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基因工程及其應(yīng)用一組主講劉婷劉杰南主編周舟副主編李伊八卦偉哥1979年,美國(guó)將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內(nèi),實(shí)現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素,大大降低了生產(chǎn)成本。1979年,美國(guó)將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內(nèi),實(shí)現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素,大大降低了生產(chǎn)成本。思考:轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)了一種生物的某些性狀在另一種生物中表達(dá)。這些性狀的表達(dá)與我們學(xué)過的基因的什么過程有關(guān)?DNA(基因)mRNA蛋白質(zhì)(性狀)轉(zhuǎn)錄翻譯1979年,美國(guó)將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內(nèi),實(shí)現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素,大大降低了生產(chǎn)成本。思考:轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)了一種生物的某些性狀在另一種生物中表達(dá)。這些性狀的表達(dá)與我們學(xué)過的基因的什么過程有關(guān)?密碼子在生物界是的!DNA(基因)mRNA蛋白質(zhì)(性狀)通用1979年,美國(guó)將人的胰島素基因重組到大腸桿菌內(nèi),實(shí)現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素,大大降低了生產(chǎn)成本。思考:轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)了一種生物的某些性狀在另一種生物中表達(dá)。這些性狀的表達(dá)與我們學(xué)過的基因的什么過程有關(guān)?轉(zhuǎn)錄翻譯問題探討蘇云金桿菌毒蛋白蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。問題探討蘇云金桿菌毒蛋白普通棉花抗蟲棉蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。讓細(xì)菌的毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中表達(dá),可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。1.作用——限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并在使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。SmaⅠSmaⅠ平末端平末端EcoRⅠEcoRⅠEcoRⅠ黏性末端黏性末端1.主要來源:2.種類:3.作用特點(diǎn):4.作用結(jié)果:一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”原核生物4000種1.主要來源:2.種類:3.作用特點(diǎn):4.作用結(jié)果:一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”識(shí)別特定核苷酸序列,切斷磷酸二酯鍵。具特異性。原核生物4000種1.主要來源:2.種類:3.作用特點(diǎn):4.作用結(jié)果:一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”識(shí)別特定核苷酸序列,切斷磷酸二酯鍵。具特異性。原核生物產(chǎn)生黏性末端或平末端4000種1.主要來源:2.種類:3.作用特點(diǎn):4.作用結(jié)果:一、限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口?可產(chǎn)生幾個(gè)末端?要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口?可產(chǎn)生幾個(gè)末端?要切兩個(gè)切口,產(chǎn)生四個(gè)末端。要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口?可產(chǎn)生幾個(gè)末端?要切兩個(gè)切口,產(chǎn)生四個(gè)末端。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割,會(huì)怎樣呢?要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口?可產(chǎn)生幾個(gè)末端?要切兩個(gè)切口,產(chǎn)生四個(gè)末端。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割,會(huì)怎樣呢?
會(huì)產(chǎn)生相同的末端。G
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G2020年9月28日26G
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G用同種限制酶切割2020年9月28日27G
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G用同種限制酶切割2020年9月28日28G
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G用同種限制酶切割2020年9月28日29G
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G用同種限制酶切割2020年9月28日30G
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G用同種限制酶切割“分子縫合針”:DNA連接酶2020年9月28日31⒈分類:⑴E·coliDNA連接酶⑵T4DNA連接酶⒉作用:二、“分子縫合針”——DNA連接酶2020年9月28日322020年9月28日33E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶2020年9月28日34E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來,2020年9月28日35E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來,即恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵2020年9月28日36
T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來,但效率較低DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?為什么?DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎?為什么?不是一回事。相同點(diǎn):形成磷酸二酯鍵不同點(diǎn):1)DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段上,形成磷酸二酯鍵;而DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵2)DNA聚合酶需要以一條DNA鏈為模板;而DNA連接酶不需要模板。三、“分子運(yùn)輸車”
——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體⒈載體需要的條件:⒈載體需要的條件:作為分子運(yùn)輸車——載體,如果沒有切割位點(diǎn)將會(huì)怎樣?三、“分子運(yùn)輸車”
——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體⒈載體需要的條件:⑴有1~多個(gè)限制酶切點(diǎn)作為分子運(yùn)輸車——載體,如果沒有切割位點(diǎn)將會(huì)怎樣?三、“分子運(yùn)輸車”
——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體⒈載體需要的條件:⑴有1~多個(gè)限制酶切點(diǎn)作為分子運(yùn)輸車——載體,如果沒有切割位點(diǎn)將會(huì)怎樣?霍亂菌的質(zhì)粒多個(gè)限制酶切點(diǎn),你會(huì)用它來做分子運(yùn)輸車嗎?三、“分子運(yùn)輸車”
——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體⒈載體需要的條件:⑴有1~多個(gè)限制酶切點(diǎn)⑵對(duì)受體細(xì)胞無害作為分子運(yùn)輸車——載體,如果沒有切割位點(diǎn)將會(huì)怎樣?霍亂菌的質(zhì)粒多個(gè)限制酶切點(diǎn),你會(huì)用它來做分子運(yùn)輸車嗎?三、“分子運(yùn)輸車”
——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效果嗎?⑶導(dǎo)入基因能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá)假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效果嗎?⑶導(dǎo)入基因能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá)假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效果嗎?目的基因有沒有進(jìn)入受體細(xì)胞,如何去發(fā)現(xiàn)?⑶導(dǎo)入基因能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá)假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制或不能轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效果嗎?目的基因有沒有進(jìn)入受體細(xì)胞,如何去發(fā)現(xiàn)?⑷有某些標(biāo)記基因,便于篩選⒉常用運(yùn)載體:⑴細(xì)菌的質(zhì)粒⑵噬菌體或某些動(dòng)植物病毒質(zhì)粒的特點(diǎn)質(zhì)粒的特點(diǎn)1.細(xì)胞染色體(或擬核DNA分子)外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子;質(zhì)粒的特點(diǎn)1.細(xì)胞染色體(或擬核DNA分子)外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子;2.質(zhì)粒的存在對(duì)宿主細(xì)胞無影響;質(zhì)粒的特點(diǎn)1.細(xì)胞染色體(或擬核DNA分子)外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子;2.質(zhì)粒的存在對(duì)宿主細(xì)胞無影響;3.質(zhì)粒的復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成。四、基因工程的過程五、基因工程的應(yīng)用五、基因工程的應(yīng)用基因工程與作物育種五、基因工程的應(yīng)用基因工程與作物育種基因工程與藥物研制五、基因工程的應(yīng)用基因工程與作物育種基因工程與藥物研制基因工程與環(huán)境保護(hù)六、基因工程在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用:六、基因工程在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用:獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物六、基因工程在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用:獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物培養(yǎng)具有各種抗逆性的作物新品種六、基因工程在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用:獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物培養(yǎng)具有各種抗逆性的作物新品種獲得人們所需要的和具有優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物六、基因工程在農(nóng)牧業(yè)上的應(yīng)用:獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物培養(yǎng)具有各種抗逆性的作物新品種獲得人們所需要的和具有優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物利用某些特定的外源基因在哺乳動(dòng)物體內(nèi)的表達(dá)1.以下說法正確的是()A.所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列B.質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體C.運(yùn)載體必須具備的條件之一是:具有多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便與外源基因連接D.DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵練習(xí)1.以下說法正確的是()A.所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列B.質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體C.運(yùn)載體必須具備的條件之一是:具有多個(gè)限制酶切點(diǎn),以便與外源基因連接D.DNA連接酶使黏性末段的堿基之間形成氫鍵C練習(xí)2.不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是()A.能復(fù)制B.有多個(gè)限制酶切點(diǎn)C.具有標(biāo)記基因D.它是環(huán)狀DNA2.不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是()A.能復(fù)制B.有多個(gè)限制酶切點(diǎn)C.具有標(biāo)記基因D.它是環(huán)狀DNAD3.有關(guān)基因工程的敘述中,錯(cuò)誤的是
()A.基因工程技術(shù)能定向地改造生物的遺傳性狀,培育生物新品種B.重組DNA的形成在細(xì)胞內(nèi)完成C.目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D.質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體3.有關(guān)基因工程的敘述中,錯(cuò)誤的是
()A.基因工程技術(shù)能定向地改造生物的遺傳性狀,培育生物新品種B.重組DNA的形成在細(xì)胞內(nèi)完成C.目的基因須由運(yùn)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D.質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體BD4.下列四條DNA分子,彼此間具有粘性末端的一組是()A.①②B.②③C.③④D.②④4.下列四條DNA分子,彼此間具有
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