實(shí)驗(yàn)一 光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)及使用方法

實(shí)驗(yàn)一光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)及使用方法第1頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、目的要求熟悉普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和性能掌握顯微鏡的使用方法了解光學(xué)顯微鏡的維護(hù)方法第2頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)原理顯微鏡可將微小物體放大物鏡和目鏡的作用相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡標(biāo)本放在物鏡下方1～2倍焦距之間，在明視距離為25cm，見(jiàn)到放大的清晰物象第3頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月光學(xué)顯微鏡的成像原理第4頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月顯微鏡的重要光學(xué)技術(shù)參數(shù)分辨率、放大率、鏡口率、焦點(diǎn)深度和視場(chǎng)寬度等反映了顯微鏡的性能和質(zhì)量第5頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月數(shù)值孔徑（鏡口率）

numericalaperture,N.AN.A是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率（n）和鏡口角（α）半數(shù)的正玄之乘積，即N.A＝n·sinα/2鏡口角α是物鏡光軸上的物體點(diǎn)與物鏡前透鏡的有效直徑所形成的角度。鏡口角越大，進(jìn)入物鏡的光通亮就越大，它與物鏡的有效直徑成正比，與焦點(diǎn)的距離成反比第6頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月－－－－－1/2αobjectivesample第7頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月間質(zhì)折射率（n）空氣為1水為1.33油為1.5物鏡N.A值·空氣為0.05~0.95·水為0.1~1.20·油為0.83~1.40第8頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月分辨率（R）顯微鏡或人眼在25cm的明視距離處，能清楚地分辨被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)最小間隔的能力人眼分辨率約為100um，光鏡為0.2um計(jì)算公式

0.61λN.AR==0.61λN·sinα/2=0.61×0.51.50×1.0=0.2um（光鏡最大分辨率）注：λ——光波波長(zhǎng)（白光為0.5）N——介質(zhì)折射率α——鏡口角第9頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月放大率（放大倍數(shù)）放大倍數(shù)＝目鏡放大倍數(shù)×物鏡放大倍數(shù)最小倍數(shù)＝5×4＝20最大倍數(shù)15×100＝1500放大倍數(shù)的表示用×，如10×,100×，…第10頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月焦點(diǎn)深度（焦深）在使用顯微鏡時(shí)，當(dāng)焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)某一物體時(shí)，不僅位于該點(diǎn)平面上的各點(diǎn)都可以看清楚，而且在此平面的上下一定厚度內(nèi)，也能看得清楚，這個(gè)清楚部分的厚度就是焦深。焦深大,可以看到被檢物體的全層，而焦深小，則只能看到被檢物體的一薄層在數(shù)值孔徑0.95時(shí)約為非常淺的0.2μ第11頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月視場(chǎng)寬度在顯微鏡下看到的圓形視場(chǎng)內(nèi)所能容納被檢物體的實(shí)際范圍。視場(chǎng)寬度愈大，愈便于觀察。視場(chǎng)的大小，是由目鏡里的視場(chǎng)光闌決定的。視場(chǎng)寬度與物鏡的放大倍數(shù)成反比因此，低倍鏡看整體，高倍鏡看局部第12頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、內(nèi)容與方法（一）顯微鏡的構(gòu)造及功能1.機(jī)械部分鏡筒（tube）物鏡轉(zhuǎn)換器（revolvingnose-piece）鏡臂（arm）調(diào)焦器（focusingadjustment）

coarsefocusandfinefocus載物臺(tái)（stage）鏡柱（post）鏡座（base）第13頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第14頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第15頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月倒置顯微鏡第16頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.光學(xué)系統(tǒng)部分目鏡（ocular）5×，10×，15×物鏡（objective）4×,10×,40×,100×聚光器（condenser）光源及光闌第17頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)準(zhǔn)物鏡的性質(zhì)放大倍數(shù)數(shù)值孔徑工作距離*（mm）10×0.206.520×0.502.040×0.650.6100×1.250.2*工作距離：物鏡最下端與蓋玻片上表面之間的距離。第18頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）顯微鏡的使用方法1.低倍鏡的使用調(diào)光先檢查光強(qiáng)度開關(guān)的位置，放到最小，再通電，亮度適中，物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，光闌，光柵，聚光器等放片標(biāo)本朝上，勿放反了調(diào)焦先粗調(diào)，后細(xì)調(diào)；調(diào)過(guò)頭了，反方向調(diào)回來(lái)；記住方向，慢調(diào)！第19頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.高倍鏡的使用先在低倍鏡下找到標(biāo)本，并將要觀察的部位移至視野中央轉(zhuǎn)換高倍鏡頭慢慢調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)，同時(shí)觀察，調(diào)到最清晰為止油鏡使用是在高倍鏡的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，轉(zhuǎn)開高倍鏡，滴上香柏油后，轉(zhuǎn)換油鏡頭使用油鏡后要用清潔劑清洗鏡頭和標(biāo)本第20頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3.油鏡的使用油鏡使用是在高倍鏡的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡轉(zhuǎn)換器，至高倍鏡與油鏡頭之間滴上香柏油后，轉(zhuǎn)換油鏡頭慢慢調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)，調(diào)到所觀察的標(biāo)本為最清晰為止注意事項(xiàng)：增強(qiáng)光線；在高倍鏡下把要觀察的部分移到視野中央；鏡頭用油浸泡；用完用清潔劑清洗干凈鏡頭和標(biāo)本。第21頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）標(biāo)本觀察①頭發(fā)絲交叉②文字③蛙血涂片第22頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、作業(yè)記錄實(shí)驗(yàn)一結(jié)果，完成作業(yè)一記錄高倍鏡下視野中央的頭發(fā)交叉點(diǎn)轉(zhuǎn)換成低倍鏡后所在的位置第23頁(yè)，課件共24頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月繪圖要求和方法