項目一-植物組織培養(yǎng)的認知課件

項目一植物組織培養(yǎng)的認知主要教學(xué)參考書（名稱、編者）

園藝植物組織培養(yǎng)王永平植物組織培養(yǎng)王清連觀賞植物組織培養(yǎng)譚文澄植物組織培養(yǎng)曹春英植物細胞工程原理與技術(shù)周維燕

項目一植物組織培養(yǎng)的認知項目二植物組織培養(yǎng)實驗室的設(shè)計與設(shè)備配置項目三培養(yǎng)基配制項目四甘藍下胚軸培養(yǎng)快速繁殖無性系項目五草莓花藥培養(yǎng)項目六馬鈴薯脫毒種薯生產(chǎn)課程主要內(nèi)容：項目七

菊花的組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)項目八蝴蝶蘭的組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)項目九紅葉石楠的組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)項目十細胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交、種質(zhì)資源的離體保存項目十一組培苗工廠化生產(chǎn)的經(jīng)營與管理本課程學(xué)習(xí)要求掌握基本原理掌握基本概念了解開展組織培養(yǎng)工作的基本設(shè)施掌握植物組織培養(yǎng)基本的操作技術(shù)掌握植物組織培養(yǎng)在植物快繁脫毒等方面的應(yīng)用《植物組織培養(yǎng)》考試課程：按334原則確定平時成績30%期中考試成績30%

期末成績占40%(實踐成績中優(yōu)秀取90分，良取75分，及格取60分)出勤及學(xué)習(xí)態(tài)度（10分）；實驗操作的規(guī)范性（10分）；實驗報告完成情況，包括結(jié)果觀察、分析、討論深入程度（10分）。成績考試暫定辦法X50%+實踐成績50%=總成績項目一、植物組織培養(yǎng)的認知了解植物組織培養(yǎng)的目的和意義。學(xué)會檢索植物組織培養(yǎng)的相關(guān)信息。掌握植物組織培養(yǎng)的概念和分類方法。會用細胞全能性和實現(xiàn)途徑的理論闡述植物組織培養(yǎng)技術(shù)。了解植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用現(xiàn)狀。學(xué)習(xí)目標主要內(nèi)容：植物組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)的類型植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)植物組織培養(yǎng)的發(fā)展簡史植物組織培養(yǎng)在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用植物組織培養(yǎng)是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)的一個重要組成部分和基本研究手段之一。它是通過無菌操作，把植物的離體器官、組織或細胞在人工制備的培養(yǎng)基上進行無菌培養(yǎng)并使其發(fā)育成完整植株的科學(xué)技術(shù)。

項目介紹 通過本課程的學(xué)習(xí)，旨在使有關(guān)專業(yè)的學(xué)生在了解和掌握有關(guān)基礎(chǔ)理論知識的前提下，加強實驗設(shè)計、技術(shù)操作和實際動手能力的培養(yǎng)，培養(yǎng)學(xué)生的動手能力和創(chuàng)新能力，擴大學(xué)生的知識面，增加畢業(yè)生就業(yè)機會和職業(yè)能力，使學(xué)生能夠在生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)和農(nóng)林生產(chǎn)中解決實際問題，直接服務(wù)于生產(chǎn)。

讓學(xué)生將檢索得到的相關(guān)信息制作成幻燈片，以PPT為輔助呈現(xiàn)其所收集的植物組培的相關(guān)內(nèi)容，然后在教師的輔導(dǎo)下開展討論，有條件的可進行植物組織培養(yǎng)的實地參觀考察，從而使加深對植物組織培養(yǎng)基本概念和知識的理解。植物組織培養(yǎng)基本知識收集、整理。探究植物組織培養(yǎng)的類型、特點和理論基礎(chǔ)。查閱植物組織培養(yǎng)的發(fā)展歷史和應(yīng)用現(xiàn)狀。工作任務(wù)植物組織發(fā)展史期刊雜志：《植物生理學(xué)通訊》、《Plantcellreports》、《plantcell,tissueandorganculture》、《Handbookofplantcellculture》、《InVitroCellularandDevelopmentBiology》、《Plantbiotechnology》。圖書：《植物組織培養(yǎng)》，王清連；《觀賞植物組織培養(yǎng)》，譚文澄；《植物細胞工程原理與技術(shù)》，周維燕；《植物組織培養(yǎng)教程》，李浚明；《植物組織培養(yǎng)與工廠化育苗》，崔德才等。網(wǎng)絡(luò)：中國植物組織培養(yǎng)網(wǎng)，“google”網(wǎng)站檢索。實踐知識植物組織培養(yǎng)相關(guān)信息的檢索一、什么是植物組織培養(yǎng)？什么是組織培養(yǎng)或離體培養(yǎng)或試管培養(yǎng)？問題探究分株繁殖壓條繁殖播種繁殖嫁接繁殖扦插繁殖組織培養(yǎng)繁殖器官（organ)：根、莖、葉、花、果實、種子等組織（tissue)：花藥、胚珠、胚、胚乳、形成層、皮層等細胞（cell）：體細胞、生殖細胞、花粉等植物組織培養(yǎng)（tissueculture）是指在無菌條件下將離體的植物器官、組織、細胞以及除去細胞壁的原生質(zhì)體放在（培養(yǎng)在）人工配置的培養(yǎng)基上，給予適當?shù)呐囵B(yǎng)條件，使其長成完整的植株。

一、概念1、狹義概念：

指對植物體組織或由植物器官培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織進行培養(yǎng)直至生成完整植株。2、廣義概念：

無菌操作分離植物體一部分(即外植體)接種到培養(yǎng)基，在人工條件下培養(yǎng)直至生成完整植株。廣義和狹義概念有何區(qū)別？

組培范圍不同，即外植體范圍不同。廣義組培狹義組培無菌離體材料：

①器官：根、莖、葉、花、果實②組織：花藥組織、胚乳、皮層③細胞：體細胞（2n）、生殖細胞（n）④原生質(zhì)體培養(yǎng)基（人工）培養(yǎng)條件：溫度、光照、濕度植物組織培養(yǎng)的四要素1.根據(jù)被切除的植物體來源不同和對象不同分為：植株培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)細胞培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng)是對植物體的各部分組織進行培養(yǎng)；或?qū)τ芍参锲鞴倥囵B(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織進行培養(yǎng)，二者均通過再分化誘導(dǎo)形成植株。

離體器官的培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的類型對完整植株材料的培養(yǎng)，如幼苗、較大植株。對由愈傷組織等進行液體振蕩培養(yǎng)所得到的能保持較好分散性的離體單細胞或花粉單細胞或很小的細胞團的培養(yǎng)。用酶及物理方法除去細胞壁的原生質(zhì)體的培養(yǎng)2.根據(jù)培養(yǎng)方式：固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)

固體培養(yǎng)液體培養(yǎng)固體培養(yǎng)：將培養(yǎng)物放在含有瓊脂等固化劑的培養(yǎng)基表面進行培養(yǎng)。液體培養(yǎng)：將培養(yǎng)物放在未加固化劑的培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)，一般需進行震蕩，又稱液體震蕩培養(yǎng)。(1)固體培養(yǎng)法

是最常用的方法。該方法簡單，易行，

但養(yǎng)分分布不均，生長速度不均衡，并常有

褐化中毒現(xiàn)象發(fā)生。(2)液體培養(yǎng)法

由于液體中氧氣含量較少，常用振動培養(yǎng)的方法以確

保氧氣的供給,往復(fù)式搖床或旋轉(zhuǎn)式搖床進行培養(yǎng)，速度一般為50-200r／min，這種定期浸沒的方法，既能使培養(yǎng)基均一，又能保證氧氣的供給。

固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)的特點：褐化3.根據(jù)培養(yǎng)器官的不同：

煙草（葉培養(yǎng)）可分為：葉培養(yǎng)、根培養(yǎng)、花藥培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、莖尖培養(yǎng)等松樹莖尖培養(yǎng)植物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是------------------，理論基礎(chǔ)是-----------------------------

植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性植物的克隆離體、消毒的植物器官、組織或細胞植物體根、芽脫分化再分化植物組織培養(yǎng)愈傷組織脫分化胚狀體再分化1、概念受精卵生殖細胞體細胞＞＞植物體的每個活細胞具有遺傳上的全能性,都具有發(fā)育為完整植株的潛能，叫做植物細胞全能性。2、原因3、全能性的體現(xiàn)：一、植物細胞的全能性植物細胞>

動物細胞不同種類植物或同種植物的不同基因型個體之間因遺傳性的差異,細胞全能性的表達程度大不相同.生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì).

思考討論：為什么體內(nèi)細胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組織、器官？

基因在特定空間和時間條件下選擇性表達的結(jié)果。在個體發(fā)育的不同時期，生物體不同部位的細胞表達的基因是不同的，合成的蛋白質(zhì)也不一樣，從而形成了不同的組織和器官。

離體狀態(tài)有一定營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件(如無菌、溫度、PH）細胞表現(xiàn)出全能性的條件二、植物組織培養(yǎng)程序1、配制半固體培養(yǎng)基2、無菌操作切取一些小塊組織3、獲得愈傷組織4、誘導(dǎo)愈傷組織5、再生新植株出現(xiàn)脫分化通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和植物生長調(diào)節(jié)劑的適當配比植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基無機營養(yǎng)物質(zhì)：植物所必需的大量元素及微量元素有機營養(yǎng)物質(zhì)①含N物質(zhì)：包括維生素和氨基酸②碳源：2%—5%的蔗糖③瓊脂：起凝固支持作用植物生長調(diào)節(jié)劑：（生長素，細胞分裂素）PH值：5.0－6.0上海和呈儀器制造有限公司CO2培養(yǎng)箱愈傷組織強調(diào)幾個概念：愈傷組織：植物組織塊切口處的細胞在創(chuàng)傷的刺激下發(fā)生脫分化，繼續(xù)分裂增殖，形成一種相對沒有分化的活的薄壁細胞團組成的新生組織。植物細胞的脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，又稱去分化。獲取外植體無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成試管苗的形成擴大培養(yǎng)移栽脫分化再分化三、植物細胞培養(yǎng)主要幾種技術(shù)：1、組織培養(yǎng)2、懸浮細胞培養(yǎng)3、原生質(zhì)體培養(yǎng)4、單倍體培養(yǎng)

通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑的適當配比，誘導(dǎo)愈傷組織分化出芽和根的分生組織而形成再生新的植株。通過液體懸浮培養(yǎng)使愈傷組織分散成單細胞，經(jīng)適宜培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可發(fā)育成胚狀體，從而形成新株。原生質(zhì)體：去除細胞壁后的植物細胞。用適當方法進行原生質(zhì)體培養(yǎng)，也可以獲得新植株。用花藥離體培養(yǎng)方法獲得單倍體植株。植物細胞愈傷組織芽、根單細胞胚狀體植株植株植物激素的不同配比