市售紅花藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)研究 論文

市售紅花藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)研究學(xué)生姓名指導(dǎo)教師專業(yè)學(xué)院成績(jī)：年月日成績(jī)：摘要目的：評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量并且測(cè)定市售紅花中總黃酮的含量。方法：通過(guò)性狀鑒別和顯微鑒別的方法來(lái)評(píng)價(jià)紅花的質(zhì)量。紫外－可見(jiàn)分光光度法測(cè)定紅花的總黃酮含量。結(jié)果：在顯微鑒別時(shí)看到黑圈，這黑圈既是雜質(zhì),實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)得：海暉醫(yī)藥連鎖新疆紅花總黃酮含量為1.76%，紅旗大藥房新疆紅花總黃酮含量為１.22％。人民同泰新疆紅花總黃酮含量為１.08%。結(jié)論:在顯微鑒別是發(fā)現(xiàn)紅花有不同程度的摻假，海暉的黃酮含量最高。關(guān)鍵詞：紅花評(píng)價(jià)質(zhì)量黃酮緒論1.1論文主要內(nèi)容本論文先介紹紅花，了解紅花的化學(xué)成分及藥理作用,進(jìn)一步研究紅花的臨床應(yīng)用。通過(guò)性狀鑒別和顯微鑒別來(lái)評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量,運(yùn)用紫外分光光度法對(duì)新疆紅花中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定。1.2論文研究目的和意義?一方面為豐富紅花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)依據(jù)，另一方面闡明市售紅花質(zhì)量情況,為紅花的研究、開(kāi)發(fā)及臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)及檢測(cè)手段。1．３紅花概述紅花,又稱草紅花。雙子葉植物，菊科,干燥的管狀花，菊科植物紅花CaｒtｈａmustｉｎctｏriuｓL.的干燥花。(不帶子房的管狀花)長(zhǎng)約１.5厘米,橙紅色，花管狹細(xì)，先端5裂,裂片狹線形，長(zhǎng)5~7毫米,雄蕊5枚，花藥黃色,聯(lián)合成管,高出裂片之外,其中央有柱頭露出。具特異香氣,味微苦。以花片長(zhǎng)、色鮮紅、質(zhì)柔軟者為佳。主產(chǎn)河南、浙江、四川等地?；钛ń?jīng),去瘀止痛。１．3.1紅花的化學(xué)成分主要含有黃酮類和脂肪酸類化合物。1.3.1.1查爾酮類主要為紅花黃色素,它是含有多種成分的水溶性混合物。1.3．1.2其他黃酮類主要含有６羥基山奈酚3O葡萄糖苷、６羥基山奈酚7O葡萄糖苷，山奈酚、槲皮素、6羥基山奈酚、黃芩苷、槲皮素苷、山奈酚３蕓香糖苷和蘆丁;槲皮樹(shù)3葡萄糖苷、槲皮樹(shù)６葡萄糖苷、楊梅素及芹黃素,木樨草素,木樨草素７OβD葡萄糖苷。１．３．1.3脂肪酸紅花含棕櫚酸、肉豆蔻酸、月桂酸、二棕櫚酸、油酸和亞油酸，其中亞油酸含量高達(dá)80%。１.3．２紅花的藥理作用1.3.2.1抗凝血、抑制血栓紅花能阻止血栓進(jìn)一步發(fā)展且可逐步緩解血栓、降低膽固醇,能較好地改善心肌及腦組織的微循環(huán)障礙,起到治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病及腦血栓的作用。紅花水煎劑能抑制血小板聚集，有效成分ＳY亦能抑制血小板聚集，對(duì)已聚集的血小板有非常明顯的解聚作用,且隨劑量的增加而逐漸增強(qiáng)；還能提高大鼠纖維蛋白的溶解活性,顯著降低血栓的長(zhǎng)度和質(zhì)量,防止血栓的形成和發(fā)展。SY還能延長(zhǎng)家兔血漿的復(fù)鈣時(shí)間、凝血酶原時(shí)間和凝血酶時(shí)間。SY能顯著提高血漿纖溶酶原激活劑的活性,使局部血栓溶解，從而起到治療心腦血管疾病的作用。1．3．2.2對(duì)心血管系統(tǒng)的作用興奮心臟:小劑量紅花煎劑對(duì)蟾蜍心臟有輕微興奮作用,能使心跳有力、振幅加大,對(duì)心肌缺血有益；大劑量對(duì)蟾蜍反而有抑制作用。增加冠狀動(dòng)脈血流量和降低冠狀動(dòng)脈阻力,增加心肌營(yíng)養(yǎng)性血流量:用犬冠脈竇插管法，靜脈注射紅花注射液（10mg/ｋg)能使犬在位心臟冠脈流量增加60.４%。擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)：用含微量去甲腎上腺素或腎上腺素的樂(lè)氏液灌流離體兔耳，紅花注射液有明顯的擴(kuò)張血管作用。紅花亦可改善哮喘大鼠的器官微循環(huán)，使微循環(huán)增粗、流速加快、流態(tài)恢復(fù)正常。1.3.2.３抗腫瘤作用現(xiàn)代研究表明，腫瘤的生長(zhǎng)需要血管為之提供營(yíng)養(yǎng)和排除代謝產(chǎn)物。因此,如何阻斷腫瘤血管生成已成為當(dāng)今世界治療腫瘤的新熱點(diǎn)。在血管生成過(guò)程中,血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖是血管發(fā)生的最基本和最重要的環(huán)節(jié)。陸梁等曾報(bào)道紅花黃色素對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的增殖具有抑制作用。張前等通過(guò)雞胚尿囊膜血管實(shí)驗(yàn)及RTPCＲ實(shí)驗(yàn)，得出HYＳA能顯著抑制雞胚尿囊膜新生血管的生成,其作用機(jī)理之一是通過(guò)抑制bGF、ＶEＧF及VEＧFR（ｆlｔ1）的mRNA表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)。１.３.2.4耐缺氧紅花能解除血管平滑肌的痙攣并增強(qiáng)耐缺氧能力。紅花醇提液對(duì)結(jié)扎大鼠總動(dòng)脈所致的急性缺血所致缺氧腦病有保護(hù)作用。sY具有緩解異丙腎上腺素所致心肌缺血大鼠心功能下降的作用,并有顯著的耐缺氧、抗疲勞作用，能明顯延長(zhǎng)動(dòng)物的存活時(shí)間,并增加離體家兔心臟和心肌缺氧的冠脈流量,改善心臟的缺氧、缺血病理狀態(tài)。1.3.3紅花的臨床應(yīng)用1.３.3．1紅花制劑治療心血管疾病紅花注射液能改善血液黏度、血小板黏附率聚集率降低，抗凝、纖溶水平提高。臨床上紅花注射液可以明顯改善冠心病心絞痛的癥狀和缺血性心電圖改變。柳德學(xué)等用紅花注射液治療急性心肌梗死患者１58例,其中對(duì)照組７６例，應(yīng)用一般擴(kuò)血管抗心絞痛常規(guī)治療，治療組８2例,在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用紅花注射液。結(jié)果顯示兩組心電圖恢復(fù)率分別為6２.9％和8５.7％;心絞痛緩解時(shí)間分別為(3．2±２.2)h和(2.0±１.1)h；并發(fā)癥發(fā)生率分別為31.6%和14.6％,差異均有顯著性(P<0.05）。王璦芬等觀察紅花注射液臨床療效，對(duì)1２6例冠心病心絞痛心肌缺血患者分紅花組和丹參組治療，療程2周。結(jié)果顯示紅花、丹參均可明顯改善冠心病心絞痛心肌缺血相應(yīng)的臨床癥狀和心電圖改變，以紅花療效顯著。紅花還有降血糖、血脂的作用，顯著改善血液流變學(xué)指標(biāo)。１.3.３.2紅花制劑治療糖尿病的并發(fā)癥糖尿病是由于胰島內(nèi)分泌功能不足所致,其基礎(chǔ)病變是周圍小血管的病變。鑒于紅花制劑對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的抑制作用，毛林華報(bào)道用紅花注射液加用愛(ài)維治注射液治療３０例糖尿病并發(fā)周圍動(dòng)脈粥樣硬化閉塞癥.并用愛(ài)維治注射液治療30例作對(duì)照。20ｄ療程后治療組顯效率為73.３％,對(duì)照組為5３．3%(P<0．05)。觀察到全血高切黏度、全血低切黏度、血漿比黏度、纖維蛋白原和血液流變學(xué)指標(biāo)改善均優(yōu)于對(duì)照組。糖尿病腎病就其發(fā)病機(jī)制而言屬糖尿病合并小血管病變,趙弋于、王洪坤等應(yīng)用紅花注射液治療糖尿病腎病，觀察到腎病改善外還分別觀察到高黏血癥改善和尿液中微量白蛋白排泄減少。應(yīng)用紅花注射液治療糖尿病周圍神經(jīng)病變，并觀察紅花注射液對(duì)患者肌電圖、空腹血糖、糖化血紅蛋白、6-酮前列環(huán)素Fla、內(nèi)皮素、血栓素等指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示對(duì)糖尿病周圍神經(jīng)病變的顯效率明顯高于用山莨菪堿治療的對(duì)照組，治療組在治療后周圍神經(jīng)傳導(dǎo)速度明顯改善，空腹血糖、糖化血紅蛋白有所下降、內(nèi)皮素和血栓素B２顯著下降。并推測(cè)其機(jī)制與改善患者血管內(nèi)皮細(xì)胞功能有關(guān)。２儀器與藥品2.1實(shí)驗(yàn)儀器CP224S型分析天平北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司高速萬(wàn)能粉碎機(jī)天津泰斯特儀器有限公司T６新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)北京普析通用儀器有限責(zé)任公司電熱恒溫水浴鍋上海躍進(jìn)醫(yī)藥器械廠電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱上海申賢恒溫設(shè)備廠循環(huán)水真空泵鄭州杜甫儀器廠２.2實(shí)驗(yàn)試劑與藥品蘆丁對(duì)照品(中國(guó)生物制品鑒定所）新疆紅花（1號(hào)）購(gòu)自寶豐藥店;新疆紅花(2號(hào))購(gòu)自海暉醫(yī)藥連鎖;新疆紅花(3號(hào)）購(gòu)自紅旗大藥房。無(wú)水乙醇、石油醚、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁均為分析純。水為蒸餾水。3方法與結(jié)果3.1性狀3.１.1正品紅花性狀特征3.１．1鑒定評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量不帶子房的管狀花,黃紅色或紅色,花冠筒細(xì)長(zhǎng),先端５列花藥聚合成筒狀,黃白色；柱頭長(zhǎng)圓柱形，露出于花藥筒外，頂端微分叉。質(zhì)輕，柔軟。氣微香，味微苦。將花浸入水中,水染成金黃色。3.1.2偽品紅花性狀特征表面橙黃色、深紅色或鮮紅色,黃色不顯明,大部分表面沾附有細(xì)小紅色顆粒狀物質(zhì)，多數(shù)粘結(jié)成團(tuán)，疏松性差手握無(wú)彈性,質(zhì)較重,濕潤(rùn)感明顯，有異樣氣味,用開(kāi)水一沖即渾濁,放置后有白色沉淀析出。3．1.3鑒別方法氣味法:紅花微有清香氣味，無(wú)其它特殊怪味。摻假紅花清香氣味被掩蓋或減弱,伴隨有油臭腐敗味。如摻油量大,密封時(shí)間長(zhǎng),則腐味更濃。手摸：手握紅花較柔軟,手不染色，不粘附泥沙雜質(zhì)。摻假紅花手握較油潤(rùn),手染有紅色斑點(diǎn)，并粘有較多的泥沙顆粒（重金屬粉)。取摻假紅花少許用放大鏡觀察，其間夾附很多灰白色或黑色顆粒(重金屬粉）。水試法:取紅花及其偽品粉末各0.5g,分別加水１5ml,浸漬數(shù)分鐘,濾過(guò)。濾液置比色管中,日光下檢視,紅花濾液顯黃色，偽品紅花濾液顯橘紅色。3.2顯微鑒別評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量3.２.1正品紅花顯微特征 分泌細(xì)胞：呈長(zhǎng)管道狀,胞腔內(nèi)充滿黃棕色至紅棕色分泌物。花冠裂片表皮細(xì)胞:表面觀呈長(zhǎng)方形或長(zhǎng)條形，頂端表皮細(xì)胞呈短絨毛狀?；ㄖ槠?表皮細(xì)胞分化成單細(xì)胞毛，呈圓錐形，先端尖。花粉粒:類球形或長(zhǎng)球形,具３個(gè)萌發(fā)孔，外壁有刺齒及疣狀雕紋。3．2.２偽品紅花顯微特征 紅花有其獨(dú)特的花粉粒及表皮外壁突出呈乳頭狀或絨毛狀，這些都是偽品沒(méi)有的。３．2.３鑒別方法 表皮細(xì)胞表面觀長(zhǎng)條形,壁薄，微彎曲,有的外壁突出成乳頭狀或絨毛狀,表面隱約可見(jiàn)纖細(xì)紋理。柱頭頂端表皮細(xì)胞絨毛狀，表面有稀疏紋理。草酸鈣結(jié)晶聚集于壁薄細(xì)胞中，呈顆粒狀圓柱狀梭形或類方形,直徑2—１4

?；ǚ哿Ｉ僖?jiàn)，成圓球形。3．3紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定市售紅花中總黃酮的含量3.3.1對(duì)照品和供試品溶液制備3.３．1.1對(duì)照品溶液制備精密稱取蘆丁對(duì)照品5．0０mg,置50ml容量瓶中，用60％乙醇溶液溶解定容，配成濃度為0．１ｍg／m~的對(duì)照品溶液。3.3.１.2供試品溶液制備從3個(gè)紅花樣品中各取１g，粉碎(40目),得紅花粗粉。在2５0ｍl圓底燒瓶中加入經(jīng)稱量的1.0０ｇ的紅花粉末,并標(biāo)號(hào)1，2,3。加入60%的乙醇溶液加至瓶頸處,超聲分離三十分鐘，冷卻至室溫,用60%的乙醇定容至1０0ml容量瓶備用。3．3.2線性關(guān)系考察?精密移取蘆丁對(duì)照品溶液1.0,2．０,3.０，4.0,5.０mＬ分別置于10mL比色管中，加60%乙醇稀釋至5.0ｍｌ。以６0%乙醇溶液5ml為空白,分別加入5％的亞硝酸鈉0.３ml,搖勻，靜置６min，加入１0%硝酸鋁溶液0.3ｍl,搖勻,靜置6min后再加入4%的氫氧化鈉溶液4ml，再加60％的乙醇0.４ml，搖勻,靜置12min后,在51０nｍ下測(cè)定。以吸光度值A(chǔ)為縱坐標(biāo),蘆丁濃度Ｃ（ｍｇ/mＬ）為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,得回歸方程y=１２.16x-０．0１38,Ｒ2＝０．９９77。結(jié)果表明蘆丁在0.0１~0.０５mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)１2345吸光度A0.１10．23５0.3350．４790.5９６濃度Ｃ（mg/ｍl）0.０１0.０2０.030.040.0５3．3.3方法學(xué)考察3．３.3.1精密度試驗(yàn) 取蘆丁對(duì)照品實(shí)驗(yàn),加６0%乙醇稀釋至5．0mｌ,加入5%ＮａNO２0.3ｍl，搖勻,靜置6mｉn,再加1０%AlＮＯ30．３ml，搖勻，靜置6miｎ,再加4%NaOH4.0ｍl，再加０.４ml60％乙醇，搖勻，靜置12ｍｉｎ。于5１0nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值,重復(fù)測(cè)定6次,計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果為RSＤ為0．2．0０％,本實(shí)驗(yàn)精密度良好。精密度試驗(yàn)數(shù)據(jù)（選取紅旗紅花樣品，２ｍｌ）1２3４56RSD（%）吸光度A０．2７40．2730.2730.2740.274０.2７３０.200%3．3．3．2穩(wěn)定性試驗(yàn) 以海暉藥店紅花所制溶液做穩(wěn)定性測(cè)試，用3．3．2方法進(jìn)行測(cè)定，在６０ｍin內(nèi),每隔１０ｍin測(cè)定一次其吸光度。由其數(shù)據(jù)可以看出在5１０nm波長(zhǎng)測(cè)定黃酮總含量時(shí),吸光度穩(wěn)定,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性良好。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(以人民暉輝為標(biāo)準(zhǔn))穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)(選取海暉紅花樣品，２ml）,每隔１０min測(cè)一次01０20３0405０6０RSD(％）吸光度A0.4３7０.４１３0．40７0.4６00.4０９0.404０.4003.06%３.3.3.3重復(fù)性試驗(yàn)以人民同泰藥店紅花所制溶液做重復(fù)性測(cè)試,用3.3.2方法進(jìn)行測(cè)定,在其最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值，由其數(shù)據(jù)可以看出在51０nm波長(zhǎng)測(cè)定黃酮總含量時(shí)，吸光度穩(wěn)定,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性良好。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(以人民同泰為標(biāo)準(zhǔn)）序號(hào)12345６RSD(%)A0.2６１０.248０．2390．２3６0．2500．２3７3.96%3．３．３.4回收率試驗(yàn)?以紅花總黃酮提取物制備的樣品溶液為供樣液，精密量取已知總黃酮含量的樣品溶液110ｍl、115ｍl、２mｌ、２15ml、３ml,分置10mｌ比色管中,加入蘆丁對(duì)照品溶液１１0ml?；靹蚝?按3.3.２方法測(cè)定．序號(hào)123456RSＤ(%）稱取樣品量(g)0.1０．120．１1０．120．1０.１１.１1%供試品中含有量（mg）2．6３.１２2.8６3．１22.62.6對(duì)照品加入量（ｍg）2．53２.8３.１２．62.5測(cè)定總黃酮的量（mｇ)5.0786.0０695.6194６.14８45.1３４55.0７３回收率(％）99.１２%96．23%9８.５5%９7.69％97.48％98.９2％3.3.4市售紅花含量測(cè)定取已制備好的３份樣品溶液測(cè)定，以60%乙醇為空白溶液，在5１0nｍ處測(cè)定。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次。總黃酮含量以蘆丁計(jì)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總黃酮含量。結(jié)果為人民同泰新疆紅花總黃酮含量為１.48％,海暉醫(yī)藥連鎖新疆紅花總黃酮含量為1.85%,紅旗大藥房新疆紅花總黃酮含量為1．2８%。三家藥店中海暉的紅花總黃酮含量較高。表2；紅花總黃酮含量測(cè)定結(jié)果樣品吸光度Ａ1吸光度A２吸光度A3平均值Ａ總黃酮含量(%)海暉0.4370.438０.44００.4381.７６%人民同泰0．261０.2480.25００.2531．0８%紅旗0.２73０．2950.2900.2861.2２%４討論紅花是臨床中常用的一種中藥材，由于其價(jià)格較高,市場(chǎng)上不法分子不顧藥材的質(zhì)量,不擇手段，造假作假。黃酮類化合物是紅花中最主要的化學(xué)成分之一。本文建立采用分光光度法測(cè)定紅花中總黃酮的含量，精密度、穩(wěn)定性良好，結(jié)果可信，為新疆紅花中總黃酮的含量測(cè)定提供了一種簡(jiǎn)便可行的方法,為新疆紅花的質(zhì)量控制提供了評(píng)價(jià)手段。三家藥店中海暉的紅花總黃酮含量較高。海暉醫(yī)藥連鎖新疆紅花總黃酮含量為1.７6%，紅旗大藥房新疆紅花總黃酮含量為1．２2％，人民同泰新疆紅花總黃酮含量為1.0８