基因結(jié)構(gòu)與表達(dá)的基本策略

1基因結(jié)構(gòu)與表達(dá)分析的基本策略StrategyforStructureandExpressionAnalysesofGenes分子生物學(xué)系22分子生物學(xué)的三大核心技術(shù)DNA序列分析—DNA測序，1977聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)—DNA擴增，1985DNA重組技術(shù)—基因克隆，19733一、DNA序列分析二、核酸分子雜交三、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)四、基因芯片和微陣列五、Western免疫印跡主要內(nèi)容4（扯一周）雙侄脫舞氧壯末疾端涉終補止沒法(鑼S坐a泉n彎g慌e畢r倉,還1恒9吸7待7羽)一殘、D朱N葡A序另列喝分棒析（飼二宴）D配N牲A自筋動屆化票序吉列懂分鄉(xiāng)豐析（牲三稈）兄化參學(xué)勺降區(qū)解糧法(G時i勾l興b豬e只r泊t,嶺1著9限7陷7弓)5F香r爸e昆d圈e懂r凡i塘c因k碧S籠a墻n寸g摩e天r1命9闖1皺8～W節(jié)a峽l辯t葛e困r徒G姥i其l拘b君e昌r號t1哲9句3德2～T炸h乖e介N蠶o理b勺e乞l綠P險r叉i豪z茄e嗎i弓n婆C買h忽e想m躺i撓s勒t病r率y耍1屈9棄8愿0P閘a仗u稈l栗B緣瑞e夫r設(shè)g1網(wǎng)9舌2慰6～6D頁N訪A測參序燥技線術(shù)酒基沫礎(chǔ)謊：高其分義辨農(nóng)率付變巨性派聚脾丙妄烯尊酰涼胺女凝叛膠步電幣泳石（p似o嶄l疾y育a查c罷r盼y捆l圣a顯m放i傍d鳥e裙g賣e奴l皺e眨l蝦e化c岸t卻r鑼o異p膛h為o頓r伸e容s樸i泊s邪,P予A煎G蹈E）誼技技術(shù)絹，唉可足分肚離差探別插僅1個椅堿淹基崖的麻單跌鏈洋寡勁核獸苷噴酸D炒N鋼A片層段熱。7(一升）徑雙楚脫飾氧寸末碼端斤終棉止京法（d黎i倉d任e液o訪x孟y伯c嘉h拔a姨i顛n幕t撕e現(xiàn)r生m醒i豪n屢a脆t灶i圍o牛n）8A楚T享P、d嗚A錘T秘P和d椒d鴨A扮T導(dǎo)P的候結(jié)骨構(gòu)A期T熊PAO斬HO弄HHHd虎A匙T棄Pd盞d嫩A譽T篇PN惠T珠P主:核券苷跨三腳磷貢酸A蜓T屋P、G復(fù)T捐P、C播T悠P、U植T格P的輝合辯稱曾；d漆N煌T每P趴:脫裹氧敬核促苷溜三載磷妹酸d愈A真T客P、d窗G慕T欄P、d舟C濃T濱P、d熟T馳T鋤P；d楚d鵲N鋸T痛P仔:碼d谷d轟A仗T耕P、d膨d摸G窗T齊P、d反d毅C跨T像P、d倉d孟T五T籌P；9摻務(wù)入N個變核蛇苷粥酸D敗N紛A合捉成延反痰應(yīng)問模幸式夜圖1堪0D拘N晨A單路鏈筒模城板引芹物摻尼入d曬d協(xié)N已T增P延雨伸欲的奔新與合沃成艦鏈末塵端桐終甘止1紗11態(tài).雙越脫凝氧師末頓端懶終同止仍法沿原齊理D堅N墨A合禮成鏟反途應(yīng)企中面，d籃d福N魔T停P不聽存憶在3泳′驢-透O槽H末炸端，否故罰不宴能授與鞋下圣一用個鉆核擋苷傻酸抄的5類′叛-磷濤酸膜基才團形緊成3港′，5揮′毯-磷紗酸脊二餅酯勒鍵損，綠導(dǎo)敢致D羞N劣A新要鏈繞的睡延歉伸晝提編前送終鎖止答于d膀d場N澆T渾P。1訂2d澇d察C等T馬Pd棕d貢A誤T父Pd講d匯T疏T魄Pd檢d璃G伙T蒸Pd饑C殲T汽Pd盆A待T簡Pd淡T見T慚Pd資G蒸T跪PA備G暢C對T5′T471股1G揭A擁A庸T堅G棕A貸3′ACGCT1印32獎.虎D相N捆A測卷序謎主匙要免步庸驟1稼4A反應(yīng)管G反應(yīng)管G反應(yīng)管T反應(yīng)管C反應(yīng)管T反應(yīng)管1勉51盾6G環(huán)A滔T爸C1衣7●變拘性茅聚句丙攔烯書酰戒胺謙凝突膠蓄電朱泳●迷單臟鏈D短N摸A模撞板宅的色制虜備●D完N管A模害板濕與丙測孩序脅引暮物傍退湖火●綱摻盈入濤法府標(biāo)謹(jǐn)記據(jù)反萄應(yīng)●音延敏伸-終駝止虜反療應(yīng)●根放券射別自虹顯偽影●涉閱贈讀號測沙序何結(jié)橡果測竄序沃步擱驟1奴8（雅二?。〥球N賀A測狼序胃自搶動饞化及原繡理采花用4種德不賓同膏的飽熒鬼光舊分肺別克標(biāo)女記4種d斷d剃N政T命P終耗止斑反陰應(yīng)絲式產(chǎn)脊物歌，卸替償代餅放喝射跳性稍同搜位大素酸標(biāo)駐記澇是慣實亮現(xiàn)D臉N耗A測碑序可自隊動董化墾的扭基諒礎(chǔ)鏈。1看9d就d休C褲T派Pd心d哲A充T垂Pd模d容T晌T品Pd附d陵G蓮T粘Pd編C惹T省Pd聾A股T聯(lián)Pd叼T涌T育Pd瞎G策T血P5′TGAATGA3′ACGCT2鍛02膚1表飄示細(xì)一箭個S污N館P位庫點還，恨該組位省點欠出旦現(xiàn)沃了樸雙關(guān)峰謙，恭對斗應(yīng)耍的付核仰苷紗酸迅分喊別弄為C和T踩,因郵此樂該私位致點千為C嘆T雜曬合剩型獸，炮如彎果芬該汗位齒點詳只姨有撥一淚個竹峰C或填者T，您則指該斬位玩點魯基綿因若型漏為C磁C或T頌T純物合架型2抖2D為N尤A自賀動如測盛序割步買驟4種持不課同事熒榴光久染馳料奇標(biāo)吊記括終型止頁物d亦d頭N殃T禾P她sS盈a腔n咽g允e常r測蜘序巖反討應(yīng)反騎應(yīng)栗產(chǎn)洲物同修一泳朱道職電振泳藍(lán)分涌離激齡光礙激神發(fā)結(jié)不夢同麥大碧小D膀N患A片周段攜上銜的派熒偵光宴分疏子呀，賄發(fā)西射愚出海四深種灣不決同焰波才長覽的睡熒抵光熒室光稍信減號良采型集告、息計翠算濫機宣分陣析歌與D仆N淹A自丸動合排膨序2蠻3D久y岡e逢l蓄a量b紅e勻l錄e跌d醋d嗎i禮d異e華o估x訓(xùn)y版t兩e氣r私m駁i土n沉a峽t蚊o盛r夾s杠o福n擊A踩B氏I眉3鈔7優(yōu)3熊0駝c該a牌p慕i遲l闖l拾a到r描i茅e絮s2丙4

與末端終止法不同，化學(xué)降解法是建立在對原有DNA的化學(xué)降解過程基礎(chǔ)上。

（三）化學(xué)降解法2圍5

將待測DNA片段3′或5′端進(jìn)行同位素標(biāo)記，標(biāo)記的DNA片段分成五個反應(yīng)，分別用不同的化學(xué)試劑處理，造成堿基特異性切割，使DNA片段分別于某一種（類）堿基處斷裂。電泳分離5組DNA混合物，放射自顯影檢測末端標(biāo)記的DNA鏈的電泳區(qū)帶位置。化學(xué)降解法原理2狐6化歌學(xué)儀降畜解G反輔應(yīng)惰模暴式紋圖硫酸二甲酯哌啶M洗e照tM舌e假tM土e杏tM譜e畜t2紐奉7最盲新閃測切序緩技希術(shù)4嶼5常4技吹術(shù)(R秧o匙c游h瞎e)焦暈磷男酸醉測則序悼（P烈y笛r漿o騙s武e偶q暢u票e右n筐c陰i脾n配g）S娃o存l遷e矮x恒a測陵序振技封術(shù)(I爪l托l(wèi)奏u飛m枝i鐘n坐a)S罷O盤L虜i貌D技尺術(shù)(A促B欠I)連挑接渡法杏測森序2腥8舉民例序：S抱o脅l森e票x犁a測造序H講i術(shù)S祖e陷q顯2嘴0憶0肅02穩(wěn)9S稿o仗l如e甜x竹a測楊序窄：野在曲一考個帆反猾應(yīng)仍中身同攪時淹加蹲入4種具核拒苷察的尼標(biāo)順簽逝，列采倉用竭邊漫合泳成公邊失測劃序霜（S懂B善S－s艷e您q歇u勒e紗n泛c妹i椅n貧g孟b員y州s高y籍n慨t稈h幣e椒s薦i頭s）凝。完槍成度人拉類艘基蟻因筒組殺草免圖吵不碌同酒測泰序年儀椒的怕比趴較餃圖3罩0二、核握酸躬分戴子戴雜富交（N湖u黑c籃l凡e露i稼c蕉A逼c謝i像d村H碼y晚b鑼r禮i躲d聾i托z滿a仗t城i鞏o莫n）（芹一栽）S靠o蟲u全t盛h成e曠r鴿n印違跡偵雜話交臂：唱檢削測D鞏N繳A(我S憐o失u止t悼h煩e略r辜n壁b猶l穿o竹t相h材y飼b全r掃i鍵d啊i桐z貫a瞧t基i彎o守n墓)普S杠o黑u鑰t準(zhǔn)h桃e依r宰n扮E英M,歸1滅9我7像5（孝二皆）N夜o惜r惜t提h鼠e咬r浪n印猾跡趨雜愁交研：龜檢劍測R遲N妄A(腫N釣o楚r惠t權(quán)h娘e唐r息n坊b睜l狹o憂t咽h近y岔b藍(lán)r基i佩d爐i駕z強a綠t穿i畜o富n墊)矮S盜t箏a禍r攝k能G兇R，1劣9精7那73室1核援酸型分凝子睬雜帖交撲原慈理標(biāo)浪記歲的單隆鏈泉核鞋酸黑探件針與抄待流檢歇測止的朽靶搏單隸鏈D紛N唇A或R蔑N懂A局但部鉛互蔑補窄結(jié)施合窗形擊成愈雜床交肅雙欠鏈甘。應(yīng)半用訓(xùn)：核撓酸頃靶D椅N極A或R趟N盜A序租列鏈的師定肥性議與格定盜量燥分較析么。3架23坊33鞋3印等跡什技某術(shù)利稱用頑各襲種焦物賭理嶼方玩法狐使最電閘泳滔膠尺中競的座生節(jié)物挑大盞分擋子秤轉(zhuǎn)榆移爭到N催C等裙各掏種及膜蔽上火，憲使趴之般成使為門固眼相椅化設(shè)分倦子幅。這帆一巡壽技推術(shù)諷類腎似激于姑用哭吸走墨魄紙申吸屈收捎紙嘆張置上廳的蹤蝶墨簡跡珍，條因旁此激稱仗之翻為“b究l罩o窮t謀t命i雀n咳g”,譯塞為碧印看跡澆技削術(shù)割。3伶43遲4探霞針側(cè)技貪術(shù)用惡放胃射腐性方核匯素固、秩生伏物取素尖或概熒餡光紛染挪料稈標(biāo)宴記額其掛末沿端課或現(xiàn)全壺鏈閘的擠已鋼知女序苦列循的暑多芝聚農(nóng)核耍苷希酸毅鏈喝被惹稱觸為“探冶針”。探率針時可幸以蹦與逆固動定遙在N咸C膜綁上毀的葵核喊苷臂酸動結(jié)滿合蔑，陽判買斷真是斤否宿有虧同烏源繁的家核贊酸注分股子怎存郵在傷。3環(huán)5S怪o柳u赴t公h神e里r吃n印閥跡題雜澇交架原串理將償電耕泳鴿分串離躍的待泛測D睛N牛A片飼段乘結(jié)事合筒到譽一喇定距的譜固徐相花支垃持書物棚上種，犧然吵后辯與耽存宋在毅于尼液鋒相奸中烈標(biāo)壤記蘿的基核福酸揭探掏針綠進(jìn)窯行幻玉雜鞭交花的誼過渠程趨。（同一色）S何o籍u聰t槍h命e域r益n印迅跡火雜關(guān)交應(yīng)排用須：D肚N劇A（號基規(guī)因翅組D再N舌A）探分?jǐn)D子眉的蓄定欄性直或稅定量遇分熟析丈。3島61參.制炕備氣基透因追組D頁N警A2麥.用漏限族制野性澤內(nèi)蕉切床核妥酸恩酶揪消脆化耽基咱因垂組D嫂N標(biāo)A3領(lǐng).瓊尸脂灘糖可凝堅膠安電航泳漢分醫(yī)離D汗N耽A酶霜切電片得段4越.凝牢膠邀預(yù)漂處床理（廟如擊強皆堿放，D娘N柴A雙導(dǎo)鏈副變蛇為銷單蛋鏈薦）5快.敵S譯o禾u拍t京h絨e坡r邀n印輪跡譯轉(zhuǎn)娘移6省.標(biāo)竭記磨核渣酸房誠探針針鋸、繪探鵲針隔與D殊N井A片偶段毯雜綱交7屠.雜呢交悉結(jié)悄果責(zé)顯陽示S非o起u腳t赤h羨e害r叉n印刑跡諸雜畏交沾基秘本救過寧程3賭7S告o釋u鄙t后h皮e庭r領(lǐng)n印葡跡紅雜揉交授示剝意獅圖3捉8將斗電康泳付分會離腥的待面測D零N辜A片母段準(zhǔn)結(jié)持合級到坦一宋定洞的盈固罵相串支魔持方物純上季，厲然肢后音與冤存喬在滅于眉液塞相悶中臘標(biāo)陽記酬的勁核殼酸停探叉針婆進(jìn)臟行駱雜壤交禾的叉過蹄程孔。3醬94烏0地云中胃海趴貧宗血杠的S淚o脅u勻t怕h泡e裂r路n亭b車l印o紐奉t基磨因輔診掩斷（1）項僅枕一啄條翻染視色舊體凝上巾的劃一歌個α基抄因微缺容失揉或?qū)m缺敗陷蹄，茄則α鏈匯的匆合彎成坡部送分丸受火抑扶制眼，仔稱贏為α填+地住貧蜂；（2）篇每眉條迎染扶色織體巡壽上護的2個α基首因旅均穗缺剝失朋或瞎缺停陷全，皆稱體為α窯0地冷貧省；(裝3澡)經(jīng)α勒1、α夜2序際列治基位本五一弦致壩；雜基猶因預(yù)不償同詠程尼度晌的螺缺骨失偷可量引績起稱不捷同謎類爽型峽的招地毛中熄海重貧拍血狼。α泛1α教2α站αα適α+α+α+α洋α0α+α0α0α04園1B吉a彈m輕H伶IB閣a西m齡H誦Iα2α1α21未0氧k翁b1悉4揭k儀bprobe地栽中廢海錦貧肥血市的捧直返接栽基里因星診胃斷4毀2αα府/太α條α廊α震α爪/儀α拆-斜α潮α淺/睜-殺-醋α往-艙/挎-遼-刮-差-糊/福-盡-正矩常道缺1缺2缺3缺41沫4皂k插b1嘴0為k籃b4蜓3（級二紐奉）N摘o肆r已t碰h贊e土r聽n印艙跡灣雜濁交(圍N訊o帽r趙t趨h增e撞r嘉n獨b蹄l貝o靜t慮h脖y海b陷r送i唇d房誠i覽z梅a憑t裕i坦o候n受)指虹將R先N伐A變緣瑞性腳及營電某泳棄分框離手后喉，位并粗轉(zhuǎn)尖移豬到眼固杏相隨支房誠持匪物坐上乳，咳用極雜味交遍反銜應(yīng)扭來龜鑒館定回其牛中持特剖定m顧R焦N蠢A分家子堅的番含鑄量蝦及后其稈大上小脫。用摸于m批R歇N音A進(jìn)印行柳定控性凡和灘定場量而分蔽析奮。4烈4R筑N詳A瓊靈脂幟糖牛凝處膠扣電首泳3kb0.4kbNt36382604623N詞o沒r宅t撿h擋e簡r頌n披b圣l圖o譜t芝h科y每b有r炒i陵d蘿i材z弱a靈t躍i拖o看n28S18S應(yīng)戚用五舉廚例4大5GAPDH0d2d4d6d8dN要o蛙r乞t際h指e餓r負(fù)n粥b聚l咳o諸t雜蜜交永分販析m環(huán)R甩N縣A的短表良達(dá)靶m孩R遇N敬A3劍-磷效酸冰甘尿油右醛各脫威氫券酶4股64竿6三史、喜其花他秋雜比交得技抖術(shù)1麗.斑癥點解雜旱交(治d孟o兔t棕b約l顯o炒t稠h班y總b樓r佛i主d拜i富z犁a啊t虜i繪o核n）將R蹲N對A或D獄N喘A變掃性救后盲直秤接姓點礙樣蕉于遠(yuǎn)硝新酸鍋纖糠維廣素瘦膜異或選尼省龍來膜豈上掘，男用狹于歐基貸因儀組西中陳特涉定東基康因查及蹦其騎表鍛達(dá)懇的輕定備性迷及善定收量占研熊究陰。4布74象72朵.原逆位幣雜靜交悉（i學(xué)n舟s掌i柜t火uh熱y抹b揚r鐮i砌d役i棚z慌a捧t大i封o苦n）用燙標(biāo)刪記蛋的豬核送酸弟探脆針擇與圣組范織笑切究片犁或初細(xì)申胞蜓中摧的赴待送測黃核培酸蛾互呈補懷序爹列轉(zhuǎn)雜槐交側(cè)，晌可咸對邊核仁酸圾進(jìn)真行膠定綿性圍、氏定零位攝和暢相絹對桐定渠量抖分占析單。4也83．嬌核澤酸泰酶S引1保木護汽分略析棵法(籌n狐u妹c薄l楊e礦a棗s狼e終S外1差p魔r稿o撞t紡e矛c蠶t雕i福o勇n些a論s畝s掌a揭y）單戲鏈D牲N曉A探黨針與忙待隆測R量N泄A形饒成D描N悼A外/不R云N均A雜槐交煮雙乳鏈儉，達(dá)加劉入欠核桃酸建酶S示1專乒一北性鼻地悲降孝解快未把形肥成神雜損交勿體擋的D旋N勒A或R夠N勉A單驗鏈框，D濱N樹A鎖/鍵R返N菠A雜罪交界雙腥鏈隊則剝受主到虜保閃護討而全不蛋被難降蔑解拉。4濁94．R絕N脊A酶賄保燒護制分浙析肢法（R慮N額a元s談e過p宏r浮o拒t佳e伴c姻t蛾i窮o修n每a微s驕s佛a礎(chǔ)y，R收P盆A）5柿0R賊P披A基膜本困程父序嶼：●待習(xí)測R玻N接A的黨分批離●體綿外偉轉(zhuǎn)柿錄北標(biāo)貢記R負(fù)N猜A探際針●待責(zé)測R截N鍛A與脾探窩針R隊N母A進(jìn)蒜行呢液綁相棗雜肢交●R梳N掏A酶樹消續(xù)化●不射同慶大隔小留雜受交囑片鳴段條凝地膠裹電狡泳側(cè)分名離5灑1三疼、縮慧聚刻合斑酶營鏈坊式晌反候應(yīng)(現(xiàn)P牌o凝l談y抄m殖e兵r醫(yī)a饅s答e暴C課h何a懼i妥n屬R差e爭a疲c佩t仔i營o聞n務(wù),莊P驗C粘R曬)（悟一擾）P姐C駕R技拔術(shù)流原但理（斧二控）爭耐拔熱D財N辨A聚敢合翠酶（傻三然）P患C役R引昏物較及辛設(shè)應(yīng)計孟原功則（匪四濾）P筆C唇R條機件尤的犧優(yōu)炎化（捧五信）P悉C血R改江進(jìn)報技膀術(shù)（矩六鞭）鍋其槳它P荷C扶R技溜術(shù)5赴2聚檢合贈酶敏鏈贏式撒反披應(yīng)(款P術(shù)C略R閉)愚:（單一截）P柄C拒R技莫術(shù)循原鑼理

Mullis

K.

1985年發(fā)明的一種模擬天然DNA復(fù)制過程的核酸體外擴增技術(shù)。

TheNobelPrizeinChemistry19935擦3T鵲h縮慧e牽r索e寇p僻l疫i付c普a駕t判i厘o拐n些o帽f勒D膛N發(fā)A5緊4原膽理曾：P礙C拾R是鼓模癢擬陰天前然D或N軌A復(fù)弓制呢過冠程修，滋利峰用D污N必A聚豎合嶺酶鏈催程化墾一費對銀引槳物偷間滋特懶異D姿N撥A片帶段掠合阿成熄的勁體建外提擴陷增嚷技掉術(shù)擾。標(biāo)其蕩主絞要初熱娘循僻環(huán)鏈過奧程御為賢：漿變異性有、據(jù)退迅火純、嘉延頁伸督三浪個助步亮驟采。5傭51孟.去P廊C膽R循嚷環(huán)叼由擠三少步銀組揪成踩：①離變鹿性（d毯e過n咸a醋t石u及r親a例t善i咱o銅n）②跟退繞火（a杜n裕n欣e叉a忠l幕i堤n妄g）③警延崗伸（e危x救t豎e兄n史s扛i案o灣n）高屆溫合觸適蚊溫管度合難適張溫散度5涉65縣75呈82韻.增P南C養(yǎng)R擴位增嘉終蛛產(chǎn)罰物盲大濕小:介恭于番兩握條變退余火盒引透物5賄′末誘端陵之明間喚的雙另鏈D芒N旅A片厲段。循綱環(huán)網(wǎng)一5置9循溫環(huán)蹤蝶二6誕0循假環(huán)寶三6眾1一賢對闖引繁物膊：讀正躁向膽和灰反祖向球限恭制昂了P姜C偵R擴移增床的救片架段穿的巧范辱圍5/——5/—3/3/—5/——5/—3/3/—6授25′C聲A頓G經(jīng)T威T溝A算A趨G僚G抹G斷G窗G擦C圈A斥G大G施A隨G增T劍G沿G灶C班G警C晃T票G診C草T貿(mào)C錄A林C劈燕C膨T慰C盯T念G踏G速T強G味C艦C蠢A韻A晶A財G烘G桿G旅C杰G心G陵C夸G斑C拴A尚G僅C涌G暈G港C續(xù)T臂G蝦C兵C胖G激A插G樓C己T哄C躍G乏G遮C撇C頓C罩T瀉G服G超A斷G櫻G覽C涉G邊G相CA暢G得A猜A吊C尋A努T貝G進(jìn)G槽T船G偵C顆G轟C甜A珍G株G溉T亞T革C獲T鳥T吊G郊G愈T滔G煤A仰C宿C企C溪T逗C盟C劫G朋G包A犯T眾T鬼C權(quán)G禿G幟C館G跨C姻G忘C門G釘T魔G啊C飯G反G克C附C芬C終G技C坡C愧G圍C初G曲A冶G仁T勻G列A侮G副G鎮(zhèn)G笑T畫T定T構(gòu)T籍C盡G投T垂G腸G窩T缺T傻C粉A偽C剛A醬T鵲C詠C捏C籍G霉C傻G揭G苦C估T湖C出A由C萍G然G詢G森G現(xiàn)G啟A念G返T勤G啦G杜G民C億A扒G漏C炭G杜C暢C烘A激G有G曲G農(nóng)G期C穩(wěn)G聾C小C領(lǐng)C振G失C申C行G叫C軌T陵G拴T孟G猾G哲C具C董C稠T午C先G協(xié)T磚G燥C像T撞G溝A包T滔G江C過T蕉A退C席T部G搖A筆G沉G燙A檢G搜C愛C扒A太G督C飼G侮T予C法T辜A識G級G男G司C仁A料G殘C累A糾G葬C間C穗G次C凝T暴T興C耳C銷T朝A潮G墨A撲A圾G安A近C送C打A玻G扣G順T繭C芳A械T考G愈A賺T晨G撓A監(jiān)T耀G備G謹(jǐn)G負(fù)C蛾AGC掘G輪C暮C艦C啟GA袖G肉T遮G瞇G尿C騎G懶G但A棟G雙C煎T惜G壺C描T膏G巷C山T宵G舅C休T晨C經(jīng)C奴A謎C藏G距G售C燥G詳C按G癢3′G裝G冊T桐C沫C得A危G里T鴨A孩C址T逆A繡C只T書A賺C撐C翼C曠G垃TA招G父A迫A附C框A她T屯G差G杏T泊G娘C諸G澆C川A耍G穴G槽T度T3灰.引刊物木設(shè)翁計戒實淡例6潤3Y切=景A（1觸+電E）nY搏:擴穗增順產(chǎn)算物為的聾量A心:最甲初蘿靶D廈N歇A分術(shù)子澡數(shù)E遙:P榴C丘R擴抽增搶效侵率n董:循激環(huán)邁次梯數(shù)3膽.膨P剛C糠R產(chǎn)好量當(dāng)E＝1楊0烤0％,匙A喝=旦1時Y便=興2n>策>鞋2爭n(引沉物奇延足伸義產(chǎn)揉物亮的惜量山）6睡4（滾二捎）堂平即臺羽期兆與挪平舌臺鎮(zhèn)效層應(yīng)1聾.平旅臺洪效和應(yīng)（p某l陡a袖t意e吳a蛙u斬e她f壘f果e唯c傭t）味：P米C創(chuàng)R經(jīng)州過淡一績定普數(shù)薦量鏟的林循鳥環(huán)混后眾，D舅N騾A片倒段鉗不曉再腳呈餡指象數(shù)蠢累夢積擴，撈而稻是深進(jìn)阿入搜線謝性疏增揪長漂期趁或旋靜幅止毛期餐，即博平循臺諸效慕應(yīng)。影串響南因妻素礎(chǔ)：①倉引停物姜及d交N滿T湖P底紡物嗓濃產(chǎn)度誓降選低幟。②秘酶歷與怕模久板刺比急例岸下展降裂。6擦5P梯C肆R平違臺宵效增應(yīng)6燈6（避二切）貪耐甜熱D拉N校A聚搶合盆酶T媽a答qD其N蘭A聚浴合炭酶蹤蝶（實淚現(xiàn)疼了P祥C綱R自蘇動鴿化接）從設(shè)嗜柱熱扭水妻生使菌t務(wù)h地e旋r東m貓u京s瘦a憐q艷u影a幅t彼i裙c您sY根T礎(chǔ)-費1株撈中飾直惹接暫分姻離吊出藍(lán)來燥?！?來5餡℃的運半慈衰梨期:4添0辟m姿i宴n●最么適古溫拐度:奏7盒2艦℃～8朗0饞℃●催件化狡反爆應(yīng)速語率:1脫5罷0～3磁0廁0核犁苷波酸/秒/酶誤分越子6梳76技8T鴉a潤qD斥N抄A聚槽合欺酶離特青性指：●5扮′睜→負(fù)3臭′聚般合挽酶露活若性舌；●5絡(luò)′罵→串3唉′外腿切泛酶絲式活聯(lián)性放；●胃較護弱徒的等非捆模仔板李依團賴苦性底；●找缺寬乏3搜′啟→藝5領(lǐng)′外裹切速酶半活尊性貓。6皇9P派C攀R寇t筆h落e材r部m奶a脖l些c客y誕c貨l雨e囑r7逃0P蔽C否R產(chǎn)鉆物翁的瓊脂南糖烤凝呆膠瞞電唐泳柳分偏析5普0針0跪b冶p4渴0禍0冤b對p2彎0帶0俗b狀p3知0沃0涂b燦p1椒0今0獨0仗b碗p6善0樣0前b叢p7擠0壯0豪b涌p8魔0究0斧b叔p9砍0柴0衡b蕩pM賞a催r廁k洋e陜rP偏C蒸R產(chǎn)遍物7泳1無寬機聾離窮子清及窮抑腎制精劑檔的朋影品響T策a斥qD時N攪A聚福合得酶睡的昌活封性對M飾g2擾+濃天度膝和購單樹價浴離茅子將（K+或N沫H燦4+）滴的臺性廉質(zhì)丙和限濃星度誘較史敏每感案。最觸適M鈴g2孝+濃替度：2辛m洞m辜o(jì)招l(wèi)戀/襪LK+濃脫度：5絨0插m彼m券o雙l裝/包L7關(guān)2幾緊種僑高及保坦真趕的熄耐左熱D充N起A聚桑合誤酶1仁.T際t植hD鍛N知A聚持合延酶2頑.V互e稅n鍬tD針N哪A聚沸合噸酶3對.P滑f號uD克N雀A聚譽合瓣酶7頑3（踐三剖）P平C脫R引評物往設(shè)笨計予原孟則引慈物挖的淡化目學(xué)遮本王質(zhì)賠是斧什諒么闖？單枝鏈鍬寡賴核管苷丙酸D菜N靈A或R搬N湯A片諸段蘆。D英N筋A(yù)復(fù)沈制持引宜物豪：箭單鵝鏈R四N顏A片桂段P尚C滋R引耽物步：畢單統(tǒng)鏈D訊N克A片癥段7京4P蜓C概R引呼物揚設(shè)駝計蚊原鴨則：1嚇.引棒物疫與棍模陪板軟的尾序摟列嫩要龜完謝全剪互偽補2波.引季物廊與跌引鏟物拒之合間或避霜免吐形菜成牌穩(wěn)竿定索的呢二居聚椒體除或磁發(fā)趕夾仆結(jié)候構(gòu)3鴿.引頑物莊不夜能余在懼模樸板納的品非掩目學(xué)的飽位資點縫引搶發(fā)D厘N帽A聚杏合水反別應(yīng)(錯腳配)7雪55′獵C戲A嘴C熊T歉G皆A拔A蜜C杯G寫TA假G吹G語C拴C風(fēng)T鞋3榆′3′衫G柳C滴A法G婦G驕T折T拋C煮AG沉T婦G彼A巾C濫T刃T裁G粗C限A守T冠C荒C涂G圖G枕A飲T縫G初C也A奇A址C拋5擋′特悄異色擴兔增5′書C鏟A百C藥T昌G辨A答A態(tài)C胡G咐TA副G柏G很C抬C略T斗3配′3′滾G包G冶A嚴(yán)T柏C啞T老A有C掉AT棚G啞C緊G吹A(chǔ)粗C霧T舟T翻A貢A疫T荷C降C特G煮G羅A升G恒A察T雀A跡C均C史5乒′錯摘誤還引方發(fā)1早.引鉗物次與青模統(tǒng)板赴的露序曲列疲要年緊規(guī)密掛互者補2頑.引貿(mào)物腎不噴能方在雞模正板會的辰非椅目膛的辱位腰點喊引晶發(fā)D飛N棍A聚抗合權(quán)反扶應(yīng)(錯喉配)7慈6引康物快之騰間聽?wèi)?yīng)鉛避隔免3迷′端議互杠補3丸.引偷物志與駕引施物半之傳間縮慧避銳免遠(yuǎn)形棋成袋穩(wěn)筒定防的厚二貓聚迅體挪或律發(fā)塵夾彼結(jié)溉構(gòu)7橫7引西物支自光身的不漠應(yīng)銹形疑成熊發(fā)悶夾嘆結(jié)禿構(gòu)7軍84忌.其繼它趁原袋則:①引敞物釀長竭度:幼1知0～3猛0番n砍t②堿惜基坊分兩布:熟A、T、G、C隨哨機拋分捐布③G渠+弦C含臟量：4顆0～6噴0厚%傅T技m鄙=憑4鈴(剖G屬+鉆C稱)踩+看2譯(繼A窗+北T捉)④引膜物3器′末調(diào)端綁堿輛基：體最哭好功選T、C、G，瓶不酬選A避匯免色出獨現(xiàn)3個翻以持上攀的炒連韻續(xù)哲堿瘋基聯(lián)，織如G批G蟲G或C禿C蜘C⑤引休物5但′末歸端遺堿彈基淺可扯不孝與促模尋板D太N蠢A互鬧補7絞91扛A2勾6蜓0o奮l切i垃g以o不D辣N鐘A≈3暗3與μ炎gN關(guān):引袖物堿跪基廊數(shù)X：午合車成葵的o亮l崖i枕g指o睛D予N嶼AA2膊6飯0單倆位Y：卻引幻玉物歲的p熔m啄o蝕l數(shù)1址06Y（p劣m覺o陷l）=暮X巷·冒3董3榆×豬─縱─3衰3演0放.蓄NX=烏─醒─治×杜1球05N2樓.引擊物際用旗量閱計期算8機0模謎板引筍物T麗a爸q眉D戀N北A聚勉合拿酶d雜N倒T爹PM新g2難+退也火變羞性延僑伸P劍C格R反殖應(yīng)8避1（陸四寒）P逐C頭R條率件伐的顆優(yōu)狗化1葵.T草a漠qD爹N寨A聚音合絡(luò)酶禁濃鋪度吧：1記.擴0～2辦.嘴5洗U殘/閱1遞0數(shù)0角μ繪l反罵應(yīng)綠液2報.罪d月N講T校P濃拌度墊：2阿0～2城0驕0風(fēng)μ六m蒼o墳l囑/立L3概.稠M辭g2就+濃錫度都：0竄.雹5～2且.蓮5抱m積m市o領(lǐng)l做/逐L4場.引蠶物雙濃夫度侮：0根.速1～0兔.燃5秀μ腦m棋o澇l某/細(xì)L8嶺2（愚五鵲）P乓C掛R改光進(jìn)口技批術(shù)1撐.齡R廊T越-瓜P涉C蹤蝶R(讓r擋e錦v莫e飲r片s廟e累t另r對a攜n邀s企c借r相i毒p汪t虛i書o彼n甘P德C乘R論)以m專R堤N尸A為林模域板耳逆他轉(zhuǎn)色錄倡合摩成c救D寬N句A，零再諒以米此c饞D撫N仍A為霸模社板框進(jìn)連行P籃C瞎R反術(shù)應(yīng)。8擇3RT-PCR原理8助4逆悄轉(zhuǎn)急錄耍酶①A匙M因V（a農(nóng)v眉i擋a蹲n老m兼y熊e寨l瓜o錢b液l秋a狐s躺t錢o清s柿i汗s迷v返i賣r怨u圈s）酶慌活專性環(huán)最渾適餓溫部度4聰2圾℃②償M勿M逮L映V（M亞o際l貢o冰n住e幟y殼m者u濫r姿i矮n罷e懷l怕e鼻u畝k燈e己m端i枕av或i扯r殼u例s）爺：效最視適巧溫敞度3憲7嘆℃8必52陵.定惕量R營T冷-懶P容C凈R（Q攏R拌T集-宴P漏C捎R）半須定如量R季T歪-擁P偏C猴R以爽樣留本m南R大N摔A為罰模陰板歌逆賣轉(zhuǎn)榨錄感合撇成c暑D酒N寶A，心在懲不錫同聯(lián)引飲物追對梨引悉導(dǎo)嚴(yán)下退共宋同P激C羊R擴駐增“侮看劍家耐”愈基扎因和目通的殼基辦因c腔D屬N奴A。8嘉6①選支擇廣內(nèi)貫對糞照錘基接因組尼織書中烘普伙遍艷表使達(dá)君、腐表怖達(dá)婦量楚比壞較害恒斥定夏的塞“寧看擊家拾”塌基參因m分R霞N去A。顏如G協(xié)A位P取D押H和β泉-揭a槽c慈t坦i作n害m嫩R當(dāng)N棒A等持。②半元定碌量捉標(biāo)隔準(zhǔn)計渠算P概C凱R產(chǎn)恥物勻：靶c床D基N派A惕/糠G桌A響P兆D輕H刊c滲D茶N馳A8促7③K襖P荷N沈A欠2碎在闖正月常查生潔理綱狀嬸態(tài)呢東鞏方禿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