羥苯磺酸鈣膠囊對大白鼠腎皮質(zhì)勻漿中cda和mda的影響

羥苯磺酸鈣膠囊對大白鼠腎皮質(zhì)勻漿中cda和mda的影響

托布霉是氨基糖苷類抗生素。在未經(jīng)aed批準的氨基糖苷類抗生素中，它與慶大霉素和丁胺鈉胺一起使用。1材料和方法1.1硫酸妥布毒素注射液雄性SD大白鼠30只,普通級,8周齡,體重210~230g。硫酸妥布霉素注射液(上海禾豐制藥有限公司)80mg,2mL;羥苯磺酸鈣膠囊(西安利君制藥有限責任公司)0.5g。1.2動物組和動物模型的構(gòu)建采用隨機數(shù)字表法將30只健康清潔雄性SD大鼠分為對照組、模型組、預防組(n=10)。對照組腹腔注射生理鹽水3mL·kg1.3腎組織病理學檢測各組動物在實驗前取尿留樣,并在第7天注射和灌胃結(jié)束后,分別放入代謝籠中留24h取尿,測尿N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)水平,實驗大鼠在第8天取尾靜脈血樣檢測SCr和BUN,然后麻醉處死大鼠,取右腎制成10%腎皮質(zhì)勻漿,測定超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),取左腎固定在10%甲醛中,制成石蠟切片進行光鏡檢查。指標測定方法:尿NAG測定使用N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶檢測試劑盒(比色法);SCr測定使用血清肌酐測定試劑盒(酶終點法);BUN測定使用尿素氮測定試劑盒(酶法);SOD活性變化使用超氧化物歧化酶測定試劑盒(比色法);MDA測定使用丙二醛含量檢測試劑盒(比色法);腎組織形態(tài)學檢查,制成石蠟切片后,分別進行HE、PAS染色,光學顯微鏡檢查。1.4統(tǒng)計方法應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料比較采用單因素方差分析和LSD-t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果2.1各組大鼠尿nag、scr、bun、scr、bun水平比較模型組和預防組大鼠尿NAG、SCr、BUN水平顯著高于對照組,預防組大鼠尿NAG、SCr、BUN水平顯著低于模型組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。2.2兩組a、對照組的比較模型組和預防組大鼠腎皮質(zhì)勻漿中SOD水平顯著降于對照組,MDA水平顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);預防組大鼠腎皮質(zhì)勻漿中SOD水平顯著高于模型組,MDA水平顯著低于模型組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。2.3大鼠近曲小管上皮細胞崩解、突出、細胞缺失、炎性染對照組大鼠腎小管,光鏡下可見細胞膜部分完整,有典型的腎小管上皮細胞管腔側(cè)的刷狀緣結(jié)構(gòu),胞漿內(nèi)未見空泡樣變,線粒體形態(tài)正常無腫脹,細胞核核膜完整。模型組大鼠近曲小管上皮細胞崩解、脫落,并有廣泛的顆粒和空泡變性,細胞核破裂,近曲小管基底膜斷裂、間質(zhì)水腫,有少量炎性細胞浸潤。預防組大鼠近曲小管僅見到單個細胞壞死和輕微的退行性改變。3妥布毒素的誘導大鼠腎毒性妥布霉素是臨床上常用的氨基糖苷類抗生素之一,用于治療囊性纖維化患者的銅綠假單胞菌肺部感染妥布霉素也是一種親水性陽離子抗生素,歸類于機體內(nèi)異生素的范疇。腎臟在維持機體平衡和內(nèi)在環(huán)境穩(wěn)定以及對許多親水性異生素和內(nèi)源性化合物的解毒中起主要作用。由于腎臟通過有機離子轉(zhuǎn)運蛋白穿過腎小管上皮細胞管腔側(cè)細胞膜分泌離子藥物,并通過腎小管上皮細胞管腔側(cè)細胞膜將過濾后的毒素重吸收進入管腔,因而腎臟與其他器官相比,會暴露于更大比例和更高濃度的藥物和毒素中,這也導致腎臟細胞受傷的風險更大,具體表現(xiàn)在近曲小管的損傷妥布霉素誘導腎毒性的機制并不明確。研究表明,妥布霉素會刺激大鼠腎臟產(chǎn)生ROS,造成機體處于氧化應(yīng)激升高狀態(tài)。ROS是最有效的活性氧化合物,能夠破壞腎臟功能并導致腎功能障礙。研究表明,氨基糖苷類抗生素刺激腎臟產(chǎn)生超氧陰離子和羥基自由基,這些超氧陰離子和羥自由基在皮質(zhì)小管的上皮細胞中累積并誘導細胞死亡,從而誘發(fā)腎毒性。ROS通常是作為正常細胞功能的一部分產(chǎn)生的,機體自身產(chǎn)生的自由基會被機體的抗氧化系統(tǒng)主動清除,在正常情況下,機體的氧化應(yīng)激處于平衡狀態(tài),當ROS產(chǎn)生增加或體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)減弱時,ROS會誘導組織損傷已在動物實驗中證明本研究通過分析羥苯磺酸鈣對妥布霉素誘導大鼠腎毒性的生化指標、氧化應(yīng)激等相關(guān)因素的影響,探討羥苯磺酸鈣對妥布霉素誘導大鼠腎毒性的預防作用。妥布霉素誘導大鼠腎毒性以近曲腎小管上皮細胞損傷最為顯著,模型組大鼠光鏡下觀察顯示近曲小管上皮細胞崩解、脫落,空泡變性,細胞核破裂也說明了這一點。模型組大鼠血清中MDA的表達水平升高,SOD表達降低說明氧化應(yīng)激可能參與了腎損傷的發(fā)生和發(fā)展;預防組MDA表達水平低于模型組,SOD高于模型組,表明羥苯磺酸鈣對妥布霉素誘導大鼠腎毒性具有預防作用,可能機制為羥苯磺酸鈣通過強抗氧化作用,增強了SOD的表達,并減少