藥典培訓-課件

2010版藥典培訓匯總藥典培訓--課件1目錄1、凡例的增修訂情況2、各論的增修訂情況3、制劑通則增修訂4、附錄通用檢測方法5、指導原則目錄1、凡例的增修訂情況2凡例的增修訂情況總則一、《中華人民共和國藥典》簡稱《中國藥典》，依據(jù)《中華人民共和國藥品管理法》組織和頒布實施。《中國藥典》有一部、二部、三部及其增補本組成，內(nèi)容分別包括凡例、正文和附錄。本部為《中國藥典》二部。二、國家藥品標準由凡例與正文及其引用的附錄共同構(gòu)成。本部藥典收載的凡例、附錄對藥典以外的其他化學藥品國家標準具同等效力。五、正文中引用的藥品系指本版藥典收載的品種，其質(zhì)量應符合相應的規(guī)定。凡例的增修訂情況總則3凡例的增修訂情況總則六、正文所設(shè)各項規(guī)定是針對符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的產(chǎn)品而言，任何違反GMP或未經(jīng)批準添加物質(zhì)所生產(chǎn)的藥品，即使符合《中國藥典》或按照《中國藥典》沒有檢出其添加物質(zhì)或相關(guān)雜質(zhì)，亦不能認為其符合規(guī)定。凡例的增修訂情況總則4凡例的增修訂情況正文八、正文系根據(jù)藥物自身的理化與生物學特性，按照批準的處方來源、生產(chǎn)工藝、貯藏條件等所制定的、用以檢測藥品質(zhì)量是否達到用藥要求并衡量其質(zhì)量是否穩(wěn)定均一的技術(shù)規(guī)定。凡例的增修訂情況正文5凡例的增修訂情況附錄十、附錄主要收載制劑通則、通用檢測方法和指導原則。制劑通則系按照藥物劑型分類，正對劑型特點所對頂?shù)幕炯夹g(shù)要求；通用檢測方法系各正文品種進行相同檢查項目的檢測時所采用的統(tǒng)一的設(shè)備、程序、方法及限度；指導原則系為執(zhí)行藥典、考察藥品質(zhì)量、起草與復核藥品標準等所制定的指導性原則。凡例的增修訂情況附錄6凡例的增修訂情況項目與要求十四、制法項下主要記載藥品的重要工藝要求和質(zhì)量管理要求。（1）所有藥品的生產(chǎn)工藝應經(jīng)驗證，并經(jīng)國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門批準，生產(chǎn)過程均應符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的要求。凡例的增修訂情況項目與要求7十七、（第二段）對于生產(chǎn)過程中引入的有機溶劑，應在后續(xù)的生產(chǎn)環(huán)節(jié)予以有效去除。除正文已明確列有“殘留溶劑”檢查的品種必須依法進行該項檢查外。其他未在“殘留溶劑”項下明確列出的有機溶劑與未在正文中列出有此項檢查的品種，如生產(chǎn)過程中引入或產(chǎn)品中殘留有機溶劑，均應按本版藥典附錄“殘留溶劑測定法”檢查并應符合相應溶劑的限度規(guī)定。藥典培訓--課件8各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：含量限度為了能正確反映藥品的含量，一般應換算成干燥品或無水物或熾灼品計的含量。按檢查項下所規(guī)定的“干燥失重”或“水分”，分別寫成（1）“按干燥品計算”或（2）“按無水物計算”；如含揮發(fā)性有機溶劑且有機溶劑計量明顯影響含量結(jié)果時，也寫明扣除，（3）“按無水物與無溶劑物計算”，但所含揮發(fā)性有機溶劑如已包括在干燥失重之內(nèi)，則僅寫明“按干燥品計算”而不再扣除溶劑。各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：含量限度9原料藥：性狀色：樣品的色澤應按照白色、類白色、微黃色、淡黃色、淺黃色、黃色這樣的順序排列（以黃色舉例），如果兩個色階相鄰，可用“或”來描述，如類白色或微黃色結(jié)晶性粉末。如色階之間相隔兩個以上，應采用“至”來描述，如類白色至淡黃色結(jié)晶性粉末。引濕性：更多品種中增加了對引濕性的描述（中國藥典2005年版二部附錄XIXJ“藥物引濕性指導原則”）。實驗時是關(guān)鍵信息。各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：性狀各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀10各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：溶解性對收錄溶劑進行了適當?shù)娜∩幔瓌t是首選標準中用到的溶劑重結(jié)晶溶劑；選擇常用試劑，考慮環(huán)保因素；對于難溶的樣品，應考慮特殊溶劑，如酸性溶液和堿性溶液或二甲亞砜和二甲基甲酰胺登對試驗有幫助的溶劑。今后應加強對多晶型藥物不同晶型溶解度的考察。各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：溶解性11各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：熔點一般情況下刪去了大部分200℃以上且熔融分解的品種的熔點。有些存在多晶現(xiàn)象的樣品在研磨過程中容易造成晶型轉(zhuǎn)變，對于這類原料應注意觀察轉(zhuǎn)晶過程是否穩(wěn)定重現(xiàn)，轉(zhuǎn)晶是否完全，熔點的測定是否穩(wěn)定，如穩(wěn)定應定入標準；否則可考慮刪除熔點項。應關(guān)注晶型和藥效的關(guān)系。如確需利用熔點作為控制晶型的手段，則標準中應收入。各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：熔點12各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：比旋度主要區(qū)別比旋度和旋光度相個項目。比旋度作為光學異構(gòu)體的物理性質(zhì)，列在“性狀”項下；旋光度作為檢查外消旋體混合物中兩對映異構(gòu)體的比例的簡易方法，列在“檢查”項下，限度一般定位+0.1°—-0.1°。比旋度測定時所選擇的溶劑盡量與歐美藥典或相關(guān)文獻一致，使最終限度具備可參考性，另外關(guān)于測定溫度，附錄要求為20℃，如果測定溫度不同于20℃，應在個論項下明確測定溫度。各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：比旋度13各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：吸收系數(shù)并非所有品種均收載吸收系數(shù)。通常在同品種制劑的含量測定、溶出度和含量均勻度測定時如果采用吸收系數(shù)法測定時，測定原料的吸收系數(shù)。測定吸收系數(shù)應采用對照品級的原料藥。上版多為定值，現(xiàn)版一般修訂為范圍。例：煙酰胺（增加此項目）各論的增修訂情況(1)-名稱與性狀原料藥：吸收系數(shù)14各論的增修訂情況(2)-鑒別鑒別常用方法：化學反應、UV、IR、色譜法等。收載原則：要求專屬性較強、重現(xiàn)性好、靈敏度高，以及操作簡便、快速等。毒性大的、放射性強的、有悖于環(huán)保的化學反應，刪除。衍生化物熔點鑒別反應，刪除。部分品種列出了兩種組合供選擇。原料藥：一般收入3-5個鑒別，一般情況下紅外光譜是必不可少的，兼顧功能團的化學鑒別和光譜及色譜鑒別。各論的增修訂情況(2)-鑒別15各論的增修訂情況(3)-安全性檢查有關(guān)物質(zhì)-----關(guān)于分離及檢測方法流動相：在保證靈敏度的前提下，一般以恒組成洗脫為主；必要時可采用梯度洗脫方式。流動相以揮發(fā)性流動相為好，一般情況下盡量不加離子對試劑。檢測器：一般采用UV。各論的增修訂情況(3)-安全性檢查有關(guān)物質(zhì)-----關(guān)于分離16各論的增修訂情況(3)-安全性檢查關(guān)于系統(tǒng)適用性試驗要求------分離度（1）采用雜質(zhì)對照品；（2）采用混合對照品（純度較差的原料藥）的方法（3）通過化學處理或其他方式產(chǎn)生雜質(zhì)，應注意反應條件的優(yōu)化，按面積歸一化計算主雜質(zhì)占5%-10%為佳。（4）采用其他方法制備系統(tǒng)適用性試驗用樣品。采用結(jié)構(gòu)性質(zhì)相近的標志性物質(zhì)。（5）如無法長期獲得該雜質(zhì)對照品，采用相對保留時間定位。如能在標準中列出主成分的保留時間、色譜柱尺寸，可增強此法的可操作性。但應注意色譜條件的耐用性考察。各論的增修訂情況(3)-安全性檢查關(guān)于系統(tǒng)適用性試驗要求--17各論的增修訂情況(3)-安全性檢查關(guān)于系統(tǒng)適用性試驗要求-----報告限通過規(guī)定小于對照溶液主峰面積的一定量的色譜峰可忽略不計，這樣可保證積分參數(shù)設(shè)置的合理性和一致性。例：甘露醇。在供試品溶液的色譜圖中，任何小于對照液主峰面積的0.05倍的峰可忽略不計各論的增修訂情況(3)-安全性檢查關(guān)于系統(tǒng)適用性試驗要求--18各論的增修訂情況(3)-安全性檢查關(guān)于定量方法不加校正因子的主成分自身對照法：大多數(shù)品種采用了這種方法對雜質(zhì)進行控制。峰面積歸一化法：在2010版化學藥品中很少使用，在保證0.1%或0.05%、甚至更低含量的雜質(zhì)能被檢出的情況下，主成分濃度就會很高，如采用該法應考慮最小組分和最大組分的檢測響應是否在主成分的線性范圍內(nèi)。謹慎使用。各論的增修訂情況(3)-安全性檢查關(guān)于定量方法19各論的增修訂情況(3)-安全性檢查殘留溶劑本版藥典加強了對殘留溶劑的檢查更多地采用了頂空進樣方式和程序升溫梯度洗脫的方法部分品種采用標準加入法，該方法可提高方法的準確度各論的增修訂情況(3)-安全性檢查殘留溶劑20各論的增修訂情況(4)---含量測定原料藥含量測定變化的主要特點：（1）非水滴定法革除汞鹽（2）終點變色不明顯的指示劑法改電位滴定法（3）紫外或滴定法或重量法等改HPLC各論的增修訂情況(4)---含量測定原料藥含量測定變化的主要21各論的增修訂情況(4)---含量測定1、容量分析原料藥純度98.5%以上時，首選容量分析法。本次藥典修訂中含量測定項最大的變化就是非水滴定中汞鹽的革除。在非水滴定中，當?shù)味ㄓ袡C堿氫鹵酸鹽藥物時，因氫鹵酸生成難離解的鹵化汞，以排除氫鹵酸的干擾。各論的增修訂情況(4)---含量測定1、容量分析22各論的增修訂情況(4)---含量測定加乙酸酐的高氯酸電位滴定法：通過溶劑的選擇，使終點突躍增大從而取代汞鹽的使用。適量乙酸酐的加入使溶質(zhì)的堿性增強，滴定突躍明顯增加。通常用冰醋酸-乙酸酐的溶劑組合，調(diào)整兩者比例，達到目的。當樣品在冰醋酸中溶解性差時，可采用甲酸等其他溶劑進行。各論的增修訂情況(4)---含量測定23各論的增修訂情況(4)---含量測定以醇類為溶劑的氫氧化鈉電位滴定法：凡是可溶于或略溶于醇類溶劑的品種，可優(yōu)先考慮使用該方法。通常醇類溶劑的加入量以30-70ml為宜，鹽酸的加入量為5ml左右，對于分子結(jié)構(gòu)中含有2分子鹽酸的藥物以及第一個突躍點足夠大的液可只加醇，不加鹽酸。各論的增修訂情況(4)---含量測定以醇類為溶劑的氫氧化鈉電24各論的增修訂情況(4)---含量測定以上量方法最重要的是與原方法進行比較，起草過程中發(fā)現(xiàn)相差較大，特別是以醇類魏溶劑的氫氧化鈉電位滴定法，高于原方法，有的會高出1.5%，應盡量解決，如不行，可依然采取原方法。各論的增修訂情況(4)---含量測定以上量方法最重要的是與原25各論的增修訂情況(4)-含量測定2、紫外分光光度法：原料藥一般避免采用UV法，必要時，采用對照品同時測定。對于吸收系數(shù)小于100的原料藥、多組分原料藥盡量避免采用UV方法。3、色譜法：對于純度略低的品種更多的關(guān)注了含量測定方法的專屬性，一般采用高效液相色譜法，一般用外標法。4、原子吸收色譜法：對于部分離子型原料藥加強了含量測定，原子吸收光譜法有更多的應用。各論的增修訂情況(4)-含量測定2、紫外分光光度法：原料藥一26制劑通則增修訂—制藥用水1、水是藥物生產(chǎn)中用量（最）大、使用（最）廣的一種輔料。2、新增一般應根據(jù)各生產(chǎn)工序或使用目的與要求選用適宜的制藥用水。藥品生產(chǎn)企業(yè)應確保制藥用水的質(zhì)量符合預期用途的要求。3、制藥用水的制備從（生產(chǎn)）系統(tǒng)設(shè)計、材質(zhì)選擇、制備過程、貯存、分配和使用均應符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的要求。制劑通則增修訂—制藥用水1、水是藥物生產(chǎn)中用量（最）大、使用274、刪除（貯缸和管道應采用適宜的方法（紫外燈管照射、加熱滅菌等）定期清洗和滅菌）制藥用水系統(tǒng)應定期進行清洗和消毒，消毒可以采用熱處理或化學處理等方法。采用的消毒方法以及化學處理后消毒劑的去除應經(jīng)過驗證。5、飲用水新增為天然水經(jīng)處理所得的水，其質(zhì)量必須符合現(xiàn)行中華人民共和國國家標準《生活飲用水衛(wèi)生標準》。刪除（為天然水經(jīng)凈化處理所得的水，其質(zhì)量必須符合中華人民共和國國家標準GB5749-85《生活飲用水衛(wèi)生標準》）6、純化水…確保使用點的水質(zhì)。刪除（可作溶劑、稀釋劑或清洗用水，一般臨用前制備）制劑通則增修訂—制藥用水4、刪除（貯缸和管道應采用適宜的方法（紫外燈管照射、加熱滅菌287、注射用水防止細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生…；可作為配制注射劑、滴眼劑等的…；為保證注射用水的質(zhì)量，應減少原水中的細菌內(nèi)毒素，（必須隨時）監(jiān)控蒸餾法制備注射用水的各生產(chǎn)環(huán)節(jié)，并防止微生物的污染。應定期清洗與消毒注射用水（制造與輸送設(shè)備，嚴防內(nèi)毒素產(chǎn)生）系統(tǒng)。注射用水的儲存方式和靜態(tài)儲存期限應經(jīng)過驗證確保水質(zhì)符合質(zhì)量要求，例如可以在（一般應在）80℃以上保溫或（65）70℃以上保溫循環(huán)或4℃以下的（無菌）狀態(tài)下存放（并在制備12小時內(nèi)使用）。8、滅菌注射用水…不含任何添加劑。制劑通則增修訂—制藥用水7、注射用水防止細菌內(nèi)毒素產(chǎn)生…；可作為配制注射劑、滴眼29制劑通則增修訂—穩(wěn)定性試驗指導原則長期試驗修訂：在溫度25℃±2℃，相對濕度60%±10%的條件下放置12個月，或在溫度30±2℃、相對濕度65%±5%的條件下放置12個月，這是從我國南方與北方氣候的差異考慮的，至于上述兩種條件選擇哪一種由研究者確定（原料與制劑增加內(nèi)容一致）。制劑通則增修訂—穩(wěn)定性試驗指導原則長期試驗修訂：30附錄通用檢測方法制藥用水1、修訂后質(zhì)量標準增二項檢查a、電導率檢查新增附錄用于檢查各種陰陽離子的污染程度b、總有機碳檢查控制有機污染（有機小分子、微生物）c、上述兩項檢查的在線檢測可對制水系統(tǒng)進行實時流程監(jiān)控附錄通用檢測方法制藥用水31附錄通用檢測方法總有機碳檢查通過測定水中的二氧化碳，間接測量水被有機物污染的程度（1）方法與原理a、氧化：燃燒、氧化劑、光照b、檢測：直接電導、薄膜電導、非色散紅外（2）對TOC測量的各種原理和方法不作任何褒貶，只強調(diào)技術(shù)要求a、能區(qū)分水中的有機碳與無機碳，并能排除無機碳的干擾b、應滿足系統(tǒng)適用性試驗要求85%＜（rss-rw）/（rs-rw）*100＜115%c、具有足夠的靈敏度（0.05mg/L）（3）TOC測量的意義控制化學污染與微生物污染附錄通用檢測方法總有機碳檢查32水電導率檢查1、對電導率儀的一般要求a、儀器的最小分辨率和讀數(shù)精度0.1μS/cmb、電導率儀須定期校正（a）采用電導標準校正電導池讀數(shù)，實測電導池常數(shù)應在規(guī)定值的±2%（b）與校正過的儀器進行間接比對2、影響制藥用水電導率測定的因素主要有溫度、大氣中的二氧化碳的溶入、水的pH值等。3、判定標準（1）純化水表1溫度與電導率限度（純化水）采用內(nèi)插法計算（2）注射用水表2溫度與電導率限度（注射用水）水電導率檢查1、對電導率儀的一般要求33水電導率檢查a、以小于測定溫度的最接近溫度所對應的電導率值極為限度值。b、調(diào)水樣（不少于100ml）溫度至25℃，劇烈攪拌，每5分鐘測一次，當變化＜0.1μS/cm時記錄讀數(shù)，讀數(shù)應不大于2.1μS/cm（合格）c、如b讀數(shù)＞2.1μS/cm，則依法測定水的pH值，由表3查得對應的電導率限度，并與b步實測值比較，如b讀數(shù)大于限度值或pH值超出5.0-7.0，則不合格表3pH值和電導率的限度（3）滅菌注射用水a(chǎn)、溫度25℃b、裝量≤10ml，限度為25μS/cmc、裝量＞10ml，限度為5μS/cm水電導率檢查a、以小于測定溫度的最接近溫度所對應的電導率值極34水電導率檢查4、TOC和電導率檢查用水（1）TOC檢查TOC＜0.1ppm電導率＜1.0μS/cm（2）電導率檢查電導率＜0.1μS/cm（3）可采用經(jīng)超純水裝置制備并經(jīng)檢驗合格的水，如仍不理想，建議再經(jīng)全玻璃重蒸。水電導率檢查4、TOC和電導率檢查用水35紫外-分光光度法1、波長校正增加了高氯酸鈥的校正（以10%高氯酸為溶劑，配制含4%氧化鈥的溶液）Λmaxnm：241.13，278.10，287.18，333.44，345.47，361.31，416.28，451.30，485.29，536.64，640.522、波長允差紫外區(qū)±1nm500nm±2nm700nm±4.8nm紫外-分光光度法1、波長校正36紅外光譜法1、原料藥鑒別遇多晶干擾（1）按規(guī)定對樣品進行預處理（重結(jié)晶與干燥）（2）采用對照品平行操作（3）采用溶液法2、對組分原料藥的鑒別

可借鑒制劑鑒別的方法在3-5個特征譜帶作為鑒別的依據(jù)。紅外光譜法1、原料藥鑒別遇多晶干擾37高效液相色譜法1、色譜法(1)常用色譜柱填料粒徑3-10μm2、柱溫（1）通常為室溫（2）以硅膠為載體的普通色譜柱，最高適用溫度不得超過60℃，一般不超過40℃。（a）提高靈敏度峰高的對數(shù)與柱溫呈線性關(guān)系（b）改善選擇性高效液相色譜法1、色譜法38高效液相色譜法3、有些色譜條件可適當調(diào)整，但流動相比例的調(diào)整有明確規(guī)定。組分比例較低者（＜50%）相對于自身的改變量不超過±30%，相當于總量的改變量不超過±10%。如±30%的相對改變量超過總量的10%，則以后者為準。4、系統(tǒng)適用性試驗（1）理論塔板數(shù)n(盡量以峰寬計算)（2）分離度R5、拖尾因子必要時，應規(guī)定拖尾因子高效液相色譜法3、有些色譜條件可適當調(diào)整，但流動相比例的調(diào)整39殘留溶劑檢測方法進行了相應的調(diào)整：（1）改變了殘留溶劑測定的習慣步驟。---對樣品存在的殘留溶劑進行定性---根據(jù)檢出對象配制相應的對照品溶液簡化對照品溶液的配制，適合批次少、殘留溶劑種類少的品種，大大降低了檢驗成本，提高工作效率（2）RART法代替RRT法-利用甲烷測定色譜系統(tǒng)的t0，用溶劑峰RART代替RRT，只受柱溫和固定相性質(zhì)的影響，避免其他色譜參數(shù)如載氣流速、柱尺寸等變化對定性的影響。殘留溶劑檢測方法進行了相應的調(diào)整：40殘留溶劑測定法---計算RART：頂空進樣甲烷氣體，記錄死時間（t0）頂空進樣供試品溶液，記錄色譜圖，按公式計算諸色譜峰的保留時間（tR）相對于正丙醇保留時間（tR（正丙醇））的相對調(diào)整保留時間（RART）；甲烷氣體的獲得與操作？----中檢所已解決（混合對照品定位）甲烷、丙酮和異丙醇殘留溶劑測定法41殘留溶劑采用標準加入法測定可以有效地排除基質(zhì)效應的影響；當標準加入法結(jié)果與內(nèi)標法結(jié)果系統(tǒng)偏差約10%（通常偏低）時，可以認為方法存在明顯的基質(zhì)效應。殘留溶劑42pH值測定法1、pH的含義2、pH值的測定3、弱緩沖液的pH測定除另有規(guī)定外，按下法測定先用苯二甲酸鹽緩沖液（pH4.01）校正儀器，1min內(nèi)pH改變＜0.05時讀數(shù)，再用硼砂緩沖液（pH9.18）校正儀器，1min內(nèi)pH改變＜0.05時讀數(shù)，取二次讀數(shù)的平均值。4、水的pH值測定加KCl適量（由制藥用水正文自行規(guī)定）pH值測定法1、pH的含義43電位滴定1、作圖法零階E-V曲線突躍部的中點或拐點所對應的滴定液體積一階導數(shù)一級微商的極值所對應的滴定液體積二階導數(shù)二級微商等于零時所對應的滴定液體積2、計算法二階導數(shù)法較一階導數(shù)法更準確，故最常用采用線性內(nèi)插法電位滴定1、作圖法44不溶性微粒檢查法1、應用對象由溶液型靜脈注射液擴大至溶液型靜脈注射液，注射用無菌粉末、注射用濃溶液及注射用無菌原料藥。2、統(tǒng)一了操作方法（1）取樣體積大于5ml取5ml小于5ml根據(jù)實際裝量取或合并成不少于25ml，每次取5ml（2）有效讀數(shù)不少于3個，取平均值計算3、儀器校正（1）標準粒子10μm相對標準偏差不大于5%（2）8μm與10μm或10μm與12μm兩個通道的差值計數(shù)/10μm通道的累計計數(shù)≥68%不溶性微粒檢查法1、應用對象由溶液型靜脈注射液擴大至溶液45不溶性微粒檢查法由于不溶性微粒光阻法測定結(jié)果僅與一定濃度范圍內(nèi)的樣品溶液呈正比關(guān)系，因此必須在標準中規(guī)定不溶性微粒檢查供試品溶液濃度。不溶性微粒檢查法46可見異物檢查法1、合并原附錄ⅨH及《可見異物檢查法補充規(guī)定》2、10ml及以下規(guī)格，每次手持不超過2支3、目視檢測時間不超過20秒4、所檢樣品必須系隨機抽取可見異物檢查法47重金屬檢查法一法硫代乙酰胺比色法

適用于難溶水、稀酸或乙醇等的藥物甲（Pb）乙（樣品）加設(shè)監(jiān)控管丙（Pb+樣品）要求丙＞甲＞乙合格如丙＜甲采第二法二法熾灼后的硫代乙酰胺比色法

適用于含芳環(huán)、芳雜環(huán)以及難溶于水、稀酸或有機溶劑的藥物。配成溶液后同一法操作。三法硫化鈉比色法

適用于堿溶性藥物，同原附錄未加監(jiān)控管。重金屬檢查法一法硫代乙酰胺比色法適用于難溶水、稀酸或乙482010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容一、進一步明確了無菌檢查法的定義：無菌檢查法系用于檢查要求無菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料、及其他品種是否無菌的一種方法。二、進一步明確了無菌檢查保障1、檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染，但采用的措施不得影響微生物的生長。2、無菌檢查要進行環(huán)境檢測增加了日常檢驗還需進行環(huán)境檢測。3、無菌檢查人員必須具備微生物專業(yè)知識，并經(jīng)過無菌技術(shù)的培訓。2010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容一、進一步明確了無菌檢查492010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容三、培養(yǎng)基增修內(nèi)容1、刪去硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基的適用范圍。2、刪去選擇性培養(yǎng)基使用的表面活性劑種類對氨基苯甲酸、聚山梨酯-80等。3、培養(yǎng)基靈敏度試驗（1）菌懸液制備中黑曲霉懸液的制備修改為“用適宜的方法吸出孢子懸液”。（2）增加在稀釋液0.9%無菌氯化鈉溶液中加入0.05%V/V）聚山梨酯80。2010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容三、培養(yǎng)基增修內(nèi)容502010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容四、試驗稀釋液、沖洗液增修訂位1、增加根據(jù)供試品的特性，可選用其他經(jīng)驗證過的適宜的溶液作為稀釋液、沖洗液。2、試驗中使用的中和劑、滅活劑和表面活性劑除證明其有效性外還應證明對污染的微生物無影響修改為無毒性。2010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容512010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容五、方法驗證試驗增修訂內(nèi)容1、試驗菌株刪除銅綠假單胞菌增加大腸埃希菌及大腸埃希菌菌液的制備（同金黃色葡萄球菌）。2、薄膜過濾法供試品用量將規(guī)定量供試品按薄膜過濾法過濾修改為取每種培養(yǎng)基規(guī)定接種的供試品總量。2010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容522010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容六、供試品的無菌檢查增修訂內(nèi)容1、檢驗量直接接種法除另有規(guī)定外，每份培養(yǎng)基接種的供試品量按表2、表3規(guī)定刪除采用直接接種法時的規(guī)定。2、陰性對照無菌試驗中若使用表面活性劑等應證明其有效性且對微生物生長無影響修改為無毒性。2010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容六、供試品的無菌檢查增修532010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容3、薄膜過濾法①增加了抗生素供試品濾膜選擇的指導應選擇低吸附的濾器及濾膜。②若需要沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量一般為100ml，且沖洗量不宜過大修改為總沖洗量不得超過1000ml。(1)水溶液供試品含抑菌成分需用適量的沖洗液沖洗膜修改為所用的沖洗量、沖洗方法同方法驗證試驗。4、直接接種法刪除β-內(nèi)酰胺類或磺胺類供試品。2010版藥典無菌檢查方法增修定內(nèi)容3、薄膜過濾法54微生物限度檢查增修定內(nèi)容1、培養(yǎng)條件控制菌培養(yǎng)溫度35-37℃修改為30-35℃。2、結(jié)果報告特殊品種可以最小包裝單位報告特殊品種包括：藥典規(guī)定微量包裝藥品的檢驗量可以酌減。還有一些貴重藥品也應考慮檢驗量。3、檢驗量沙門菌檢驗量修改為檢驗量為20g或20ml并注明（其中10g用于陽性對照）。微生物限度檢查增修定內(nèi)容1、培養(yǎng)條件控制菌培養(yǎng)溫度35-55微生物限度檢查增修定內(nèi)容4、供試品的制備（1）供試品檢查時適用表面活性劑應證明其對微生物生長和存活無影響修改為無毒性。（2）供試液的制備若需加溫時，可采用其他經(jīng)驗證的方法，但應均勻加熱，且溫度不應超過45℃。（3）具抑菌活性的供試品刪除應消除供試液的抑菌活性修改為當供試品具有抑菌活性時，應盡量選擇操作簡便、快速的方法，應避免損傷供試品中污染的微生物。在供試品溶液形狀允許的情況下，應盡量選用薄膜過濾法。微生物限度檢查增修定內(nèi)容4、供試品的制備56微生物限度檢查增修定內(nèi)容（1）離心沉淀集菌法兩次離心修改為一次離心：500轉(zhuǎn)/分離心，不超過3分鐘，取全部上清液用于檢查。影響因素供試品污染菌特性適用范圍1、僅適用于微生物限度檢查供試液的制備。2、盡量避免適用，不可使用快速離心。微生物限度檢查增修定內(nèi)容（1）離心沉淀集菌法57微生物限度檢查增修定內(nèi)容細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)增修內(nèi)容1、增加了菌懸液的制備及保存條件。菌懸液制備后在室溫下放置應在2小時內(nèi)使用，若保存在2-8℃可以在24小時內(nèi)使用。2、黑曲霉孢子懸液可保存在2-8℃，在驗證過的貯存期內(nèi)使用，每株試驗菌平行制備2個平皿，混勻，凝固，按規(guī)定條件培養(yǎng)計數(shù)，同時用相應的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進行上述試驗。3、增加了對照培養(yǎng)基。4、新增常見干擾物的中和劑和滅活方法。微生物限度檢查增修定內(nèi)容細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)增修內(nèi)容58微生物限度檢查增修定內(nèi)容供試品檢查（1）平皿法刪去采用平皿法進行菌數(shù)測定時，連續(xù)2-3個稀釋級的供試液。修改為按