月季的花藥培養(yǎng)課件

月季的花藥培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)花中皇后月季又稱(chēng)“月月紅”，自然花期5至11月，開(kāi)花連續(xù)不斷，通常扦插就可以成活。

花中皇后月季又稱(chēng)“月月紅”，自然花期5至11月，知識(shí)回顧單倍體育種的過(guò)程？花藥離體培養(yǎng)（N）單倍體植株（N）秋水仙素處理，使染色體翻倍植株（2N）特點(diǎn)：1明顯縮短育種年限2后代植株都為純合子。正常植株（2N）知識(shí)回顧單倍體育種的過(guò)程？花藥離體培養(yǎng)（N）單倍體植株（N）花的結(jié)構(gòu)一、課題背景花的結(jié)構(gòu)一、課題背景花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉（一）被子植物的花粉發(fā)育1雄蕊一、基礎(chǔ)知識(shí)2花粉的概念:由花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成的單倍體的生殖細(xì)胞.花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉（一）被子植物的花粉發(fā)育1花粉發(fā)育過(guò)程花粉發(fā)育過(guò)程小孢子母細(xì)胞花粉母細(xì)胞小孢子減數(shù)分裂有絲分裂花粉管細(xì)胞核生殖細(xì)胞核有分絲裂精子1個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞生殖細(xì)胞4個(gè)4個(gè)4個(gè)4個(gè)4個(gè)8個(gè)（小孢子四分體時(shí)期單核居中期單核靠邊期雙核期）小孢子母細(xì)胞花粉母細(xì)胞小孢子減數(shù)分裂有絲分裂花粉管細(xì)胞核生殖雌蕊的結(jié)構(gòu)雌蕊的結(jié)構(gòu)活動(dòng)1：閱讀“被子植物的花粉發(fā)育”，回答下列問(wèn)題：

1．花粉是___倍體的_______細(xì)胞.

被子植物的花粉是在

中由

經(jīng)過(guò)

分裂形成的。

2．花粉的發(fā)育要經(jīng)歷不同的時(shí)期：

減數(shù)單生殖（

）分裂（

）分裂小孢子母細(xì)胞（2n）（

）時(shí)期（n）單核（

）期（n）雙核期（）細(xì)胞核（n）（

）細(xì)胞核（n）（

）細(xì)胞（n）（）細(xì)胞（n）（

）個(gè)精子(n)單核（

）期（n）（）分裂減數(shù)小孢子四分體靠邊有絲居中生殖營(yíng)養(yǎng)花粉管2生殖有絲花藥花粉母細(xì)胞基礎(chǔ)知識(shí)活動(dòng)1：閱讀“被子植物的花粉發(fā)育”，回答下列問(wèn)題：1．（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化叢芽再分化叢芽誘導(dǎo)生根體細(xì)胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過(guò)程中，某些細(xì)胞在形態(tài)上轉(zhuǎn)變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結(jié)構(gòu)，發(fā)育過(guò)程亦與合子胚類(lèi)似原因：培養(yǎng)基中的激素種類(lèi)及濃度配比（二）產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化①不選擇單核期之前花藥原因：花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎；②不選擇單核期之后花藥原因：花瓣開(kāi)始松動(dòng)，給材料消毒帶來(lái)困難困難；③挑選單核期花藥方法：應(yīng)當(dāng)選擇完全未開(kāi)放的花蕾，菌少，易消毒。（三）影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇：⑴不同種類(lèi)植物的誘導(dǎo)成功率不同。⑵同一種植物，親本植株的生理狀況對(duì)誘導(dǎo)成功率有直接影響。⑶合適的花粉發(fā)育時(shí)期：花期早期時(shí)的花藥最佳。⑷選擇最合適的花粉發(fā)育時(shí)期①不選擇單核期之前花藥原因：花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎；（三）影花藥培養(yǎng)所采用的培養(yǎng)基各成分中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的水平和配比起決定作用。⑴誘導(dǎo)愈傷組織或胚狀體產(chǎn)生的培養(yǎng)基：廣泛使用2，4-D、IAA；⑵誘導(dǎo)分化的培養(yǎng)基常除去2，4-D而以IBA代之。親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理、接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定的影響。2、培養(yǎng)基的組成：3、其他因素：花藥培養(yǎng)所采用的培養(yǎng)基各成分中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的水平和為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難？答：花瓣松動(dòng)后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來(lái)困難。

為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難？討論：為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難？答：花瓣松動(dòng)后1.選擇花藥一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。2.最常用的方法：某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采用焙花青—鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。三、實(shí)驗(yàn)操作（一）材料的選取醋酸洋紅法1.選擇花藥一般通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育花蕾無(wú)菌水清洗吸干表面水分0.1％的氯化汞溶液2-4min無(wú)菌水清洗3-5次70％的酒精浸泡30s1.將花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30s2.無(wú)菌水清洗3.無(wú)菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4.放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2~4min（也可用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液）5.無(wú)菌水沖洗3~5次（二）材料的消毒花蕾無(wú)菌水清洗吸干表面水分0.1％的氯化汞溶液2-4mi

滅菌后花蕾，要在無(wú)菌條件下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。

在剝離花藥時(shí)，要盡量不損傷花藥（否則接種后，容易從受傷部位產(chǎn)生二倍體的愈傷組織），同時(shí)還要徹底去除花絲，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。（三）接種和培養(yǎng)滅菌后花蕾，要在無(wú)菌條件下除去萼片和花瓣，并立即將花

經(jīng)過(guò)20-30天培養(yǎng)后，會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開(kāi)裂，長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一步分化出再生植株。

每瓶接種花藥7-10個(gè)，溫度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。

如果花藥開(kāi)裂釋放出胚狀體，則一個(gè)花藥內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株，必須在花藥開(kāi)裂后盡快將幼小植株分開(kāi)，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開(kāi)。經(jīng)過(guò)20-30天培養(yǎng)后，會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開(kāi)裂，長(zhǎng)出愈傷組織

對(duì)培養(yǎng)出來(lái)的植株做進(jìn)一步的鑒定和篩選。因?yàn)樵诨ㄋ幣囵B(yǎng)中，特別是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株，常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。對(duì)培養(yǎng)出來(lái)的植株做進(jìn)一步的鑒定和篩選。因?yàn)樵诨ㄋ幣囵B(yǎng)四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1、選材是否恰當(dāng)

選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。應(yīng)學(xué)會(huì)通過(guò)顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。

2、無(wú)菌技術(shù)是否過(guò)關(guān)

如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，說(shuō)明某些操作步驟，如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問(wèn)題。3、接種是否成功

如果接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體，花藥培養(yǎng)的第一步就成功了。要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便愈傷組織或胚狀體進(jìn)一步分化成再生植株。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1、選材是否恰當(dāng)選材是否成功是基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作被子植物的花粉發(fā)育花粉其他因素影響因素花粉發(fā)育經(jīng)歷的時(shí)期月季的花藥培養(yǎng)材料與培養(yǎng)基材料的選取產(chǎn)生途徑結(jié)果分析與評(píng)價(jià)消毒接種和培養(yǎng)課堂小結(jié)基礎(chǔ)知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作被子植物的花粉發(fā)育花粉其他因素影響因素花粉發(fā)植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較項(xiàng)目相同點(diǎn)不同點(diǎn)植物組織培養(yǎng)技術(shù)離體的植物組織經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再分化成叢芽，誘導(dǎo)出根，然后進(jìn)行移栽。外植體為體細(xì)胞，染色體數(shù)無(wú)需加倍?；ㄋ幣囵B(yǎng)技術(shù)取材為花藥，培養(yǎng)的為單倍體幼苗，植株弱小，高度不育，必須用秋水仙素處理，使染色體加倍，恢復(fù)正常植株的染色體數(shù)，而且為純種。植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較項(xiàng)目相同點(diǎn)不同點(diǎn)植物組織自主測(cè)評(píng)7．基因型為AaBb的水稻（24條染色體）的花藥通過(guò)無(wú)菌操作，接入試管后，在一定條件下培養(yǎng)形成試管苗。（1）愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)，愈傷組織形成中，必須從培養(yǎng)基中獲得

、

和小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。（2）要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有

和

兩種激素。（3）愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根，再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過(guò)程必須給予光照，其原因是①_________________

②

。（4）試管苗的細(xì)胞核中含有

條脫氧核苷酸鏈。（5）培育成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有。

水無(wú)機(jī)鹽細(xì)胞分裂素試管苗的生長(zhǎng)發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)來(lái)自葉綠體利用光能制造的有機(jī)物24AB、Ab、aB、ab生長(zhǎng)素葉綠素的形成需要光自主測(cè)評(píng)7．基因型為AaBb的水稻（24條染色體）的花藥通過(guò)下圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題：課堂練習(xí):下圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，請(qǐng)據(jù)圖回答(1)選用的材料合適與否是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，一般來(lái)說(shuō)選用

期的花粉可提高成功率。選擇花粉時(shí)，一般要通過(guò)

來(lái)確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時(shí)需要對(duì)花粉的細(xì)胞核進(jìn)行染色，常用的染色劑是

。(2)上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中

。

(3)胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于愈傷組織的細(xì)胞排列疏松無(wú)規(guī)則，是一種高度

的薄壁細(xì)胞，胚狀體與