重組dna技術(shù)與基因工程

重組DNA技術(shù)與基因工程5

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重組DNA技術(shù)與基因工程的基本概念重組DNA技術(shù)所需的基本條件重組DNA技術(shù)的操作過程目的基因的克隆與基因文庫的構(gòu)建外源基因在大腸桿菌中的表達(dá)外源基因在酵母中的表達(dá)A用于核酸操作的工具酶2

重組DNA技術(shù)所需的基本條件限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶DNA聚合酶核酸酶核酸修飾酶限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)及其生物功能識(shí)別雙鏈DNA分子中的特定序列，并切割DNA雙鏈主要存在于原核細(xì)菌中，幫助細(xì)菌限制外來DNA的入侵細(xì)菌的限制與修飾作用hsdR：編碼限制性核酸內(nèi)切酶hsdM：編碼限制性甲基化酶hsdS：編碼限制性酶和甲基化酶的協(xié)同表達(dá)1968年，Smith等人首先從流感嗜血桿菌d株中分離出

HindII和HindIII

限德制籠性揭核螺酸略內(nèi)懸切壤酶限線制錯(cuò)性廈核雁酸膨內(nèi)礙切渾酶竭的索類位型主別要開特化性I型I饞I型I切I槍I型限制修飾多功能單功能雙功能蛋暈白奏結(jié)領(lǐng)構(gòu)異唯源衛(wèi)三旱聚供體同貍源盒二錢聚野體異扮源機(jī)二挎聚童體輔助因子ATPMg2+SAMATPMg2+SAMMg2+識(shí)別序列TGAN8TGCT旋轉(zhuǎn)對(duì)稱序列GAGCCAACN6GTGCCAGCAG切壟割包位紀(jì)點(diǎn)距描識(shí)尤別差序趙列購1k擋b處識(shí)右別借序召列滲內(nèi)或或諷附饞近距呆識(shí)圾別六序術(shù)列母下組游隨騾機(jī)證性蔥切找割特漫異辣性刮切鋼割2偏4蟻-租2寸6b晶p處限考制鴉性哨核究酸增內(nèi)嘴切皆酶限筍制彼性普核佛酸陳內(nèi)說切申酶測的挖命文名屬貌名效種提名象株服名H秒i院n曠d寨I違I綠IH嚷i晃nd泉I年I滿IHa魯e禿m往o橫p柱h重i橡l冊(cè)u(píng)亞si窩nf準(zhǔn)l餡u朗e改n傅z郵a擱ed嗜怨血食流靜感塘桿館菌d株同查一嗽菌眼株騰中來所毒含指的系多架個(gè)勤不敵同生的值限高制喬性姿核類酸上內(nèi)貨切總酶限盆制亦性賢核悼酸程內(nèi)亂切四酶I盯I型烘限押制獸性走核往酸雕內(nèi)扎切生酶超的叨基絨本酬特黨性識(shí)喂別矮雙撤鏈D栗N廣A分奮子噴中4言-統(tǒng)8對(duì)樹堿垮基撲的匪特抬定部序鼻列大遠(yuǎn)部恥分遭酶雹的蜓切弟割伸位寄點(diǎn)饞在禽識(shí)桶別悼序詢列健內(nèi)聯(lián)部豎或木兩袋側(cè)識(shí)綢別楊切液割欠序牛列窯呈藏典袖型濃的盡旋檔轉(zhuǎn)翁對(duì)茂稱喬型回念文腦結(jié)許構(gòu)5’…G貴C譜TG昆A嚴(yán)A盟T阻T笑CG井A默G森…汪3口’3’…C臉G慰AC恒T雄T涌A時(shí)A皆GC鬧T情C樹…控5我’E盞c挺o嚴(yán)R也I的包識(shí)安別碧序飼列E億c壩o倒R駝I的稠切雷割郊位秘點(diǎn)E年c添o卵R豪I等司產(chǎn)簡生植的歐5’粘悅性季末校端5’…G-C-T-G-A-A-T-T-C-G-A-G…3’3’…C-G-A-C-T-T-A-A-G-C-T-C…5’E詠c送o堪R蠻I白3伍7℃5’

…G-C-T-G-OH

P-A-A-T-T-C-G-A-G…3’3’

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OH-G-C-T-C…5’退添火倡4妥-足7℃5’…G-C-T-GA-A-T-T-C-G-A-G換…緩3遺’3’…C-G-A-C-T-T-A-AG-C-T-C依…彩5睜’O禍HPO升HPP愉s嘴t大I等黎產(chǎn)星生襲的囑3’粘雞性的末菌端5’…G-C-T-C-T-G-C-A-G-G-A-G促…浙3檢’3’…C-G-A-G-A-C-G-T-C-C-T-C蹈…必5通’P繳s諸t普I演3崖7℃5’…G-C-T-C-T-G-C-A-O賤HP-淡G健-經(jīng)G胖-尚A館-磁G…湖3前’3’…C-G-A-G-PO富H-A-C-G-T-C-C-T-C腸…團(tuán)5響’退春火貸4笨-協(xié)7℃5’…G-C-T-C-T-G-C-AG-G-A-G醋…己3不’3’…C-G-A-GA-C-G-T-C-C-T-C群…歇5帶’O徒HPO袖HPP君v支u雞I插I等括產(chǎn)槐生登的施平拍頭眾末殃端5’…G-C-T-C-A-G-C-T-G-G-A-G自…飛3斤’3’…C-G-A-G-T-C-G-A-C-C-T-C富…勺5弱’P鐵v驕u墾I讀I歌3根7℃5’…G-C-T-C-A-G-OH

P-C-T-G-G-A-G…3’3’…C-G-A-G-T-C-P

OH-G-A-C-C-T-C…5’限旅制留性群核編酸屋內(nèi)備切組酶I致I型捆限腐制熟性笨核蜜酸花內(nèi)遺切岡酶墳酶棕解妹反怖應(yīng)幅的填操馳作大隆部盾分I飾I型沫核搜酸唇內(nèi)黎切蕉酶搜需矩要乓相揭似灘的待反尼應(yīng)床條拔件賭：T翁r吵i近s季-蹈H義C曬l5嫁0渴m系M民p曠H銷7閱.捎5M買g旋C鹿l21邪0井m統(tǒng)MN猾a治C融l0南-更1迷5旱0僚m驚MD說T詢T1捧m思M0茂-傲5纖0彩m振M低甜鹽任酶1稠0右0宮m酒M中御鹽緞酶1小5難0忙m訊M高保鹽性酶V唐o膀l吼u喪m痛e2沒0忍-仰1毅0蝕0mlT悉T3誦7℃1貴-蠶1黨.饑5h鴉r1U核籍酸崗內(nèi)守切輪酶墳的獅酶機(jī)活必性獎(jiǎng)：榜在消最徒佳洗反償應(yīng)矛條關(guān)件妖下脆反假應(yīng)透1舌小芝時(shí)辜，澡完怎全水朗解賞1mg標(biāo)趣準(zhǔn)D澤N菠A所配需勢的遞酶肝量限滅制免性恩核早酸蹲內(nèi)伯切秤酶I侍I型結(jié)限糕制顯性建核俯酸伍內(nèi)意切筋酶重酶欺解椅反四應(yīng)徑的電操信作I狐I型版核眉酸輸內(nèi)房誠切擺酶御的嗚多地酶歷聯(lián)菌合洋酶梯解劫：對(duì)揀鹽粱濃峽度蔬要仗求羅相希同滑的辯酶周，忙原竄則覆上戀可訂以葉同瘦時(shí)睛酶具切辨，偵但遷應(yīng)彩注辣意蒸：5’…G枕C逗T拾A文C加A河TG鐵G捧A心T筍C訪C何C倆G罵G悉GT丈T技C級(jí)G韻C汗A邀T伶…咳3筆’3’…C驢G待A輕T咐G傲T近AC狀C首T槍A典G粥G寶G味C振C誦CA擴(kuò)A宏G還C站G捆T苗A度…巖5賓’B姨a透m用H姓I框S型m上a蜓I5’…G品C濱T瘦A蜘C漲A贊TG沸G壩A承T叼C減C蠟C倒G役G不GT蒜T考C配G巧C太A坦T請(qǐng)…螞3樓’3’…C逐G趟A羅T餅G槐T頂AC現(xiàn)C駐T閉A耐G遠(yuǎn)G狐G甩C繭C燒CA事A脫G貫C住G越T啞A墓…敗5俊’5’…G撥C邀T確A煎C烤A賀TG隸G斥A停T快C凳C音C徐G綱G埋GT敲T炮C貨G武C獄A笨T揉…惹3啟’3’…C邊G烈A晶T地G濫T革AC軟C常T京A最G挖G穗G勿C第C蹄CA卵A答G丹C眾G劃T鬼A基…葛5起’限采制診性獅核婆酸命內(nèi)壇切恭酶I云I型屠限以制齊性念核課酸睛內(nèi)翁切寄酶納酶載解翼反化應(yīng)著的散操館作I播I型呢核乏酸牢內(nèi)恭切河酶對(duì)的錢多萄酶竭聯(lián)母合瓜酶芝解返：對(duì)江鹽蠢濃謠度顛要始求收不洽同劃的唱酶惡，菠可渣采裂取壯下傲列茄方店法既：使愛用水較聲貴稿的生酶電的牢鹽譯濃很度嗎，懷加寶大灘便荒宜帆酶懼的芬用洞量針，供同術(shù)時(shí)栽酶夾解低普鹽偶酶都先毛切允，慈然澤后法補(bǔ)磚加清鹽專，鉗高套鹽母酶崖再均切一捧種類酶它先透切告，腿然尚后饒更駱換星緩縱沖揭液須，寺另列一秧種澇酶般再消切0友.單1倍墾體識(shí)積稠的語5M享N模a纏A秤c晴p埋H宮5縱.物42唱.箭5倍石體駕積億的旅冰隸冷配乙河醇冰不浴忠5媽分燒鐘屈、革高艘速絹冷曾凍慈離乎心鴿1半0惹分跪鐘牌、賢干蜓燥限禮制非性疲核爬酸云內(nèi)述切昆酶影散響偉限宏制秋性暑核套酸桌內(nèi)怖切堡酶憐活昆性腥的憤因采素D謝N繞A樣虧品題的饑純吳度騰：蛋槍白福質(zhì)拉、蹦苯暈酚狀、慮氯姿仿病、威乙慘醇目、E璃D懼T畢A嫁、濫S夢D師S最、勒N旬a(chǎn)浮C爐l等加脖大累酶秩的朵用辯量濕，電1mg券D吧N音A用石1總0U酶加餅大懂反法應(yīng)攔總堤體獵積延宋長艷反籠應(yīng)盯時(shí)趴間限禍制雁性諒核綢酸被內(nèi)級(jí)切蜓酶影仁響韻限問制排性成核損酸希內(nèi)步切乳酶炎活牌性念的渠因瞇素D帝N讀A樣看品弓的陸甲士基監(jiān)化慘程沫度西：大存腸卡桿板菌伯中撫的d盯a柴m甲殘基薄化鼻酶預(yù)在5’G猾A銅T峽C分3’序坊列碌中汁的姥腺嘌浮呤N6位引辰入撓甲條基蘇，擾受論其怨影針響賠的銹酶午有B輪c篩l蠻I、M嘉b謹(jǐn)o罩I等都，駐但B籃a跳m胖H樓I朱、B啄g族l禾I夜I大、哲S纖a境u芒3勁A錄I不衰受任影賞響大乳腸絨桿猛菌傾中錘的d投c農(nóng)m甲賠基壟化投酶我在5’C部C則A踐G救G據(jù)3’或5’C漢C澇T顛G吼G門3’序輪列中高的胞創(chuàng)嘧薦啶C5位上俘引脹入芬甲軌基維，受冊(cè)其低影嚇響碎的博酶予有E姻c鵲o焰R翅I底I等哺腫乳芒動(dòng)晉物伸中鑰的也甲賠基筒化豈酶呼在5’C艱G療3’序陷列屯中澡的C5位上丹引世入舌甲糖基限蔑制仁性四核再酸災(zāi)內(nèi)舟切鏈酶影許響爺限劣制靈性繪核煌酸銳內(nèi)節(jié)切垂酶島活冤性誘的趁因典素核碎酸男內(nèi)部切昌酶自的腰緩閥沖旁液滔性擺質(zhì)巡壽：高晚濃孫度病的喬酶厘、功高殺濃宅度岔的怎甘潔油陶、萬低宰離池子完強(qiáng)濟(jì)度掉、乒極霸端p慕H值等魂，會(huì)勤使構(gòu)一畏些麗核疏酸族內(nèi)太切湖酶滴的夠識(shí)書別開和杠切省割那序司列紡發(fā)漲生崖低嫩特趙異陳性興，求即所縣謂烏的S膜t服a鹽r旗a調(diào)c兵t燈i抵v先i效t摘y現(xiàn)嚼象E賢c證o聽R詞I在患正盤常貼條磚件抱下譯識(shí)芳別闊并削切財(cái)割忙5’G摸A規(guī)A闊T氧T單C臂3’序道列獄，捷但饞在搭甘油帽濃些度軌超擔(dān)過虧5柴%翅（v卻/皂v找）時(shí)失，斃也肉可斑切閉割5’P套u(yù)多P戒u倡A高T化P循y殼P芹y勇3’或仇者5’A蛛A瞇T筆T冶3’D丟N萌A連閃接百酶D套N違A連仙接狀酶哭的院基蜘本丑性顫質(zhì)修僵復(fù)私雙務(wù)鏈D反N控A上硬缺北口引處魄的疼磷攻酸洗二代酯怎鍵D疼N貨A連婦接創(chuàng)酶5’…G-C-T-C-T-G-C-AG-G-A-G愉…浮3駁’3’…C-G-A-GA-C-G-T-C-C-T-C踐…滑5張’O奴HPO誦HP5’…G-C-T-C-T-G-C-A-G-G-A-G珍…截3種’3’…C-G-A-G-A-C-G-T-C-C-T-C短…館5拉’n示i割c服kn是i駛c臣kD搏N涌A連敗接逮酶D魔N趟A連距接完酶包的柏基嚼本內(nèi)性修質(zhì)修鋤復(fù)英與R畜N酸A鏈撤結(jié)衡合溜的D宅N繞A鏈在上弱缺衣口疫處刻的炎磷糖酸潮二尖酯堤鍵T亡4寧-編D序N拋A連湊接妻酶5’…G-C-U-C-U-G-C-C-G-G-A-G…涂3艇’3’…C-G-A-GA-C-G-G-C-C-T-C何…餅5寬’O智HPn腫i味c基k5’…G-C-U-C-U-G-C-C-G-G-A-G…琴3綱’3’…C-G-A-G-A-C-G-G-C-C-T-C滲…利5獄’D榆N江A連足接點(diǎn)酶D慚N想A連尖接賴酶修的病基此本換性國質(zhì)連御接屋多珍個(gè)貴平駱頭沿雙豪鏈D炭N確A分恭子乓：5’…G-C-T-C-A-G-C-T-G-G-A-G…3與’3’…C-G-A-G-T-C-G-A-C-C-T-C…5法’5’…G-C-T-C-A-G-OH

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2捐+5’…G-C-T-C-A-G3’…C-G-A-G-T-CT-G-G-A-G-T暫…融3扎’A-C-C-T-C-A禽…5’核浸酸住酶單崗鏈普內(nèi)晚切分雙塘鏈饅外委切竭的晚核旗酸懂酶躍：B動(dòng)a家l海3普1核增酸幸酶B叼a響l染3狹1核鋤酸夏酶題的賢基撞本個(gè)特荒性嫁：投來五自煌艾賢氏灰交磁替洞單械胞還菌涂（A洞.賴e柳s席p優(yōu)e光j交i橫a晚n尚a）C寨a2倉+5’d分N啊M蓮P深s或5’N敗M閘P匪ss釣s爸D唯N綱A證o嚷r哀R階N桐AC財(cái)a2沃+C搬a2育+核母酸語酶單葬鏈盞內(nèi)埋切汗雙沒鏈拖外騾切獲的掩核俱酸游酶綠：B煤a鞏l遞3屯1核幫酸蜘酶B碧a浪l斤3火1核攤酸曬酶沃的薪基恐本桿用余途業(yè)：紹誘霜發(fā)D飾N轉(zhuǎn)A突竹變E置c愛o糾R夜IABCE擾c牧o響R酸IE跑c仆o逝R斑IBCAB茶a膊l騙3耗1BCA環(huán)媽化AC核銳酸腔修默飾秧酶末悠端欄脫珠氧泰核煤苷溫酰麥轉(zhuǎn)投移糾酶壓（T備d植T拌）T揭d廟T的齡基滅本隙特水性掀：規(guī)來只自嗚小賺牛虛胸胞腺不喚需烤要跑模行板肝的D像N走A聚近合歉酶及，隨淺機(jī)由摻女入d專N珍T爸P毅s5’p3’H楚OO疏H3’p5’T灑d類TM念g2持+d襪A侍T虧P5’p3’H豆OA找A惑A殿A(yù)膽A插A債A屆A朝A惡A肚A崖AO棵H3’p5’T諸d撕T的看基至本賽特膨性遇：5’p3’H仙OO脾H水3’p5’T象d利TC未o2漏+d瘋A及T琴P5’p3’H膝OA胃A子A禁A勁A缸A耐A銹A必A判A銅AA鎖A勤A肉A局A橡A賀A簡A伐A銅AO贊H扒3’p5’5’p3’H冤OO惜H泛3’p5’T夸d澡TC吐o2肉+d糊A餃T殿P5’p3’H膏OA蚊A賄A黎A進(jìn)A掉A迷A閣A因A仍A歉A悟A仍A鉛AO妨H跑3’p5’A知A赴A盼A概A炮A氏A富A榮A摧A燙A核磨酸掘修蹈飾斯酶堿乞性鐘磷爐酸倉單潮酯粱酶來抄自爛小課牛搖胸劇腺嚇的鹿堿授性維磷案酸弟單捆酯耍酶繪（C棍I敞P踏）來稻自褲大紋腸單桿贏菌怠的煮堿蠟性州磷搬酸禽單頂酯狐酶橡（B除A謀P些）5’pO任H3’D司N達(dá)A咽o始r凝R然N綁A5’p悔p猜p末d道N5’p籮p翁p納NB瘦A框P滲/改C頭I欲PO際H3’5’H甚O5’H榨Od討N5’H夾ON核施酸素修閃飾棚酶T蔑4幸-多稼核惕苷蝕酸太磷紡酸芹激之酶竭（T徹4塑-冒P搬N額P肝）T匆4蛛-訴P鐘N忙P的化基肌本賣特踏性聚：彩在D哀N液A爺、外R交N佳A森、膨d羞N臺(tái)R糾、躍N葬R的瞇5勇‘燈-O免H上停加平磷5’H儲(chǔ)O3’H據(jù)OO括H3’O鬼H5’T地4管-帶P束N城PM臺(tái)g2治+pp往p頭A眾T縮慧P修（g-3廳2P億-逐A傳T駁P喂）5’p3’H助OO備H3’p5’用叨于菜探家針緣瑞的臂末暑端轎同妄位來素壁標(biāo)伍記頑：B用匹于船基殼因蛋克汪隆匯的增載壟體2重展組D孝N齒A技火術(shù)務(wù)所濟(jì)需蚊的繪基怨本遍條輸件質(zhì)脅粒立（p丸l斤a枕s蹈m轉(zhuǎn)i任d坐）噬竿菌載體各或怖病啟毒D兩N刺A考數(shù)斯盜質(zhì)竹粒風(fēng)（c蛾o弟s稿m輩i歌d疾）人現(xiàn)造亞染餡色守體割載纏體載濤體發(fā)的目功胡能保及霉特圍征載案體少的漫功蹤蝶能辮及伐特足征載么體測的故功顫能運(yùn)糾送釀外盒源叼基妖因滔高吊效恐轉(zhuǎn)零入庸受裁體遙細(xì)魄胞為囑外劑源城基橋因知提衛(wèi)供販復(fù)晚制貍能驅(qū)力誕或樂整堅(jiān)合魂能似力為段外怎源溪基徑因障的志擴(kuò)志增掌或蘇表漸達(dá)興提多供嘗必等要掙的墳條礎(chǔ)件載秘體泡的期功怎能懂及兼特枝征載酬體邁應(yīng)讀具燒備矮的駝條曲件具卸有咸針便對(duì)積受騙體碑細(xì)鍛胞挎的宏親遞緣偉性碧或賢親妖和籍性巷（俘可帆轉(zhuǎn)嘩移奔性蹲）具傲有異合汁適是的辦篩圍選巷標(biāo)跌記具鼓有濟(jì)較高綁的凳外酸源D夫N軋A的休載垃裝識(shí)能子力具屈有尾多裹種養(yǎng)單吩一豎的盡核危酸胃內(nèi)凡切榆酶托識(shí)悔別辜切挪割殖位斗點(diǎn)具叢有舒與仍特堵定青受駛體新細(xì)裙胞閉相址適汗應(yīng)笑的夾復(fù)蛙制絡(luò)位裂點(diǎn)棋或打整判合倘位抵點(diǎn)質(zhì)濱粒質(zhì)旋粒需的龜基做本跡特鳳征質(zhì)木粒撇是但生最物棵細(xì)伴胞豪內(nèi)你固殼有最的劍、你能站獨(dú)志立士于增寄窮主班染贏色踢體鳴而厭自維主茶復(fù)奏制缺、公并能卻被治穩(wěn)齡定碑遺乎傳勝的臂一歉類和核曾酸戲分松子傍；質(zhì)捐粒猶常畫見廁于狡原北核儲(chǔ)細(xì)她菌甩和網(wǎng)真齊菌聰中竄；絕正大嘩多殼數(shù)蘋的艱質(zhì)算粒刑是D票N喉A型注的開，墊絕當(dāng)大盞多變數(shù)哭的乞天記然D道N幕A質(zhì)桐粒越具翠有龜共勢價(jià)封腫閉斷、原環(huán)糖狀贈(zèng)的晝分烈子禿結(jié)攻構(gòu)挺，積即c脆c輪c智D上N黑A；質(zhì)終粒D懶N撇A的法分掛子鋤量捷范委圍再：歉1喝-呈3撇0踐0k趕b質(zhì)察粒質(zhì)顏?；穆暬醣纠L特爽征質(zhì)嬌粒陳的療自茄主扛復(fù)輸制濤性推：質(zhì)遭粒歌能撇利底用嗎寄霉主諸細(xì)深胞著的D域N膜A復(fù)甘制臟系好統(tǒng)橡進(jìn)率行懷自迷主揮復(fù)榮制秧；質(zhì)材粒D輝N罷A上忽的偽復(fù)頌制累子士結(jié)杰構(gòu)瓣決陶定曉了睬質(zhì)萬粒紋與膨寄使主眨的傘對(duì)增應(yīng)升關(guān)勉系根寒據(jù)果在塵每篩個(gè)更細(xì)淚胞敏中補(bǔ)的憤分劑子密數(shù)忌（凍拷承貝侄數(shù)歡）暫多監(jiān)寡漆，吊質(zhì)焦粒展可養(yǎng)分靜為寫兩壩大升復(fù)松制類受型籌：嚴(yán)濕緊底型瓜復(fù)懷制板控茄制純的垮質(zhì)佛?；?莖-尤3暖拷節(jié)貝s燥t劍r脖i馳n曠g謹(jǐn)e真n獻(xiàn)t飾p糊l慶a探s雨m胞i牌d松耗弛飯型臺(tái)復(fù)恐制瘦控毀制感的捧質(zhì)企粒狹1踐0慢-愿6椅0端拷窗貝s口t拼r恒i膀n償g灑e觀n銷t正p霜l撐a假s良m易i找d質(zhì)送粒質(zhì)德粒烈的植基耕本譜特苗征質(zhì)噴粒聾的培自宿主包復(fù)隸制響性趙：拷襪貝糠數(shù)衛(wèi)的類控卸制挽機(jī)僵制西–擋質(zhì)帳粒D仙N憤A復(fù)厭制累啟誼動(dòng)蘆控造制控飛制捉復(fù)結(jié)制拜引細(xì)物伐與閘模商板況的莊結(jié)壁合o全r墾iE埋.護(hù)c盯o丙l找iC扶o泉l鞏E警1p猛l口a鴉s躺m興i怨d復(fù)遼制歇方呀向r榨o釀p（株+無）R標(biāo)o岔pR錫N鋤A脂I羞IR旺N已A狡I3倡’5墨’5腦’3償’質(zhì)屬粒質(zhì)英粒賤的愚基桑本尖特衫征質(zhì)慕粒盟的孕自潔主偉復(fù)唐制紛性乓：拷弄貝好數(shù)甘的捷控才制席機(jī)裹制滲–芒質(zhì)杏粒D烤N打A復(fù)患制能啟公動(dòng)隙控舌制控趙制糞復(fù)豆制勢起蛾始敲因味子埋與宿復(fù)籍制谷起量始扣位菊點(diǎn)?。╫葵r貴i）的畏結(jié)蛙合P掘c縱o辮pc貧o貝pP亦/泳O旅r澡e刮pr現(xiàn)e肅po罵r批iC獵o團(tuán)pR麗e黑p質(zhì)趙粒質(zhì)予粒另的岡基庸本夕特劇征質(zhì)攏粒梅的鞋不粉相軍容堤性粥：任休何宵兩鼓種橡含涂有銜相嚴(yán)似租復(fù)舞制蹄子寬結(jié)淋構(gòu)昏的叼不儀同懲質(zhì)滾粒鈔，些一油般辟不盆能闖同篇時(shí)我存科在諒于一份個(gè)憶細(xì)押胞附中巾，芹這葬種炎現(xiàn)呆象宏稱它為鈔質(zhì)嘆粒證的蹤蝶不飽相尸容浴性舒，教不縣相餡容澡性嶄的既質(zhì)急粒么組C望o吸l緊E斤1顏、伶p俱M梅B孤1擁緞?dòng)袆?lì)相宴似唉的妥復(fù)儀制溫子旺結(jié)酷構(gòu)臘，邀彼落此崗不倆相極容p鋪S勁C浪1尚0賊1翅、柄F堤、巖R漲P終4擁丹有狂相始似慢的榜復(fù)帳制深子妹結(jié)丹構(gòu)剃，緩彼照此透不毫相如容p儉1豪5籠A及丑其蒼衍堆生娃質(zhì)屑粒哨擁艙有束相榜似真的大復(fù)訊制刃子腳結(jié)批構(gòu)罩，渣彼真此住不床相使容成不唇相聰容感性桑群。索以弓大范腸烈桿放菌副的暑質(zhì)棚粒較為取例市：質(zhì)貢粒質(zhì)哄粒量的繁基該本爆特倦征質(zhì)峽粒侮的惡可扯轉(zhuǎn)但移疑性起：革災(zāi)蘭寧氏選陰月性棕菌乓的盾質(zhì)歲粒慢可搞分巴成穗兩靈大泊類進(jìn)：接司合越型辭質(zhì)椒粒：緣瑞能用在湖天攤?cè)粬|條梳件精下研自刃發(fā)端地駕從噸一尖個(gè)邁細(xì)抗胞顧轉(zhuǎn)鄭移綠到夫另坊一扛個(gè)細(xì)端胞僚（盈接樸合豎作假用教）閥，宿如F叮、蜓C祖o慚l葉、宋R質(zhì)槽?；甑然?；非孝接譽(yù)合膊型朝質(zhì)紡粒：捉不砌能塵在設(shè)天浮然區(qū)條騎件放下燙獨(dú)蔽立酬地懇發(fā)頓生烤接頂合練作恢用助。值愚得錯(cuò)注驗(yàn)意啊的客是古，臂某侄些擊非還接胸合崇型剖質(zhì)取粒巾（C越o駕l拌E疼1庫）在倍接宏合箱型趕質(zhì)逐粒膊的他存租在和狹協(xié)恥助岡下課，批也棄能把發(fā)孕生D這N轟A轉(zhuǎn)增移排，回這那個(gè)加過銅程鼻由b針o狠m和m汪o綿b基電因泳決短定擔(dān)。質(zhì)循粒質(zhì)往粒告的牌基蘆本版特臟征攜金帶埋特寨殊史的盒遺僑傳攝標(biāo)胡記骨：野享生之型奔的事質(zhì)誦粒D穗N法A上鞋往搜往晃攜茶帶邊一踏個(gè)合或晝多愈個(gè)孝遺樹傳政標(biāo)當(dāng)記果基撥因毒，直這使船得累寄致主屠生什物眼產(chǎn)然生謙正勾常強(qiáng)生研長閣非蟻必設(shè)需薦的決附兆加劣性輕狀脾，湖包婆括素：物漿質(zhì)盼抗良性抗姨生禾素詞、箱重紗金錄屬記離禾子砍、光毒陡性手陰支離閘子配、剩有粘機(jī)榮物物踩質(zhì)運(yùn)合電成抗畫生葬素衡、膏細(xì)壟菌金毒腐素肢、寶有虧機(jī)雷堿這殊些流標(biāo)味記您基愁因句對(duì)D仙N落A重怖組乎分踏子夕的岡篩施選推具退有雨重獵要?jiǎng)褚庑亮x避。質(zhì)志粒質(zhì)旗粒水的購構(gòu)策建天次然微存畢在閑的遮野來生惰型細(xì)質(zhì)目粒煙由看于儀分還子禿量嶼大淘、渠拷表貝待數(shù)逐低鵲、悼單燈一缺酶首切柱位香點(diǎn)窄少超遺媽傳閥標(biāo)夾記庸不宰理獵想洋等塞缺聽陷寸，喇不類能貧滿歷足喊克揮隆遞載圈體混的治要析求黎，屬因文此沿往螞往駕需野要剃以謊多界種漁野亦生賓型跟質(zhì)機(jī)粒尚為味基逝礎(chǔ)姜進(jìn)積行富人貸工玩構(gòu)野建甘。趴目銜前脹實(shí)伙驗(yàn)跨室漁使液用別的奏大步腸預(yù)桿四菌其質(zhì)汗粒陸大多伸是巧由竿少呈數(shù)紛幾蓄個(gè)逆野珍生境型紐奉質(zhì)劑粒勻構(gòu)釣建膀而輕成粱的距：p姨S撇C虹1陶0應(yīng)18滴.目8抱k偉b，煩拷抬貝潑數(shù)戀5疊，溫四他環(huán)工素釋抗綁性伶標(biāo)走記例基牌因T恥crC寨o抵l總E殲16窗.統(tǒng)5鎖k斯b，絹拷穿貝欲數(shù)坦2增0-雨3凡0，姨大騙腸銳桿黨菌早內(nèi)矩毒煉素稀標(biāo)澡記屑基搶因E螞1R麻S呢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