幾種常見酵母菌、霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察

微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告幾種常見酵母菌、霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察姓名： 學(xué)號(hào)： 系別： 班級(jí)： 日期： 同組成員：

一、摘要通過對(duì)酵母菌、霉菌形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察，了解酵母菌、霉菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的形態(tài)結(jié)構(gòu)知識(shí)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為：1、酵母菌一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬性。菌落形態(tài)與細(xì)菌相似，但較大較

厚，呈乳白色或紅色，表面濕潤、粘稠，易被挑起。2、四種霉菌的形態(tài)特征。菌種形態(tài)特征根霉菌絲無隔，有匍匐菌絲和假根，假根著生處有直立的向上孢子囊梗，其頂端膨大成孢子囊，孢子囊底部有半球形囊軸。曲霉菌絲有隔，氣絲分化成分生孢子梗，孢子梗下方有足，細(xì)胞頂端膨大形成球形頂囊，頂囊表面輻射出狀生出一層或兩層小梗，小梗上有一串串分生孢子。青霉菌絲有隔，分生孢子梗亦有隔，頂端不膨大，無頂囊，其分生孢子梗多次分枝，產(chǎn)生對(duì)稱或不對(duì)稱的小梗，小頂端有孢子，形如掃帚，稱為帚狀體毛霉菌絲無隔、多核、分枝狀，無假根或匍匐菌絲，菌絲體上直接生出單生、總狀分枝或假軸狀分枝的孢囊梗，頂端有球形孢子囊。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)酵母菌、霉菌形態(tài)結(jié)構(gòu)。2、學(xué)習(xí)酵母菌、霉菌觀察方法。3、了解酵母菌、霉菌在實(shí)際中的意義。三、實(shí)驗(yàn)原理酵母菌：酵母菌多呈圓形、卵圓形，有的呈分支的菌絲狀。無性繁殖以出芽生殖為主，少數(shù)以分裂方式繁殖；有性生殖是通過不同遺傳性的細(xì)胞接合產(chǎn)生子囊孢子的方式進(jìn)行。子囊孢子可用孔雀綠進(jìn)行染色觀察。觀察細(xì)胞形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)可采用染色的方法。美藍(lán)是無毒性的染料，新陳代謝旺盛的細(xì)胞具有較強(qiáng)的還原能力，使美藍(lán)從藍(lán)色的氧化型變成無色的還原型；而死亡細(xì)胞無此還原力，故被染成藍(lán)色。霉菌：霉菌可產(chǎn)生復(fù)合分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲、氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體(尤其是繁殖菌絲)及孢子的形態(tài)特征是識(shí)別不同種類霉菌的重要依據(jù)。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多，常是細(xì)菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍/高倍顯微鏡即可觀察。四、實(shí)驗(yàn)材料與儀器菌種：產(chǎn)黃青霉、黑曲霉、黑根霉、總狀毛霉、釀酒酵母、熱帶假絲酵母斜面菌種。2、培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基、0.05%美藍(lán)染液、5%孔雀綠染液、半固體PDA培養(yǎng)基、乳酸苯酚固定液等。3、儀器及用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、接種環(huán)、酒精燈、鑷子、滴管、吸水紙等。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟酵母菌形態(tài)觀察1、酵母菌活體觀察及死亡率的鑒定（1）取釀酒酵母PDA斜面，以無菌水洗下菌苔制成菌懸液。（2）取潔凈載玻片一張，滴加0.05%美藍(lán)染液1滴于載玻片中央，用接種環(huán)取酵母菌懸液與染色液混勻，染色2-3min，加蓋玻片，在高倍鏡下觀察酵母菌個(gè)體形態(tài)。（3）在一個(gè)視野里計(jì)數(shù)死亡細(xì)胞與活細(xì)胞，共計(jì)數(shù)5-6個(gè)視野。酵母菌死亡率一般用百分?jǐn)?shù)來表示，以下式來計(jì)算：死亡率=死亡細(xì)胞總數(shù)×100%死活細(xì)胞總數(shù)2、酵母菌子囊孢子的觀察從產(chǎn)孢子培養(yǎng)基上挑取少量菌苔于載玻片的水滴中，經(jīng)過涂片、干燥和熱固定后，加數(shù)滴孔雀綠染液，染色1min，水洗去孔雀綠染液；加95%乙醇脫色30s，水洗去乙醇溶液；最后用沙黃染色液復(fù)染30s，水洗去沙黃染色液，用吸水紙吸去載玻片上的水分；待制片干燥后鏡檢。子囊孢子為綠色，子囊為粉紅色。假菌絲的培養(yǎng)與觀察在28℃培養(yǎng)2-3d的假絲酵母PDA培養(yǎng)基中，挑取少量菌苔，放在載玻片上滴一滴清水，制成懸濁液；在空氣中自然干燥或置于火焰上方，使酵母菌固定；在高倍顯微鏡下觀察，牙殖酵母可形成藕節(jié)狀假菌絲，裂殖酵母形成竹節(jié)狀假菌絲。霉菌形態(tài)觀察1、黑根霉主要觀察它的孢囊孢子和假根，取少量黑根霉制成懸濁液，在高倍顯微鏡下觀察；2、黑曲霉的觀察方法同黑根霉，主要觀察黑曲霉的分生孢子和足細(xì)胞；3、青霉的觀察做法同上，觀察的是青霉的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)—分生孢子梗；4、取少量總狀毛霉菌苔，在載玻片上加一滴乳酸苯酚油，蓋上蓋玻片，主要觀察的是總狀毛霉的孢囊孢子及假根。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1、酵母菌死亡率的計(jì)算。（如圖1）本實(shí)驗(yàn)記錄了5組數(shù)據(jù)，如下表所示組別死細(xì)胞總數(shù)死活細(xì)胞總數(shù)死亡率1224548.9%2284858.3%3326549.2%4254951.0%5294663.0%用美蘭對(duì)新培養(yǎng)的酵母菌進(jìn)行活體染色后，大多數(shù)細(xì)胞是被染成藍(lán)色的死細(xì)胞，少部分細(xì)胞是不被著色的代謝旺盛的活細(xì)胞，還有少數(shù)為被染成淡藍(lán)色的衰老細(xì)胞。這五組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的死亡率有三組數(shù)據(jù)超過50%，說明大部分細(xì)胞是死細(xì)胞，少數(shù)細(xì)胞是活細(xì)胞或衰老細(xì)胞。造成這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可能原因是染色時(shí)間過長，導(dǎo)致細(xì)胞大部分死亡，從而被染成藍(lán)色細(xì)胞。酵母菌一般呈卵圓形、圓形、圓柱形或檸檬性。菌落形態(tài)與細(xì)菌相似，但較大較

厚，呈乳白色或紅色，表面濕潤、粘稠，易被挑起。通過對(duì)釀酒酵母的活體觀察可以看到酵母細(xì)胞的球形結(jié)構(gòu)以及其出芽生殖產(chǎn)生的孢子，還有其形成的子囊孢子，在蓋玻片的擠壓下，只能看到三個(gè)孢子，實(shí)則為四個(gè)子囊孢子。酵母菌子囊孢子為綠色，子囊為粉紅色。（見圖2）四種霉菌的形態(tài)特征。菌種形態(tài)特征根霉菌絲無隔，有匍匐菌絲和假根，假根著生處有直立的向上孢子囊梗，其頂端膨大成孢子囊，孢子囊底部有半球形囊軸。曲霉菌絲有隔，氣絲分化成分生孢子梗，孢子梗下方有足，細(xì)胞頂端膨大形成球形頂囊，頂囊表面輻射出狀生出一層或兩層小梗，小梗上有一串串分生孢子。青霉菌絲有隔，分生孢子梗亦有隔，頂端不膨大，無頂囊，其分生孢子梗多次分枝，產(chǎn)生對(duì)稱或不對(duì)稱的小梗，小頂端有孢子，形如掃帚，稱為帚狀體毛霉菌絲無隔、多核、分枝狀，無假根或匍匐菌絲，菌絲體上直接生出單生、總狀分枝或假軸狀分枝的孢囊梗，頂端有球形孢子囊。圖1酵母菌活體染色圖圖2酵母菌子囊孢子圖3青霉圖4根霉圖5曲霉圖