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冬凌草甲素和冬凌草多糖的制備及其抗膀胱腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究的開題報(bào)告一、研究背景及意義:膀胱腫瘤是泌尿系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤之一,且近年來發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。傳統(tǒng)治療手段如手術(shù)、放療、化療等存在著嚴(yán)重的副作用和局限性,因此尋找新的有效治療方法具有重要意義。天然藥物因其安全、低毒、多效、多組分的特點(diǎn)成為當(dāng)前藥物研究的熱點(diǎn)。冬凌草是一種具有廣譜的藥理活性成分的中草藥,其成分有多種多糖及霜降集素等。有報(bào)道稱冬凌草對(duì)膀胱腫瘤具有一定的抗腫瘤作用,但冬凌草中甲素成分的抗腫瘤作用及其多糖成分的抗腫瘤作用尚未得到深入研究。二、研究目的:1.制備冬凌草甲素和冬凌草多糖2.探討冬凌草甲素和冬凌草多糖對(duì)膀胱腫瘤的抗腫瘤作用三、研究內(nèi)容:1.冬凌草甲素的制備:采用柱層析技術(shù),從冬凌草中純化甲素成分,并進(jìn)行HPLC鑒定純化程度。2.冬凌草多糖的制備:采用酸性水解法,從干燥的冬凌草中提取多糖并利用乙醇沉淀得到純化的多糖。3.建立膀胱腫瘤模型:通過給大鼠注射膀胱癌細(xì)胞,建立膀胱腫瘤模型。4.藥理實(shí)驗(yàn):將建立好的膀胱腫瘤模型隨機(jī)分為對(duì)照組、甲素組、多糖組、甲素+多糖組,分別灌胃給予不同給藥。通過檢測腫瘤大小、組織病理學(xué)變化等指標(biāo),探討冬凌草甲素和冬凌草多糖對(duì)膀胱腫瘤的抗腫瘤作用及其作用機(jī)制。四、研究預(yù)期成果:1.成功制備冬凌草甲素和冬凌草多糖。2.發(fā)現(xiàn)并探究冬凌草甲素和冬凌草多糖對(duì)膀胱腫瘤的抗腫瘤作用。3.為開發(fā)具有靶點(diǎn)選擇性和生物利用度較高的天然藥物提供一種新思路和新方法。五、研究方法和技術(shù)路線:1.檢測冬凌草中甲素成分:采用HPLC技術(shù),并且以C18反相高效液相色譜柱為固定相,創(chuàng)立甲素的高效液相色譜條件。2.提取冬凌草多糖:實(shí)驗(yàn)采用酸性水解法,完善相應(yīng)的組織病理學(xué)的技術(shù)路線。3.建立膀胱癌細(xì)胞模型:采用膀胱腫瘤裸鼠模型,選用大鼠的膀胱癌細(xì)胞。4.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn):將建立好的膀胱腫瘤模型隨機(jī)分為對(duì)照組、甲素組、多糖組、甲素+多糖組,分別灌胃給予不同給藥,記錄其體質(zhì)量及生物標(biāo)志物等變化。六、研究周期和預(yù)算:1.研究周期:2年2.預(yù)算:實(shí)驗(yàn)設(shè)備購置費(fèi):50,000元實(shí)驗(yàn)材料及藥品費(fèi):150,000元學(xué)術(shù)交流與論文發(fā)表費(fèi):50,000元總預(yù)算:250,000元七、論文框架:1.緒論2.相關(guān)領(lǐng)域現(xiàn)狀及研究進(jìn)展3.材料與方法4.結(jié)果5.討論與結(jié)論6.參考文獻(xiàn)八、參考文獻(xiàn):1.LiuJ,LinC*,ZhouJ.SynthesisandantitumoractivityofFritillariacirrhosa-derived3-formylchromonesinhumanbladdercancercells.EuropeanJournalofMedicinalChemistry,2020,208:112808.2.XuZ,WeiL,GaoG,etal.AntitumoreffectofpolysaccharideextractedfromCistanchetubulosaonbladdercancerinvitroandinvivo.InternationalJournalofBiologicalMacromolecules,2019,140:358-365.3.QinD,QuX,JiY,etal.Anti-bladdercanceractivityofarctigenin:alterationofcellcycleandRac1signaling.JournalofPharmacologicalSciences,2018,138(2):83-90.4.ZhangY,GaoG,FanJ,etal.Apolysaccharidefromcornsilkinhibitsgrowthandmetastasisofhumanbladdercancercellsthroughinductionofcellapoptosis,reductionofcellmigration,i
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