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性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義淋病的實(shí)驗(yàn)室診斷淋病的主要實(shí)驗(yàn)室診斷方法
—直接顯微鏡檢查;
—分離培養(yǎng)淋球菌;
—非培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)淋球菌細(xì)胞成份如抗原或DNA(EIA,PCR/LCR)
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義顯微鏡檢查的臨床意義
男性尿道標(biāo)本:多形核細(xì)胞內(nèi)見(jiàn)到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌具診斷價(jià)值敏感性及特異性:95%~99%宮頸標(biāo)本、無(wú)癥狀男性尿道標(biāo)本敏感性:40~70%不推薦直接顯微鏡檢查診斷直腸和咽部淋球菌感染。
如果在多形核細(xì)胞外見(jiàn)到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌,需進(jìn)一步培養(yǎng)確認(rèn)。
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義淋球菌培養(yǎng)培養(yǎng)法為診斷淋病的金標(biāo)準(zhǔn)。從選擇性培養(yǎng)基上分離出淋球菌即可診斷淋病。初步鑒定淋球菌的主要依據(jù)菌落特征氧化酶試驗(yàn)革蘭染色性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義淋球菌培養(yǎng)的的臨床意義
培養(yǎng)特異性:100%,敏感性81-100%。宮頸、無(wú)癥狀男性尿道、直腸、咽部標(biāo)本等應(yīng)做淋球菌培養(yǎng)可發(fā)現(xiàn)無(wú)癥狀淋球菌感染患者;可用于進(jìn)一步作藥敏試驗(yàn);可用于治療后的判愈試驗(yàn)。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義淋病其它診斷技術(shù)核酸檢測(cè)的特點(diǎn)及臨床意義不依賴(lài)于活的病原體的存在,無(wú)需特殊運(yùn)送條件;敏感性高,不僅適合尿道或?qū)m頸標(biāo)本,還可以采用尿液、陰道標(biāo)本;不能進(jìn)行抗生素敏感性試驗(yàn);用于判愈試驗(yàn)需在治療后至少3周以上進(jìn)行.性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義沙眼衣原體感染的實(shí)驗(yàn)室診斷細(xì)胞培養(yǎng)法免疫層析快速抗原檢測(cè)酶聯(lián)免疫抗原檢測(cè)核酸擴(kuò)增檢測(cè)性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義衣原體培養(yǎng)的臨床意義
敏感性70%~80%特異性100%可用于判愈可用于確診缺點(diǎn)費(fèi)時(shí)(需3~5天),費(fèi)力,技術(shù)要求高不宜作為臨床常規(guī)檢查不宜用于大規(guī)模的篩查和流行病學(xué)調(diào)查性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義衣原體抗原快速檢測(cè)的臨床意義優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)易,方便,快速,尤其適用于基層單位宮頸標(biāo)本陰道標(biāo)本敏感性50%33%特異性98%99%缺點(diǎn):標(biāo)本中需要足夠數(shù)量的沙眼衣原體抗原,否則有假陰性結(jié)果性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義現(xiàn)有的核酸檢測(cè)方法PCRLCRSDATMARealtimePCR衣原體核酸檢測(cè)性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義優(yōu)點(diǎn):
敏感性:-98% 特異性:-99%
缺點(diǎn):
實(shí)驗(yàn)室條件和技術(shù)要求高 成本高、費(fèi)時(shí)、假陽(yáng)性衣原體核酸檢測(cè)的臨床意義性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義生殖器皰疹實(shí)驗(yàn)室診斷HSV實(shí)驗(yàn)室診斷的意義臨床診斷的準(zhǔn)確性:50%~70%,通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段可幫助診斷亞臨床感染:孕婦、性伴的檢測(cè)等進(jìn)行HSV分型的意義HSV-2是該病的主要病原體,HSV-1約占該病的30%兩型HSV感染的預(yù)后不同性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義生殖器皰疹實(shí)驗(yàn)室診斷方法病原學(xué)診斷-病毒檢測(cè)-抗原檢測(cè)-DNA檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)-抗體檢測(cè)
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義HSV血清學(xué)檢測(cè)的意義HSV感染的血清流行病學(xué)調(diào)查感染者性伴的HSV感染狀況的判斷孕婦產(chǎn)前監(jiān)測(cè)
HSV型特異性血清抗體檢測(cè)是發(fā)現(xiàn)亞臨床及無(wú)癥狀生殖器HSV感染者的最可行手段,對(duì)于防止性伴間和母嬰間HSV傳播有著重要意義性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義HPV-DNA檢測(cè)的意義HPV感染流行病學(xué)調(diào)查HPVDNA定型高危型HPV病毒負(fù)荷的增加可使女性發(fā)生宮頸癌及宮頸癌前病變的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)及臨床意義
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體也稱(chēng)蒼白密螺旋體蒼白亞種(Treponemapallidumsubspeciespallidum),是一種小而纖細(xì)的螺旋狀微生物,長(zhǎng)5~15m,直徑約0.2m,活體平均有8~14個(gè)規(guī)則的螺旋。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體透明而不易被染色,在普通顯微鏡下不易發(fā)現(xiàn),只有在暗視野顯微鏡、免疫熒光或Fontana鍍銀染色等特殊染色下才能觀(guān)察到。
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體在體外不易生存,離開(kāi)人體很快死亡,其生存最適溫度為37℃。煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒劑很容易將其殺死。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體不耐熱,加熱至42℃2個(gè)小時(shí)可將它殺死,100℃時(shí)立即死亡;但耐低溫,在0℃時(shí)可存活48小時(shí),置于-78℃數(shù)年仍具有傳染性。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體尚不能在體外培養(yǎng)繁殖,人是其唯一的自然宿主。梅毒螺旋體可在家兔睪丸中生長(zhǎng)繁殖,用于抗原制備和實(shí)驗(yàn)研究。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體傳代時(shí)間為30~33小時(shí),繁殖方式主要為橫斷分裂。1998年完成了梅毒螺旋體全基因組測(cè)序。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的特點(diǎn)病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)檢測(cè)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)檢測(cè)暗視野顯微鏡檢查VDRLFTA-ABS銀染色鏡檢USRTPPA/APHA核酸檢測(cè)RPRELISATRUST發(fā)光法
膠體金法不同原理的方法:檢測(cè)策略臨床意義解釋復(fù)雜:不同方法結(jié)果判斷、血清固定、前帶現(xiàn)象缺乏特殊梅毒的有效檢測(cè)方法:胎傳梅毒、神經(jīng)梅毒性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
原理
暗視野映光檢查是采用一個(gè)特殊的聚光器,分為干系和濕系兩種,其中央均為黑漆所遮蔽,僅在圓周邊留有光線(xiàn)斜角處,光線(xiàn)只可從其圓周邊緣斜角射到載玻片上。梅毒螺旋體檢查一般采用濕系聚光器。倘若斜射光線(xiàn)遇到載玻片上的物體,如螺旋體等,物體會(huì)發(fā)光顯現(xiàn)。本法檢查梅毒螺旋體對(duì)于梅毒有病原學(xué)診斷的價(jià)值。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
材料暗視野顯微鏡、鈍刀(刮勺)、載玻片、注射器、注射針頭、無(wú)菌等滲鹽水。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
取材
皮膚粘膜損害取材:首先在載玻片(厚度為1.0~1.2mm)上滴加50~100μL鹽水備用。然后用棉拭子取無(wú)菌鹽水輕輕擦去皮損上的污物。如皮損上有痂皮,可用鈍刀小心除去。再用鈍刀輕輕地刮數(shù)次(避免出血),取組織滲液與載玻片上的鹽水混勻,加蓋玻片置暗視野顯微鏡下檢查。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
取材
淋巴結(jié)取材:消毒淋巴結(jié)表面皮膚,用無(wú)菌干棉球擦干。用1mL無(wú)菌注射器配12號(hào)針頭,吸取無(wú)菌等滲鹽水0.25~0.5mL,以無(wú)菌操作穿刺淋巴結(jié)并注入鹽水,再吸入注射器內(nèi),反復(fù)2~3次后,取少量淋巴液于載玻片上,加蓋玻片,置暗視野顯微鏡下檢查性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
方法
在暗視野聚光器(此法用濕系暗視野聚光器)上加一滴甘油緩沖液(甘油和0.1mol/LPBS,pH7.0按7:3配制)。載玻片置載物臺(tái)上,上升聚光器使甘油緩沖液接觸載玻片,先用10倍物鏡,使物像清晰,再用40倍物鏡觀(guān)察,尋找有特征形態(tài)和運(yùn)動(dòng)方式的梅毒螺旋體性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
結(jié)果及解釋暗視野顯微鏡下,典型的梅毒螺旋體呈白色發(fā)光,其螺旋較密而均勻。運(yùn)動(dòng)規(guī)律,運(yùn)動(dòng)性較強(qiáng),其運(yùn)動(dòng)方式包括①旋轉(zhuǎn)式,圍繞其長(zhǎng)軸旋轉(zhuǎn);②蛇行式,全身彎曲如蛇行;③伸縮其螺旋間距離而移動(dòng)。觀(guān)察其運(yùn)動(dòng)形式有助于與其他螺旋體相鑒別。
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒螺旋體暗視野檢查
結(jié)果及解釋
未檢出螺旋體不能排除梅毒的診斷,陰性結(jié)果可能說(shuō)明:①螺旋體數(shù)量不足(單次暗視野顯微鏡檢查陽(yáng)性率小于50%)。②患者已接受抗生素或殺滅梅毒螺旋體的藥物治療。③損害接近自然消退。④損害不是梅毒。
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的特點(diǎn)臨床表現(xiàn)取材部位檢查方法 一期梅毒 潰瘍淋巴結(jié)病原學(xué)檢查 血液 血清學(xué)檢查 二期梅毒 皮損淋巴結(jié) 病原學(xué)檢查 血液 血清學(xué)檢查 潛伏梅毒 血液 血清學(xué)檢查 三期梅毒 血液 血清學(xué)檢查神經(jīng)梅毒 血液 血清學(xué)檢查 腦脊液 細(xì)胞、蛋白量檢查VDRL等性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義梅毒血清學(xué)檢測(cè)原理
當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4周-10周左右,血清中可產(chǎn)生一定數(shù)量的抗類(lèi)脂質(zhì)抗原的非特異性抗體(反應(yīng)素)和抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體。這些抗體均可用免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè),是輔助診斷梅毒的重要手?jǐn)?性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
梅毒血清學(xué)檢測(cè)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn) (VDRL)血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn) (RPR、TRUST)梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS)、梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫試驗(yàn)(ELSA)膠體金梅毒快速檢測(cè)試驗(yàn)性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后,血清可呈陽(yáng)性。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、快速,敏感性和特異性較好。適用于梅毒的篩查。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性,故可作為療效觀(guān)察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)存在假陽(yáng)性反應(yīng)①技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)由于標(biāo)本的保存不當(dāng)(如細(xì)胞污染或溶血)、試劑質(zhì)量差或過(guò)期、或?qū)嶒?yàn)室操作錯(cuò)誤所造成。②生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)是由于患者有其他疾病、吸毒或生理狀態(tài)發(fā)生變化,使梅毒血清試驗(yàn)出現(xiàn)陽(yáng)性
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)所有的非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣的,包括RPR、TRUST等基本成分是心磷脂卵磷脂和膽固醇抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物、凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒、肉眼可觀(guān)察結(jié)果方法敏感性和特異性都基本相似性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)未經(jīng)治療的病人和部分經(jīng)過(guò)治療的患者,其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后,反應(yīng)素可以逐漸減少,并可轉(zhuǎn)為陰性早期梅毒(一期、二期)經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個(gè)月,其抗體滴度下降2個(gè)稀釋度,6個(gè)月下降4個(gè)稀釋度。一期梅毒1年后絕大部分轉(zhuǎn)為陰性二期梅毒2年后大部分轉(zhuǎn)為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢,大部分病人血清反應(yīng)可能終身陽(yáng)性。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
1、性病研究實(shí)驗(yàn)室(VDRL)玻片試驗(yàn)
定性試驗(yàn)a.血清標(biāo)本需56℃滅活30分鐘備用;b.吸取0.05mL血清放入玻片圈內(nèi),將血清涂開(kāi)至整個(gè)圈內(nèi);c.用標(biāo)準(zhǔn)針頭加入1滴VDRL抗原;d.將玻片置旋轉(zhuǎn)器上搖動(dòng)4min,180±5次/min,立即置10×10倍顯微鏡下觀(guān)察。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
大或中等大小的絮狀物,液體清亮:3+-4+強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)絮狀物較小,液體較清亮:2+陽(yáng)性反應(yīng)絮狀物較小,均勻分布,液體混濁1+弱陽(yáng)性反應(yīng)抗原顆粒稍粗,無(wú)凝集±可疑抗原顆粒均勻,針狀細(xì)小:–陰性反應(yīng)性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
定量試驗(yàn)a.在反應(yīng)板1~8孔各加等滲鹽水0.05mLb.吸取0.05mL血清標(biāo)本(血清已滅活)置第1孔與等滲鹽水混勻,吸取0.05mL稀釋液至第2孔混勻,再吸取0.05mL至第3孔,如此連續(xù)稀釋至第8孔,棄0.05mL稀釋液。稀釋度為原倍、1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128,必要時(shí)可稀釋至更高倍數(shù)c.每個(gè)稀釋度加入抗原1滴d.旋轉(zhuǎn)速度和時(shí)間同定性試驗(yàn)性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
2、快速血漿反應(yīng)素(RPR)環(huán)狀卡片試驗(yàn)RPR試驗(yàn)是VDRL試驗(yàn)的一種改良方法。該法是在抗原中加入活性炭顆粒作為指示物,特制的白色紙卡替代了玻片。試驗(yàn)結(jié)果易于判斷,肉眼即可觀(guān)察,血清不需滅活,也可用血漿進(jìn)行檢測(cè),試驗(yàn)結(jié)果可保存??乖?℃冰箱可保存1年。
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
定性試驗(yàn)a.吸取0.05mL血清或血漿加于卡片圈內(nèi),并均勻地涂布在整個(gè)圈內(nèi)(每張紙卡有10個(gè)或12個(gè)反應(yīng)圈);b.將抗原輕輕搖勻,用標(biāo)準(zhǔn)針頭吸取抗原,每個(gè)標(biāo)本加1滴抗原;c.將卡片置水平旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)8min,100±5轉(zhuǎn)/min;d.立即在明亮光線(xiàn)下觀(guān)察結(jié)果。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
中到大的黑色絮狀物,液體清亮3+-4+強(qiáng)陽(yáng)性小到中的黑色絮狀物,液體較清亮2+陽(yáng)性小的黑色絮狀物,液體混濁1+弱陽(yáng)性?xún)H見(jiàn)活性炭顆粒集于中央一點(diǎn)或均勻分散-陰性性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
定量試驗(yàn)RPR定量試驗(yàn)的指證與VDRL試驗(yàn)相同在圈內(nèi)加入0.05mL等滲鹽水(一般作6~8個(gè)稀釋度),勿將鹽水涂開(kāi)b.吸取0.05mL血清或血漿作系列稀釋?zhuān)?:2~1:64),當(dāng)稀釋到最后的第6孔時(shí),棄去0.05mL稀釋液。從第6孔起將血清稀釋液涂布整個(gè)圈內(nèi),再涂布第5孔,依此向前到第1孔c.滴加抗原,旋轉(zhuǎn)時(shí)間、速度和觀(guān)察結(jié)果同定性試驗(yàn)。
性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義
非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)操作與結(jié)果解讀
甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)
TRUST試驗(yàn)原理與RPR試驗(yàn)原理相同唯TRUST試驗(yàn)的抗原中加入甲苯胺紅顆粒代替活性炭顆粒指示物,使陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)紅色絮狀現(xiàn)象,陰性結(jié)果見(jiàn)紅色顆粒集于中央或均勻分散。TRUST試驗(yàn)方法及結(jié)果判斷均與RPR試驗(yàn)相同。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)
假陽(yáng)性反應(yīng)的處理技術(shù)性假陽(yáng)性反應(yīng)一般是由于操作錯(cuò)誤引起的假陽(yáng)性反應(yīng),經(jīng)過(guò)重復(fù)試驗(yàn)即可除外。對(duì)生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng),應(yīng)做TPHA(TPPA)等梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)前帶現(xiàn)象
指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中,有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果,而臨床上又表現(xiàn)為二期梅毒,此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn),出現(xiàn)了陽(yáng)性的結(jié)果,該現(xiàn)象稱(chēng)為前帶現(xiàn)象。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)?zāi)脱逍裕ㄑ骞潭ǎ?/p>
晚期耐血清性與梅毒的類(lèi)型及開(kāi)始治療的時(shí)間早晚有關(guān)。晚期耐血清性病人已經(jīng)足夠量的治療后,即使再予更多地或無(wú)限制地治療也不能使血清滴度降低。對(duì)于這種病人,需經(jīng)過(guò)詳細(xì)的檢查,除外神經(jīng)、心臟與其他內(nèi)臟梅毒后,作定期隨訪(fǎng)。性病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及其意義梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)采用梅毒螺旋體作抗原,是特異性的抗原
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