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文檔簡介
目錄摘要……TOC\o"1-5"\h\zAbstract 1材料與方法 21.1材料 11.1.1材料 21.1.2培養(yǎng)基 2試劑 2儀器 21.2方法 21.2.1革蘭氏染色的方法 21.2.2甘露醇發(fā)酵的方法 21.2.3凝固酶試驗的方法 21.2.4過氧化氫酶試驗的方法 2結果分析 32.1革蘭氏染色的結果分析 32.2甘露醇發(fā)酵的結果分析 32.3凝固酶試驗的結果分析 32.4過氧化氫酶試驗的結果分析 3討論 33.1結果討論 33.2操作過程中可能出現(xiàn)的問題 3結論 4參考文獻 4葡萄球菌鏈球菌的分離鑒定摘要:在微生物學中,葡萄球菌和鏈球菌都屬于革蘭氏陽性菌,具有致病性。主要了解兩種細菌的形態(tài)、排列、生化特性以及主要的鑒別特點。通過用革蘭氏染色,甘露醇試驗,凝固酶試驗以及過氧化氫酶試驗的方法來看鏈球菌和葡萄球菌的不同,從而來證明A組為鏈球菌,B組為葡萄球菌。關鍵詞:葡萄球菌;鏈球菌;革蘭氏染色;甘露醇;過氧化氫酶;凝固酶引言葡萄菌屬(Staphylococcus)屬微球菌科,葡萄球菌屬,本菌屬分為20多種,為排列不規(guī)則的革蘭氏陽性球菌,廣泛存在于自然界。寄居于人和動物的口、鼻、皮膚、毛發(fā)等處的葡萄球菌是正常菌群成員菌群之一。有致病性的葡萄球菌主要是金黃色葡萄球菌,可引起人和動物的化膿感染,也可造成人類的食物中毒。此外,還常常是其他傳染病的繼發(fā)感染或混合感染的病原。致病性葡萄球菌的鑒定可通過色素顏色、溶血性、過氧化氫酶試驗、凝固酶試驗、甘露醇發(fā)酵試驗,腸毒素⑵試驗等進行。鏈球菌(Streptococcus)為長短不一、鏈狀排列的球形或卵圓形革蘭氏陽性細菌,也廣泛分布于自然界。本均屬分類迄今尚未統(tǒng)一,多以溶血性、生理生化特征和抗原結構加以分類,是獸醫(yī)學上重要的病原菌,可引起牛的乳房炎、子宮炎、豬鏈球菌病、新生幼畜臍感染、馬腺疫以及家禽的某些疾患⑶。在鑒定鏈球菌時,主要以形態(tài)、培養(yǎng)特、生化試驗、抗原構造以及抵抗力來作為鑒定種別的依據(jù)。材料與方法1.1材料1.1.1材料:金黃色葡萄球菌、鏈球菌1.1.2培養(yǎng)基:金黃色葡萄球菌斜面培養(yǎng)物、普通營養(yǎng)瓊脂平板、血瓊脂平板、甘露醇微量發(fā)酵管1.1.3試劑:革蘭氏染色液、香柏油、1:5兔血漿、3%H2O21.1.4儀器:顯微鏡、接種環(huán)、載玻片等1.2方法1.2.1革蘭氏染色的方法:初染:在已干燥、固定好的抹片上滴加草酸銨結品紫溶液,染色1-2min,水洗;媒染:加革蘭氏碘溶液于抹片上媒染,作用1-3min,水洗;脫色:加95%乙醇于抹片上,脫色0.5-1min,水洗;復染:加稀釋的石碳酸復紅(或沙黃水溶液)復染10-30S,水洗;吸十或自然干燥,鏡檢。1.2.2甘露醇發(fā)酵的方法:將各種葡萄球菌分別接種于甘露醇發(fā)酵管中,置37^培養(yǎng)24h,觀察分解甘露醇的情況。1.2.3凝固酶試驗的方法:在玻片上滴加生理鹽水一滴,挑取菌落于生理鹽水中混勻,然后滴加兔血漿一滴,混勻,若細菌凝結成塊則為陽性。1.2.4過氧化氫酶試驗的方法:取2ml3%過氧化氫溶液,加入干凈的小試管中,用細玻璃棒蘸取試驗菌,插入過氧化氫液下面,若有氣泡產(chǎn)生者為陽性。結果分析2.1革蘭氏染色的結果分析鏈球菌 葡萄球菌2.2甘露醇發(fā)酵的結果分析
B管褪色的葡萄球菌,A管顏色不變的為鏈球菌。2.3凝固酶試驗的結果分析凝固的為葡萄球菌。2.4過氧化氫酶試驗的結果分析取干凈的小試管,用細玻璃棒蘸取試驗菌,插入過氧化氫液下面,若有氣泡產(chǎn)生,則為葡萄球菌。討論3.1結果討論在革蘭氏染色試驗中根據(jù)圖片形狀來判斷菌種,在甘腐醇發(fā)酵試驗中根據(jù)甘露醇是否褪色來判斷,在凝固酶試驗中看試管中是否凝固,在過氧化氫酶試驗中根據(jù)是否冒氣泡來判斷。3.2操作過程中可能出現(xiàn)的問題(1)在進行革蘭氏染色時,應挑取最適生長階段的菌落(18-24h)進行圖片,否則可能出現(xiàn)染色特性不均一。(2)平板的制備、細菌的接種都應進行嚴格的無菌操作,防止病原菌的散播。結論A組為鏈球菌,B組為葡萄球菌。參考文獻
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