擴(kuò)增活化的自體淋巴細(xì)胞技術(shù)

EAAL擴(kuò)增活化的自體淋巴細(xì)胞治療(zhìliáo)腫瘤技術(shù)簡介

IntroductionofEAALTherapy第一頁，共七十三頁。整理課件腫瘤(zhǒngliú)免疫治療的機(jī)制MechanismsofCancerImmunotherapy通過調(diào)動(dòng)機(jī)體自身的免疫系統(tǒng)，達(dá)到控制腫瘤生長，殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。前提：腫瘤細(xì)胞有別于正常細(xì)胞腫瘤抗原腫瘤特異性T細(xì)胞免疫應(yīng)答腫瘤特異性抗體(kàngtǐ)免疫應(yīng)答天然免疫對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用第二頁，共七十三頁。整理課件如何達(dá)到有效(yǒuxiào)的免疫治療效果有足夠可以識別腫瘤抗原的殺傷性T細(xì)胞機(jī)體的免疫環(huán)境有利于上述細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤功能Th1/Th2Treg這些(zhèxiē)T細(xì)胞可以到達(dá)腫瘤組織局部T細(xì)胞歸巢在腫瘤局部，這些T細(xì)胞可以發(fā)揮有效的殺傷功能腫瘤基質(zhì)及腫瘤組織微環(huán)境第三頁，共七十三頁。整理課件腫瘤(zhǒngliú)疫苗過繼(guòjì)細(xì)胞免疫治療腫瘤(zhǒngliú)的免疫治療方法

ApprochesofCancerImmunotherapy第四頁，共七十三頁。整理課件細(xì)胞(xìbāo)免疫治療

CellularImmunotherapy包括腫瘤在內(nèi)的多種慢性病的最重要的生物治療方法(fāngfǎ)之一腫瘤的細(xì)胞免疫治療：非特異性※LAK細(xì)胞※CIK細(xì)胞※EAAL細(xì)胞特異性※Provenge,樹突狀細(xì)胞

※腫瘤特異性T細(xì)胞

-其它慢性病的細(xì)胞免疫治療：※慢性病毒感染性疾病乙肝、丙肝艾滋病※慢性寄生蟲感染(gǎnrǎn)※糖尿病※多發(fā)性硬化癥※系統(tǒng)性紅斑狼瘡第五頁，共七十三頁。整理課件擴(kuò)增活化(huóhuà)的自體淋巴細(xì)胞（EAAL）的定義自體免疫細(xì)胞治療技術(shù)CD3+T淋巴細(xì)胞為主（95.91%±0.24%），含少量NK細(xì)胞體外擴(kuò)增活化腫瘤殺傷功能改進(jìn)的LAK和CIK治療：細(xì)胞培養(yǎng)效率和腫瘤殺傷能力顯著增強(qiáng)EAAL是ExpandedActivatedAutologousLymphocytes（擴(kuò)增活化的自體淋巴細(xì)胞）的簡稱。其定義是通過采取機(jī)體自身20-100ml靜脈血，分離獲得0.8-3x107外周血單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)過體外無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，獲得以CD3細(xì)胞為主的，包含(bāohán)CD8+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD3+CD56+NKT細(xì)胞、NK細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)量在3x109以上的活化的混合淋巴細(xì)胞，這些細(xì)胞在體外具有明確腫瘤殺傷功能。

第六頁，共七十三頁。整理課件EAAL技術(shù)(jìshù)特點(diǎn)使用無血清淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，保證沒有潛在(qiánzài)的病源微生物感染不需使用(shǐyòng)單采機(jī)，對患者免疫系統(tǒng)沒有破壞作用細(xì)胞擴(kuò)增的高效性和高活性:擴(kuò)增效率約為2001000倍獨(dú)特的細(xì)胞培養(yǎng)工藝，少量外周血即可滿足多次細(xì)胞回輸?shù)囊罂膳c化療聯(lián)合，完全滿足多個(gè)化療療程對細(xì)胞治療次數(shù)和細(xì)胞治療數(shù)目的要求，從而產(chǎn)生較好的協(xié)同治療腫瘤效果。可進(jìn)行多次、高頻治療，達(dá)到最好的治療效果第七頁，共七十三頁。整理課件EAAL技術(shù)的臨床-實(shí)驗(yàn)室操作(cāozuò)流程外周血20-100ml擴(kuò)增及活化(huóhuà)回輸100ml/次，1-8次培養(yǎng)(péiyǎng)及擴(kuò)增14-35天收集誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞第八頁，共七十三頁。整理課件EAAL的作用機(jī)制(jīzhì)研究第九頁，共七十三頁。整理課件自體腫瘤(zhǒngliú)細(xì)胞的體外殺傷效應(yīng)（IFN-γ）第十頁，共七十三頁。整理課件培養(yǎng)后的淋巴細(xì)胞與順鉑以不同序貫方式聯(lián)合(liánhé)對PLA-801D細(xì)胞的抑制率Groupinhibitedrates(%)QDDPEAALDDP+EAAL淋巴細(xì)胞作用前10h順鉑淋巴細(xì)胞作用前8h順鉑淋巴細(xì)胞作用前4h順鉑淋巴細(xì)胞作用同時(shí)順鉑淋巴細(xì)胞作用后4h順鉑淋巴細(xì)胞作用后8h順鉑淋巴細(xì)胞作用后10h順鉑46±1.741.7±3.035.8±1.327.1±2.418.5±1.316.7±2.214.0±0.916.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.488.1±0.64*88.9±0.16*96.7±1.99*55.8±0.33*73.6±0.67*66.2±0.12*53.2±0.14*1.6021.7322.0801.4242.2972.1691.885(注：聯(lián)合作用(zuòyòng)組、單順鉑組和單淋巴細(xì)胞作用(zuòyòng)組抑制率進(jìn)行單因素方差分析,P<0.01*)

EAL聯(lián)合化療(huàliáo)的體外殺傷效果第十一頁，共七十三頁。整理課件EAL細(xì)胞的腫瘤(zhǒngliú)抗原特異性分析Donor

A2-01A2-02A2-03CancerAntigenNY-ESO-1BC(%)0.170.860.32AC(%)1.122.572.3Multiple6.592.997.19MAGE-1BC(%)0.390.070.1AC(%)0.251.150.51Multiple0.6416.435.10MAGE-3BC(%)0.450.060.07AC(%)0.280.360.36Multiple0.626.005.14MAGE-10BC(%)0.520.150.23AC(%)0.250.220.48Multiple0.481.472.09P53BC(%)0.631.130.78AC(%)5.2712.248.7Multiple8.3710.8311.15HIVBC(%)0.590.20.22AC(%)0.240.250.31Multiple0.411.251.41FLUBC(%)1.060.60.66AC(%)4.4411.7610.01Multiple4.1919.6015.17第十二頁，共七十三頁。整理課件EAAL在裸鼠體內(nèi)(tǐnèi)

對HepG2形成腫瘤的抑制作用裸鼠注射(zhùshè)EAAL細(xì)胞的劑量分組組別注射渠道注射劑量(細(xì)胞數(shù)/只)注射液量(ml)每組裸鼠數(shù)量(個(gè)體號)每組腫瘤平均體積（mm3）每組腫瘤平均重量（g）G1陰性對照組微靜脈00.310(1M01–1M10)1444.690.96G2低劑量組微靜脈1.7×1050.310(2M11–2M20)1236.450.82G3中劑量組微靜脈5×1050.310(3M21–

3M30)979.910.73G4高劑量組微靜脈15×1050.310(4M31–

4M40)941.390.72G5陽性對照組腹腔2mg/kg10ml/kg10(4M41–

4M50)847.920.64p<0.05第十三頁，共七十三頁。整理課件G1G2G3G4G5第十四頁，共七十三頁。整理課件EAAL對患者體內(nèi)免疫環(huán)境的改變(gǎibiàn)作用CD8+殺傷性T淋巴細(xì)胞比例上升NK細(xì)胞比例上升CD4/CD8T淋巴細(xì)胞比值下降分泌的IFN-γ細(xì)胞比例上升IFN-γ的分泌量上升經(jīng)EAAL治療(zhìliáo)后，患者體內(nèi)殺傷性淋巴細(xì)胞數(shù)量和比例顯著增加第十五頁，共七十三頁。整理課件EAAL為CD8+T細(xì)胞(xìbāo)為主細(xì)胞表面分子培養(yǎng)前的百分比（均值）培養(yǎng)后的百分比（均值）CD365.083.7CD433.210.6CD822.863.0CD4/CD81.90.2CD3+CD56+5.411.7CD3-CD16+12.611.8CD4+CD25+3.31.7第十六頁，共七十三頁。整理課件IL-2IFN-gIL-4IL-5TNF-ab-actin015(mg/ml)PHAABFigure5.Cytokinegeneexpressionbyexvivo-expandedTcells.ExpandedCyTcellswerere-stimulatedwithPHA(1and5mg/ml)for4hrandtotalRNAwasextractedfromthecellsandthegeneexpressionlevelsofIL-2,IFN-g,IL-4,IL-5,andTNF-awereanalyzedbyRT-PCR(A).Bandareaswereanalyzedusinganimageanalysissystems(Multi-Analyst,Bio-Rad,CA),anddatawerepresentedasratiosvs.b-actin,whichservedasaninternalcontrol(B).Representativeimagefromsample#4wasshown.EAAL細(xì)胞(xìbāo)分泌Th1類細(xì)胞因子第十七頁，共七十三頁。整理課件第十八頁，共七十三頁。整理課件PREPOST第十九頁，共七十三頁。整理課件第二十頁，共七十三頁。整理課件第二十一頁，共七十三頁。整理課件ThesubsetsofIFN-gamma+lymphocytes第二十二頁，共七十三頁。整理課件第二十三頁，共七十三頁。整理課件ThechangeoftheratioofIFN-gamma+cells第二十四頁，共七十三頁。整理課件EAAL的療效(liáoxiào)單獨(dú)(dāndú)使用手術(shù)后預(yù)防復(fù)發(fā)穩(wěn)定腫瘤改善生活質(zhì)量與化療/靶向治療聯(lián)合協(xié)同作用改善化療和靶向治療副作用延長患者的總生存期第二十五頁，共七十三頁。整理課件術(shù)後復(fù)

發(fā)

期間免疫群（76例）（＊）対照群（74例）ｐ値（＊＊）5年以內(nèi)復(fù)發(fā)45(59%)57(77%)0.012年以內(nèi)復(fù)發(fā)25(33%)40(54%)0.005（LANCET2000;356;802-07）EAAL的療效(liáoxiào)：降低肝癌手術(shù)后的復(fù)發(fā)率：隨機(jī)對照臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果第二十六頁，共七十三頁。整理課件一例晚期肝癌患者(huànzhě)實(shí)現(xiàn)6年帶瘤生存

Hepatology(28),5,1436-7,1998.患者：62歲，男性，丙肝，肝癌ChildB級，約7厘米大小。已出現(xiàn)右門靜脈腫瘤栓塞和右腎轉(zhuǎn)移（T4N0M1,ⅣB期）該腫瘤已無法切除。該患者因此接受了質(zhì)子照射治療，治療后腫瘤出現(xiàn)壞死并且體積縮小至原來的50%。EAAL治療：放射治療之后患者每1－2月應(yīng)用一次過繼性免疫治療平均每次回輸細(xì)胞1.4±0.5×10（10）絕大多數(shù)為T細(xì)胞標(biāo)記陽性（95%±2%CD3+，90％±2%CD3+/HLA-DR+，61%±9%CD8+，39%±8%CD4+）且對Daudi細(xì)胞具有細(xì)胞毒活性的細(xì)胞。細(xì)胞回輸在6年內(nèi)共為53次完成（平均5-6周一次回輸）累計(jì)回輸細(xì)胞總數(shù)為7.3×10（11）結(jié)果：獲得了6年無復(fù)發(fā)生存，整個(gè)(zhěnggè)過程沒有出現(xiàn)治療相關(guān)的不良反應(yīng)。在長期觀察中，該患者健康狀況良好，未出現(xiàn)肝癌的復(fù)發(fā)，且肝功能好轉(zhuǎn)。第二十七頁，共七十三頁。整理課件左眼瞼細(xì)胞(xìbāo)鱗癌和結(jié)腸腺癌雙原發(fā)

（JpnJClinOncol2000:30(6)267-271）患者：同時(shí)患有左眼瞼細(xì)胞鱗癌和結(jié)腸腺癌，兩者都已出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?；颊呓邮芰俗笱圬喑g(shù)及左頸部改良根治性淋巴結(jié)清掃術(shù)和隨后的跨結(jié)腸切除術(shù)和局部淋巴結(jié)清掃。治療：EAAL過繼性免疫治療作為單一術(shù)后輔助治療，而未接受可引起免疫抑制的化療。共進(jìn)行了150次回輸（平均2周一次回輸）平均每次回輸細(xì)胞數(shù)為1.38×10（10）。結(jié)果(jiēguǒ)：至文章發(fā)表為止，術(shù)后6年內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)和其它轉(zhuǎn)移。第二十八頁，共七十三頁。整理課件EAAL治療(zhìliáo)神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的效果Case

AgeSex

InitialtreatmentOpe.

Rad.

Chemo.TTP＊Follow＊＊

1.37FTotal

60Gy

ACNU

10ｙ10ｍAlive

2.17FTotal

60Gy

ACNU

10ｙ2ｍAlive

3.49MTotal

60Gy

ACNU

24m

3ｙ9ｍDead

4.56MTotal

60Gy

ACNU

8m

4ｙ0ｍDead

5.40MTotal

60Gy

ACNU

2ｙ6ｍAlive＊TTP再発までの期間。＊＊2003年12月現(xiàn)在。＊5例中5例が3年以上の生存(shēngcún)。2例が10年以上生存。

2006年2月現(xiàn)在、5例中3例が5年以上の生存であることから論文投稿作業(yè)中。第二十九頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)1.非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移患者男性，54歲，非小細(xì)胞肺癌，并伴有脾、腦轉(zhuǎn)移，TNMIV期治療：EAAL為單一治療，六周內(nèi)共五次回輸總回輸細(xì)胞數(shù)為1.66×10(10)。結(jié)果：第五次輸注后10天行MRI檢查，與治療前對比：右額葉強(qiáng)化結(jié)節(jié)此次掃描未見異常強(qiáng)化，僅表現(xiàn)為斑片狀長T1長T2信號，范圍較前縮小，余腦實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)對稱，灰白質(zhì)界限清晰，未見異常強(qiáng)化灶，中線結(jié)構(gòu)居中，腦室(nǎoshì)系統(tǒng)未見異常，小腦及腦干未見異常，頭顱諸骨未見骨質(zhì)破壞灶。提示右額葉轉(zhuǎn)移瘤較EAAL細(xì)胞輸注前好轉(zhuǎn)。脾上極實(shí)性占位較前變化不大。胸部CT肺中葉下葉病灶變化不大。第三十頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)2.髓母細(xì)胞瘤術(shù)后和放化療后復(fù)發(fā)患者：女，21歲，小腦蚓部髓母細(xì)胞瘤手術(shù)后二年（2005年3月）脊髓復(fù)發(fā)，進(jìn)行單純化療3個(gè)療程，腫瘤消失。繼續(xù)口服化療藥，連續(xù)7個(gè)療程。2006-2-28核磁共振發(fā)現(xiàn)，腦脊髓廣泛種植復(fù)發(fā)治療：化療與EAAL療法結(jié)合治療方案。累積回輸共14次，回輸細(xì)胞總數(shù)達(dá)到6.77×10（10）。結(jié)果：2個(gè)療程后，2006-6-21核磁共振發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶大部分消失，明顯好于對單純化療的預(yù)期?；颊呋熀蟀准?xì)胞，血色素低。EAAL細(xì)胞治療縮短了恢復(fù)時(shí)間，起到良好的支持治療作用?；颊咴诨熎陂g(qījiān)無發(fā)熱和感染，一直堅(jiān)持爬山鍛煉，也沒有出現(xiàn)過第一次化療時(shí)的貧血導(dǎo)致的心慌、氣短等癥狀；患者精神狀態(tài)良好，無食欲下降、體重減輕、睡眠不良、精神萎靡等化療不良反應(yīng)。

第三十一頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)3.賁門癌肺轉(zhuǎn)移伴腹水患者：女，賁門癌肺轉(zhuǎn)移伴腹水，化療無效治療：兩周間隔，兩次輸注EAAL細(xì)胞，腹腔及靜脈各半，共計(jì)細(xì)胞總數(shù)為1.13×10（10），回輸前進(jìn)行腹腔低劑量化療（以前同樣劑量化療未顯示治療效果）。結(jié)果：腹部CT檢查，與回輸前2005-11-15腹部CT結(jié)果相比較：可見肝S4結(jié)節(jié)低密度結(jié)節(jié)較前縮?。?0mm×13mm→18×12mm）肝右葉低密度結(jié)節(jié)較前縮小(16mm×24mm→14mm×22mm)，臟壁層腹膜表面及腸管表面多發(fā)結(jié)節(jié)較前縮?。?0mmX22mm→17mmX15mm）雙側(cè)附件區(qū)及盆腔內(nèi)腹膜多發(fā)異常強(qiáng)化結(jié)節(jié)及腫塊(zhǒnɡkuài)亦較前縮小，現(xiàn)最大75mm×60mm，原為95mm×60mm。腹水較前減少。第三十二頁，共七十三頁。整理課件病例4：復(fù)發(fā)的乳腺癌

治療(zhìliáo)后(5次回輸),腫瘤標(biāo)志物水平下降Patient:0012Infusiondate:12/29/051/5/061/12/061/19/061/26/06第三十三頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)5：顱內(nèi)Ｂ淋巴細(xì)胞瘤患者：男，顱內(nèi)Ｂ淋巴細(xì)胞瘤手術(shù)，未能完全切除治療：10倍于常規(guī)劑量化療，第一次化療后副作用強(qiáng)，無法正常生活每次化療后在化療間歇回輸兩次EAAL結(jié)果：手術(shù)未能切除的腫瘤消失患者未再產(chǎn)生化療的副作用，實(shí)現(xiàn)正常生活；無脫發(fā)、惡心、嘔吐；體重增加；每天堅(jiān)持步行2小時(shí)(xiǎoshí)現(xiàn)每月一次EAAL細(xì)胞回輸，迄今未復(fù)發(fā)第三十四頁，共七十三頁。整理課件病例６．持續(xù)進(jìn)展(jìnzhǎn)復(fù)發(fā)賁門癌患者：男，賁門癌復(fù)發(fā)未轉(zhuǎn)移，化療效果(xiàoguǒ)差治療：細(xì)胞治療配合原來效果不好的化療劑量，共10次回輸效果：疼痛（需服止痛藥）基本消失打嗝基本消失CA199從210降至78CA242從158降至85超聲胃鏡檢查腫瘤明顯縮小第三十五頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)７．持續(xù)進(jìn)展胃癌患者：男，胃癌術(shù)后未發(fā)現(xiàn)腫瘤，但CA724進(jìn)行性增高，未進(jìn)行化療治療：每周回輸EAAL，共四次患者同時(shí)吃中藥，無其它治療效果：回輸兩周前：CA724為256回輸兩次后：降至39.8回輸三次后：降至22.5持續(xù)治療3個(gè)療程后腫瘤標(biāo)志物正常(zhèngcháng)，迄今未復(fù)發(fā)第三十六頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)8：晚期賁門癌男性，48歲。賁門癌，皮革胃，腹膜(fùmó)后、縱隔、左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；KPS100分2007.09：分子靶向治療+EAAL1次/2周+化療（TP）；2008.02：接近CR，2月后CR（包括皮革胃恢復(fù)正常）繼續(xù)：分子靶向治療+EAAL1次/2周；2008.07后改為：EAAL1次/2周2009.02：4次復(fù)查（包括胃鏡、PET/CT）無病生存。第三十七頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)9.結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移患者：男，結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移三年，手術(shù)、化療、介入、愛必妥目前治療：愛必妥之前使用約半年，可控制疾病進(jìn)展。但2009年4月發(fā)現(xiàn)多項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物升高。細(xì)胞治療每5天一次回輸，目前已進(jìn)行4次回輸結(jié)果：腫瘤標(biāo)志物明顯(míngxiǎn)下降CEA：由421降至289CA19.9：由486降至303CA72.4：由107降至86第三十八頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)10：胰腺癌廣泛肝轉(zhuǎn)移男性，38歲。胰腺癌廣泛肝轉(zhuǎn)移；KPS100分2008.08：TACE1次后，分子(fēnzǐ)靶向治療+EAAL1次/2周+健擇1次/周；2008.10：MR;肝轉(zhuǎn)移灶減少、縮小2009.02：SD；肝轉(zhuǎn)移進(jìn)一步減少、縮小，第三十九頁，共七十三頁。整理課件中國人民解放軍總醫(yī)院（301）患者(huànzhě)總結(jié)

（2007-2009）患者一般情況EAAL治療組晚期患者共51例，男性38例，女性13例，患者年齡31-78歲。其中晚期肺癌患者22例，晚期結(jié)直腸癌患者17例，晚期胰腺癌患者7例，原發(fā)性肝癌患者5例。治療方案在最佳支持治療或者化療的基礎(chǔ)(jīchǔ)上加用EAAL細(xì)胞治療，本試驗(yàn)用的EAAL細(xì)胞由患者自身提供20－100ml外周血（根據(jù)患者本人淋巴細(xì)胞絕對值決定所需要的血量），體外培養(yǎng)使淋巴細(xì)胞數(shù)目擴(kuò)增。每次回輸含3－10X109細(xì)胞/100－200ml含1％白蛋白的生理鹽水。細(xì)胞產(chǎn)品無細(xì)菌、霉菌、支原體、病毒等任何微生物和內(nèi)毒素的污染。抽外周血后約２周左右開始回輸，患者每周回輸一次，或者配合化療，化療后48小時(shí)回輸，至少回輸6次。

病例隨訪密切隨訪觀察接受EAAL治療患者，記錄其生存情況，隨訪終點(diǎn)為患者死亡。

第四十頁，共七十三頁。整理課件隨訪(suífǎnɡ)結(jié)果（至2009年10月4日）腫瘤類型病例數(shù)中位生存期（月）及說明1年生存率肺癌22到隨訪截止時(shí)間有6例死亡，中位生存期尚未到達(dá)。74.4%結(jié)直腸癌17到隨訪截止時(shí)間有4例死亡，中位生存期尚未到達(dá)。88.9%胰腺癌6到隨訪截止時(shí)間有2例死亡，中位生存期尚未到達(dá)。60.0%原發(fā)性肝癌5到隨訪截止時(shí)間有0例死亡，中位生存期尚未到達(dá)。80.0%第四十一頁，共七十三頁。整理課件EAAL技術(shù)研究(yánjiū)歷程引進(jìn)應(yīng)用提高細(xì)胞培養(yǎng)過程細(xì)胞因子組合(zǔhé)無血清培養(yǎng)基電子化管理系統(tǒng)推廣第四十二頁，共七十三頁。整理課件EAAL細(xì)胞治療(zhìliáo)的建議方案和流程第四十三頁，共七十三頁。整理課件不良反應(yīng)統(tǒng)計(jì)(tǒngjì)統(tǒng)計(jì)患者總數(shù):107人回輸總次數(shù):518次按癥狀種類統(tǒng)計(jì)癥狀低熱中熱高熱頭暈腹脹腹瀉嘔吐數(shù)量按人次13322211按回輸次數(shù)18622211比例按人次12.15%2.80%1.87%1.87%1.87%0.93%0.93%按回輸次數(shù)3.47%1.16%0.39%0.39%0.39%0.19%0.19%按癥狀種類統(tǒng)計(jì)癥狀感冒樣癥狀嗜睡寒戰(zhàn)靜脈炎頭疼胸悶合計(jì)數(shù)量按人次22221134按回輸次數(shù)33221245比例按人次1.87%1.87%1.87%1.87%0.93%0.93%31.78%按回輸次數(shù)0.58%0.58%0.39%0.39%0.19%0.39%8.69%第四十四頁，共七十三頁。整理課件不良反應(yīng)免疫治療組(n=76)*細(xì)胞回輸(n=370)發(fā)熱36(47%)50(14%)頭痛3(4%)5(1%)惡心3(4%)4(1%)頭暈1(1%)1(0·3%)搔癢1(1%)1(0·3%)心動(dòng)過速1(1%)1(0·3%)總體45(59%)62(17%)患者(huànzhě)出現(xiàn)的不良反應(yīng)在45位患者中共出現(xiàn)了62次不良反應(yīng)，所有均為1或2級并且具有自限性，未有患者出現(xiàn)肺或腎部的癥狀(zhèngzhuàng)、任何跡象的感染、肝功能衰退或自身免疫失調(diào)。TheLancet,356（9232）：802-807第四十五頁，共七十三頁。整理課件EAAL的禁忌癥感染發(fā)熱期的患者（腫瘤熱除外(chúwài)）進(jìn)行器官移植的患者有嚴(yán)重自身免疫病的患者T細(xì)胞相關(guān)淋巴瘤和白血病患者第四十六頁，共七十三頁。整理課件EAAL細(xì)胞(xìbāo)免疫治療細(xì)胞類型：混合型T淋巴細(xì)胞，CD8+殺傷性T細(xì)胞為主應(yīng)用：多次（2-6周一次）大量淋巴細(xì)胞（1010/次）效果：有效控制實(shí)體腫瘤復(fù)發(fā)和進(jìn)展、延長患者無瘤生存期配合常規(guī)放化療延長病人生存期，實(shí)現(xiàn)無瘤、帶瘤生存提高放化療耐受性提高病人生存質(zhì)量機(jī)制：具有(jùyǒu)腫瘤抗原特異性可明顯改善腫瘤病人機(jī)體免疫功能狀態(tài)，增加TH1類細(xì)胞因子的表達(dá)其它：治療效果與臨床使用方案密切相關(guān)第四十七頁，共七十三頁。整理課件一、單獨(dú)(dāndú)使用EAAL進(jìn)行治療適用人群預(yù)期效果使用方案手術(shù)后無其它治療患者預(yù)防復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移四個(gè)療程回輸。第一、二個(gè)療程每周一次回輸，共6-8次回輸；第三個(gè)療程每2周一次回輸，共3-4次回輸；第四個(gè)療程每月一次回輸，共3-4次回輸；此后可每三個(gè)月至半年進(jìn)行一個(gè)療程，每周一次的回輸所有其它治療無效、腫瘤持續(xù)進(jìn)展的患者改善生活質(zhì)量穩(wěn)定腫瘤1周一次回輸，兩個(gè)療程后評價(jià)療效。如患者要求，根據(jù)病情進(jìn)展可持續(xù)進(jìn)行1-2周一次的EAAL細(xì)胞回輸化療或放療有效，但已停用，需維持治療效果的患者長期維持腫瘤穩(wěn)定患者無腫瘤：同手術(shù)后無其它治療患者方案患者體內(nèi)仍有腫瘤：第一、二個(gè)療程每周一次回輸，共6次回輸；第三個(gè)療程每2周一次回輸，共3次回輸；此后根據(jù)患者的要求，可長期進(jìn)行每2周一次的細(xì)胞回輸。第四十八頁，共七十三頁。整理課件二、聯(lián)合(liánhé)化療適用人群預(yù)期效果使用方案正在進(jìn)行化療的患者改善生活質(zhì)量消除化療副作用與化療產(chǎn)生協(xié)同作用，殺傷腫瘤維持腫瘤穩(wěn)定三周化療方案：自第一天給與化療計(jì)算，第三至七天回輸EAAL細(xì)胞一次。如能在七天后再給一次，效果更好四周化療方案：化療第七天和第十七天各回輸一次EAAL細(xì)胞1、8天化療，三周方案：化療第三天、第十天回輸EAAL細(xì)胞第四十九頁，共七十三頁。整理課件三、聯(lián)合(liánhé)靶向治療適用人群預(yù)期效果使用方案正在進(jìn)行抗體靶向治療的患者通過ADCC作用與靶向治療產(chǎn)生協(xié)同作用，殺傷腫瘤維持腫瘤穩(wěn)定根據(jù)靶向藥物的治療方案而定，細(xì)胞回輸通常在靶向藥物給藥后48小時(shí)第五十頁，共七十三頁。整理課件方

案

舉

例星期一星期二星期三星期四星期五星期六星期日

2009-2-26回輸細(xì)胞-4

2009-3-9化療2009-3-10化療

2009-3-16細(xì)胞回輸-5

2009-3-27細(xì)胞回輸-6

2009-4-6化療2009-4-7化療

2009-4-13細(xì)胞回輸-7

2009-4-24細(xì)胞回輸-8

2009-5-4化療2009-5-5化療

2009-5-11細(xì)胞回輸-9

2009-5-22細(xì)胞回輸-10

第五十一頁，共七十三頁。整理課件方

案

舉

例治療計(jì)劃（預(yù)估）如在治療過程中疾病進(jìn)展，可隨時(shí)加入化療星期一星期二星期三星期四星期五星期六星期日

2009-2-26取血，回輸和凍存

2009-3-12取血2009-3-13回輸-1

2009-3-20回輸-2

2009-3-26取血2009-3-27細(xì)胞回輸-3

2009-4-3回輸-4

2009-4-9取血2009-4-10回輸-5

2009-4-17回輸-6

2009-4-24回輸-7

2009-4-30回輸-8如不進(jìn)行后續(xù)治療，此日回輸前取血，進(jìn)行培養(yǎng)凍存，備化療時(shí)使用；如進(jìn)行后續(xù)治療，每2-3周一次回輸，一次取血，一次回輸

第五十二頁，共七十三頁。整理課件取血要求(yāoqiú)（1）取血前必需進(jìn)行的醫(yī)院檢驗(yàn)科檢查項(xiàng)目（取血前一周內(nèi)結(jié)果有效）：血常規(guī):(檢查后及取血前無其它治療)決定病人是否可以取血決定取血量取血量=80ml/淋巴細(xì)胞絕對值例如(lìrú)：患者淋巴細(xì)胞絕對值為1.2，取血量=80ml/1.2=67ml，一般取70ml。感染篩查：乙肝、丙肝、愛滋、梅毒。（檢查后及取血前未進(jìn)行輸血）愛滋病、梅毒患者不進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)血培養(yǎng)：極晚期患者，保證病人血液中沒有細(xì)菌感染第五十三頁，共七十三頁。整理課件取血要求(yāoqiú)（2）取血量：3天內(nèi)的血常規(guī)，要求白細(xì)胞在正常范圍，淋巴細(xì)胞絕對值大于0.8。近3天內(nèi)不能用升白藥及化療。滿足取血條件(tiáojiàn)情況下，取血量取決淋巴細(xì)胞絕對值：淋巴細(xì)胞絕對值 <0.8不能取血

>0.8 可以取血取血量(ml)=80ml/淋巴細(xì)胞絕對值第五十四頁，共七十三頁。整理課件取血要求(yāoqiú)（3）病人清晨抽血前可以進(jìn)食，但勿食用油膩食物抽血前不能輸液抽血前病人沒有任何感染(gǎnrǎn)及心肝肺腎功能異常手術(shù)病人：術(shù)前取血化療病人：化療前（需凍存步驟）或化療后待血象正常后取血。放療病人：放療前或血象正常后取血每次抽血必須是在回輸之前根據(jù)病人淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)確定外周血取血量，一般為20－100ml/每次培養(yǎng)或每次凍存第五十五頁，共七十三頁。整理課件回輸要求(yāoqiú)（1）回輸前病人狀態(tài)：血象基本正常，回輸之日無感染發(fā)燒病人沒有進(jìn)行(jìnxíng)免疫抑制藥物治療（本方法不能用于器官移植術(shù)后病人）第五十六頁，共七十三頁。整理課件回輸要求(yāoqiú)（2）回輸延期：實(shí)驗(yàn)室在回輸前3-7天通知醫(yī)院主管大夫回輸日期醫(yī)生需在回輸前至少一天確認(rèn)患者是否可以回輸。否則細(xì)胞收獲后，則無法再進(jìn)行延期。一般(yībān)由于病人的原因，可延期1－2天，不影響治療效果第五十七頁，共七十三頁。整理課件回輸要求(yāoqiú)（3）回輸步驟：細(xì)胞運(yùn)輸：常溫4C（可置于化學(xué)冰保溫的保溫筒內(nèi)運(yùn)輸），收獲后12小時(shí)內(nèi)回輸細(xì)胞總體積約100ML-200ML回輸速度開始約40-50滴/分鐘，總共約60分鐘回輸過程中約5-8分鐘輕輕擠捏轉(zhuǎn)輸袋上部混勻細(xì)胞 注意：不要碰到輸液器針頭尖部以免刺穿轉(zhuǎn)輸袋；避免產(chǎn)生氣泡?；剌斍安唤ㄗh做抗過敏預(yù)處理，醫(yī)生(yīshēng)可根據(jù)患者實(shí)際情況給予5mg地塞米松，并做好過敏急救準(zhǔn)備細(xì)胞回輸后，繼續(xù)輸約50ML生理鹽水沖洗細(xì)胞回輸管第五十八頁，共七十三頁。整理課件操

作

流

程患者簽署知情同意書，一式兩份：醫(yī)生、永泰免疫各一份保存制定細(xì)胞(xìbāo)治療計(jì)劃：永泰免疫配合醫(yī)生回輸次數(shù)是否配合其它治療、配合的方案獲得患者感染篩查和血常規(guī)結(jié)果（淋巴細(xì)胞絕對值）收費(fèi)采血：取血量=80ml/淋巴細(xì)胞絕對值。永泰免疫提供采血管，護(hù)士采血細(xì)胞培養(yǎng)：永泰免疫永泰免疫以E-MAIL形式，在細(xì)胞培養(yǎng)開始約7-9天確認(rèn)治療方案中細(xì)胞回輸?shù)娜掌谟捞┟庖咴诿恐芩幕蛐瞧谖逡訣-MAIL形式和電話形式通知負(fù)責(zé)醫(yī)生下周患者回輸日期和時(shí)間回輸：永泰免疫提供質(zhì)量檢測報(bào)告，負(fù)責(zé)醫(yī)生簽署接收報(bào)告和細(xì)胞，護(hù)士用輸血器進(jìn)行細(xì)胞回輸?shù)谖迨彭?，共七十三頁。整理課件目前使用EAAL進(jìn)行(jìnxíng)腫瘤治療的醫(yī)院中國人民解放軍總醫(yī)院北京協(xié)和醫(yī)院北京大學(xué)人民醫(yī)院山東大學(xué)(shāndōnɡdàxué)齊魯醫(yī)院第六十頁，共七十三頁。整理課件謝謝(xièxie)！第六十一頁，共七十三頁。整理課件北京永泰免疫應(yīng)用科技(kējì)有限公司

ImmunotechAppliedScienceLimited(IMAS)簡介(jiǎnjiè)Introduction第六十二頁，共七十三頁。整理課件全球唯一經(jīng)過(jīngguò)隨機(jī)對照臨床試驗(yàn)證實(shí)的、安全、有效的同類腫瘤免疫治療產(chǎn)品

THEONLY

Randomizedclinicaltrialprovedeffectiveandsafecancerimmunotherapeuticproductofthiskindintheworld.EAAL擴(kuò)增活化(huóhuà)的自體淋巴細(xì)胞治療腫瘤技術(shù)

ExpandedActivatedAutologouseLymphocytes:ACellularImmunotherapyPlatformforCancerChineseMedicine第三類醫(yī)療(yīliáo)技術(shù)第六十三頁，共七十三頁。整理課件2005年5月，EAAL基本技術(shù)(jìshù)引入中國!

2005年12月，EAAL技術(shù)(jìshù)正式在中國投入臨床腫瘤治療!

2007年10月，EAAL技術(shù)(jìshù)和試劑系統(tǒng)申請專利！2007年10月，EAAL技術(shù)獲得北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，進(jìn)行肝癌治療！2007年12月，永泰免疫在北京建立中國第一個(gè)獨(dú)立的GMP級別的細(xì)胞制備車間并投入使用！2008年7月，EAAL無血清培養(yǎng)基系統(tǒng)建立，永泰免疫進(jìn)入國際細(xì)胞免疫治療領(lǐng)先領(lǐng)域!

2009年2月，EAAL技術(shù)獲得北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，進(jìn)行惡性腫瘤治療并簽署合作協(xié)議，進(jìn)行EAAL技術(shù)的臨床應(yīng)用研究!2009年2月，永泰免疫與山東大學(xué)齊魯醫(yī)院簽署合作協(xié)議，進(jìn)行EAAL技術(shù)的臨床應(yīng)用研究！2009年10月，永泰免疫與北京大學(xué)人民醫(yī)院簽署合作協(xié)議，進(jìn)行EAAL技術(shù)的臨床應(yīng)用研究！2009年10月，永泰免疫在北京的第二個(gè)獨(dú)立的GMP級別的細(xì)胞制備車間投入使用！2009年10月，永泰免疫投資的濟(jì)南永泰細(xì)胞工程有限公司成立！2010年4月，隸屬國藥集團(tuán)、由新型疫苗國家工程研究中心--北京微谷生物醫(yī)藥有限公司，正式簽約控股永泰免疫，使永泰免疫進(jìn)入快速市場發(fā)展階段！永泰免疫發(fā)展歷史TheHistoryofIMAS第六十四頁，共七十三頁。整理課件永泰免疫(miǎnyì)獲得的榮譽(yù)TheHonorsofIMAS中國醫(yī)藥生物技術(shù)(jìshù)協(xié)會理事會員ChinaMedicalBiotechnologyAssociationMember國家“十一五”重大新藥創(chuàng)制項(xiàng)目資助(zīzhù)單位National"EleventhFive"MajorDrugDiscoveryProjectFundedUnit中國生物技術(shù)外包服務(wù)聯(lián)盟（ABO）成員ChinaBiotechnologyOutsourcingServicesAlliance(ABO)Member

國家衛(wèi)生部第三類醫(yī)療技術(shù)規(guī)范起草單位MinistryofHealth3rdTypeofMedicalTechnical

SpecificationsDrafting

Unit第六十五頁，共七十三頁。整理課件外資(wàizī)49%新型疫苗國家工程(gōngchéng)研究中心51%永泰免疫股權(quán)(ɡǔquán)分析

ShareHoldersofIMAS第六十六頁，共七十三頁。整理課件永泰免疫(miǎnyì)關(guān)聯(lián)企業(yè)RelatedInstitutes中國(zhōnɡɡuó)生物技術(shù)集團(tuán)新型疫苗(yìmiáo)國家工程研究中心永泰免疫北京生物制品研究所北京天壇生物制品股份有限公司中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防和控制所中國醫(yī)藥集團(tuán)總公司第六十七頁，共七十三頁。整理課件中國人民解放軍總醫(yī)院北京大學(xué)人民醫(yī)院北京(běijīnɡ)普仁醫(yī)院山東大學(xué)(shāndōnɡdàxué)齊魯醫(yī)院永泰免疫面貌(miànmào)展示（1）

AppearanceofIMAS第六十八頁，共七十三頁。整理課件永泰免疫(miǎnyì)面貌展示（2）

AppearanceofIMAS第六十九頁，共七十三頁。整理課件沈心亮董事長著名生物(shēngwù)疫苗專家國家疫苗工程中心北京生物制品研究所所長，新型疫苗國家工程(gōngchéng)研究中心主任；國家重大傳染病專項(xiàng)首席科學(xué)家《國家中長期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要》（2006－2020年）“重大傳染病”科技重大專項(xiàng)“疫苗、抗原篩選和國家應(yīng)急系統(tǒng)建設(shè)”專家組組長，“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)“新藥研究開發(fā)關(guān)鍵技術(shù)研究”平臺復(fù)審專家。國家科技部863生物和醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域?qū)＜医M專家，專家組組長；國家新藥審評專家，國家藥典委員會委員，受聘擔(dān)任中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會常務(wù)委員，中國醫(yī)藥生物技術(shù)學(xué)會基因工程藥物多肽藥物和疫苗專業(yè)委員會副主任委員、國家藥典委員會委員。國家新藥申評專家?guī)鞂＜?、國家?chuàng)業(yè)板發(fā)生委唯一行業(yè)委員，享受政府特殊津貼。王歈總經(jīng)理著名(zhùmíng)生物免疫學(xué)專家北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部免疫學(xué)博士，曾任北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部免疫學(xué)系副教授、北京大學(xué)臨床腫瘤學(xué)院腫瘤生物診斷與治療中心副主任，北京市