革蘭氏陰性需氧桿菌

《獸醫(yī)微生物學(xué)》講議十第九章革蘭氏陰性需氧桿菌G－需氧桿菌屬于細(xì)菌門的第七部分。包括8個科16個關(guān)系未定的屬，在獸醫(yī)上具有重要意義的主要是：假單胞菌科：綠膿桿菌；伯氏菌屬：鼻疽桿菌、類鼻疽桿菌；布氏桿菌屬：布氏桿菌；波氏桿菌屬：支氣管敗血波氏桿菌、禽波氏菌等。第一節(jié)假單胞菌屬假單胞菌屬(Pseudomonas)是一群有動力、需氧的革蘭氏陰性菌，廣泛分布于土壤、水及空氣中。綠膿桿菌銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，俗稱為綠膿桿菌，廣泛存在于自然界中，以及人畜體表和各腔道中，為條件致病菌。為常見的多種家畜和人的創(chuàng)傷感染、泌尿系統(tǒng)感染和牛乳房炎病原，還可致敗血癥。一、生物學(xué)性狀大小：0.6-2.0um，G－，有菌毛，有鞭毛（1~3根）、粘液型菌株有多糖莢膜。一、生物學(xué)性狀需氧、營養(yǎng)要求不高，普通營養(yǎng)生長良好。菌落：圓形、邊緣不整齊、扁平隆起、光滑濕潤、常互相融合形成菌苔。能產(chǎn)生藍(lán)綠色的綠膿素和綠色熒光的熒光素，均為水溶性色素。能分解葡萄糖，產(chǎn)生H2S，靛基質(zhì)陰性，液化明膠，氧化酶陽性。二、微生物學(xué)診斷病料涂片鏡檢意義不大，應(yīng)進行細(xì)菌分離及生化鑒定。

三、免疫及微生物學(xué)防治獸醫(yī)上人工免疫預(yù)防無實際意義。在人醫(yī)中，對燒傷患者采用多價綠膿桿菌免疫血清治療可降低敗血癥的發(fā)病率和死亡率。第二節(jié)布氏桿菌屬布氏桿菌屬(Brucella)為一革蘭氏陰性短小桿菌。該菌為牛羊豬等動物的病原菌，可引起母畜流產(chǎn)，公畜附丸睪炎。人類與病畜或帶菌動物接觸，或食用染菌肉類，乳制品，可發(fā)生感染，稱布氏桿菌病(Brucellosis)。臨床表現(xiàn)為間歇發(fā)熱，稱波浪熱。一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)與染色初次分離呈小球桿狀，大小為0.2~0.5×0.5~1um。多次傳代后，牛、豬布氏桿菌可變成桿狀，大小為0.5~0.7×0.6~1.5um，多單在，少呈鏈狀。本菌不形成芽胞，無鞭毛，不能運動。革蘭氏陰性。（一）形態(tài)與染色本菌有抗酸染色性，對布氏桿菌有鑒別意義。（一）形態(tài)與染色左為E.coli；右為布魯氏桿菌（一）形態(tài)與染色布氏桿菌電鏡照片（偽著色）（二）培養(yǎng)特性專性需氧菌。初次分離時要在5％~10％CO2環(huán)境下始能生長。最適生長溫度為37℃，最適pH值為6.6-7.4。人工培養(yǎng)數(shù)代后，即適應(yīng)普通大氣。普通培養(yǎng)基生長不好，生長遲緩。加及血清或肝浸液等可促進生長。初代培養(yǎng)常需5~10天，甚至20~30天，方可見生長；經(jīng)傳代后的菌種，約24~72小時即可生長良好。（二）培養(yǎng)特性在肝湯瓊脂或胰蛋白胨瓊脂上生長，呈圓形、光滑、稍隆起，均質(zhì)而中央常有細(xì)微顆粒；初無色透明，后漸渾濁而帶灰白甚至灰黃色；大小差異大，直徑約0.1mm至2~3mm。在液體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48小時呈輕度渾濁，一周后混濁明顯，有沉淀。（三）生化反應(yīng)本菌屬分解糖的能力不同:不產(chǎn)生吲哚；不液化明膠；尿素分解陰性；M－R試驗陰性；V－P試驗陰性；石蕊牛乳陰性；過氧化氫酶陽性。（四）抵抗力本菌抵抗力較強:在土壤、皮毛、肉和乳制品及水中可生存數(shù)周至數(shù)月。但在濕熱60℃10min死亡；直射陽光下10-20min死亡；對消毒劑抵抗力不強:3％的來蘇兒中數(shù)分鐘內(nèi)死亡。（五）抗原構(gòu)造與分型布氏桿菌屬含有兩種抗原物質(zhì)。一種是M抗原（羊布氏菌菌體抗原）另一種是A抗原（牛布氏菌菌體的抗原）兩種抗原在三種菌中含量不同:羊布氏菌M:A是20:1牛布氏桿菌M:A＝1:20豬布氏桿菌M:A＝1:2。二、致病性與免疫性（一）致病物質(zhì)：內(nèi)毒素主主要致病物質(zhì)。馬爾他布氏桿菌毒力最強，其次為豬布氏桿菌、流產(chǎn)布氏桿菌毒力較弱。透明質(zhì)酸酶、莢膜等也具有較強的侵襲力。（二）所致疾病本屬細(xì)菌可感染的動物種類極多，目前已知有六十多種；其中有各種家畜、野生哺乳動物、嚙齒動物、鳥類、爬蟲類、兩棲類和魚類。布氏桿菌所致病，母畜主要癥狀為流產(chǎn)，公畜主要發(fā)生附睪炎（三）免疫性一般認(rèn)為布氏桿菌感染后形成的免疫是有菌免疫，即初次感染后病菌存在體內(nèi)，對再次感染有較強的免疫力。近年來學(xué)者認(rèn)為，隨著病程的延續(xù)，機體免疫力增強，病菌可被不斷消滅，而最終變成無菌免疫。布氏菌感染后，以細(xì)胞免疫為主，產(chǎn)生的IgG、IgM起調(diào)理作用。疫苗1、羊型5號（M5）弱毒活菌苗：由哈獸藥研究所生產(chǎn)，采用馬爾他布氏桿菌H28強毒經(jīng)雞體長期傳代減毒篩選出弱毒制成的疫苗。使用方法是皮下注射或氣霧免疫，對羊免疫期為1年半、對牛和鹿免疫期為1年。2、豬型2號（S2）弱毒活菌苗由農(nóng)業(yè)部獸藥監(jiān)察所研制，采用豬布氏桿菌的變種制備而成的疫苗。使用方法：口服（飲水），對豬亦可皮下注射，羊可肌肉注射。免疫期：綿羊半年到1年，山羊和豬均為一年。三、微生物學(xué)檢查（一）細(xì)菌學(xué)檢查：首先采集標(biāo)本：流產(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物、羊水及胎盤的壞死部分或母畜陰道分泌物、乳汁、尿液等。其次：直接涂片，抗酸染色鏡檢；（一）細(xì)菌學(xué)檢查再：分離培養(yǎng)：以優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基，加入抗生素，兩套培養(yǎng)基分別置普通環(huán)境和5－10％CO2環(huán)境中培養(yǎng)，培養(yǎng)時間應(yīng)在30天以上。如有可疑菌落，作玻板凝集試驗，以確定。（一）細(xì)菌學(xué)檢查分離培養(yǎng)物可進行動物試驗：細(xì)菌懸液以腹腔可皮下注射接種豚鼠。一方面可采取血液獲得抗血清，測凝集價，如在1：50以上為陽性；另一方面，剖檢，檢查脾臟、肝臟實質(zhì)器官，觀察是否有結(jié)節(jié)存在。（二）血清學(xué)診斷凝集反應(yīng)、