豬圓環(huán)病毒病2型滅活疫苗LG株工藝規(guī)程

編號(hào):SC-TS-02-218豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程上海海利生物藥品有限公司工藝規(guī)程生產(chǎn)管理上海海利生物藥品有限公司編號(hào):SC-TS-02-218生效日:1/16頁標(biāo)題:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程起草

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:質(zhì)管部、技術(shù)研發(fā)部、生產(chǎn)部目錄TOC\o"1-2"\h\z1.主題內(nèi)容 22.適用范圍 23.引用標(biāo)準(zhǔn) 24.規(guī)程內(nèi)容 24.1品名 24.2劑型 24.3規(guī)格 24.4菌（毒）種 24.5批準(zhǔn)文號(hào) 24.6工藝流程圖 24.7質(zhì)量控制點(diǎn) 44.8活性物質(zhì)制備工藝過程 44.9活性物質(zhì)生產(chǎn)技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)和原料利用率計(jì)算 74.10油乳劑滅活疫苗制造工藝過程 74.11油乳劑劑制造技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo) 94.12設(shè)備一覽表 104.13生物安全及勞動(dòng)保護(hù) 104.14物料 114.15成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 134.16貯藏和有效期 144.17包裝材料要求 144.18標(biāo)簽、說明書 15題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2182/16頁主題內(nèi)容本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）達(dá)到的技術(shù)要求。適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）引用標(biāo)準(zhǔn)國家標(biāo)準(zhǔn)(豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）制造及檢驗(yàn)試行規(guī)程)。規(guī)程內(nèi)容品名通用名稱：豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗(LG株)英文名：PorcineCircovirusType2Vaccine,Inacitvated（StrainLG）漢語拼音：ZhuYuanhuanbingduErxingMiehuoyimiao(LGZhu)劑型水包油劑型規(guī)格20ml/瓶、40ml/瓶、100ml/瓶、250ml/瓶菌（毒）種來源：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)生物研究所保存毒株：豬圓環(huán)病毒LG株代次：56～60代保存溫度：-80℃以下批準(zhǔn)文號(hào)獸藥生字（2010）工藝流程圖

豬圓環(huán)病毒2型豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝流程圖生產(chǎn)用PK-15細(xì)胞生產(chǎn)用PK-15細(xì)胞棄液并加入胰蛋白酶，消化細(xì)胞棄液并加入胰蛋白酶，消化細(xì)胞加入DMEM液，分散細(xì)胞加入DMEM液，分散細(xì)胞分裝，取樣檢測(cè)分裝，取樣檢測(cè)轉(zhuǎn)瓶制備成細(xì)胞懸液﹡轉(zhuǎn)瓶制備成細(xì)胞懸液﹡轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)同步接種毒同步接種毒﹡36~48h，換維持液36~48h，換維持液﹡細(xì)胞病變達(dá)70～80%細(xì)胞病變達(dá)70～80%﹡收獲﹡半成品檢測(cè)半成品檢測(cè)分裝滅活檢驗(yàn)*滅活合格抗原說明書、紙箱標(biāo)簽成品檢驗(yàn)入庫貼簽軋蓋乳化*反復(fù)凍融3次分裝滅活檢驗(yàn)*滅活合格抗原說明書、紙箱標(biāo)簽成品檢驗(yàn)入庫貼簽軋蓋乳化*反復(fù)凍融3次裝箱裝箱百級(jí)區(qū)百級(jí)區(qū)萬級(jí)區(qū)帶﹡項(xiàng)為質(zhì)量控制點(diǎn)十萬級(jí)區(qū)題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2184/16頁質(zhì)量控制點(diǎn)工序名稱控制項(xiàng)目控制標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞消化消化液0.125%胰蛋白酶+0.01EDTA溶液；50-100mL/轉(zhuǎn)瓶消化溫度37消化時(shí)間轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)瓶，待細(xì)胞層開始出現(xiàn)裂縫時(shí)終止，一般為45秒轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)溫度37℃時(shí)間細(xì)胞生長成單層即可結(jié)束培養(yǎng)，一般為24小時(shí)左右轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)瓶機(jī)設(shè)置為10～12轉(zhuǎn)/小時(shí)接毒接種量無菌控制下接種，5%無菌檢測(cè)取樣，T.G、G.P、G.A培養(yǎng)基培養(yǎng)應(yīng)無菌調(diào)PH值PH值2日后，無菌，7.5%碳酸氫鈉調(diào)PH為7.2觀察細(xì)胞病變情況出現(xiàn)混濁，可能污染，棄去。細(xì)胞病變達(dá)70%~80%時(shí)收獲收獲無菌無菌控制下操作，不污染滅活滅活劑0.2%的甲醛滅活溫度調(diào)整滅活罐的溫度為3滅活時(shí)間滅活充分，維持24小時(shí)乳化水相、油相比例保證抗原含量并不分層，水相：油相為9:1乳化時(shí)間30分鐘乳化溫度0～10活性物質(zhì)制備工藝過程PK-15細(xì)胞系標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞形態(tài)：用含10%的小牛血清的MEM培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞，置37℃細(xì)胞純凈性：應(yīng)無菌、無霉菌、無支原體、無外源病毒污染。細(xì)胞致瘤性檢驗(yàn)：不致瘤。細(xì)胞核學(xué)檢查：不同代次的細(xì)胞與基礎(chǔ)細(xì)胞庫的細(xì)胞相比，所有細(xì)胞的染色體模式數(shù)不得高出15%，核型必須相同。制苗的細(xì)胞代次：第20～40代之間。細(xì)胞保存：液氮保存，保存期為36個(gè)月。生產(chǎn)用毒種要求病毒含量：每毫升病毒含量應(yīng)不低于105.5TCID50純凈性：病毒應(yīng)無題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2185/16頁細(xì)菌霉菌支原體其它外源病毒特異性與PCV2陽性血清中和后接種PK15細(xì)胞，中和細(xì)胞孔IPMA檢測(cè)無明顯著色反應(yīng)，病毒對(duì)照孔呈棕紅色染色。毒種保存與毒種繼代在-20繼代應(yīng)不超過3代。細(xì)胞的傳代工藝過程選生長2—3天已形成致密單層的細(xì)胞種按常規(guī)法進(jìn)行細(xì)胞分散，37℃生長不良、形態(tài)不好的細(xì)胞不能用。工作條件工作環(huán)境潔凈級(jí)別：100級(jí)溫度：18～26℃相對(duì)濕度：30～65%壓差：大于5Pa工作器械121℃高溫蒸汽滅菌工藝應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證4.8.4制備細(xì)胞同步接種5%LG毒種，置37℃溫室的轉(zhuǎn)瓶機(jī)上4.8.5工藝過程接種后每天逐瓶觀察細(xì)胞病變，并做好記錄，接毒后36～48小時(shí)用無血清的MEM培養(yǎng)基換液1次，繼續(xù)培養(yǎng)72～96小時(shí)收獲病毒液，置–20℃以下冰箱凍結(jié)保存，保存期不得超過12個(gè)月。題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2186/16頁工作條件工作環(huán)境潔凈級(jí)別：100級(jí)溫度：18～26℃相對(duì)濕度：30～65%壓差：大于5Pa工作器械121℃高溫蒸汽滅菌工藝應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證.滅活工藝過程工藝過程病毒液導(dǎo)入滅活罐后，將甲醛溶液緩緩導(dǎo)入滅活罐使其終濃度為0.2%，37℃滅活24小時(shí)滅活結(jié)束后用10%亞硫酸鈉加入病毒液，使其終濃度為0.05%終止滅活。工作環(huán)境工作條件潔凈級(jí)別：10000級(jí)溫度：18～26℃相對(duì)濕度：30～65%壓差：大于5Pa工作器械121℃高溫蒸汽滅菌工藝應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證半成品檢驗(yàn).1按照現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)無細(xì)菌霉菌支原體外源病毒.2病毒含量檢驗(yàn)IPMA(免疫過氧化物酶單層細(xì)胞染色法)將毒種用無血清MEM培養(yǎng)基做10倍系列稀釋。取10-3、10-4、10-5、10-64個(gè)稀釋度各接種96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每個(gè)稀釋度接種4孔，每孔100UL,同時(shí)設(shè)不接毒的空白對(duì)照4孔；每孔再加入100uL加入新消化的PK15細(xì)胞懸液37℃用33%丙酮-PBS固定，用PCV2陽性血清進(jìn)行IPMA試驗(yàn)，測(cè)定各孔中病毒感染情況，按照Reed-Muench法計(jì)算TCID50，每ml病毒含量應(yīng)不低于105.5TCID50。題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2187/16頁.3抗原滅活檢驗(yàn)后檢驗(yàn)按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)無菌滅活檢驗(yàn)滅活后的病毒液10倍稀釋后取10-1、10-2、10-33個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度各取1ml接種到新消化的PK15細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，37℃、含5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)96小時(shí)，盲傳2代，按照病毒含量檢驗(yàn)法檢驗(yàn)，崗位定員和生產(chǎn)周期崗位人員生產(chǎn)周期制細(xì)胞3每批共7天配液2接種2收獲3原材料：PK15細(xì)胞，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合PK15細(xì)胞系的要求。4.9活性物質(zhì)生產(chǎn)技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)和原料利用率計(jì)算原料營養(yǎng)液收獲得益率數(shù)量PK-15細(xì)胞10*100095%價(jià)值/元50010*1000*0.21000*10*0.95每ml活性物質(zhì)（500+2000）/1000*10*0.95=0.2631元4.10油乳劑滅活疫苗制造工藝過程配方滅活液水相9份15AVG油相1份油相制備為法國SEPPIC提供的MontanideTMISA15AVG佐劑，題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2188/16頁水相制備為已滅活的病毒液乳化按照上述比例，先將水相加之乳化容器中進(jìn)行攪拌，然后緩慢加入油相，以800r/min攪拌30分鐘，再靜止30分鐘。分裝.1內(nèi)包裝容器名稱：西林瓶或藥用高密度聚乙烯瓶、丁腈橡膠塞藥用高密度聚乙烯瓶由符合GMP要求的廠家直接提供。丁腈橡膠塞滅菌：121℃西林瓶清洗：用超聲波清洗機(jī)清洗2-3次；121℃.2分裝生產(chǎn)：生產(chǎn)好的疫苗產(chǎn)品，移至分裝生產(chǎn)線上，進(jìn)行分裝，有20ml/瓶、40ml/瓶、100ml/瓶、250ml/瓶四種規(guī)格。.3工作環(huán)境工作條件潔凈級(jí)別：100級(jí)溫度：18～26℃相對(duì)濕度：30～65%壓差：大于5Pa工作器械121℃高溫蒸汽滅菌工藝應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證軋蓋貼簽裝箱壓蓋：分裝完畢的產(chǎn)品，立即進(jìn)入壓蓋生產(chǎn)線，加上鋁蓋，進(jìn)行壓蓋。貼簽：貼簽機(jī)調(diào)整設(shè)置好相應(yīng)的產(chǎn)品批號(hào)及有效期限，進(jìn)入貼簽程序。裝盒：20ml每10瓶一盒，盒內(nèi)放置說明書，用條形碼封小盒口；裝箱。100ml每一瓶裝入紙箱，盒內(nèi)放置說明書，再每10瓶裝入一盒；用條形碼封小盒口。裝箱：外箱用泡沫箱外套紙箱，20ml每箱放入49盒疫苗，并在包裝箱外側(cè)貼一張?jiān)摦a(chǎn)品的標(biāo)簽。100ml每箱放入9盒疫苗，并在包裝箱外側(cè)貼一張?jiān)摦a(chǎn)品的標(biāo)簽。入庫。注：批號(hào)設(shè)置、貼簽印刷應(yīng)符合《獸藥瓶簽、說明書的管理規(guī)定》題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-2189/16頁崗位定員和生產(chǎn)周期崗位人員生產(chǎn)周期分裝41/2天壓蓋31/2天貼簽裝箱32天4.11油乳劑劑制造技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)序號(hào)項(xiàng)目及計(jì)算指標(biāo)1分裝率（%）=實(shí)際分裝瓶數(shù)/理論分裝瓶數(shù)*100%100%±5%2合格率（%）=合格瓶數(shù)/實(shí)際分裝瓶數(shù)*100%≥99%題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-21810/16頁4.12設(shè)備一覽表設(shè)備名稱規(guī)格制造單位1恒溫培養(yǎng)箱0-100上海一恒科學(xué)儀器有限公司2恒溫?fù)u床0-65上海一恒科學(xué)儀器有限公司3轉(zhuǎn)瓶機(jī)1400*650*14000南京博健科技有限公司4-70℃450L青島海爾集團(tuán)52-8℃40m上海開靈制冷有限公司6-20℃20m上海開靈制冷有限公司7脈動(dòng)真空滅菌柜2200*2000*2200華菱醫(yī)療設(shè)備制造有限公司8脈動(dòng)真空滅菌柜2415*1200*1800華菱醫(yī)療設(shè)備制造有限公司11干熱滅菌柜1600*1800*2550華菱醫(yī)療設(shè)備制造有限公司12滅活罐413電子天平1上海一恒科技有限公司14乳化乳化泵2000L15分裝分裝機(jī)HD-20050-20ml16分裝機(jī)HD-20050-100ml17自動(dòng)膠塞清洗機(jī)2370*1320*1880上海欣麗實(shí)業(yè)有限公司18臭氧滅菌柜1600*1800*550康爾醫(yī)藥設(shè)備制造有限公司19包裝軋蓋機(jī)XF-20051375*755*160020貼簽機(jī)TLJ1650*845*120021檢驗(yàn)恒溫箱HIHENG650*445*550上海一恒科技有限公司4.13生物安全及勞動(dòng)保護(hù)技術(shù)安全上崗工人必須經(jīng)過“生物安全及自我防護(hù)”培訓(xùn)。生產(chǎn)過程中，各崗位必須嚴(yán)格按照工藝規(guī)程、崗位標(biāo)準(zhǔn)操作程序及設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作，不得違反。生產(chǎn)時(shí)必須在符合獸藥GMP要求環(huán)境條件下進(jìn)行。每次生產(chǎn)更換批號(hào)（或品種和規(guī)格），各工序須清洗工具容器和場(chǎng)地，達(dá)到清場(chǎng)要求。題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-21811/16頁各工序半成品容器加蓋密封存放，放至半成品貯存間規(guī)定的地方，防止異物混入，并有明顯標(biāo)志（有卡片），按品名、規(guī)格、批號(hào)存放或設(shè)棚欄隔開。機(jī)器設(shè)備有專人管理、維護(hù)、保養(yǎng)。嚴(yán)格執(zhí)行安全用電規(guī)定，經(jīng)常檢查電源、線路，防止漏電短路，電源要接地線，禁止?jié)袷珠_掣；機(jī)電設(shè)備嚴(yán)禁帶病運(yùn)轉(zhuǎn)，機(jī)器運(yùn)行時(shí)，嚴(yán)禁用手伸入轉(zhuǎn)動(dòng)部位；禁止用水洗電機(jī)轉(zhuǎn)軸及皮帶輪防護(hù)安全罩，操作時(shí)不能站在與皮帶輪同一線上。隨時(shí)檢查燃?xì)庀到y(tǒng)，應(yīng)保持完好無損，以免發(fā)生事故，設(shè)備、設(shè)施應(yīng)定期檢查完好情況。管道標(biāo)志明顯：水管涂綠色，藥液管涂黃色，蒸氣管涂紅色，嚴(yán)防漏氣漏液。高壓容器、管道系統(tǒng)等應(yīng)經(jīng)勞動(dòng)技術(shù)安全部門檢測(cè)合格方能使用。各工序均應(yīng)配備防火設(shè)施和其他意外應(yīng)急設(shè)施，每個(gè)員工都要學(xué)會(huì)使用滅火器材。各崗位操作人員須經(jīng)嚴(yán)格崗位培訓(xùn)并經(jīng)考核合格，憑崗位合格證才能上崗獨(dú)立操作。非本崗位人員不能頂替上班。當(dāng)班人員不能隨意離開崗位，嚴(yán)禁竄崗，必需離開時(shí)要有本崗位人員接替方能離開。交接班應(yīng)交接清楚，認(rèn)真填寫交接班記錄。各崗位上崗須按規(guī)定穿戴工作服、帽、鞋、手套。特別是接觸強(qiáng)酸、強(qiáng)堿，要穿戴防護(hù)衣、膠手套、水鞋及防護(hù)鏡，避免酸、堿液濺到身上。萬一被濺上皮膚，立即用大量水沖洗。勞動(dòng)保護(hù)1．上班人員均要按規(guī)定穿戴工作服、帽、鞋、防護(hù)手套等勞保用品。2．使用顯微鏡的人員嚴(yán)格執(zhí)行中休、班休制度，每年檢查視力一次。員工每年進(jìn)行健康檢查一次。建立健康檔案。物料注射用水的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗(yàn)1）性狀：本品為純化水經(jīng)蒸餾所得的無色的澄明液體；無臭，無味。2）檢查a

:pH值

:應(yīng)為5.0～7.0（附錄ⅥH）。b

:氨取本品50ml，照純化水的方法檢查，注：對(duì)照用氯化銨溶液改為1.0ml，應(yīng)符合規(guī)定（0.00002％）。c

:細(xì)菌內(nèi)毒素取本品，依法檢查（附錄ⅪE），每1ml中含內(nèi)毒素量應(yīng)小于0.25EU。d

:氯化物、硫酸鹽與鈣鹽、硝酸鹽與亞硝酸鹽、二氧化碳、易氧化物、不揮發(fā)物與重金屬照純化水的方法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-21812/16頁小牛血清名稱：牛血清質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：2005年版《中華人民共和國藥典》三部附錄供應(yīng)商：上海微科生化試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.3名稱：MEM質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：HG/T3935-2007供應(yīng)商：清大天一生物科技有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.4名稱：磷酸鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：HG/T2968-1999供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.5名稱：磷酸氫二鉀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：HG-T3487-2000供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.6名稱：磷酸氫二鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：GB1263—2006供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.7名稱：胰酶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：GB/T21498-2008供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.8名稱：D-氨基葡萄糖供應(yīng)商：Sigma（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-21813/16頁4.14.9名稱：無水氯化鈣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：HG/T2327-92供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.10名稱：苯酚紅質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：GB/T15351-94供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.14.11名稱：15AVG佐劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：供應(yīng)商：法國SEPPIC公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）EDTA名稱：乙二胺四乙酸二鈉(250g)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：GB12593-2007供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）3乙醇名稱：乙醇質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：中國藥典，2000年版。供應(yīng)商：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物理性狀外觀本品為粉白色乳狀液。劑型水包油型。穩(wěn)定性取疫苗10ml加入離心管中，以3000r/min離心30分鐘，管底析出的水相應(yīng)不大于0.5ml。粘度用1ml吸管（出口內(nèi)徑1.2mm），吸取25℃左右的疫苗1ml，令其垂直自然流下，記錄流出0.4ml所需的時(shí)間，應(yīng)在4無菌檢驗(yàn)應(yīng)無菌生長。題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):SC-TS-02-21814/16頁安全檢驗(yàn)用30～40日齡健康易感仔豬（IPMA法檢測(cè)PCV2抗體效價(jià)，應(yīng)低于50）5頭。各深部肌肉注射疫苗2ml。連續(xù)觀察14日。接種前1日及接種后逐日測(cè)定體溫，每日上、下午各測(cè)定1次。應(yīng)不出現(xiàn)體溫升高，或僅于接種次日體溫升高不超過1℃，在觀察期內(nèi)應(yīng)不出現(xiàn)由疫苗注射引起的任何局部或全身效力檢驗(yàn)下列方法任擇其一。（1）抗體檢測(cè)用30～40日齡健康易感仔豬（IPMA法檢測(cè)PCV2抗體，應(yīng)低于50，見附注1）10頭，隨機(jī)等分成2組。其中一組分別經(jīng)頸部肌肉注射途徑接種疫苗1ml，21日后，以相同劑量和途徑加強(qiáng)免疫1次；另一組不接種疫苗，作為對(duì)照組。二免后14日采集血，分離血清，用IPMA法（見附注1）檢測(cè)血清抗體效價(jià)。免疫豬應(yīng)至少4頭抗體效價(jià)不低于800，對(duì)照豬抗體效價(jià)均應(yīng)低于50。（2）免疫攻毒二免后14日，取上述免疫豬和對(duì)照豬，用PCV2LG株強(qiáng)毒攻擊，通過滴鼻和肌肉注射途徑各接種1ml（105.0TCID50）。稱取攻毒當(dāng)日體重。攻毒后28日，將所有豬稱重后撲殺，取腹股溝淋巴結(jié)樣品，采用熒光定量PCR法（見附注2）檢測(cè)病毒核酸載量。相對(duì)增重率（見附注3）應(yīng)不低于5%；免疫豬應(yīng)至少4頭病毒核酸載量不高于3.5×107拷貝/g組織，對(duì)照豬應(yīng)至少4頭病毒核酸載量不低于1.45×109拷貝/g組織。甲醛含量測(cè)定應(yīng)不超過0.2%。貯藏和有效期2-8℃保存，18包裝材料要求標(biāo)簽名稱：豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）標(biāo)簽質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：80克銅板紙，內(nèi)容符合《獸藥瓶簽、說明書的管理規(guī)定尺寸：24mm×60mm，39mm×98供應(yīng)商：上海鄭盛印務(wù)有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）4.17.2名稱：外用液體藥用高密度聚乙烯瓶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：符合《中華人民共和國藥品管理法》和《藥品包裝用材料和容器管理辦法》尺寸：20mm供應(yīng)商：滄州維康食品藥品包裝有限公司，江陰恒利源包裝材料有限公司（或經(jīng)公司批準(zhǔn)的其他符合規(guī)定的廠家）題目

:豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）工藝規(guī)程編號(hào):S