)以上的高倍鏡視野再報(bào)告。3．細(xì)胞：①白細(xì)胞：正常糞便中偶見，腸炎癥時(shí)增多，腸道寄生蟲感染（如鉤蟲和阿米巴痢疾）和過敏性腸炎時(shí)嗜酸粒細(xì)胞增多；②紅細(xì)胞：正常糞便中無，常見于下消化道疾?。虎鄞笸淌杉?xì)胞：正常糞便中無，可作為急性菌痢的依據(jù)；④上皮細(xì)胞：正常糞便中很難找到，常見于結(jié)腸炎癥。4．夏科-雷登結(jié)晶：常見于阿米巴痢疾、過敏性腸炎。5．細(xì)菌：細(xì)菌約占糞便干重的1/3，糞便中球菌和桿菌比例約為1:10。第十二單元腦脊液檢驗(yàn)?zāi)X脊液（CSF）檢驗(yàn)（掌握）1．概述：由腦室脈絡(luò)叢產(chǎn)生，正常成年人總量為120～180ml（平均150m1）。2．采集禁忌證：顱內(nèi)壓增高者，休克、衰竭狀態(tài)者，穿刺部位有化膿性感染者，顱后窩有占位性病變者，腦疝先兆者。3．標(biāo)本采集：腦脊液采集標(biāo)本采3管，每管1～2ml。第一管細(xì)菌學(xué)檢查；第二管生化和免疫學(xué)檢查；第三管細(xì)胞計(jì)數(shù)。4．顏色：①無色：正常；②紅色：見于穿刺損傷（新鮮出血）或蛛網(wǎng)膜下腔出血；③黃色：陳舊性蛛網(wǎng)膜下隙出血、重癥黃疸；④乳白色：化膿性腦膜炎；⑤褐色或黑色：黑色素瘤；⑥綠色：銅綠假單胞菌感染。5．透明度：①清晰透明：正常；②毛玻璃樣微渾，靜置后表層有薄膜：結(jié)核性腦膜炎；③膿樣渾濁或凝塊：化膿性腦膜炎。6．凝固性：①當(dāng)CSF中蛋白含量＞10g/L時(shí)會(huì)出現(xiàn)凝塊或沉淀，化膿性腦膜炎CSF在1～2小時(shí)內(nèi)呈凝塊；②蛛網(wǎng)膜下隙梗阻：膠樣凝固，黃變癥，蛋白質(zhì)-細(xì)胞分離。7．生化指標(biāo)：腦脊液生化檢查：化膿性腦膜炎患者葡萄糖降低最明顯；結(jié)核性腦膜炎氯化物降低最明顯；病毒性腦膜炎葡萄糖和氯化物正常。8．病原學(xué)檢查：堿性亞甲藍(lán)染色檢測(cè)腦膜炎球菌；抗酸染色用于檢測(cè)結(jié)核桿菌；印度墨汁染色用于新型隱球菌檢查；革蘭染色用于其他致病菌檢查。9．細(xì)胞參考值：成年人CSF無紅細(xì)胞，WBC（0～8）×106/L，主要為單個(gè)核細(xì)胞，單核/淋巴＝7:3。10．細(xì)胞鑒別：①新型隱球菌：不溶于乙酸，經(jīng)墨汁染色后可見莢膜；②白細(xì)胞：不溶于乙酸，加酸后胞質(zhì)和胞核更加清晰；③紅細(xì)胞：加乙酸后溶解。第十三單元漿膜腔積液檢驗(yàn)考點(diǎn)一、漿膜腔積液采集要求與保存（掌握）表1-13-1漿膜腔積液采集要求與保存考點(diǎn)二、漿膜腔積液常見顏色與臨床意義（掌握）表1-13