實驗五血清中谷丙轉氨酶的測定_第1頁
實驗五血清中谷丙轉氨酶的測定_第2頁
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文檔簡介

關于實驗五血清中谷丙轉氨酶的測定第1頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三一、實驗目的掌握血清丙氨酸氨基轉移酶活性測定的基本原理。了解血清丙氨酸氨基轉移酶的測定方法及臨床意義。第2頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三510nm光吸收法測定相對血清ALT活力二、實驗原理丙氨酸氨基轉移酶(ALT)催化丙氨酸與α-酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼在酸性溶液中反應形成相應的2,4-二硝基苯腙，呈黃色，后者在堿性條件下呈紅棕色。（1）丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+谷氨酸ALT

（2）丙酮酸+2,4-二硝基苯肼丙酮酸2,4-二硝基苯肼(黃色)丙酮酸2,4-二硝基苯肼（3）苯腙硝醌化合物NaOH（黃色）（紅棕色）第3頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三三、實驗器材材料：人血清試劑：谷丙轉氨酶測定試劑盒用具：分光光度計，微量移液槍，試管，試管架，恒溫水浴鍋第4頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三（1）取3支試管，按下表加入試劑:試劑試劑空白管標準管樣品管基質液(uL)200200200標準液(uL)–50.0–血清樣品(uL)––50.0蒸餾水(uL)50.0––混合37℃水浴放置30min顯色劑(uL)20020020037℃水浴放置20min稀釋NaOH(uL)200020002000四、實驗步驟冷卻至室溫后，510nm處比色比色方法：以空白管調零，讀取標準管及樣品管光密度值。第5頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三（2）計算：依據朗伯-比爾定律：A=KLC標準管谷丙轉氨酶活力：57U/L

樣品管谷丙轉氨酶活力（U/L）＝樣品管光密度值

標準管光密度值×57U樣=A樣A標×U標第6頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三參考值谷丙轉氨酶血清參考值：0~50U/L

第7頁，講稿共9頁，2023年5月2日，星期三正確使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液應占比色皿的2/3。每次測定時都需用試劑空白溶液調零，不能用蒸餾水代替微量移液槍的正確使用注

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