紫外分光光度計(jì)

紫外分光光度計(jì)第1頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基本結(jié)構(gòu)1、輻射光源2、單色器（分光系統(tǒng)）3、樣品室（吸收池）4、檢測(cè)器5、測(cè)量信號(hào)顯示系統(tǒng)第2頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、光源

儀器對(duì)光源的基本要求是，在廣泛的光譜區(qū)內(nèi)能穩(wěn)定發(fā)射連續(xù)光譜、有足夠輻射強(qiáng)度而且輻射能量隨波長(zhǎng)無(wú)明顯變化。

可見區(qū)：鎢絲燈、鹵素?zé)?/p>

波長(zhǎng)：320~2500nm

紫外區(qū)：氫燈、氘燈

波長(zhǎng)：180~375nm一、基本結(jié)構(gòu)第3頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、單色器

單色器是能從光源波長(zhǎng)連續(xù)的復(fù)合光中分出單色光的光學(xué)裝置，其主要功能為產(chǎn)生光譜純度高的波長(zhǎng)且波長(zhǎng)在紫外—可見區(qū)域內(nèi)任意可調(diào)。

單色器一般由入射狹縫、準(zhǔn)光器（透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光）、色散元件、聚焦元件和出射狹縫等幾部分組成。

其中色散元件是核心部分，其分光作用，主要是棱鏡和光柵。一、基本結(jié)構(gòu)第4頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、吸收池

用于盛放分析試樣，一般有石英和玻璃材料兩種。4、檢測(cè)器

將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)的部件；基本要求是靈敏度高、響應(yīng)時(shí)間快、對(duì)輻射能量的響應(yīng)線性關(guān)系好；

目前應(yīng)用最廣泛的是硅光電池、光電管和光電倍增管。一、基本結(jié)構(gòu)第5頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、測(cè)量信號(hào)指示系統(tǒng)

將檢測(cè)器輸出的信號(hào)進(jìn)一步放大，然后用記錄儀紀(jì)律下來(lái)。

常見的信號(hào)顯示裝置有直讀檢流計(jì)、電位調(diào)節(jié)指零裝置、自動(dòng)記錄和數(shù)字顯示裝置。一、基本結(jié)構(gòu)第6頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、分類及特點(diǎn)1、單光束分光光度計(jì)特點(diǎn)：

光路系統(tǒng)簡(jiǎn)單

光源能量損失小

機(jī)械振動(dòng)小

噪聲小

信噪比高原理：由氘燈D2或鎢絲燈W發(fā)出連續(xù)光譜，經(jīng)反射鏡M1和M2反射進(jìn)入單色器，經(jīng)過棱鏡P虎撲光柵分光將單色光通過狹縫S射入樣品池Sa，分別通過參比溶液和樣品溶液，進(jìn)行光強(qiáng)度（吸收）的測(cè)量。第7頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、雙光束分光光度計(jì)二、分類及特點(diǎn)原理：由光源發(fā)出的光通過單色器分光，將一束單色光從狹縫送出，經(jīng)旋轉(zhuǎn)鏡Sc1分成強(qiáng)度相等的兩束光，一束通過參比池，另一束通過樣品池。

特點(diǎn)：能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線第8頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)二、分類及特點(diǎn)原理：同一光源發(fā)出的光被分為兩束，分別經(jīng)過兩個(gè)單色器后獲得兩束不同波長(zhǎng)的單色光，利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池。第9頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)

優(yōu)點(diǎn)：

可消除參比池與樣品池的不同而引起的誤差；

可消除不同混濁度引起的背景吸收；

適當(dāng)選擇波長(zhǎng)，可簡(jiǎn)化混合組分同時(shí)測(cè)定過程。二、分類及特點(diǎn)第10頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、操作過程1、光源的調(diào)節(jié)2、分光光度計(jì)的校正①波長(zhǎng)的校正②吸光度的校正③吸收池的校正3、測(cè)量條件的選擇①測(cè)量波長(zhǎng)的選擇②狹縫的調(diào)節(jié)③測(cè)量誤差與適宜吸光度范圍選擇第11頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、顯色反應(yīng)在可見光區(qū)進(jìn)行分光光度測(cè)定時(shí)，長(zhǎng)選擇合適的顯色劑將被測(cè)組分轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩衔?，然后進(jìn)行測(cè)定。

影響顯色反應(yīng)的因素：

酸度

顯色劑的濃度

顯色時(shí)間和反應(yīng)溫度

試樣中共存離子的干擾第12頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月選擇顯色劑的原則：①顯色反應(yīng)的靈敏度高；②顯色劑的選擇性好；③顯色時(shí)顏色變化鮮明；④生成的有色化合物穩(wěn)定性好、組成恒定。四、顯色反應(yīng)第13頁(yè)，課件共15頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、應(yīng)用1、定性分析①化合物純度的鑒定②未知物的定性鑒定③分子結(jié)構(gòu)的推斷2、定量分析①校正曲線法②標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比法③