高三生物多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段

高三生物多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段課件第1頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第2頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基礎(chǔ)知識(shí)1、組成元素（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第3頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第4頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素2、基本單位（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第5頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素脫氧核苷酸2、基本單位（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第6頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基礎(chǔ)知識(shí)C、H、O、N、P1、組成元素脫氧核苷酸2、基本單位3、脫氧核苷酸結(jié)構(gòu)（一）DNA分子的結(jié)構(gòu)第7頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月脫氧核苷酸結(jié)構(gòu)式第8頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月OOPOHO堿基OOHOOPOHOOH堿基5’3’3’5’堿基脫氧核糖磷酸基團(tuán)堿基脫氧核糖堿基脫氧核糖5’3’多脫氧核苷酸鏈結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖第9頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接第10頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGC第11頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGCATGC第12頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGCATGC第13頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGCATGC3'端（含羥基）第14頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）第15頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）3'端第16頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月連接ATGCATGC5'端含磷酸基團(tuán)3'端（含羥基）3'端5'端第17頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)第18頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)①DNA分子是由兩條反向平行的（即一條鏈為3’－5’，另一條鏈為5’－3’）脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤旋而成的規(guī)則雙螺旋結(jié)構(gòu)第19頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)①DNA分子是由兩條反向平行的（即一條鏈為3’－5’，另一條鏈為5’－3’）脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤旋而成的規(guī)則雙螺旋結(jié)構(gòu)②脫氧核糖與磷酸交替連結(jié)，排列在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架；堿基排列在鏈的內(nèi)側(cè)第20頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月③兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵連結(jié)起來(lái)，形成堿基對(duì)。堿基對(duì)的組成有特定的規(guī)律：即腺嘌呤一定與胸腺嘧啶配對(duì)，鳥嘌呤一定同胞嘧啶配對(duì)。5、DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)第21頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）DNA的復(fù)制2、時(shí)期3、場(chǎng)所1、概念第22頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）DNA的復(fù)制2、時(shí)期3、場(chǎng)所1、概念由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程第23頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）DNA的復(fù)制2、時(shí)期有絲分裂間期減數(shù)第一次分裂前的間期3、場(chǎng)所1、概念由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程第24頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）DNA的復(fù)制2、時(shí)期有絲分裂間期減數(shù)第一次分裂前的間期3、場(chǎng)所細(xì)胞核（主）、線粒體、葉綠體1、概念由一個(gè)DNA形成兩個(gè)完全相同的DNA的過(guò)程第25頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、原材料6、基本條件4、模板第26頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、原材料6、基本條件4、模板DNA母鏈第27頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、原材料脫氧核苷酸6、基本條件4、模板DNA母鏈第28頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、原材料脫氧核苷酸6、基本條件酶、ATP、原料、模板4、模板DNA母鏈第29頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月7、復(fù)制過(guò)程第30頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月7、復(fù)制過(guò)程①DNA的解旋第31頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月7、復(fù)制過(guò)程①DNA的解旋親代DNA分子利用細(xì)胞提供的能量在解旋酶的作用下氫鍵斷裂，部分雙螺旋鏈解旋為兩條平行的雙鏈第32頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA聚合酶的特性

DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，而只能從3’端延伸DNA鏈。因此，DNA復(fù)制需要引物。

第33頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月②RNA引物的合成第34頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月②RNA引物的合成以單股DNA為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第35頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月②RNA引物的合成以單股DNA為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物③DNA的生成第36頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月②RNA引物的合成以單股DNA為模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物③DNA的生成以單股的DNA為模板，在DNA聚合酶的作用下，在RNA引物的末端由5’端－3’端合成DNA。第37頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④切掉引物生成岡崎片斷第38頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④切掉引物生成岡崎片斷在核酸酶的作用下切掉引物。在DNA聚合酶的作用下將引物部位換上DNA，此時(shí)的DNA片斷稱為岡崎片斷第39頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④切掉引物生成岡崎片斷在核酸酶的作用下切掉引物。在DNA聚合酶的作用下將引物部位換上DNA，此時(shí)的DNA片斷稱為岡崎片斷⑤DNA片斷的連接第40頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④切掉引物生成岡崎片斷在核酸酶的作用下切掉引物。在DNA聚合酶的作用下將引物部位換上DNA，此時(shí)的DNA片斷稱為岡崎片斷⑤DNA片斷的連接在DNA連接酶的作用下將岡崎片斷連接起來(lái)。形成一條完整的新的DNA鏈。新鏈與舊鏈構(gòu)成新的DNA第41頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第42頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA合成的方向從子鏈由5’端向3’端延伸第43頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月思考：DAN復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開(kāi)雙鏈？第44頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DAN復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開(kāi)雙鏈？第45頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DAN復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開(kāi)雙鏈？雙鏈的解開(kāi)第46頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA復(fù)制的前提是______________；用_________________方法思考：DAN復(fù)制的前提是什么？體外擴(kuò)增DNA如何打開(kāi)雙鏈？雙鏈的解開(kāi)控制溫度第47頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4.DNA分子的熱變性原理：第48頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈4.DNA分子的熱變性原理：第49頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈變性（加熱80-100℃）4.DNA分子的熱變性原理：第50頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）4.DNA分子的熱變性原理：第51頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）復(fù)性（緩慢冷卻）4.DNA分子的熱變性原理：第52頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：4.DNA分子的熱變性原理：第53頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：解開(kāi)雙鏈4.DNA分子的熱變性原理：第54頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：復(fù)性的目的：解開(kāi)雙鏈4.DNA分子的熱變性原理：第55頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）復(fù)性（緩慢冷卻）變性的目的：復(fù)性的目的：解開(kāi)雙鏈有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ與兩條單鏈的結(jié)合4.DNA分子的熱變性原理：第56頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月思考：高溫使DNA解旋，但普通DNA聚合酶會(huì)失活，__________________找到耐高溫DNA聚合酶。第57頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月思考：高溫使DNA解旋，但普通DNA聚合酶會(huì)失活，__________________找到耐高溫DNA聚合酶。托馬斯.布魯克第58頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)第59頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)①DNA模板；第60頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)①DNA模板；②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；第61頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)①DNA模板；②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；③四種脫氧核苷酸；第62頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)①DNA模板；②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；③四種脫氧核苷酸；④耐高溫的聚合酶；第63頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5、體外DNA復(fù)制的條件(PCR反應(yīng)的條件)①DNA模板；②分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物；③四種脫氧核苷酸；④耐高溫的聚合酶；⑤控制溫度，但不需解旋酶。第64頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（五）

PCR的反應(yīng)過(guò)程1、PCR的反應(yīng)步驟第65頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（五）

PCR的反應(yīng)過(guò)程1、PCR的反應(yīng)步驟

PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為三個(gè)基本步驟──變性、復(fù)性和延伸第66頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①變性（模板DNA解旋）模板DNA經(jīng)加熱至900C以上。一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使成為單鏈，以便于它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。2、循環(huán)過(guò)程第67頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月靶序列靶序列PCR循環(huán)第一步：加熱變性第68頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月②復(fù)性（退火）模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降到500C左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合第69頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月靶序列靶序列引物Ⅰ引物Ⅱ5’3’5’5’3’5’3’3’PCR循環(huán)第二步：引物與靶序列退火第70頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月③延伸

DNA模板－引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下以脫氧核苷酸為原料，以母鏈為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則與半保留復(fù)制的原理，合成一條新的DNA鏈第71頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月靶序列靶序列引物Ⅰ引物Ⅱ5’3’5’5’3’5’3’3’TaqDNA聚合酶PCR循環(huán)第三步：引物延伸第72頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月靶序列

靶序列第1個(gè)PCR循環(huán)完成后：得到兩個(gè)拷貝的靶序列第73頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、30次循環(huán)后靶序列擴(kuò)增的數(shù)量第74頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、30次循環(huán)后靶序列擴(kuò)增的數(shù)量第75頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月循環(huán)次數(shù)DNA數(shù)量122438201,048,576301,073,741,8243、30次循環(huán)后靶序列擴(kuò)增的數(shù)量第76頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、PCR循環(huán)的結(jié)果第77頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、PCR循環(huán)的結(jié)果①?gòu)牡诙喲h(huán)開(kāi)始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會(huì)與引物Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行DNA的延伸第78頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、PCR循環(huán)的結(jié)果②DNA聚合酶只能特異性地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列，使這段固定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增①?gòu)牡诙喲h(huán)開(kāi)始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會(huì)與引物Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行DNA的延伸第79頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月95℃變性（1）PCR循環(huán)——變性第80頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（1）PCR循環(huán)——變性95℃變性第81頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月95℃變性（1）PCR循環(huán)——變性第82頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月55℃復(fù)性（2）PCR循環(huán)—復(fù)性第83頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（3）PCR循環(huán)—延伸第84頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（3）PCR循環(huán)—延伸第85頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（3）PCR循環(huán)—延伸第86頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（3）PCR循環(huán)—延伸第87頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第88頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第89頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第90頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第91頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、循環(huán)特點(diǎn)：①上一次循環(huán)的產(chǎn)物為下一循環(huán)的模板②結(jié)果單鏈中有最初母鏈的只兩條（無(wú)引物存于兩個(gè)子代DNA分子中③其它子代DNA分子都為雙引物分子式④處于兩引物之間的DNA序列呈指數(shù)增長(zhǎng)1×2N第92頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)步驟第93頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①準(zhǔn)備好PCR反應(yīng)體系的配方二、實(shí)驗(yàn)步驟第94頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①準(zhǔn)備好PCR反應(yīng)體系的配方②用微量移液器按配方在微量試管中加入各組分二、實(shí)驗(yàn)步驟第95頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①準(zhǔn)備好PCR反應(yīng)體系的配方②用微量移液器按配方在微量試管中加入各組分③蓋嚴(yán)蓋子，用手指輕輕彈擊管壁二、實(shí)驗(yàn)步驟第96頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①準(zhǔn)備好PCR反應(yīng)體系的配方②用微量移液器按配方在微量試管中加入各組分③蓋嚴(yán)蓋子，用手指輕輕彈擊管壁④離心10分鐘二、實(shí)驗(yàn)步驟第97頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①準(zhǔn)備好PCR反應(yīng)體系的配方②用微量移液器按配方在微量試管中加入各組分③蓋嚴(yán)蓋子，用手指輕輕彈擊管壁④離心10分鐘⑤將離心管放入PCR儀上，設(shè)置好循環(huán)程序二、實(shí)驗(yàn)步驟第98頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①準(zhǔn)備好PCR反應(yīng)體系的配方②用微量移液器按配方在微量試管中加入各組分③蓋嚴(yán)蓋子，用手指輕輕彈擊管壁④離心10分鐘⑤將離心管放入PCR儀上，設(shè)置好循環(huán)程序⑥電泳檢測(cè)PCR結(jié)果二、實(shí)驗(yàn)步驟第99頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

1．為避免外源DNA等因素的污染，PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。

2．PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，并在-20℃儲(chǔ)存。使用前，將所需試劑從冰箱拿出，放在冰塊上緩慢融化。三、操作提示第100頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

3．在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí)，每吸取一種試劑后，移液器上的槍頭都必須更換。所有的成分都加入后，蓋嚴(yán)離心管口的蓋子，用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁，使反應(yīng)液混合均勻，再將微量離心管放在離心機(jī)上，離心約10s，使反應(yīng)液集中在離心管底部，再放入PCR儀中進(jìn)行反應(yīng)。第101頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月目的：避免外源性DNA大量擴(kuò)增造成假陽(yáng)性反應(yīng)。第102頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、原理：DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰(圖5-11)?？梢岳肈NA的這一特點(diǎn)進(jìn)行DNA含量的測(cè)定。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)第103頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(了解)2、具體方法如下。1）將樣品進(jìn)行50倍稀釋：取2μLPCR反應(yīng)液，加入98μL蒸餾水。2）以蒸餾水作為空白對(duì)照，在波長(zhǎng)260nm處，將紫外分光

光度計(jì)(圖5-12)的讀數(shù)

調(diào)節(jié)至零。第104頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3）加入步驟1中的DNA稀釋液100L至比色杯中，測(cè)定260nm處的光吸收值。4）根據(jù)下面的公式計(jì)算DNA含量。

DNA含量(μg/ml)=50×(260nm的讀數(shù))×稀釋倍數(shù)第105頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、課題延伸第106頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、PCR優(yōu)點(diǎn)：五、課題延伸第107頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月原理雖然復(fù)雜，但操作卻十分簡(jiǎn)單。快速、高效、靈活和易于操作。1、PCR優(yōu)點(diǎn)：五、課題延伸第108頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月原理雖然復(fù)雜，但操作卻十分簡(jiǎn)單。快速、高效、靈活和易于操作。1、PCR優(yōu)點(diǎn)：2、PCR技術(shù)的意義五、課題延伸第109頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月復(fù)習(xí)：PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別第110頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月復(fù)習(xí)：PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別1.PCR不需要解旋酶；體內(nèi)DNA復(fù)制需要；第111頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月復(fù)習(xí)：PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別1.PCR不需要解旋酶；體內(nèi)DNA復(fù)制需要；2.PCR需要耐熱的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶），而生物體內(nèi)的聚合酶在高溫時(shí)會(huì)變性；第112頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月復(fù)習(xí)：PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別1.PCR不需要解旋酶；體內(nèi)DNA復(fù)制需要；2.PCR需要耐熱的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶），而生物體內(nèi)的聚合酶在高溫時(shí)會(huì)變性；3.PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，而生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要生物體自身的復(fù)制。第113頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.DNA單鏈的________末端為3'端，________末端為5'端，在DNA復(fù)制時(shí)，引物從模板鏈的______端配對(duì)結(jié)合。在___________酶的作用下，引物提供____端，使子鏈向下延伸。2.每次循環(huán)可以分為_(kāi)________________這三個(gè)過(guò)程，對(duì)應(yīng)溫度分別為_(kāi)______________________。練習(xí)第114頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.DNA單鏈的________末端為3'端，________末端為5'端，在DNA復(fù)制時(shí)，引物從模板鏈的______端配對(duì)結(jié)合。在___________酶的作用下，引物提供____端，使子鏈向下延伸。2.每次循環(huán)可以分為_(kāi)________________這三個(gè)過(guò)程，對(duì)應(yīng)溫度分別為_(kāi)______________________。羥基練習(xí)第115頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.DNA單鏈的________末端為3'端，________末端為5'端，在DNA復(fù)制時(shí)，引物從模板鏈的______端配對(duì)結(jié)合。在___________酶的作用下，引物提供____端，使子鏈向下延伸。2.每次循環(huán)可以分為_(kāi)________________這三個(gè)過(guò)程，對(duì)應(yīng)溫度分別為_(kāi)______________________。磷酸基團(tuán)羥基練習(xí)第116頁(yè)，課件共121頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.DNA單鏈的________末端為3'端，________末端為5'端，在DNA復(fù)制時(shí)，引物從模板鏈的______端配對(duì)結(jié)合。在___________酶的作用下，引物提供____端，使子鏈向下延伸。2.每次循環(huán)可以分為_(kāi)_____________