性傳播疾病的實驗室診斷

性傳播疾病的實驗室診斷第1頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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講授內容?性病概述（性病的概念、危害、研究范圍）?梅毒的實驗室診斷（臨床、實驗室診斷）?淋病的實驗室診斷（臨床、實驗室診斷）?非淋菌性尿道炎（臨床、實驗室診斷）?生殖器皰疹（臨床、實驗室診斷）?尖銳濕疣的實驗室診斷（臨床、實驗室診斷）第2頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?????性?。╒enerealdiseases,VD）是指通過性交傳染的、具有明顯生殖器損害癥狀的全身性疾病，亦稱為經典性病。包括梅毒、淋病、軟下疳和性病性淋巴肉芽腫。性傳播疾?。╯exuallytransmitteddiseases,STD）：是指通過性接觸可以傳染的一組傳染病，在我國，人們簡稱為性病。其概念不同于經典性病，包容的病種20余種?！缎圆》乐喂芾磙k法》:梅毒，淋病，尖銳濕疣，非淋菌性尿道炎，生殖器皰，軟下疳，性病性淋巴肉芽腫，艾滋病。STD是自古就有的，只是由于人類活動范圍的擴大，交流增多，性行為更隨意，性病的范圍在不斷擴大。性病在我國廣泛流行，它不僅危害個人健康，也殃及家庭，遺害后代，同時還危害社會,成為嚴重的公共衛(wèi)生和社會問題。.性傳播疾病的概念第3頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

性病的危害(1)?感染性病后不及時發(fā)現并徹底治療，不僅可損害 人的生殖器官，導致不孕不育、異位妊娠、早產、 流產和死胎等，有些性病還可損害心臟、腦等人 體的重要器官，甚至導致死亡。有些性病一旦染 上是難以治愈的，如尖銳濕疣、生殖器皰疹。?有相當一部分的性病患者癥狀較輕或沒有任何明 顯的癥狀，但卻可以通過各種性病傳播途徑傳給 其他健康人。第4頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

性病的危害(2)?性病的流行還給家庭帶來嚴重危害。例如 淋病，通常情況是，夫婦中的一方由于某 種原因而感染上淋病，然后通過夫妻間的 性生活，傳染給對方，家中的孩子或是通 過母嬰途徑傳播，或是通過日常生活的接 觸而被感染，使得一家人都深受其害。?性病還能促進艾滋病的傳播和流行。第5頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月陜西省皮膚性病防治所朱參勝1.臨床：–早期、準確診斷，發(fā)現無癥狀感染者––評估治療效果，判斷治愈指導臨床用藥，耐藥性監(jiān)測2.流行病學監(jiān)測：

– – –2011.7病例報告患病率調查耐藥監(jiān)測3.科研：

–基礎性 –應用型研究

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Forevaluationonly.性病實驗室診斷的應用第6頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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性病研究范圍《性病防治管理辦法》指定的8種性病1.梅毒2.淋病3.尖銳濕疣4.非淋菌性尿道炎5.生殖器皰疹6.軟下疳7.性病性淋巴肉芽腫8.艾滋病第7頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?梅毒概念：梅毒（英文名稱：syphilis）是由蒼白（梅毒）螺旋體(Treponemapallidum)引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病(VD,STD)。絕大多數是通過性途徑傳播，臨床上可表現為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潛伏梅毒。臨床上以陰部糜爛，外發(fā)皮疹，筋骨疼痛，皮膚起核而潰爛，神情癡呆為主要表現的傳染病。是《中華人民共和國傳染病防治法》中，列為乙類防治管理的病種。

.一、梅毒syphilis第8頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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一期梅毒：標志性臨床 特征是硬下疳，潛伏期 2～4周，外生殖器部位 發(fā)生暗紅色硬腫塊、淺 潰瘍，有軟骨樣硬度， 周圍淋巴結腫大。二期梅毒：在一期梅毒1～2個月之后，全身皮膚、粘膜發(fā)生對稱泛發(fā)皮疹、斑疹、丘疹、膿皰疹等。粘膜可發(fā)生粘膜斑、扁平濕疣，傳染性強。.第9頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

三期梅毒：發(fā)生在感染后2～3年乃至10年，皮膚為樹膠樣腫，還可涉及骨、關節(jié)、心、血管，表現為主動脈炎、主動脈瓣閉鎖不全和主動脈瘤等，侵及神經為脊髓癆，全身麻痹。第10頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

梅毒流行簡況（1）?全球每年約有1200萬新發(fā)病例，主要集中在南亞、東南亞 和非洲。?于1505年經印度傳入我廣東，至今已500多年。?解放前是中國四大性病之首，60年代初基本被消滅，80年 代再次發(fā)生和流行。?1991年報告病例數為1870例，1995年11336例，1997年 33668例。呈明顯增多趨勢，臨床經?？梢娨?、二期梅 毒，也已發(fā)現三期梅毒和先天梅毒。?在義務獻血員中發(fā)現隱性梅毒。第11頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

梅毒流行簡況（2）?梅毒患者的皮膚、粘膜中含梅毒螺旋體，未患病者在與 梅毒患者的性接觸中，皮膚或粘膜若有細微破損則可得 病。?極少數可通過輸血或其它途徑傳染。?獲得性梅毒（后天）的早期梅毒病人是傳染源，95%是 通過不潔性交傳染，少數通過接吻、握手、輸血、接觸 污染的內衣、濕毛巾、茶杯、煙斗、哺乳、尿布等傳染。?胎兒梅毒（先天）：孕婦體內螺旋體，一般在妊娠3~4 月通過胎盤感染嬰兒。第12頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

?病因：梅毒螺旋體侵入人體后經過2~3周潛伏期，即發(fā)生 皮膚損害(典型損害為硬下疳)這是一期梅毒。發(fā)生皮膚損 害后機體產生抗體，梅毒初期的組織學特征是單核細胞侵 潤，在感染的第6天，即有淋巴細胞浸潤，此時梅毒螺旋 體見于硬下疳中的上皮細胞間隙中，以及位于上皮細胞的 內陷或吞噬體內，或成纖維細胞、漿細胞、小的毛細血管 內皮細胞之間及淋巴管和局部淋巴結中。由于免疫的作用 使梅毒螺旋體迅速地從病灶中消除。感染的第24天后，免 疫熒光檢測未發(fā)現梅毒螺旋體的存在，螺旋體大部分被殺 死，進入無癥狀的潛伏期此即一期潛伏梅毒。第13頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

梅毒的暗視野顯微鏡檢查（1）?暗視野顯微鏡檢查：是一種檢查梅毒螺旋體的方法。暗視 野，顧名思義即是顯微鏡下沒有明亮的光線，它便于檢查 蒼白的螺旋體。這是一種病原體檢查，對早期梅毒的診斷 有十分重要的意義。?早期皮膚粘膜損害（一期、二期）可查到蒼白螺旋體。一 期梅毒蒼白螺旋體多在硬下疳的硬結、潰瘍的分泌物和滲 出液中存在，腫大的淋巴結穿刺也可檢出。二期梅毒蒼白 螺旋體可在全身血液和組織中檢出，但以皮膚檢出率最高。 早期先天性梅毒，可以通過皮膚或粘膜損害處刮片發(fā)現梅 毒蒼白螺旋體。第14頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月???基本原理：皮損滲出液、淋巴結穿刺液→涂片→暗視野顯微鏡下觀察→形態(tài)，運動方式。暗視野顯微鏡（darkfieldmicroscope）：聚光鏡中央有擋光片，使照明光線不直接進人物鏡，只允許被標本反射和衍射的光線進入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。標本采集：

–皮膚黏膜組織液：帶乳膠手套，擦去去污物，鈍刀輕刮、擠壓， 避免出血，取滲出液，預先有生理鹽水的載玻片上，加蓋玻片。 –淋巴液：無菌穿刺，注入生理鹽水，反復抽吸，取少量淋巴液， 滴加至載玻片上，加蓋玻片。

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Forevaluationonly.暗視野顯微鏡檢查（2）第15頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月??操作步驟：

–加鏡油至聚光器上(不要 將鏡油加載蓋玻片上) –聚光 –鏡檢結果判讀：

–形態(tài)：纖細、白色、有 折光、螺旋狀–運動方式：旋轉、蛇行、 伸縮結果報告：

陽性：見到上述特征的螺旋體 陰性：未見到上述特征的螺旋體

.暗視野顯微鏡檢查（3）第16頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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暗視野顯微鏡檢查（4）?臨床意義：

–陽性：確診梅毒 –陰性：復檢，血清學檢查?注意事項:

–避免出血 –及時 –對廢棄物及時處理，梅毒病原體為蒼白螺旋體，對外界抵抗力 弱，離體后一般1-2小時內死亡，對干燥和熱敏感，但對冷抵 抗力較強，低效消毒劑也可將其消滅。第17頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

鍍銀染色法（1）?基本原理：

–梅毒螺旋體親銀性→銀溶液染色→鏡下觀察。?標本采集（同暗視野顯微鏡檢查）：

–皮膚黏膜組織液 –淋巴液第18頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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Forevaluationonly.

鍍銀染色法（2）?操作步驟：

–涂片干燥（空氣中自然干燥） –固定：羅吉固定液（甲醛，乙酸）2~3min –洗滌：無水酒精 –媒染：鞣酸媒染劑，微加熱，染30sec，水洗 –銀染：銀染液，微加熱，染30sec，水洗 –鏡檢：油鏡第19頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

鍍銀染色法（3）?結果判讀：

–棕褐色梅毒螺旋體?結果報告：

–陽性：見到棕褐色梅毒螺旋體 –陰性：未見到棕褐色梅毒螺旋體?臨床意義：

–陽性：確診梅毒 –陰性：復檢，血清學檢查?注意事項:

–與其它螺旋體的鑒別第20頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月.第21頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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梅毒的血清學檢測方法?梅毒血清學檢查對于診斷二期、三期梅毒，以及 判定梅毒的發(fā)展和痊愈，判斷藥物的療效都有十 分重要的意義。梅毒血清學檢查包括非梅毒螺旋 體抗原血清學試驗和梅毒螺旋體抗原血清學試驗。 前者常用于臨床篩選及判定治療的效果，抽血后1 小時即可出結果，費用也低廉。后者主要是用于 判定試驗，但是它不能判定治療效果，一旦患有 梅毒，這一試驗將終身陽性。第22頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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梅毒血清學檢測方法的分類?非梅毒螺旋體抗原血清試驗

–VDRL試驗 –RPR試驗

–TRUST試驗?梅毒螺旋體抗原血清試驗

–TPPA試驗 –TPHA試驗 –FTA-ABS試驗 –TP-ELISA試驗 –TP-WB試驗第23頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月???VenerealDiseaseResearchLaboratory基本原理：梅毒螺旋體感染→宿主產生抗類脂抗原的抗體→與心磷脂、卵磷脂、膽固醇混合物（抗原）→凝集反應標本采集:

–血清：靜脈血2~5ml，及時離 心，保存于2~8℃，長期保存于- 20℃。

–腦脊液：專業(yè)人員操作，有血 細胞，2000rpm離心。?操作步驟：

–VDRL抗原配制

–VDRL玻片定性實 驗

?滅活 ?吸樣 ?加抗原 ?反應,低倍顯微 鏡觀察

.VDRL試驗（1）第24頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

弱陽性或可疑（滴度）， 或陰性但有臨床癥狀時需 做定量試驗（前帶現象）?VDRL定量試驗

–加稀釋液 –樣本稀釋：系列稀 釋 –加抗原 –反應凝集反應強度分級：–3+~4+：中到大絮狀物，液體清亮–2+：絮狀物較小，液體較清亮–1+：小凝集物，均勻分布，液體渾 濁–±：抗原抗體復合物顆粒稍粗–-：抗原顆粒均勻、細小

VDRL試驗（2）?當VDRL定性試驗為陽性、?結果判讀第25頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

VDRL試驗（3）滅活：血清是在56oC加熱30分鐘，除去非特異性抑制劑（如補體）。

VDRL用于腦脊液的測定：對腦脊液的測定診斷神經梅毒,首選定量VDRL。測試中有一些變化:用等量的10％鹽水稀釋樣品，腦脊液不能被加熱（或滅活），樣品體積為0.01毫升，旋轉時間為8分鐘。其余的程序同血清。第26頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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VDRL試驗（4）?結果報告：

–定性

?陽性：1+~4+ ?陰性

–定量

?滴度：最高稀釋倍數?臨床意義：

–腦脊液VDRL陽性對神經梅毒有診斷意義。 –患有其它疾病可能產生假陽性結果，包括一些病毒感染（單核細 胞增多，肝炎）、藥物、懷孕、風濕熱、類風濕關節(jié)炎、紅斑狼 瘡、麻風。 –滴度與病情相關（即滴度下降表明成功的治療），用于預后判定。第27頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月???RapidPlasmaReagin(RPR)基本原理：VDRL試驗的改良?？乖?活性炭顆粒+抗體→黑色絮狀物（肉眼可見）。反應素：Tp（梅毒病毒）侵入人體破壞組織后，組織中的磷脂粘附于螺旋體表面形成復合抗原。從而使機體產生抗磷脂的自身抗體，這種抗體稱為反應素。??標本采集:

–血清：新鮮分離或凍存 –血漿：各種抗凝劑操作步驟：

–定性實驗

?加樣 ?加抗原 ?反應

RPR試驗（1）第28頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

RPR試驗（2）?定量實驗

–稀釋液準備 –加樣：系列稀釋 –加抗原 –反應（旋轉8min）?結果判讀

凝集反應強度分級： –3+~4+：中到大黑色絮狀物，液體清亮 –2+：黑色絮狀物小到中，液體較清亮 –1+：小黑色凝集物，液體渾濁 –-：碳顆粒集中于中央一點或均勻分散第29頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

RPR試驗（3）?結果報告：

–定性

?陽性：1+~4+ ?陰性

–定量

?滴度：最高稀釋倍數?臨床意義：

–比VDRL簡便（血清不需滅活，加有氯化膽堿） –適用于篩查、療效觀察、復發(fā)或再感染 –未經治療的一期、二期和潛伏梅毒的敏感性：86%、100%和98%第30頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

指示物，陽性結果為紅色絮 狀物?標本采集：

–血清 –血漿操作步驟： 定性： 加樣（50μL) 加抗原（一滴） 反應（8min)

TRUST試驗（1）?（Tolulizedredunheated serumtest,TRUST）?基本原理：用甲苯胺紅代替 RPR試驗中的碳顆粒，作為第31頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月??定量：

–稀釋液（50μL生理鹽水) –加樣（50μL血清/血漿)，倍比稀釋 –加抗原（一滴） –反應（8min)結果判讀

–凝集反應強度分級： ?3+~4+：中到大凝集物，液體清亮 ?2+：小到中凝集物，液體較清亮 ?1+：小凝集物，液體渾濁 ?-：甲苯胺紅集中于中央或均勻分散

.TRUST試驗（2）第32頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月??結果報告：

–定性:陽性：1+~4+;陰性 –定量:滴度：最高稀釋倍數臨床意義：

–適用于篩查、療效觀察、復發(fā)或再感染 –用正常牛心肌的心類脂作為抗原，而不是用螺旋體作為抗原，來測定病人血 清中的反應素（非特異性抗體---抗心磷脂抗體）。 –用來初步篩查梅毒螺旋體感染。反應素在初期梅毒病灶出現后1~2周就可測 出，在二期梅毒滴度最高，三期梅毒較低。 –所用抗原不具有特異性，除梅毒病人外，一些非梅毒疾患也可暫時或長期地 存在反應素。例如麻風、結核、傳染性單核細胞增多癥、紅斑狼瘡、類風濕 性關節(jié)炎、回歸熱、以及一些發(fā)熱性疾病。 –此外，在孕婦、老年人和吸毒者有生物學假陽性反應。

.TRUST試驗（3）第33頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?????凡確診為梅毒者，治療前最好做定量試驗。兩次定量試驗滴度變化相差2個稀釋度以上時，才可判定滴度下降。梅毒患者在經過正規(guī)治療以后，頭三個月應當每月復查一次滴度，以后可改為每三個月復查一次，第二年每三個月或每半年復查一次，以觀察比較當次與前幾次的滴度變化的情況。梅毒患者治療后的隨訪觀察一般在兩年的時間。如果每次檢測的RPR的滴度呈現不斷下降的趨勢，說明抗梅治療是有效的。如果連續(xù)三次到四次檢測的結果都是陰性，則可以認為該患者的梅毒已經治愈。

.梅毒療效判定第34頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月??前帶現象：一種抗原—抗體反應的現象。以定量抗原檢測抗體，若抗體過剩，可使所形成的免疫復合物反而減少，而不出現凝集。非梅毒螺旋體抗原血清試驗中，有時血清中存在高濃度的抗體時出現的弱陽性、不典型或陰性反應的結果，而臨床上又表現為二期梅毒，此時將血清稀釋后再進行試驗，出現了陽性的結果，該現象稱為前帶現象。耐血清性（血清固定）：晚期耐血清性與梅毒的類型及開始治療的時間早晚有關。晚期耐血清性病人已經足夠量的治療后，即使再予更多地或無限制地治療也不能使血清滴度降低。對于這種病人，需經過詳細的檢查，排除神經、心臟與其他內臟梅毒后，作定期隨訪。

.非梅毒螺旋體抗原血清試驗第35頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?treponema pallidumparticle agglutination assay(TPPA).?基本原理：超聲裂 解梅毒抗原+明膠粒 子+血清抗梅毒抗 體，凝集反應?標本采集：

–血清 –血漿?操作步驟：

–試劑準備 –加稀釋液 –樣品稀釋 –加致敏明膠粒子和對照液 （4個孔） –混合：震蕩30秒 –反應：2小時

.TPPA試驗（1）第36頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月??結果判讀:

–陰性對照：未致敏粒子不出現凝集 –凝集反應強度分級： ?4+：粒子光滑，覆蓋整個孔底 ?3+：粒子光滑，覆蓋大部分孔底 ?2+：粒子光滑覆蓋孔底，周圍有一環(huán) ?1+：粒子光滑覆蓋孔底，周圍有一明顯環(huán) ?±：粒子沉集孔底，中央形成一個小點 ?-：粒子緊密沉積孔底中央結果報告：

–陽性：第3孔不出現凝集，第4孔出現凝集1+~4+ –陰性：第3孔和第4孔均未出現凝集

.TPPA試驗（2）第37頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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TPPA試驗（3）?臨床意義：

–初篩陽性的確證 –治療后，TPPA試驗仍可為陽性，不能作為療效 觀察 –結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果，區(qū)分既 往和現癥感染?注意事項：

–“可疑”：其他方法復檢 –非特異性凝集：稀釋復檢或其他方法復檢第38頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?Treponemapallidum haemagglutination assay?基本原理：超聲裂解 梅毒抗原+羊紅細胞+ 血清抗梅毒抗體--凝 集反應?標本采集：

–血清 –血漿?操作步驟：

–試劑準備 –加稀釋液（5個孔） –樣品稀釋（5個孔） –加對照液 –混合：震蕩30秒 –反應：4小時

TPHA試驗（1）第39頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?結果判讀:

–陰性對照：未致敏血球不出現凝集 –凝集反應強度分級： ?4+：凝集物光滑，覆蓋整個孔底 ?3+：凝集物光滑，覆蓋大部分孔底 ?2+：凝集物光滑覆蓋孔底，周圍有一細胞 環(huán) ?1+：凝集物光滑覆蓋孔底，周圍有一明顯 細胞環(huán) ?±：凝集物沉集孔底，中央形成一個小點 ?-：凝集物緊密沉積孔底中央

TPHA試驗（2）第40頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月???結果報告：

–陽性：第三孔不出現凝集，第4孔出現凝集1+~4+ –陰性：第3孔和第4孔均未出現凝集臨床意義：

–初篩陽性的確證 –治療后，TPHA試驗仍可為陽性，不能作為療效觀察 –結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果，區(qū)分既往和現癥感染注意事項：

–“可疑”：其他方法復檢 –非特異性凝集：稀釋復檢或其他方法復檢

TPHA試驗（3）第41頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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FTA-ABS試驗（1）?Fluorescenttreponemalantibody absorptiontest?基本原理：血清+稀釋劑（Reiter株螺旋體制備 而成）--吸收--完整梅毒抗原+第二抗體（FITC 標記)，熒光顯微鏡下觀察--蘋果綠色熒光?標本采集：

–血清 –腦脊液第42頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月?操作步驟：

–血清滅活：56℃，30min –血清稀釋：血清用吸收劑稀釋，陽性血清用PBS稀釋 –加樣：設置6種對照(PBS,吸收劑，PBS+陽性對照，PBS+ 陰性對照，吸收劑+陽性對照，吸收劑+陰性對照；樣品血 清10ul（稀釋后） –洗滌： –加熒光抗體：37℃，30min –洗滌： –封片、讀片

FTA-ABS試驗（2）第43頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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FTA-ABS試驗（3）?結果判讀:

–陽性對照：綠色熒光的螺旋 體 –陰性對照和空白對照：不產 生熒光?結果報告：

–陽性：綠色熒光的螺旋體 –陰性：無熒光或淡綠色螺旋 體第44頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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FTA-ABS試驗（4）?臨床意義：

–FTA-ABS:梅毒螺旋體抗原血清學試驗的“金標準” –初篩陽性的確證 –治療后，FTA-ABS仍可為陽性，不能作為療效觀察 –結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果，區(qū)分既往和現癥感染 –用于神經梅毒的診斷?注意事項：

–洗滌：干凈，除去雜質，以免影響結果判讀 –高質量熒光顯微鏡，技術熟練第45頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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TP-ELISA試驗（1）?基本原理：

–包被抗原+血清抗體+第二抗體（酶標記)---底 物顯色?標本采集：

–血清 –血漿第46頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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TP-ELISA試驗（2）?操作步驟：

–加稀釋液： –加樣：陽性、陰性對照，待檢血清 –孵育：37℃，60min，洗板 –加酶結合物：37℃，60min，洗板 –加顯色劑：37℃，15min， –終止反應：終止，比色第47頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

TP-ELISA試驗（3）?結果判讀:

–閾值：公式 –陽性對照： –陰性對照和空白對照?結果報告：

–陽性 –陰性第48頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

TP-ELISA試驗（4）?臨床意義：

–適用于流行病學調查和大量樣品的檢查 –治療后，TP-ELISA仍可為陽性，不能作為療效觀察 –結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果，區(qū)分既往和現 癥感染 –用于篩查?注意事項：

–不同批號試劑不能混用 –溫度和時間必須嚴格控制第49頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

TP-WB試驗（1）?基本原理：

–抗原印跡（硝酸纖維膜）+酶聯反應，檢測多 種成分的抗體?標本采集：

–血清 –血漿第50頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

TP-WB試驗（2）?操作步驟：

–反應：工作緩沖液，樣品，搖45min –洗滌：工作緩沖液，洗滌3次 –加酶結合物：30min –洗滌 –顯色：37℃，15min –終止：第51頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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TP-WB試驗（3）?結果判讀:

–陽性參比圖 –觀察45kD,17kD,15.5kD顯色帶?結果報告：

–陽性：45kD,17kD,15.5kD均出現顯色帶 –陰性：45kD,17kD,15.5kD無顯色帶第52頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第53頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第54頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月第55頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

TP-WB試驗（4）?臨床意義：

–初篩陽性的確證 –治療后，TP-WB試驗仍可為陽性，不能作為療效觀察 –結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果，區(qū)分既往和現癥感染?注意事項：

–洗滌要充分，否則背景偏深 –對照條帶應顯示 –當45kD,17kD,15.5kD出現1~2個顯色帶，其他方法復檢第56頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

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快速免疫色譜法（1）?基本原理：免疫色譜原理，采用吸附有顯色標記 的梅毒螺旋體重組抗原的試劑條，快速監(jiān)測標本 中的梅毒螺旋體抗體。?標本采集：

–血清 –血漿 –全血第57頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月???操作步驟：

–加樣： –加緩沖液： –觀察結果：結果判讀:

–質控條帶 –標本條帶結果報告：

–陽性：質控條帶+標本條帶 –陰性：質控條帶

快速免疫色譜法（1）第58頁，課件共67頁，創(chuàng)作于2023年2月

快速免疫色譜法（1）?臨床意義：

–用于標本的快速篩查 –結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果，區(qū)分既 往和現癥感染?注意事項：

–試劑平衡至室溫 –假陽性和假陰性第59