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第一章原核微生物原核微生物是一大類僅含一個(gè)DNA分子的原始核區(qū)而無(wú)核膜包裹的原始單細(xì)胞微生物。三菌:細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌包括三體:支原體、立克次氏體、衣原體鞭毛菌毛中介體莢膜細(xì)胞質(zhì)核糖體核質(zhì)胞質(zhì)顆粒細(xì)胞膜細(xì)胞壁

/外膜第一節(jié)細(xì)菌(bacteria)定義:是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌、以二等分裂方式繁殖和水生性較強(qiáng)的原核微生物。生存環(huán)境:溫暖潮濕、富含有機(jī)物的地方,有特殊的臭味或酸敗味,發(fā)粘、發(fā)滑一、細(xì)菌的形態(tài)、大小和重量球狀桿狀螺旋狀基本形態(tài)(一)細(xì)菌的形態(tài)1、球菌(coccus)呈球形或橢圓形,不同種的球菌在細(xì)胞分裂時(shí)會(huì)形成不同的空間排列方式,依據(jù)排列方式的不同分為:?jiǎn)?、雙、鏈、四聯(lián)、八疊、葡萄球菌。單球菌雙球菌八疊球菌四聯(lián)球菌鏈球菌葡萄球菌2、桿菌細(xì)胞呈桿狀或圓柱形,一般其粗細(xì)(直徑)比較穩(wěn)定,而長(zhǎng)度則常因培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)條件不同而有較大變化。單桿菌雙桿菌鏈桿菌球桿菌枯草芽孢桿菌地衣芽孢桿菌銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)結(jié)核分枝桿菌炭疽病的病原菌-------炭疽桿菌炭疽芽胞桿菌3-10μm大破傷風(fēng)梭菌3、螺旋菌弧菌螺旋菌螺旋體菌體彎曲、螺旋狀的細(xì)菌弧菌:菌體只有一個(gè)彎曲,其程度不足一圈,形似“C”字或逗號(hào),鞭毛偏端生。蛭弧菌霍亂弧菌螺旋菌:螺旋滿2—6環(huán),螺旋狀,兩端都有鞭毛鼠咬熱螺菌螺旋體:旋轉(zhuǎn)周數(shù)在6環(huán)以上,菌體柔軟梅毒密螺旋體▼細(xì)菌特殊形態(tài)柄細(xì)菌、腎形菌、臂微菌、網(wǎng)格硫細(xì)菌、貝日阿托氏菌(絲狀)、具有子實(shí)體的粘細(xì)菌等是特殊形態(tài)的細(xì)菌。細(xì)菌的形態(tài)不是一成不變的,受環(huán)境影響。培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)溫度培養(yǎng)基成分濃度pH值結(jié)核桿菌的正常形態(tài)結(jié)核桿菌的異常形態(tài)(二)細(xì)菌的大小細(xì)菌的大小測(cè)量單位是um球菌:直徑桿菌:長(zhǎng)×寬螺菌:長(zhǎng)、寬大小的測(cè)量方法顯微鏡測(cè)微尺顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進(jìn)行測(cè)算目鏡測(cè)微尺鏡臺(tái)測(cè)微尺每個(gè)細(xì)胞約為lx10-9~lx10-10mg,即每g細(xì)菌約含1~10萬(wàn)億個(gè)細(xì)菌個(gè)體。(三)細(xì)菌細(xì)胞的重量二、細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能一般結(jié)構(gòu):一般細(xì)菌都有的構(gòu)造特殊結(jié)構(gòu):部分細(xì)菌具有的或一般細(xì)菌在特殊環(huán)境下才有的細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核區(qū)、內(nèi)含物鞭毛、芽孢、菌毛、性毛、糖被(一)細(xì)菌細(xì)胞的一般結(jié)構(gòu)

細(xì)胞壁(cellwall)是位于細(xì)胞表面,內(nèi)側(cè)緊貼細(xì)胞膜的一層較為堅(jiān)韌,略具彈性的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。約占干重的10-25%

不同細(xì)菌細(xì)胞壁的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)不同,通過(guò)革蘭氏染色法可將所有的細(xì)菌分為革蘭氏陽(yáng)性(G+)和革蘭氏陰性(G-)。

1、細(xì)胞壁(cellwall)肽聚糖磷壁酸肽聚糖外壁層細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)磷壁酸肽聚糖(1)革蘭氏陽(yáng)性的細(xì)胞壁成分主要由肽聚糖和磷壁酸組成肽聚糖:又稱粘肽、胞壁質(zhì)、粘質(zhì)復(fù)合物或糖肽)是真細(xì)菌細(xì)胞壁中的特有成分(古生菌沒(méi)有)

G+菌細(xì)胞壁化學(xué)組成以肽聚糖為主,占細(xì)胞壁物質(zhì)總量的60-90%。肽聚糖聚糖(雙糖單位)肽N—乙酰胞壁酸(NAM)N—乙酰葡糖胺(NAG)四肽尾:L-Ala,D-Glu,L-Lys,D-Ala五肽橋:甘氨酸5肽特點(diǎn):韌、厚、層多組成:β-1,4-糖苷鍵β-1,4-糖苷鍵青霉素抗菌作用機(jī)理:主要通過(guò)作用于細(xì)胞壁肽聚糖的四肽鏈和五肽橋的結(jié)合,從而阻礙肽聚糖的合成而發(fā)揮抗菌作用。溶菌酶的作用位點(diǎn)溶菌酶殺菌作用機(jī)理:主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之間的β-1,4糖苷鍵,導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。肽聚糖結(jié)構(gòu)N-乙酰葡糖胺N-乙酰胞壁酸四肽尾五肽橋青霉素作用點(diǎn)溶菌酶作用點(diǎn)β-1,4-糖苷鍵磷壁酸是大多數(shù)G+菌所特有的成分,約占細(xì)胞壁成分的10-30%。A、主要成分:甘油磷壁酸或核糖醇磷壁酸

B、根據(jù)結(jié)合部位不同分為膜磷壁酸:結(jié)合細(xì)胞原生質(zhì)膜壁磷壁酸:結(jié)合肽聚糖分子膜磷壁酸壁磷壁酸肽聚糖細(xì)胞膜使細(xì)胞壁形成負(fù)電荷環(huán)境,吸附二價(jià)金屬離子,提高一些合成酶的活力貯藏磷元素調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)自溶素的活力,借以防止細(xì)胞因自溶而死亡賦予G+菌特異的表面抗原構(gòu)成噬菌體吸附的受體位點(diǎn)增強(qiáng)某些致病菌對(duì)宿主細(xì)胞的粘連,避免被白細(xì)胞吞噬,并有抗補(bǔ)體的作用C、主要功能:可用于菌種的鑒定(2)革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁成分G-細(xì)胞壁的組成和結(jié)構(gòu)比G+更復(fù)雜。主要成份為:脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖。肽聚糖革蘭陰性菌的細(xì)胞壁脂多糖細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞膜脂蛋白外膜磷脂周漿間隙結(jié)構(gòu)外壁(外膜)肽聚糖脂多糖磷脂脂蛋白G-有肽聚糖,肽聚糖結(jié)構(gòu)與G+基本相同。差異:a.四肽尾中的3號(hào)位上L-Lys被內(nèi)消旋二氨基庚二酸(m-DAP)取代.b.沒(méi)有特殊的肽橋。

其前后兩個(gè)單體的連接通過(guò)甲四肽尾的第四個(gè)氨基酸(D-丙氨酸)的羧基和乙四肽尾的第三個(gè)氨基酸(m-DAP

)的氨基相連。特點(diǎn):松薄層少無(wú)肽橋β-1,4-糖苷鍵G-有肽聚糖結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖G+、G-肽聚糖結(jié)構(gòu)的比較韌厚層多松薄層少無(wú)肽橋外壁層是G-細(xì)菌細(xì)胞壁所特有的結(jié)構(gòu),它位于壁的最外層,化學(xué)成分為脂多糖、磷脂和脂蛋白。脂多糖(LPS)為G-細(xì)菌特有的成分,

由類脂A、核心多糖和O-抗原側(cè)鏈構(gòu)成其中類脂A是內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ)吸附Ca2+、Mg2+等陽(yáng)離子以提高其在細(xì)胞表面濃度的作用。作為重要的抗原因子決定了G-菌的抗原表位的多樣性許多噬菌體吸附的受體具有選擇性屏障功能脂多糖的功能:又稱特異性多糖或菌體抗原,具有種的特異性內(nèi)毒素的活性中心StructureofaGram-NegativeCellWall細(xì)胞膜肽聚糖脂蛋白磷脂O-特異側(cè)鏈類脂A核心多糖脂多糖外膜細(xì)胞壁G-菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)周質(zhì)空間(periplasmicspace,periplasm)又稱壁膜間隙。在革蘭氏陰性細(xì)菌中,一般指其外膜與細(xì)胞膜之間的狹窄空間(寬約12~15nm),呈膠狀。周質(zhì)空間是進(jìn)出細(xì)胞的物質(zhì)的重要中轉(zhuǎn)站和反應(yīng)場(chǎng)所(3)G+細(xì)菌與G-細(xì)菌細(xì)胞壁的比較革蘭氏陽(yáng)性菌肽聚糖磷壁酸聚糖肽N—乙酰胞壁酸(NAM)N—乙酰葡糖胺(NAG)四肽尾五肽橋膜磷壁酸壁磷壁酸革蘭氏陰性菌外壁肽聚糖脂多糖類脂A磷脂脂蛋白O-特異側(cè)鏈核心多糖N—乙酰胞壁酸(NAM)N—乙酰葡糖胺(NAG)四肽鏈(第3位氨基酸由DAP取代)聚糖G+細(xì)菌與G-細(xì)菌細(xì)胞壁的比較成分占細(xì)胞壁干重的%肽聚糖磷壁酸脂多糖類脂質(zhì)G+

細(xì)菌G-細(xì)菌含量很高(30-95)含量較高(<50)0一般無(wú)(<2)含量很低(5-20)0含量較高含量較高(約20)G-菌胞壁G+菌胞壁肽聚糖脂多糖壁磷壁酸膜磷壁酸脂蛋白磷脂(4)革蘭氏染色C.Gram(革蘭)于1884年發(fā)明的一種鑒別不同類型細(xì)菌的染色方法。1、初染:用堿性染料草酸銨結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染。G+、G-均染成紫色2、媒染:用碘溶液進(jìn)行媒染,其作用是提高染料和細(xì)胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固。3、脫色:用乙醇或丙酮沖洗進(jìn)行脫色。在經(jīng)歷脫色后仍將結(jié)晶紫保留在細(xì)胞內(nèi)的為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,細(xì)胞仍呈紫色。而革蘭氏陰性細(xì)菌的結(jié)晶紫被洗掉,細(xì)胞呈無(wú)色。4、復(fù)染:用一種與結(jié)晶紫具有不同顏色的堿性染料對(duì)涂片進(jìn)行復(fù)染。例如沙黃,它使原來(lái)無(wú)色的革蘭氏陰性細(xì)菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌繼續(xù)保持深紫色。革蘭氏染色的步驟和機(jī)制最關(guān)鍵步驟GrampositiveorGramnegative?初染媒染脫色復(fù)染G+菌藍(lán)紫色G-菌紅色大多為嗜極菌除熱原菌屬?zèng)]有細(xì)胞壁以外,其余都具有與真細(xì)菌功能相似的細(xì)胞壁有G+菌、G-菌之分細(xì)胞壁中含有假肽聚糖、糖蛋白或蛋白質(zhì)(5)古生菌的細(xì)胞壁β-1,3糖苷鍵古生菌假肽聚糖N-乙酰葡糖胺N-乙酰塔羅糖胺糖醛酸肽橋肽尾1、多糖骨架:由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰塔羅糖胺糖醛酸以β-1,3糖苷鍵交替連接而成。2、肽尾:由L-glu、L-ala和L-lys三個(gè)L型氨基酸組成3、肽橋:由一個(gè)L-glu氨基酸組成(6)細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌:主要有四種類型L型細(xì)菌原生質(zhì)體球狀體支原體a.L型細(xì)菌(L-formofbacteria)細(xì)菌在某些環(huán)境條件下(實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi))通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺損菌株。因英國(guó)李斯德(Lister)預(yù)防研究所首先發(fā)現(xiàn)而得名(1935年,念珠狀鏈桿菌Streptobacillus

moniliformis)特點(diǎn)沒(méi)有完整而堅(jiān)韌的細(xì)胞壁,細(xì)胞呈多形態(tài);有些能通過(guò)細(xì)菌濾器,故又稱“濾過(guò)型細(xì)菌”;對(duì)滲透敏感,在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落;b.原生質(zhì)體(protoplast)在人為條件下,用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生細(xì)胞壁合成而形成的僅由一層細(xì)胞膜包裹的、圓球形、對(duì)滲透壓變化敏感的細(xì)胞。一般由革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌形成。特點(diǎn)對(duì)環(huán)境條件變化敏感,低滲透壓、振蕩、離心甚至通氣等都易引起其破裂;有的原生質(zhì)體具有鞭毛,但不能運(yùn)動(dòng),細(xì)胞不能分裂、也不被相應(yīng)噬菌體所感染;在適宜條件(如高滲培養(yǎng)基)可生長(zhǎng)繁殖、形成菌落,形成芽孢。及恢復(fù)成有細(xì)胞壁的正常結(jié)構(gòu)。比正常有細(xì)胞壁的細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì),是研究遺傳規(guī)律和進(jìn)行原生質(zhì)體育種的良好實(shí)驗(yàn)材料。c.球狀體(sphaeroplast)采用上述同樣方法,針對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌處理后而獲得的殘留部分細(xì)胞壁(外壁)的球形體。

與原生質(zhì)體相比,它對(duì)外界環(huán)境具有一定的抗性,可在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。D、支原體自然界長(zhǎng)期進(jìn)化形成,獨(dú)立成為柔膜菌綱,柔膜菌目。缺壁細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室中形成自然界中長(zhǎng)期進(jìn)化形成自發(fā)缺壁突變?nèi)斯し椒ㄈケ趶氐壮M部分去除L型細(xì)菌原生質(zhì)體球狀體支原體(7)細(xì)胞壁的功能賦予細(xì)菌特定的的抗原性、致病性和對(duì)抗生素、噬菌體的敏感性。維持細(xì)胞固有的形態(tài);保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷和滲透壓危害;為細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂和鞭毛運(yùn)動(dòng)所必需;屏障保護(hù)功能;(1)細(xì)胞膜概念:細(xì)胞質(zhì)膜(cytoplasmicmembrane),又稱質(zhì)膜(plasmamembrane)、細(xì)胞膜(cellmembrane)或內(nèi)膜(innermembrane)是緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)、包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜.2、細(xì)胞膜與間體(2)細(xì)胞膜的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)模型:a.化學(xué)組成親水的極性端:甘油-3-磷酸疏水的非極性端:長(zhǎng)鏈脂肪酸細(xì)胞膜磷脂蛋白質(zhì)整合蛋白(跨膜蛋白)周邊蛋白(膜外蛋白)b.液態(tài)鑲嵌模型(fluidmosaicmodel)①膜的主體是脂質(zhì)雙分子層;②脂質(zhì)雙分子層具有流動(dòng)性;③整合蛋白因其表面呈疏水性,故可“溶”于脂質(zhì)雙分子層的疏水性內(nèi)層中;④周邊蛋白表面含有親水基團(tuán),故可通過(guò)靜電引力與脂質(zhì)雙分子層表面的極性頭相連;⑤脂質(zhì)分子間或脂質(zhì)與蛋白質(zhì)分子間無(wú)共價(jià)結(jié)合;⑥脂質(zhì)雙分子層猶如一“海洋”,周邊蛋白可在其上作“漂浮”運(yùn)動(dòng),而整合蛋白則似“冰山”狀沉浸在其中作橫向移動(dòng)。1972年,辛格(J.S.Singer)和尼科爾森(G.L.Nicolson)abcdef(3)細(xì)胞膜的生理功能:①選擇性地控制細(xì)胞內(nèi)、外的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的運(yùn)送;②是維持細(xì)胞內(nèi)正常滲透壓的結(jié)構(gòu)屏障;③合成細(xì)胞壁和糖被的各種組分的重要基地;④膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代謝的酶系,是細(xì)胞的產(chǎn)能場(chǎng)所;⑤是鞭毛基體的著生部位和鞭毛旋轉(zhuǎn)的供能部位;(4)間體(mesosome,或中體):細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)褶而形成的囊狀構(gòu)造,其中充滿著層狀或管狀的泡囊。多見(jiàn)于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。青霉素酶分泌、DNA復(fù)制、分配以及細(xì)胞分裂有關(guān)“間體”僅是電鏡制片時(shí)因脫水操作而引起的一種贗像細(xì)胞質(zhì)的主要成分為核糖體、貯藏物、多種酶類和中間代謝物、質(zhì)粒、各種營(yíng)養(yǎng)物和大分子的單體等,少數(shù)細(xì)菌還有類囊體、羧酶體、氣泡或伴孢晶體等。(1)概念:細(xì)胞質(zhì)(cytoplasm)是細(xì)胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。含水量約80%。3、細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物核糖體是細(xì)胞質(zhì)中的一種核糖核蛋白的顆粒狀物質(zhì),常以游離狀態(tài)或多聚核糖狀態(tài)分布于細(xì)胞質(zhì)中。其沉降系數(shù)均為70s。組成:30S小亞基和50S大亞基組成(2)核糖體(ribosomes)四環(huán)素、鏈霉素紅霉素、氯霉素功能:是蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所。(3)貯藏物(reservematerials):①聚-β-羥丁酸(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)功能:碳源和能源的貯藏物貯藏物是一類由不同化學(xué)成分累積而成的不溶性沉淀顆粒,主要功能是貯存營(yíng)養(yǎng)物。②多糖類貯藏物糖原粒:碘液染成褐色淀粉粒:碘液染成深蘭色功能:碳源和能源的貯藏物③異染粒(metachromaticgranules)功能:貯藏磷元素和能量異染粒又稱迂回體或捩轉(zhuǎn)菌素,最先在迂回螺菌中發(fā)現(xiàn)并可用美藍(lán)或甲苯胺藍(lán)染成紅色的。硫粒(sulfurglobules)

很多真細(xì)菌在含有還原性的硫化物如H2S,硫代硫酸鹽等豐富環(huán)境中時(shí),常在細(xì)胞內(nèi)以折光性很強(qiáng)的硫粒。

功能:貯存硫元素和能量貯藏物組成功能;聚-羥基丁酸PHB貯備碳和能源多糖類貯藏物糖原粒淀粉粒貯備碳和能源異染粒多聚磷酸鹽貯備磷元素和能量硫粒硫粒貯備硫元素和能源細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的貯藏物

以上貯藏物均有降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓的作用(4)氣泡(gasvocuoles)許多光合營(yíng)養(yǎng)型、無(wú)鞭毛運(yùn)動(dòng)的水生細(xì)菌中存在的充滿氣體的泡囊狀內(nèi)含物,外由2nm厚的蛋白質(zhì)膜包裹。功能:調(diào)節(jié)細(xì)胞相對(duì)密度,以使細(xì)胞漂浮在最適水層中,獲取光能、O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(5)質(zhì)粒(plasmid)細(xì)胞核外的遺傳物質(zhì)以小型環(huán)狀的DNA形式存在質(zhì)粒染色體

適合于作基因克隆載體的質(zhì)粒必須具備的條件:復(fù)制基因選擇性標(biāo)記克隆位點(diǎn)質(zhì)粒應(yīng)用:基因工程,體外重組.細(xì)菌沒(méi)有真正的細(xì)胞核,細(xì)菌的核無(wú)核膜和核仁,只是在菌體中央有由環(huán)狀DNA分子高度纏繞而成的擬核。4、核區(qū)(nuclearregionorarea)(二)細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)(1)概念包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì)。主要有水分(占90%)、多糖類、多肽類組成。1、糖被(glycocalyx)不宜著色(2)糖被的成分多糖、多肽或蛋白質(zhì),尤以多糖居多根據(jù)形狀和厚度的不同,將糖被分為四類:大莢膜(macrocapsule)、微莢膜(microcapsule)、粘液層(slimelayer)和菌膠團(tuán)(zoogloea)。糖被包裹在單個(gè)細(xì)胞上包裹在細(xì)胞群上:菌膠團(tuán)在壁上有固定層層次厚:大夾膜層次?。何A膜松散、未固定在壁上:粘液層(3)糖被的分類莢膜粘液層菌膠團(tuán)產(chǎn)莢膜的細(xì)菌菌落通常光滑透明,稱光滑型(S型)菌落.不產(chǎn)莢膜細(xì)菌菌落表面粗糙,稱粗糙型(R型)菌落S型菌落R型菌落(4)功能保護(hù)細(xì)菌免受干燥的影響,能抵抗吞噬細(xì)胞的吞噬貯藏養(yǎng)料,以備營(yíng)養(yǎng)缺乏時(shí)重新利用;保護(hù)細(xì)菌免受重金屬離子的毒害表面附著功能細(xì)菌間的信息識(shí)別作用堆積代謝產(chǎn)物致病功能:為主要表面抗原—莢膜抗原(K抗原),是有些病原菌的毒力因子5、糖被的應(yīng)用鑒定菌種用作藥物和生化試劑污水處理工業(yè)原料有害:食品發(fā)粘、變質(zhì);增強(qiáng)致病力;發(fā)生齲齒;污染發(fā)酵液。葡聚糖黃原膠(1)概念某些細(xì)菌細(xì)胞表面著生的一至數(shù)十條長(zhǎng)絲狀、波曲的附屬物。2、鞭毛(flagellum,復(fù)flagella)(2)主要成份:蛋白質(zhì)(3)鞭毛的著生方式鞭毛的有無(wú)、以及著生方式在細(xì)菌分類和鑒定工作中是一項(xiàng)重要的形態(tài)學(xué)指標(biāo)(4)觀察和判斷細(xì)菌鞭毛的方法電子顯微鏡直接觀察鞭毛長(zhǎng)度:15~20μm;直徑:0.01~0.02μm光學(xué)顯微鏡下觀察:鞭毛染色和暗視野顯微鏡根據(jù)培養(yǎng)特征判斷:半固體穿刺接種:菌體沿穿刺線擴(kuò)散生長(zhǎng)平板培養(yǎng)基上的菌落形狀:大、薄、不規(guī)則,邊緣不整齊C環(huán)基體S-M環(huán):類似馬達(dá)鞭毛絲:鞭毛抗原(H抗原)C環(huán)(5)鞭毛的結(jié)構(gòu)G-鞭毛基體P環(huán)L環(huán)鉤形鞘(鞭毛鉤)G+菌:只有S環(huán),M環(huán)(6)功能:通過(guò)栓菌試驗(yàn)證明鞭毛運(yùn)動(dòng)是旋轉(zhuǎn)論,而不是揮鞭論具有推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)功能,為細(xì)菌的“運(yùn)動(dòng)器官”。(6)生長(zhǎng):靠其頂部延伸,而非基部延伸又稱傘毛或纖毛長(zhǎng)在細(xì)菌體表的纖細(xì)、中空、短直、數(shù)量較多的蛋白質(zhì)類附屬物。3、菌毛(fimbria,復(fù)數(shù)fimbriae)一般以革蘭氏陰性菌中常見(jiàn)、多為致病菌。功能:1、使菌體附著于其它細(xì)胞或物體的表面2、是許多G-的抗原構(gòu)造和成分與菌毛相同,但比菌毛長(zhǎng),數(shù)量?jī)H一至少數(shù)幾根。性毛一般見(jiàn)于革蘭氏陰性細(xì)菌的雄性菌株(即供體菌)功能是雄性菌株向雌性菌株(即受體菌)傳遞遺傳物質(zhì)。有的性毛還是RNA噬菌體的特異性吸附受體。4、性毛(pili,單數(shù)pilus)(1)概念某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期,在細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體,稱為芽孢(endospore或spore,偶譯“內(nèi)生孢子”)。每個(gè)細(xì)菌只能產(chǎn)生一個(gè)芽孢,因而芽孢無(wú)繁殖力5、芽孢——特殊的休眠構(gòu)造

A近中央

B末端

C中央芽孢的形態(tài)及其在細(xì)胞中的位置:(2.)芽孢的特點(diǎn)A.抗逆性強(qiáng)(熱、干燥、輻射等)生物界抗逆性最強(qiáng)的生命體。

能否消滅芽孢是衡量各種消毒滅菌手段的最重要的指標(biāo)。C.芽孢是休眠體,不是繁殖體。在適宜的條件下可以重新轉(zhuǎn)變成為營(yíng)養(yǎng)態(tài)細(xì)胞B.折光性強(qiáng),不易著色(芽孢染色法)。D.芽孢的有無(wú)、形態(tài)、大小和著生位置是細(xì)菌分類和鑒定中的重要指標(biāo)。芽孢有多層結(jié)構(gòu),主要包括孢外壁、芽孢衣、皮層和核心(3)芽孢的結(jié)構(gòu)芽孢孢外壁芽孢衣皮層核心芽孢壁芽孢質(zhì)膜芽孢質(zhì)核區(qū)孢外壁芽孢衣皮層芽孢質(zhì)芽孢核區(qū)芽孢膜芽孢壁核心-------脂蛋白-----角蛋白--芽孢肽聚糖和DPA-Ca(4)芽孢的形成DNA濃縮細(xì)胞膜內(nèi)陷形成前芽孢前芽孢前芽孢的雙層隔膜形成芽孢衣形成形成皮層芽孢成熟細(xì)胞裂解,釋放芽孢少數(shù)芽孢桿菌如蘇云金芽孢桿菌

,會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體——δ內(nèi)毒素,稱為伴孢晶體。功能:因其對(duì)鱗翅目的幼蟲(chóng)有毒性作用,因而可將這類產(chǎn)伴孢晶體的細(xì)菌制成有利于環(huán)境保護(hù)的生物農(nóng)藥——細(xì)菌殺蟲(chóng)劑。特點(diǎn):不溶于水,對(duì)蛋白酶類不敏感;容易溶于堿性溶劑。6伴孢晶體(parasporalcrystal)伴孢晶體鱗翅目幼蟲(chóng)口服伴孢晶體在腸道迅速溶解(中腸pH為9.0-10.5)吸附于上皮細(xì)胞,引起滲透性喪失,腸道穿孔腸道中的堿性溶液進(jìn)入血液,后者pH升高,昆蟲(chóng)全身麻痹而死亡伴孢晶體的作用蛋白原毒素亞基

裂殖主要為二分裂,此外還有三分裂和復(fù)分裂細(xì)菌的二分裂繁殖過(guò)程分為三個(gè)連續(xù)步驟:核的分裂橫隔壁形成;子細(xì)胞分裂。三、細(xì)菌的繁殖細(xì)菌主要是通過(guò)無(wú)性繁殖產(chǎn)生后代。其繁殖方式是裂殖(主要)和芽殖。二分裂(binaryfission)芽殖(budding)芽殖是指在細(xì)胞表面(尤其在其一端)形成一個(gè)小突起,待其長(zhǎng)大到與母細(xì)胞相仿后相互分離并獨(dú)立生活的一種繁殖方式。

四、細(xì)菌的群體形態(tài)(一)、在固體培養(yǎng)基上(內(nèi))的群體形態(tài)1、菌落:在固體培養(yǎng)基上,由單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體。不同的微生物種類,其菌落特征不同。同一種菌在不同培養(yǎng)條件下菌落特征也不盡相同。菌落的特征:大小、形狀、顏色、邊緣、質(zhì)地、透明度、光澤、表面、濕潤(rùn)度等。

當(dāng)一個(gè)固體培養(yǎng)基表面有許多菌落連成一片時(shí),便稱為-----2、菌苔(二)、在半固體培養(yǎng)基上(內(nèi))的群體形態(tài)(三)、在液體培養(yǎng)基上(內(nèi))的群體形態(tài)細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)大小球菌桿菌螺旋菌一般結(jié)構(gòu)特殊結(jié)構(gòu)壁膜核質(zhì)糖被鞭毛菌毛性毛芽孢結(jié)構(gòu)組成功能知識(shí)結(jié)構(gòu)繁殖方式群體形態(tài)G+:磷壁酸、肽聚糖G-:脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖革蘭氏染色:初染、媒染、脫色、復(fù)染古細(xì)菌:假肽聚糖缺壁細(xì)菌:作用:液態(tài)鑲嵌模型核區(qū)核糖體、內(nèi)含物、質(zhì)粒結(jié)構(gòu)組成功能(

)

1.屬于細(xì)菌細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)的為

A、莢膜

B、細(xì)胞壁

C、芽胞

D、鞭毛

(

)

2.菌苔是微生物

培養(yǎng)特征。

A、固體平板

B、固體斜面

C、液體表面

D、明膠穿刺(

)

3.用來(lái)測(cè)量細(xì)菌大小的單位是

A、

C、m

B、mm

C、

um

D、nm

(

)

4.細(xì)菌缺乏下列哪一種結(jié)構(gòu)仍可存活

A、細(xì)胞壁

B、細(xì)胞膜

C、細(xì)胞質(zhì)

D、核質(zhì)(

)

5.細(xì)菌革蘭氏染色的正確程序是

A、95%乙醇→結(jié)晶紫→沙黃→碘液

B、結(jié)晶紫→碘液→95%乙醇→沙黃

C、結(jié)晶紫→95%乙醇→碘液→沙黃

D、沙黃→碘液→95%乙醇→結(jié)晶紫

(

)

6.細(xì)菌主要繁殖方式為

A、增殖

B、芽殖

C、裂殖

D、孢子生殖

(

)

7.下列耐熱能力最強(qiáng)的是

A、營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞

B、菌絲

C、孢子

D、芽孢(

)

8.革蘭氏染色中哪一步驟省略后不會(huì)影響對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌的區(qū)分A、碘染

B、酒精脫色

C、蕃紅復(fù)染

D、固定(

)

9.鞭毛被認(rèn)為是細(xì)菌的

A、接合通道

B、運(yùn)動(dòng)器官

C、吸收營(yíng)養(yǎng)的器官

D、用于附著寄主

(

)

10.革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁特有的成分是

A、肽聚糖

B、幾丁質(zhì)

C、

脂多糖

D、

磷壁酸一、概念在形態(tài)上具有分枝狀菌絲、菌落形態(tài),以孢子進(jìn)行繁殖。與霉菌相似“介于細(xì)菌與絲狀真菌之間又接近細(xì)菌的一類絲狀原核生物”近代生物學(xué)技術(shù)放線菌實(shí)際上是屬于細(xì)菌范疇內(nèi)的原核微生物,只不過(guò)其細(xì)胞形態(tài)為分枝狀菌絲。是一類主要呈菌絲狀生長(zhǎng)和以孢子繁殖的陸生性較強(qiáng)的原核生物。第二節(jié)放線菌(Actinomyces)細(xì)胞的構(gòu)造和細(xì)胞壁的化學(xué)組成與細(xì)菌相似單細(xì)胞,大多由分枝發(fā)達(dá)的菌絲組成;氣生菌絲孢子絲孢子基內(nèi)菌絲培養(yǎng)基菌絲直徑與桿菌類似,約0.2-1.2um;細(xì)胞壁組成與細(xì)菌類似,革蘭氏染色陽(yáng)性(少數(shù)陰性)按菌絲形態(tài)和功能可分為:營(yíng)養(yǎng)菌絲氣生菌絲孢子絲二、形態(tài)與結(jié)構(gòu)多核的單細(xì)胞生兒育女1、營(yíng)養(yǎng)菌絲(基內(nèi)菌絲)匍匐生長(zhǎng)于培養(yǎng)基內(nèi),吸收營(yíng)養(yǎng),也稱基內(nèi)菌絲。一般無(wú)隔膜,直徑0.2-0.8

mm,長(zhǎng)度差別很大,有的可產(chǎn)生色素。功能:吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),排泄廢物。2、氣生菌絲營(yíng)養(yǎng)菌絲發(fā)育到一定階段,伸向空間形成氣生菌絲,疊生于營(yíng)養(yǎng)菌絲上,可覆蓋整個(gè)菌落表面。在光學(xué)顯微鏡下觀察,顏色較深,直徑較粗(1-1.4

mm),有的產(chǎn)色素。功能:分化形成孢子絲3、孢子絲氣生菌絲發(fā)育到一定階段,其上可分化出形成孢子的菌絲,即孢子絲,又稱產(chǎn)孢絲或繁殖菌絲。其形狀和排列方式因種而異,常被作為對(duì)放線菌進(jìn)行分類的依據(jù)。功能:形成孢子,起繁殖作用基內(nèi)菌絲埋頭大吃朝天生長(zhǎng)垂直單輪(無(wú)螺旋)彎曲叢生松環(huán)、初級(jí)螺旋鉤狀松螺旋緊螺旋單輪(有螺旋)雙輪(無(wú)螺旋)雙輪(有螺旋)極廣泛,土壤中最多三、分布:含水量低,有機(jī)質(zhì)豐富的中性或偏堿性的土壤四、繁殖方式繁殖方式借孢子借菌絲常見(jiàn)于液體培養(yǎng)中,工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)抗生素時(shí)都以此法大量繁殖放線菌分生孢子孢囊孢子孢子是放線菌的繁殖體1.分生孢子(conidiospores):在氣生菌絲頂端形成成串或單個(gè)孢子,菌絲分裂形成。分生孢子的形成

在氣生菌絲頂端或基內(nèi)菌絲頂端膨大或盤卷纏繞形成孢子囊,在孢子囊內(nèi)形成孢囊孢子。2、孢囊孢子五、菌落形態(tài)固體培養(yǎng)基菌落形態(tài)能產(chǎn)生大量分枝和氣生菌絲的菌種(如鏈霉菌)不能產(chǎn)生大量菌絲體的菌種(如諾卡氏菌)菌落質(zhì)地致密,與培養(yǎng)基結(jié)合緊密,小而不蔓延,不易挑起或挑起后不易破碎。粘著力差,粉質(zhì),針挑起易粉碎液體靜止培養(yǎng)

表面常形成一層膜,但培養(yǎng)液清六、放線菌與人類絕大多數(shù)抗生素由放線菌產(chǎn)生用來(lái)生產(chǎn)纖維素、酶、維生素具固氮作用,用于生產(chǎn)生物菌肥少數(shù)寄生型放線菌可引起動(dòng)植物病害;有的放線菌能破壞棉毛織品和紙張90%來(lái)自鏈霉菌弗蘭克菌屬自然界物質(zhì)循環(huán)第三節(jié)藍(lán)細(xì)菌(Cyanobacteria)1、概念也稱藍(lán)藻或藍(lán)綠藻(blue-greenalgae),G-,無(wú)鞭毛,含有葉綠素a、能進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用的大型原核微生物。以前曾歸于藻類,因?yàn)樗透叩戎参镆粯泳哂泄夂仙?---葉綠素a,能進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用。后來(lái),由于其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,具有擬核,核糖體等特點(diǎn)將其歸為原核生物早知螺旋藻,何必吃仙桃2、特性1)分布極廣;2)形態(tài)差異極大,有球狀、桿狀和絲狀等形態(tài);3)細(xì)胞中含有葉綠素a,進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用;4)具有原核生物的典型細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞核無(wú)核膜,也不進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞壁含胞壁酸和二氨基庚二酸,革蘭氏染色陰性。5)營(yíng)養(yǎng)極為簡(jiǎn)單,不需要維生素,以硝酸鹽或氨作為氮源,多數(shù)能固氮,其異形胞是進(jìn)行固氮的場(chǎng)所。6)分泌粘液層、莢膜或形成鞘衣,因此具有強(qiáng)的抗干旱能力。7)無(wú)鞭毛,但能在固體表面滑行,進(jìn)行光趨避運(yùn)動(dòng)。8)許多種類細(xì)胞質(zhì)中有氣泡,使菌體漂浮,保持在光線最充足的地方,以利光合作用?!跋蠕h生物”之美稱。它被認(rèn)為是地球上生命進(jìn)化過(guò)程中第一個(gè)產(chǎn)氧的光合生物,對(duì)地球上從無(wú)氧到有氧的轉(zhuǎn)變、真核生物的進(jìn)化起著里程碑式的作用。光合色素位于類囊體的中細(xì)胞核無(wú)核膜,也不進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞壁含胞壁酸和二氨基庚二酸,革蘭氏染色陰性。

羧酶體固定CO2色球藍(lán)細(xì)菌屬為單細(xì)胞個(gè)體或群體,群體種類在細(xì)胞壁外分泌果膠類物質(zhì)構(gòu)成膠質(zhì)鞘膜,彼此融合形成大的膠團(tuán)(球形或塊狀)。3.藍(lán)細(xì)菌的分群第一群:色球藍(lán)細(xì)菌群第二群:厚球藍(lán)細(xì)菌群第三群:無(wú)異形胞絲狀藍(lán)細(xì)菌群第四群:有異形胞絲狀藍(lán)細(xì)菌群第五群:多分裂的有異形胞絲狀藍(lán)細(xì)菌群一種特化細(xì)胞,壁厚、色深、與異形胞相似,著生在菌絲的中間或末端,富含儲(chǔ)藏物,抵抗抗干旱或冷凍的休眠胞。異形胞位于絲狀生長(zhǎng)藍(lán)細(xì)菌細(xì)胞鏈的中間或末端,由營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞特化而來(lái)的形大、壁厚、專司固氮功能(N2NH3)的細(xì)胞。靜息孢子4、藍(lán)細(xì)菌的特化形態(tài)異形胞一些有異形胞的菌種形成靜息孢子靜息孢子少數(shù)種類在細(xì)胞內(nèi)形成許多球形或三角形的內(nèi)孢子,待成熟后即可釋放,具有繁殖作用。鏈絲緞?dòng)址Q為連鎖體或是藻殖段,是由長(zhǎng)細(xì)胞鏈斷裂而成的短鏈段,具有繁殖功能。內(nèi)孢子5、藍(lán)細(xì)菌與人類的關(guān)系A(chǔ)、具有固氮能力,是良好的綠肥如滿江紅魚(yú)腥藍(lán)細(xì)菌B、食用種類如發(fā)菜念珠藍(lán)細(xì)菌、普通木耳念珠藍(lán)細(xì)菌、盤狀螺旋藍(lán)細(xì)菌、最大螺旋藍(lán)細(xì)菌(1)重大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值B、少數(shù)種類可產(chǎn)生誘發(fā)人類肝癌的毒素如:微囊藍(lán)細(xì)菌屬(2)危害A、海水的赤潮和湖泊的水華的元兇,給漁業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的危害第四節(jié)支原體、立克次氏體和衣原體支原體(Mycoplasma)

立克次氏體(Rickettsia)

衣原體(Chlamydia)革蘭氏陰性細(xì)菌,其大小和特性均介于通常的細(xì)菌與病毒之間。一、支原體或枝原體(Mycoplasma)是一類無(wú)細(xì)胞壁、介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生生活間的最小型的原核微生物。細(xì)胞很小缺乏細(xì)胞壁一般以二分裂和出芽方式繁殖體外培養(yǎng)的要求苛刻,需含血清、酵母膏或固醇的營(yíng)養(yǎng)豐富的復(fù)合培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。形成“油煎蛋”狀菌落具有氧化型或發(fā)酵型的產(chǎn)能代謝,在好氧或厭氧條件下生長(zhǎng)對(duì)能抑制蛋白質(zhì)生物合成的抗生素和破壞含甾醇體的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的抗生素都敏感

基因組很小細(xì)胞膜含有甾醇,因而更堅(jiān)硬特點(diǎn)兩性霉素B、皂素對(duì)其有作用自然界獨(dú)立生活最小的原核微生物制霉菌素、兩性霉素B、皂素鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素是大小介于通常的細(xì)菌與病毒之間,在許多方面類似細(xì)菌,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的原核微生物。H.T.Ricketts1909年,首次發(fā)現(xiàn)斑疹傷寒的病原體,并因研究此病而犧牲,1916年人們以他的名字命名這類病原體作為紀(jì)念。二、立克次氏體(Rickettsia)6、對(duì)理化因素抵抗力不強(qiáng),尤對(duì)熱敏感,一般在56℃,30min即被滅活。對(duì)一些廣譜抗生素敏感。立克次氏體一般具有以下特性3、專性細(xì)胞內(nèi)寄生,以二分裂方式繁殖2、有細(xì)胞壁、革蘭氏染色陰性,無(wú)鞭毛5、節(jié)肢動(dòng)物為傳播媒介不能用人工培養(yǎng)基培養(yǎng),須用雞胚、敏感動(dòng)物及動(dòng)物組織細(xì)胞來(lái)培養(yǎng)1、細(xì)胞多形,細(xì)胞較大,光鏡可見(jiàn)。4、有不完整的產(chǎn)能代謝途徑其又被稱為蟲(chóng)媒微生物不能利用葡萄糖,只能利用谷氨酸或谷氨酰胺產(chǎn)能7、同時(shí)有DNA和RNA兩種核酸,基因組很小皮膚出現(xiàn)皮疹1、概念介于立克次氏體與病毒之間,能通過(guò)細(xì)菌濾器,專性活細(xì)胞內(nèi)寄生的一類原核微生物。過(guò)去誤認(rèn)為“大病毒”,但它們的生物學(xué)特性更接近細(xì)菌而不同于病毒。三、衣原體(Chlamydia)衣原體的發(fā)現(xiàn)1956年我國(guó)學(xué)者湯飛凡等從沙眼中分離衣原體成功,證明其為獨(dú)特的原核生物2、特性1)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與細(xì)菌類似;具有類似的細(xì)胞壁,但無(wú)肽聚糖;70S核糖體也是由30S和50S二個(gè)亞基組成,核酸為DNA和RNA兩種)2)細(xì)胞呈球形或橢圓形,直徑0.2-0.3mm,能通過(guò)細(xì)菌濾器;3)專性活細(xì)胞內(nèi)寄生;衣原體有一定的代謝活性,能進(jìn)行有限的大分子合成,但缺乏產(chǎn)生能量的系統(tǒng),必須依賴宿主獲得ATP,因此又被稱為“能量寄生型生物”。4)在宿主細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖具有獨(dú)特的生活周期,即存在原體和始體兩種形態(tài)。5)衣原體廣泛寄生于人類、哺乳動(dòng)物及鳥(niǎo)類,少數(shù)致?。?)衣原體不耐熱,60℃10min即被滅活,但它不怕低溫,冷凍干燥可保藏多年。對(duì)紅霉素、氯霉素、四環(huán)素敏感。沙眼衣原體是人類沙眼的病原體,甚至引起結(jié)膜炎、角膜炎、角膜血管翳等臨床癥狀,成為致盲的重要原因。衣原體生活史始體有感染力,無(wú)繁殖力無(wú)感染力,有繁殖力特征細(xì)菌放線菌藍(lán)細(xì)菌支原體立克次氏體衣原體直徑0.2-0.53-100.2-0.250.2-0.50.2-0.3可見(jiàn)性光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡光鏡勉強(qiáng)可見(jiàn)光學(xué)顯微鏡光鏡勉強(qiáng)可見(jiàn)過(guò)濾性不能過(guò)濾不能過(guò)濾不能過(guò)濾能過(guò)濾不能過(guò)濾能過(guò)濾形狀球、桿、螺旋絲狀多樣多變球或桿桿或球革蘭氏染色陽(yáng)性或陰性陽(yáng)性陰性陰性陰性陰性細(xì)胞壁有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁與細(xì)菌相似與細(xì)菌相似缺少與細(xì)菌相似與細(xì)菌相似,無(wú)肽聚糖繁殖方式二分裂孢子二分裂二分裂二分裂二分裂培養(yǎng)方法人工培養(yǎng)基人工培養(yǎng)基人工培養(yǎng)基人工培養(yǎng)基宿主細(xì)胞宿主細(xì)胞核糖體有(70S)有(70S)有(70S)有(70S)有(70S)有(70S)大分子合成有有有有有(少)有產(chǎn)生ATP系統(tǒng)有有有有有無(wú)入侵方式多樣直接直接直接昆蟲(chóng)媒介不清楚光合作用部分有無(wú)有無(wú)無(wú)無(wú)固氮作用部分有有有無(wú)無(wú)無(wú)對(duì)抗生素敏感敏感敏感敏感(青霉素除外)敏感敏感三菌和三體的比較主要以節(jié)肢動(dòng)物(虱、蜱、螨等)為媒介,寄生在它們的消化道表皮細(xì)胞中,然后通過(guò)節(jié)肢動(dòng)物叮咬和排泄物傳播給人和其他動(dòng)物。

鸚鵡衣原體(姬姆沙

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