實驗室自建專題知識講座講義

實驗室自建專題知識講座實驗室自建項目LDTLDT(laboratorydevelopedtests,LDTs)實驗室內(nèi)部研發(fā)、驗證和使用采用生物化學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué)試驗方法以診斷為目的分析DNA/RNA/線粒體/蛋白/代謝等生物標(biāo)志物體外診斷項目LDT項目要求可使用購買或自制的試劑僅能在研發(fā)的實驗室使用不能銷售給其他實驗室/醫(yī)院等我國LDT現(xiàn)狀LDT的數(shù)量及種類不多與歐美發(fā)達(dá)國家相比，臨床實驗室開展LDT的數(shù)量及種類均有較大差距臨床研究為主無法滿足臨床診療的個體化與精準(zhǔn)化的需求基因檢測、遺傳性疾病診斷、藥物靶點檢測第三類體外診斷試劑根據(jù)風(fēng)險程度，體外診斷試劑分為一、二、三類，對第三類的監(jiān)管最為嚴(yán)格基因檢測涉及的倫理、隱私、遺傳信息保護(hù)和生物安全等問題

得不到有效的監(jiān)管基因產(chǎn)品所涉及的管理、價格和質(zhì)量監(jiān)管等問題

未能得到明確地監(jiān)管對“萌芽”中的LDT試行

過于嚴(yán)格、過度的監(jiān)管，將阻礙新方法和新技術(shù)的應(yīng)用及發(fā)展LDMTs的監(jiān)管要求1、實驗室資質(zhì)以及環(huán)境要求實驗室資質(zhì)分子診斷實驗室應(yīng)通過衛(wèi)生計生行政部門認(rèn)可的臨床基因擴(kuò)增實驗室審核驗收并在有效期內(nèi)實驗室環(huán)境要求要求達(dá)到國家相關(guān)臨床基因擴(kuò)增實驗室要求2.人員要求

開展LDMTs，實驗室應(yīng)該有相應(yīng)團(tuán)隊?wèi)?yīng)至少包括具有檢驗等相關(guān)專業(yè)的博士學(xué)位并具有相關(guān)研究經(jīng)驗和工作基礎(chǔ)的研究人員1名臨床相關(guān)專業(yè)中級以上醫(yī)師1名，檢驗相關(guān)專業(yè)中級以上檢驗技師1名自建分子診斷項目負(fù)責(zé)人應(yīng)至少具有副高級以上專業(yè)技術(shù)職稱、博士學(xué)位從事分子診斷工作至少3年分子診斷實驗室操作人員應(yīng)經(jīng)過有資質(zhì)的培訓(xùn)機(jī)構(gòu)培訓(xùn)合格取得上崗證簽發(fā)分子病理報告的醫(yī)師應(yīng)至少具有中級病理學(xué)專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格并有從事分子病理工作的經(jīng)歷3.管理要求開展LDMTs項目之前，應(yīng)有相關(guān)臨床科室的申請、醫(yī)務(wù)機(jī)構(gòu)的審批以及醫(yī)院倫理委員會的同意應(yīng)通過相關(guān)行政管理機(jī)構(gòu)組織的同行專家委員會的評議，或經(jīng)所在地省、自治區(qū)、直轄市人民政府相關(guān)行政部門審?fù)馔ㄟ^初次評議的項目在試運(yùn)行一年后，宜申請相關(guān)行政管理機(jī)構(gòu)組織的同行專家委員會的再評議，通過再次評議的項目，正式運(yùn)行通過再次評議的項目，宜接受每3年一次的復(fù)評審，用以監(jiān)督該項目的運(yùn)行情況停用項目的標(biāo)準(zhǔn)和措施一旦造成醫(yī)療糾紛或進(jìn)入司法程序，相關(guān)單位的LDMTs項目應(yīng)立即停止使用，并進(jìn)入緊急審核程序，通過相關(guān)行政管理機(jī)構(gòu)組織的同行專家委員會的評議后，項目方可恢復(fù)檢驗實驗室須建立相應(yīng)的程序和管理制度質(zhì)量控制的基本要求1.應(yīng)不低于國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方法規(guī)要求《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實驗室管理方法》《CNAS－CL36醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在分子診斷領(lǐng)域的應(yīng)用說明》2.開展LDMTs項目臨床應(yīng)用檢測之前應(yīng)進(jìn)行性能確認(rèn)3.實驗室自建分子診斷項目中，涉及市售試劑耗材質(zhì)量保證應(yīng)不低于國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和地方法規(guī)要求4.定性檢測項目每次實驗應(yīng)設(shè)置陰性、弱陽性和/或陽性質(zhì)控物如為基因突變、基因多態(tài)性或基因型檢測則應(yīng)包括最能反映檢測情況的突變或基因型樣品每批檢測的質(zhì)控至少應(yīng)有一種基因突變或基因型，并建議在一定周期內(nèi)涵蓋所有的基因型5.定量檢測項目每次實驗應(yīng)設(shè)置高值、中值和低值質(zhì)控物6、應(yīng)參加通過認(rèn)可的能力驗證計劃提供者提供的能力驗證計劃7、在沒有能力驗證提供的情況下，通過與其他實驗室(如已獲認(rèn)可的實驗室、使用相同檢測方法的實驗室、使用配套系統(tǒng)的實驗室)比對的方式確定檢驗結(jié)果的可接受性時，應(yīng)滿足如下要求：規(guī)定比對實驗室的選擇原則樣品數(shù)量：至少5份，包括正常和異常水平或不同常見基因突變或基因型；頻率：至少每年2次判定標(biāo)準(zhǔn)：至少應(yīng)有≥80%的結(jié)果符合要求實驗室使用兩套及以上檢測系統(tǒng)檢測同一項目時應(yīng)有比對數(shù)據(jù)表明其檢測結(jié)果的一致性比對頻次每年至少1次，樣品數(shù)量不少于20份濃度水平應(yīng)覆蓋測量區(qū)間，計算回歸方程，系統(tǒng)誤差應(yīng)<±7.5%應(yīng)定期(至少每年1次，每次至少5份臨床樣品)進(jìn)行檢驗人員的結(jié)果比對、考核并記錄使用不同生物參考區(qū)間的檢測系統(tǒng)間不宜進(jìn)行比對LDMTs性能確認(rèn)的基本要求方法學(xué)性能評價，進(jìn)行性能驗證試驗，觀察指標(biāo)為準(zhǔn)確性（accuracy）精確性（precision）參考范圍（referencerange）可報告范圍（reportablerange）分析敏感性（analyticsensitivity）分析特異性（analyticspecificity）臨床驗證（clinicalvalidity）傳統(tǒng)LDT與現(xiàn)今LDT比較傳統(tǒng)LDT自行研發(fā)配制試劑簡單手工檢測檢測結(jié)果需要人為判讀