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高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察
染色劑的染色與顯微鏡的觀察
顯微鏡觀察的是透射光而不是反射光,所以對(duì)于大部分無色半透明的生物組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)來說,需用特殊的方法制片染色處理后才能用顯微鏡觀察清楚。而且生物材料很少是單層細(xì)胞結(jié)構(gòu)的,故還需要進(jìn)行切片或壓片、涂片等處理操作。如果觀察經(jīng)過染色劑染色的生物材料,如觀察洋蔥根尖分生區(qū)有絲分裂實(shí)驗(yàn)時(shí)要用較強(qiáng)的光照。而不經(jīng)染色的生物材料在顯微鏡下觀察時(shí),光線盡可能的較暗些。如觀察質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)時(shí),如果光線太強(qiáng),不容易觀察到液泡。高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察堿性染料與染色體的觀察
生物實(shí)驗(yàn)中所用的染料,按其來源可分為天然染料和人工染料兩大類。人工染料根據(jù)其主要化學(xué)成分的性質(zhì),又分成堿性染料、酸性染料和中性染料三大類,其堿性、酸性和中性是由染料中有色部分的性質(zhì)所決定的。若染料的有色部分為陰離子,即為“酸性”染料;若染料的有色部分為陽離子,則稱為“堿性”染料;若染料的陰、陽離子均有顏色,則稱為“中性”染料。染色體(質(zhì))是細(xì)胞核內(nèi)容易被堿性染料染成深色的物質(zhì)。高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察在觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中,常用龍膽紫溶液使染色體染成紫色,也使用醋酸洋紅溶液使染色體著紅色。二者染色時(shí)間都不可過長。1%~2%龍膽紫溶液俗稱紫藥水,是人們所熟悉的外用藥。龍膽紫溶液的配制是將龍膽紫溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的醋酸溶液中配制而成。染色中使用的龍膽紫溶液略呈酸性,
l%醋酸洋紅本身也是酸性,同樣具有堿性的助色基團(tuán)。配方中的醋酸是染料的溶劑,在染色時(shí)增加了細(xì)胞的通透性,利于染液的離子進(jìn)入細(xì)胞而使細(xì)胞核內(nèi)的染色體著色。此外,改良苯酚品紅溶液也可使染色體著色。應(yīng)用:用高倍鏡觀察細(xì)胞的有絲分裂等。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察DNA和RNA的染色鑒定甲基綠和吡羅紅是混合染色劑。甲基綠是具有金屬光澤的綠色微結(jié)晶或亮綠色粉末。溶于水,顯藍(lán)綠色。稍溶于乙醇,不溶于戊醇。吡咯在鹽酸作用下聚合成為吡羅紅,可與RNA結(jié)合呈現(xiàn)紅色。這兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可以觀察到DNA和RNA在細(xì)胞中的分布情況。注意:①鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)人細(xì)胞,同時(shí)使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。②2種染色劑要混合使用,而且要現(xiàn)配現(xiàn)用。高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察活體染色劑健那綠和亞甲基藍(lán)健那綠染液是專一性的線粒體的活細(xì)胞染料,線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)(即有色狀態(tài))呈藍(lán)綠色,而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原成為無色狀態(tài)。因此可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無色。線粒體能在健那綠染液中維持活性數(shù)小時(shí),通過染色,可以在高倍顯微鏡下觀察到生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察亞甲基藍(lán)是細(xì)胞的活體染色劑,0.01%亞甲基藍(lán)對(duì)細(xì)胞無毒害,亞甲基藍(lán)是一種有機(jī)物小分子,在水中離解成亞甲基藍(lán)的陽離子(呈藍(lán)色)和氯離子(無色),亞甲基藍(lán)陽離子可通過主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入到細(xì)菌體內(nèi),在酶的作用下被細(xì)菌分解成無色的小分子,使藍(lán)色褪去。褪色程度越大,說明細(xì)菌越多,水污染越嚴(yán)重,因此可用于水污染程度指示劑。此外,亞甲基藍(lán)是氧化還原指示劑,在有氧的環(huán)境中藍(lán)色褪去,可用作氧氣檢測(cè)劑。高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察臺(tái)盼藍(lán)使死細(xì)胞染成藍(lán)色
原理:正常的活細(xì)胞,細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整具有選擇透過性能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi);死細(xì)胞或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞,胞膜的通透性增加,可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。應(yīng)用:區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞;檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性。另有用紅墨水鑒定種子發(fā)芽率實(shí)驗(yàn)同理。高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察蘇丹紅與脂肪鑒定
蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ是人工合成的蘇丹紅系列染料。常作為一種工業(yè)染料,被廣泛用于如溶劑、油、蠟、汽油的增色以及鞋、地板等增光。近年有不法分子用于食品添加劑,對(duì)人體有害。蘇丹紅為親脂性化合物。在脂肪類物質(zhì)中的溶解度大于在其他溶劑(如酒精、丙酮)中的溶解度時(shí),染料顆粒便大量進(jìn)入脂肪類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)內(nèi),在脂滴中溶解積累,并吸附在脂肪顆粒結(jié)構(gòu)上,蘇丹Ⅲ遇脂肪顯橘黃色,蘇丹Ⅳ遇脂肪顯紅色。蘇丹Ⅳ染液與脂肪的親和力比較強(qiáng),所以染色時(shí)間應(yīng)比蘇丹Ⅲ短。三(山)橘子丹四(是)紅高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察斐林試劑檢測(cè)可溶性還原糖
原理:還原糖+斐林試劑(加熱后)→磚紅色沉淀注意:斐林試劑的甲液和乙液要等量混合均勻后方可使用,而且是現(xiàn)用現(xiàn)配,條件需要水浴加熱。應(yīng)用:檢驗(yàn)和檢測(cè)某糖是否為還原糖;不同生物組織中含糖量高低的測(cè)定;在醫(yī)學(xué)上進(jìn)行疾病的診斷,如糖尿病、腎炎。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察菲林試劑與雙縮尿試劑的比較高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察DNA的染色與鑒定
染色原理:DNA+甲基綠→綠色應(yīng)用:可以顯示DNA在細(xì)胞中的分布。鑒定原理:DNA+二苯胺→藍(lán)色應(yīng)用:用于DNA粗提取實(shí)驗(yàn)的鑒定試劑。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察一些化學(xué)物質(zhì)的檢驗(yàn)方法高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察吲哚酚試劑與維生素C溶液呈褪色反應(yīng)
原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚鈉,其水溶液為藍(lán)紫色,維生素C具有還原性,能將其褪色。應(yīng)用:可用于檢測(cè)食品營養(yǎng)成分中是否含有維生素C。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察亞硝酸鹽的檢測(cè)出現(xiàn)玫瑰紅
原理:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。應(yīng)用:將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較,可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察脲酶的檢測(cè)
原理:細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),使PH升高,從而使酚紅指示劑變紅。應(yīng)用:在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細(xì)菌后,看指示劑變紅與否可以鑒定這種細(xì)菌能否分解尿素。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察剛果紅檢測(cè)纖維素分解菌
原理:剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí),剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后,剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察伊紅美藍(lán)檢測(cè)大腸桿菌
原理:在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上,大腸桿菌的代謝產(chǎn)物(有機(jī)酸)與伊紅美藍(lán)結(jié)合使菌落呈現(xiàn)黑色。應(yīng)用:用濾膜法測(cè)定水中大腸桿菌的含量。
高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察
例題分析
例1只有在保持細(xì)胞活性的條件下,才能顯示細(xì)胞中某物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)是()A.蘇丹Ⅲ染色劑觀察花生種子子葉細(xì)胞中的脂肪B.龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的有絲分裂C.健那綠(詹納斯綠B)染色觀察動(dòng)物細(xì)胞的線粒體D.甲基綠、派洛寧(吡羅紅)染色觀察動(dòng)物細(xì)胞中的DNA和RNAC高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察解析:本題考查有關(guān)染色劑的使用。蘇丹Ⅲ染色劑用于觀察花生子葉細(xì)胞中的脂肪顆粒。觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)在解離時(shí)細(xì)胞已死亡,甲基綠、吡羅紅用于觀察DNA和RNA健那綠染液是專一性的線粒體的活細(xì)胞染料,其染色原理是:線粒體中細(xì)胞色素氧化酶使染料保持氧化狀態(tài)(即有色狀態(tài))呈藍(lán)綠色,而在周圍的細(xì)胞質(zhì)中染料被還原成為無色狀態(tài)。因此可以使活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無色。所以只有在保持細(xì)胞活性的條件下,才能顯示細(xì)胞中線粒體結(jié)構(gòu)。答案為C。高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察例2下表是根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,所選用的試劑與預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確的是實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑噭╊A(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果A觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布斐林試劑吡羅紅斐林試劑將DNA染成綠色,吡羅紅將RNA染成紅色B檢測(cè)植物組織中的脂肪雙縮脲試劑脂肪顆粒被染成紫紅色C檢測(cè)植物組織中的葡萄糖甲基綠葡萄糖與甲基綠作用,生成綠色沉淀D觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂醋酸洋紅染色體被染成紫紅色D高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察解析:本題主要考查生物教材中不同實(shí)驗(yàn)的染色或某些顏色變化。植物脂肪的鑒定用蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)試劑呈橘黃色(或紅色);觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布應(yīng)該選用甲基綠和吡羅紅染色劑,甲基綠將DNA染成綠色,吡羅紅將RNA染成紅色;葡萄糖用斐林試劑鑒定呈現(xiàn)磚紅色沉淀。答案為D高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察例3使用染色劑染色是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的方法,某同學(xué)對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)做了如下歸納:實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)象染色劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果①花生子葉細(xì)胞的脂肪顆粒蘇丹Ⅲ脂肪顆粒被染成橘黃色②人口腔上皮細(xì)胞中的DNA和RNA分布吡羅紅甲基綠細(xì)胞內(nèi)染成綠色的面積顯著大于染成紅色的面積③人口腔上皮細(xì)胞中的線粒體健那綠線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色④洋蔥根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂龍膽紫間期細(xì)胞不著色,分裂期細(xì)胞染色體著色高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察(1)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果的歸納,正確的有_______(實(shí)驗(yàn)序號(hào))。(2)實(shí)驗(yàn)②和實(shí)驗(yàn)④在染色之前,都使用了一定濃度的鹽酸處理。其中,實(shí)驗(yàn)②用鹽酸可改變______通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)④用鹽酸與酒精混合,對(duì)材料進(jìn)行解離。在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)操作中,都要注意鹽酸濃度,處理材料時(shí)的溫度和______。(3)健那綠使線粒體著色與線粒體內(nèi)膜的酶系統(tǒng)有關(guān)。線粒體內(nèi)膜上的酶主要催化有氧呼吸的第______階反應(yīng),該反應(yīng)變化是____________。①③
細(xì)胞膜
時(shí)間三
[H]與氧結(jié)合形成水,同時(shí)釋放大量的能量高中生物實(shí)驗(yàn)的染色與顏色觀察解析:使用甲基綠和吡羅紅進(jìn)行染色體色時(shí),甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。DNA主要存在于細(xì)胞核,而RNA存在于細(xì)胞質(zhì)中,因此應(yīng)該是呈現(xiàn)紅色的面積較大。使用龍膽紫對(duì)洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),染色體被染色,在間期細(xì)胞核被染成深色,在分裂期可看到染色
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