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文檔簡介
18溶劑萃取法又稱液—液萃取;是一種常用化工單元操作。
應用廣泛:石油化工、濕法冶金、精細化工、生化物質的分離和純化。18溶劑萃取法又稱液—液萃??;是一1優(yōu)點:①、具有選擇性;②、能與其他純化步驟(例如:結晶、蒸餾)相配合③、將產(chǎn)品及時轉移到具有不同理化特性的第二相中,可減少由于水解引起的產(chǎn)品損失;④、可從潛伏的降解過程中(代謝或微生物過程)分離產(chǎn)物;⑤、適用于各種不同的規(guī)模;⑥、傳質速度快,生產(chǎn)周期短,便于連續(xù)操作.容易實現(xiàn)計算機控制。優(yōu)點:2液—液萃取的操作步驟:①、萃取劑和料液混合接觸,進行萃??;②、分離互不相溶的兩相,并回收溶劑;③、萃余液(殘液)脫溶劑。液—液萃取的操作步驟:①、萃取劑和料液混合接觸,進行萃??;3溶劑萃取法課件4溶劑萃取在生物產(chǎn)品分離中的典型應用:
(1)、從發(fā)酵培養(yǎng)液中萃取產(chǎn)物(2)、從生物反應液或生物轉化液中萃取產(chǎn)物。溶劑萃取在生物產(chǎn)品分離中的典型應用:5根據(jù)被萃取物的分子大小,萃取有兩種主要類型:(1)、小分子類抗生素、有機酸等,能用傳統(tǒng)液—液萃取法萃取到有機相中.(2)、大分子類有酶、抗體、蛋白質等,傳統(tǒng)的液體萃取技術不適用,要采用雙水相萃取。根據(jù)被萃取物的分子大小,萃取有兩種主要類型:6逆膠束萃取(ReversedMicelleExtraction)超臨界萃取(SupercriticalfluidExtraction)液膜萃取(LiquidmembraneExtraction)
溶劑萃取與其他技術相結合,產(chǎn)生的新型分離技術:用于生物制品如酶、蛋白質、核酸、多肽和氨基酸等的提取精制。本章重點介紹有機溶劑萃取法的理論與實踐。逆膠束萃取(ReversedMicelleExtra7一、分配定律
萃取平衡時,根據(jù)相律,有:
F=c-P十2其中:F自由度,c組分數(shù),P相數(shù)。若系統(tǒng)中除兩種溶劑外,只含有一種溶質,則c=3。因為P=2,代入相律,得F=3。當溫度、壓力一定時,F(xiàn)=1,即一個變數(shù)就能決定整個系統(tǒng)。亦即:一相的濃度如果固定,另一相的濃度亦應固定,其關系可用分配定律表示。一、分配定律萃取平衡時,根據(jù)相律,有:8(一)分配定律的導出:在一定的溫度和壓力下達成平衡時,溶質在兩相中的化學位相等,即:(一)分配定律的導出:在一定的溫度和壓力下達9標準化學位和組成無關,但和溫度、壓力有關。所以有:當溫度一定時,標準化學位為常數(shù),故得如為稀溶液,可以濃度代替活度標準化學位和組成無關,但和溫度、壓力有關。所以有:當溫度一10應用式(18—1)時,須注意下列條件:
1)、必須是稀溶液。2)、溶質對溶劑之互溶度沒有影響:3)、必須是同一種分子類型,即不發(fā)生締合或離解。
例如:青霉素。應用式(18—1)時,須注意下列條件:例如:青霉素。11
溶質A、B由于分配系數(shù)不同,在萃取相中的相對含量就不同。如A的分配系數(shù)較B大,則萃取相中A的含量(濃度)較B多,這樣A和B就得到一定程度的分離。萃取劑對A和B分離能力可用分離因素(?)來表征:分離因素(?)溶質A、B由于分配系數(shù)不同,在萃取相中的相對12二、溶劑的選擇1、對產(chǎn)物的溶解度大。2、選擇性好。3、溶劑與被萃取的液相互溶度要小,粘度低,界面張力適中,使相的分散和兩相分離有利。4、溶劑的回收和再生容易,化學穩(wěn)定性。5、溶劑價廉易得。6、溶劑的安全性好,如閃點高、低毒等。常用的溶劑有乙酸乙酯、乙酸丁酯和丁醇等。對萃取溶劑的要求:二、溶劑的選擇1、對產(chǎn)物的溶解度大。對萃取溶劑的要求:13可根據(jù)類似物容易溶解類似物的原則來選擇溶劑(極性上的類似)。
介電常數(shù)是一個化合物摩爾極化程度的量度,如果已知這個值,就可預知此化合物是否極性。可根據(jù)類似物容易溶解類似物的原則來選擇溶劑(14若已知一個物質的介電常數(shù)D,即可用此物質在一個電容器中兩極板之間所得的靜電容量C來量度:介電常數(shù)D的求法若已知一個物質的介電常數(shù)D,即可用此物質在一15可以測定被提取物(產(chǎn)物)的介電常數(shù),來尋找相當?shù)娜軇???梢詼y定被提取物(產(chǎn)物)的介電常數(shù),來尋找相16影響萃取操作的因素很多,主要有pH、溫度、鹽析、帶溶劑等。三、水相條件的影響
影響萃取操作的因素很多,主要有pH、溫度、鹽171、PH影響分配系數(shù)。如對弱堿性抗生素紅霉素,當pH9.8時,它在乙酸戊酯與水相間的K為44.7,而在PH5.5時,K為14.4。2、pH對選擇性有影響。如酸性產(chǎn)物一般在酸性下萃取到有機溶劑,而堿性雜質則成鹽而留在水相。如為酸性雜質則應根據(jù)其酸性之強弱,選擇合適的PH,以盡可能除去之。對于堿性產(chǎn)物則相反,在堿性下萃取到有機溶劑中。3、PH還應選擇在盡量使產(chǎn)物穩(wěn)定的范圍內。(一)、pH值1、PH影響分配系數(shù)。如對弱堿性抗生素紅霉素,當pH9.818生化產(chǎn)物在溫度較高時不穩(wěn)定,萃取應在室溫或較低溫度下進行。但如低溫對萃取速度影響較大,為提高萃取速度可適當升高溫度。
(二)、溫度此外,溫度也會影響分配系數(shù)。例如:溫度對紅霉素分配系數(shù)的影響。生化產(chǎn)物在溫度較高時不穩(wěn)定,萃取應在室溫或19加入鹽析劑(硫酸銨等)可使產(chǎn)物在水中溶解度降低,而易于轉入溶劑中去。另一方面也能減少有機溶劑在水中的溶解度。
舉例:提取維生素B12時加入硫酸銨,對B12自水相轉移到有機溶劑中有利。提取青霉素時加入NaCl,對青霉素從水相轉移到有機溶劑中有利。鹽析劑的用量要適當,用量過多會使雜質也一起轉入溶劑中。當鹽析劑用量大時,也應考慮回收和再利用問題。(三)、鹽析加入鹽析劑(硫酸銨等)可使產(chǎn)物在水中溶解度降20
帶溶劑:能和欲提取的生物物質形成復合物,而易溶于溶劑中,且此復合物在一定條件下又要容易分解。
應用場合:1、有的產(chǎn)物的水溶性很強,在通常有機溶劑中溶解度都很小,則如要采用溶劑萃取法來提取,可借助于帶溶劑。2、即使水溶性不強的產(chǎn)物,有時為提高其收率和選擇性,也可考慮采用帶溶劑。(四)、帶溶劑帶溶劑:能和欲提取的生物物質形成復合物,而易21
水溶性較強的堿(如鏈霉素)可與脂肪酸(如月桂酸)形成復合物而能溶于丁醇、醋酸丁酯、異辛醇中,在酸性下(pH5.5—5.7),此復合物分解成鏈霉素而可轉入水相。鏈霉素在中性下能與二異辛基磷酸酯相結合,而從水相萃取到三氯乙烷中,然后在酸性下,再萃取到水相。舉例:鏈霉素水溶性較強的堿(如鏈霉素)可與脂肪酸(22青霉素作為一種酸,可用酯肪堿作為帶溶劑。如能和正十二烷胺、四丁胺等形成復合物而溶于氯仿中。這樣萃取收率能夠提高,且可以在較有利的PH范圍內操作,適用于青霉素的定量測定中。這種正負離子結合成對的萃取,也稱為離子對萃取。舉例:青霉素青霉素作為一種酸,可用酯肪堿作為帶溶劑。如能和23
土霉素在堿性下成負離子能與溴代十六烷基吡啶相結合而溶于異辛醇中,然后再在酸性下萃取到水相。也可以看作土霉素負離子與溴離子相交換而溶于異辛醇中,因此這種帶溶劑有時也稱為液體離子交換劑。
檸檬酸在酸性條件下,可與磷氧鍵類萃取劑如磷酸三丁酯(TBP)形成中性絡合物而進入有機相,有時也稱為反應萃取。舉例:土霉素在堿性下成負離子能與溴代十六烷基吡啶相24四、乳化和去乳化
乳化是一種液體分散在另一種不相混合的液體中的現(xiàn)象。乳化會使有機相和水相分層困難,出現(xiàn)兩種夾帶即:
1、發(fā)酵液廢液中夾帶有機溶劑微滴,發(fā)酵單位損失;2、溶劑相中夾帶發(fā)酵液微滴,給后續(xù)精制造成困難。
四、乳化和去乳化乳化是一種液體分散在另一種不25(一)、乳濁液的形成乳濁液的兩種形式:1、以油滴分散在水中,稱為水包油型或O/W型。2、水以水滴分散在油中,稱為油包水型或W/O型。(一)、乳濁液的形成乳濁液的兩種形式:26
油與水不相溶,混在一起能很快分層,不能形成乳濁液。一般要有表面活性劑存在時,才容易發(fā)生乳化,這種物質稱為乳化劑。表面活性劑:分子一端具有親水基,另一端具有親油基,且能降低界面張力。能夠把不相溶的油與水連在一起,且其分子處在任一相中都不穩(wěn)定,而當處在兩相界面上,親水基伸向水、親油基伸向油時就比較穩(wěn)定。油與水不相溶,混在一起能很快分層,不能形成乳27乳化機理所以表面張力降低,液體容易分散成微滴而發(fā)生乳化。在乳濁液中,界面積大,物系的自由能大,故為熱力學不穩(wěn)定系統(tǒng),會自行破壞。因此要形成乳濁液,還應具備使其穩(wěn)定的條件。乳化機理所以表面張力降低,液體容易分散成微滴而發(fā)生乳化。在乳28(二)、乳濁液的穩(wěn)定條件和乳濁液的類型
影響乳濁液穩(wěn)定性的因素:1)、界面上保護膜是否形成。表面活性劑分子聚集在界面上,在分散相液滴周圍形成保護膜。保護膜應具有一定的機械強度,不易破裂,能防止液滴碰撞而引起聚沉。2)、液滴是否帶電。如為離子型的表面活性劑,則除了形成保護膜外,還會使分散相液滴帶電荷。3)、介質的粘度。介質粘度較大時能增強保護膜的機械強度。其中以第一個因素最重要。(二)、乳濁液的穩(wěn)定條件和乳濁液的類型影響乳濁液穩(wěn)定性的因29
除表面活性劑外,能同時為兩種液體所潤濕的固體粉末也能作為乳化劑,這是因為這種固體粉末也能存在于界面上而形成保護膜。
除表面活性劑外,能同時為兩種液體所潤濕的固體30
乳濁液的類型決定于水和油對它的潤濕性的相對強弱。如粉末對水的潤濕性強于對油的潤濕性(稱為親水性粉末),則根據(jù)自由能最小的原則,這種粉末被拉入水內,即大部分表面為水所潤濕,其接觸角為銳角(圖18—8a),能促使形成水包油O/W型乳油液(圖18—9a)。相反,親油性粉末作為乳化劑時,得到的是W/O型乳濁液。乳濁液的類型決定于水和油對它的潤濕性的相對強31
固體粉末所穩(wěn)定的乳濁液的理論,可以推廣到其它型式的乳化劑。例如:表面活性劑的親水基強度大于親油基,則易形成O/W型乳濁液;反之如親油基強度大于親水基則易形成W/O型乳濁液。固體粉末所穩(wěn)定的乳濁液的理論,可以推廣到其它32
表面活性劑的親水與親油程度的相對強弱,在工業(yè)上常用HLB數(shù)來表示。
HLB數(shù)即親水與親油平衡程度,HLB越大,親水性越強,形成O/W型乳濁掖,HLB越小,親油性越強,形成W/O型乳濁液.
HLB表面活性劑的親水與親油程度的相對強弱,在工業(yè)33當HLB數(shù)未知時,可根據(jù)其溶解度或分散程度粗略估計,見表18—2。不同HLB的表面活性劑的用途見表16—3。當HLB數(shù)未知時,可根據(jù)其溶解度或分散程度粗略34
在生物工業(yè)上,引起乳化的常為蛋白質,由蛋白質引起的乳化是相當穩(wěn)定的,構成型式多為W/O型。發(fā)酵液,蛋白質對表面張力的影響最明顯.在生物工業(yè)上,引起乳化的常為蛋白質,由蛋白35乳濁液穩(wěn)定性大小可用乳濁液在離心機中(分離因素一定)分離一定時間后,分出的有機相體積與原來有機溶劑體積之比作為指標來表征。比值愈小,乳濁液愈穩(wěn)定。乳濁液穩(wěn)定性大小可用乳濁液在離心機中(分離36(三)、乳濁液的破壞破壞方法:(1)、過濾和離心分離當乳化不嚴重時,可用過濾或離心分離的方法。分散相在重力或離心力場中運動時,??梢鹋鲎捕鄢?。在實驗室中,用玻璃棒輕輕攪動乳濁液也可促使其破壞。(2)、如熱能使粘度降低,易促使乳濁液破壞。如生化物質對熱穩(wěn)定,可考慮此法。(3)、稀釋法在乳濁液中,加入連續(xù)相,可使乳化劑濃度降低而減輕乳化。(三)、乳濁液的破壞破壞方法:37(4)、加電解質離子型乳化劑所成乳濁液常因分散相帶電荷而穩(wěn)定,可加入電解質,以中和其電性而促使聚沉。
(5)、吸附法例如,碳酸鈣易為水所潤濕,但不能為有機溶劑所潤濕,故將乳濁液通過碳酸鈣層時,其中水分被吸附,生產(chǎn)上將紅霉素一次丁酯抽提液通過碳酸鈣層,以除去微量水分,有利于以后的提取。(4)、加電解質離子型乳化劑所成乳濁液常38
(6)、頂替法加入表面活性更大,但不能形成堅固保護膜的物質,格原先的乳化劑從界面上頂替出來,但由于不能形成堅固保護膜,因而不能形成乳濁液。常用的頂替劑是戊醇,它的表面活性很大,但碳鏈很短,不能形成堅固的薄膜。(6)、頂替法加入表面活性更大,但不能形39(7)、轉型法
在O/W型乳濁液中,加入親油性乳化劑,則乳濁液有從O/W型轉變成W/O型的趨向,但條件還不允許形成W/O型乳濁液,因而在轉變過程中,乳濁液就破壞。同樣,在W/O型乳濁液中,加入親水性乳化劑,也會使乳濁濃破壞。
(7)、轉型法40上述這些方法雖有一定效果,但需耗費能量和物質,而且都在乳化發(fā)生后再破處,故宜將發(fā)酵液先頂處理,除去其中的表面活性物質(蛋白質),即消除水相乳化的起因.
例如:某有機酸發(fā)酵液,經(jīng)酸化預處理后,蛋白質含量從0.396%下降到0.1810%,其它物性變化甚少,進行清液萃取時,就未發(fā)生乳化現(xiàn)象。上述這些方法雖有一定效果,但需耗費能量和物質,41(四)、常用的去乳化劑在生物合成工業(yè)上使用的去乳化劑有兩種:1、陽離子表面活性劑:溴代十五烷基吡啶。2、陰離子表面活性劑:十二烷基磺酸鈉。當然并,不排斥試用其它高效去乳化劑的可能性。(四)、常用的去乳化劑在生物合成工業(yè)上使用的去乳化劑有兩種:421、溴代十五烷基吡啶
棕褐色稠厚液體,在水中溶解度約6%,在有機溶劑中溶解度較小,因此,適用于破壞W/O型乳濁液,去乳化效果很好。使用時要先溶解在熱水中,用量為0.01%一0.05%。1、溴代十五烷基吡啶棕褐色稠厚液體,在水中432、十二烷基磺酸鈉是一種洗滌劑,淡黃色透明液體,含量為25%,易溶于水,微溶于有機溶劑,因此適用于破壞W/O型乳濁液。價廉,僅為溴代十五烷基吡啶的1/20。其分子式如下:2、十二烷基磺酸鈉是一種洗滌劑,淡黃色透明液體44
國外報導采用溴代四烷基吡啶作為去乳化劑,效果很好。它可由丁醇合成,價廉,既易溶于水,又易溶于丁酯中,因此它既能破壞w/o型,也能破壞O/W型。與溴代十五烷基吡啶相比,乳濁液破壞較完全,能降低青霉素隨廢液的損失,用量為0.03%——0.05%。應用舉例:青霉素青霉素提煉的乳化現(xiàn)象過去曾用過磺化蓖麻油以及石油煤油部分的磺化產(chǎn)物(碳鏈為C12-C18)等,但去乳化能力不強。國外報導采用溴代四烷基吡啶作為去乳化劑,效果45去乳化劑的選擇方法1、以HLB數(shù)可作為指標;2、主要應用實驗方法來決定。
將發(fā)酵液和有機溶劑按一定比例混合,加入一定量去乳化劑,攪拌,(此時,仍產(chǎn)生一定程度的乳化),然后用離心機分離,觀察分層和乳化破壞程度,就可比較去乳化能力。去乳化劑用量也可按此實驗方法決定。3、去乳化劑不應破壞發(fā)酵單位和污染成品。例如:紅霉素在堿性下提取到丁酯相,過去用溴代十五烷基吡啶作為乳化劑,因它是堿性物質,在堿性下易混入丁酯相。而現(xiàn)在改用十二烷基磺酸鈉,是酸性物質,在堿性下留在水相,成品色澤有所改進。去乳化劑的選擇方法46五、萃取方式和理論收的率的計算
工業(yè)上萃取操作包括三個步驟:1、混和:料液和萃取劑充分混和形成乳濁液,生物物質自料液轉入萃取劑中?;旌屯ǔT跀嚢韫拗羞M行;也可以將料液和萃取劑以很高的速度在管道內混和,湍流程度很高,稱為管道萃??;也有利用在噴射泵內渦流混和進行萃取的,稱為噴射萃取。2、分離將乳濁液分成萃取相和萃余相。通常利用離心機。也有將混和分離同時在一個設備內完成的。3、溶劑回收可利用蒸餾的方式。五、萃取方式和理論收的率的計算工業(yè)上萃取操作包47對于利用混和-分離器的萃取過程,按其操作方式分類,可以分為單級萃取和多級萃取,后者又可以分為錯流萃取和逆流萃取,還可以將錯流和逆流結合起來操作。
對于利用混和-分離器的萃取過程,按其操作方48下面討論各種萃取操作的理論收得率的計算方法。在計算中假定萃取相和萃余相能很快達到平衡,即每個級都是理論級,且兩相完全不互溶,而能完全分開。下面討論各種萃取操作的理論收得率的計算方法。49(一)、單級萃?。ㄒ唬渭壿腿?0(二)、多級錯流萃取特點:每級都加新鮮溶劑,溶劑消耗大,萃取液濃度低,但萃取完全。(二)、多級錯流萃取特點:每級都加新鮮溶劑,51溶劑萃取法課件52
例如:在一次萃取中,應用一定量之萃取劑,令萃取因數(shù)E=4,則末被萃取的分率為20%、但如將該量之萃取劑,等分成兩次萃取,則E=2,末被萃取的分率為11%。由此可見,萃取劑用量一定時,萃取次數(shù)愈多,萃取愈完全。例如:在一次萃取中,應用一定量之萃取劑,令萃53溶劑萃取法課件54(三)、多級逆流萃取多級逆流萃取中,在第一級中加入料液,并逐漸向下一級移動,而在最后一級中加入萃取劑,并逐漸向前一級移動。料液移動的方向和萃取劑移動的方向相反,故稱為逆流萃取(圖19—14)。在逆流萃取中,只在最后一級中加入萃取劑,故和錯流萃取相比,萃取劑之消耗量較少,因而萃取液平均濃度較高。(三)、多級逆流萃取多級逆流萃取中,在第一級55溶劑萃取法課件56如求取多級逆流萃取的理論收得率,設共有n級,圖18—15中每一方框代表一級,包括一個混和器和一個分離器。如求取多級逆流萃取的理論收得率,設共有n級,57(四)、萃取計算諾模圖生化物質萃取分離、濃縮過程的主要指標:產(chǎn)物從一相轉入另一相的完全程度、濃縮倍數(shù)以及萃取的選擇性等。決定因素:所用的有機溶劑,水相pH值、萃取溫度、相的體積比,設備效率等。(四)、萃取計算諾模圖生化物質萃取分離、濃58
為了便于選擇合理的萃取條件和相應的設備,必須恰當?shù)胤治鲋饕蛩貙^程的影響。則可利用未被萃取分率、濃縮倍數(shù)m,水相pH和使用設備的理論級數(shù)n定量連結的諾模圖來完成。主要可通過下列關聯(lián)式進行計算:
從上面三式分析可見,主要是求取在一定溫度下分配系數(shù)K和溶液pH的關系(m和n是可以任選的),然后通過電子計算機運算即可描點繪圖。為了便于選擇合理的萃取條件和相應的設備,必須59溶劑萃取法課件60
諾模圖的應用:設有三種萃取設備,A.兩級逆流混合離心分離設備,每一級混和器的效率取為0.9,則該設備相當于1.8個理論級,即n=1.8;B.盧懷斯特三室離心萃取機,每一室的效率取為0.7,則設備相當于n=2.1;C.多級離心萃取機,它相當于五個理論級n=5。如規(guī)定未被萃取的分率Φ為2%,則在pH2.0和3.0萃取時,相應的濃縮倍數(shù)見表:諾模圖的應用:設有三種萃取設備,A.兩級逆61
從表18—4可見,在pH2萃取時,濃縮倍數(shù)的計算值在5.0以上,但實際值卻在2.5—3.0之間,即實際溶劑用量不能少于濾液體積的1/3,這是由于丁酯體積減少時,在相分界面上,每單位面積乳化雜質的量將大大增加,因而乳化嚴重,Φ值就要超過原來規(guī)定的2%。從表18—4可見,在pH2萃取時,濃縮倍62
實踐表明,在pH2.0萃取青霉素時,主要損失不在于廢水中青霉素剩余量,而是它的破壞、水相中因乳化而夾帶丁酯,以及渣子中帶走。因此pH2.0萃取時,多級萃取設備和兩級逆流混合離心分離設備相比,顯不出優(yōu)越性。但在pH3.0萃取,多級萃取設備就較優(yōu)越,因為濃縮倍數(shù)可達5-7,雜質析出較少,乳濁液較易破壞,青霉素破壞也較少(在pH為2.0時破壞速度要比pH為3.0時高出6倍),選擇性也增大,丁酯相中雜質減少(見圖18—18和表18—5)。所以利用多級萃取設備在pH為3.0下萃取對收率、質量都是有利的。實踐表明,在pH2.0萃取青霉素時,主要損失63溶劑萃取法課件64溶劑萃取法課件65六、離子對/反應萃取上述液-液萃取屬于物理萃取,其應用的限制因素:1、發(fā)現(xiàn)一個對目標溶質分配系數(shù)足夠高的溶劑是比較困難的。
2、用有機溶劑萃取弱電解質(有機酸或有機堿)時都要調節(jié)溶液的pH使其小于pKa(對有機酸)或大于pKb(對有機堿),這樣會影響目標溶質的穩(wěn)定性。因此,啟發(fā)人們尋找新的萃取體系。六、離子對/反應萃取上述液-液萃取屬于物理萃66(一)一般介紹
離子對/反應萃取:使目標溶質與溶劑通過絡合反應、酸堿反應或離子交換反應生成可溶性的復合的絡合物,易從水相轉移到有機溶劑萃取系統(tǒng)中。
(一)一般介紹離子對/反應萃?。菏鼓繕巳苜|與67(1)有機磷類萃取劑
在類似的條件下,用有機磷類化合物萃取弱的有機酸比醋酸丁酯等碳氧類萃取劑分配比要高很多。典型的磷類萃取劑最早用于金屬萃取,它們有:磷酸三丁酯(TBP),氧化三辛基膦(TOPO)和二-2-乙基己基磷酸(DEHPA),其分子式如下:主要有兩類萃取劑:(1)有機磷類萃取劑主要有兩類萃取劑:68(2)胺類萃取劑用溶解在稀釋劑中長鏈脂肪酸從水溶液中萃取帶質子的
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