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文檔簡介
血細胞分析儀原理及散點圖臨床應(yīng)用本文檔共28頁;當前第1頁;編輯于星期一\21點8分一、血細胞各通道分析原理及散點圖分析二、散點圖案例分析本文檔共28頁;當前第2頁;編輯于星期一\21點8分一、血細胞各通道分析原理及散點圖分析血細胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究參數(shù),如直方圖,DIFF散點圖,NRBC散點圖等。實驗人員可根據(jù)這些信息從大量的標本中挑出需要重點關(guān)注的,進行涂片復(fù)檢確認,提高工作效率,減少漏診率。本文檔共28頁;當前第3頁;編輯于星期一\21點8分DIFFWBC/BASONRBC半導(dǎo)體激光熒光染色(聚次甲基+噁嗪)主要原理FSC前向散射光:細胞大小SSC側(cè)向散射光:復(fù)雜程度(細胞的顆粒和細胞核等內(nèi)含物的信息)SFL側(cè)向熒光:核酸含量(DNA、RNA)本文檔共28頁;當前第4頁;編輯于星期一\21點8分DIFF通道分析原理4DL(陰離子表面活性劑)完全溶解RBC PLT在WBC膜上打孔溶血素中加入有機酸,與嗜酸粒細胞內(nèi)的堿性蛋白粘附,使Eo顆粒的復(fù)雜程度增加,在SSC顯示復(fù)雜程度是最大的。4DS對核酸染色縱坐標:側(cè)向熒光(SFL)反映核酸含量橫坐標:側(cè)向散射光(SSC)反映細胞內(nèi)部復(fù)雜程度化學(xué)粘附大分子有機酸與嗜酸粒細胞中的堿性顆粒發(fā)生化學(xué)粘附嗜酸粒細胞大分子有機酸本文檔共28頁;當前第5頁;編輯于星期一\21點8分RNA/DNA熒光染色原理成熟白細胞:高熒光特性網(wǎng)織紅細胞:弱熒光特性血小板:成熟RBC:原始細胞:幼稚細胞:微弱熒光特性無熒光特性極高熒光特性極高熒光特性本文檔共28頁;當前第6頁;編輯于星期一\21點8分熒光染色WBC分類的優(yōu)勢檢測異常細胞提供幼稚粒細胞信息(IG)提供原始細胞信息(Other)本文檔共28頁;當前第7頁;編輯于星期一\21點8分10S–FB溶血劑(酸性,低滲)溶解RBC PLT除嗜堿性粒細胞以外的白細胞處理成裸核形態(tài)Baso保持原狀縱坐標:前向散射光(FSC)反映細胞大小橫坐標:側(cè)向散射光(SSC)反映細胞內(nèi)部復(fù)雜程度嗜堿其它有核細胞嗜堿粒細胞溶血素為酸性低滲溶液,Baso內(nèi)的蛋白為酸性蛋白,因此在該溶液中受到保護,而其他有核細胞則被溶解成裸核WBC/BASO通道分析原理本文檔共28頁;當前第8頁;編輯于星期一\21點8分NRBC通道分析原理NR溶血劑完全溶解RBC,PLTWBC保持原狀NRBC溶解為裸核NR染液對核酸染色縱坐標:前向散射光(FSC)反映細胞大小橫坐標:側(cè)向熒光(SFL)反映核酸含量NRBC%=NRBC#/
NRBC_WBC#本文檔共28頁;當前第9頁;編輯于星期一\21點8分出現(xiàn)有核紅時WBC的修正紅系增生活躍時,外周血易見較多的NRBC,在WBC計數(shù)時不被溶解,常被計入淋巴細胞中。本文檔共28頁;當前第10頁;編輯于星期一\21點8分WBC增多對RBC計數(shù)的干擾RBC:阻抗法RBC值含WBCWBC>100*109/L時,需校正紅系統(tǒng)參數(shù)貧血越嚴重,對RBC影響越大本文檔共28頁;當前第11頁;編輯于星期一\21點8分血紅蛋白通道光電比色法SLS(十二烷基磺酸鈉):無氰無毒本文檔共28頁;當前第12頁;編輯于星期一\21點8分二、散點圖案例分析本文檔共28頁;當前第13頁;編輯于星期一\21點8分嗜堿性粒細胞增多癥在BASO散點圖上,嗜堿區(qū)域出現(xiàn)大量散點,另外DIFF散點圖上,中性區(qū)域的左下方也為嗜堿區(qū)域,也出現(xiàn)了大量的散點。
BASO%:儀器13.4%鏡檢13.5%本文檔共28頁;當前第14頁;編輯于星期一\21點8分AML-M1(例1)不可信DIFF散點圖顯示淋巴與單核之間融合,有分類結(jié)果,但不可信。IMI散點圖也提示大量原始細胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有77.5%的原始細胞。細胞表面標志CD13和CD33陽性,CD36陰性;為急性髓細胞性白血病。本文檔共28頁;當前第15頁;編輯于星期一\21點8分AML-M2DIFF散點圖顯示白細胞完全融合且不分類。IMI散點圖顯示大量原始細胞和幼稚粒細胞。NRBC散點圖:紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)有90%的原始細胞、3%的早幼粒細胞哦、1%中幼粒細胞。流式細胞儀檢測結(jié)果顯示細胞表面標志CD13和CD33陽性,為髓細胞性白血病。本文檔共28頁;當前第16頁;編輯于星期一\21點8分AML-M3DIFF散點圖顯示白細胞完全融合且不分類。IMI散點圖也顯示大量原始細胞和幼稚粒細胞。NRBC散點圖:紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)3%的原始細胞,91%的早幼粒細胞、3.5%的中幼粒細胞,0.5%晚幼粒細胞。本文檔共28頁;當前第17頁;編輯于星期一\21點8分AML-M4DIFF散點圖,白細胞區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點,完全融合,不分類。大致分成兩群,一群為原始細胞,一群為幼稚粒細胞。IMI散點圖也顯示大量原始細胞和幼稚粒細胞。本文檔共28頁;當前第18頁;編輯于星期一\21點8分AML-M5bDIFF散點圖淋巴與單核融為一體,不分類,IMI散點圖顯示大量原始細胞和幼稚粒細胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)59%的原始細胞,0.5%的早幼粒細胞,單核細胞24.5%。本文檔共28頁;當前第19頁;編輯于星期一\21點8分慢粒危象DIFF散點圖OTHER區(qū)域出現(xiàn)大量散點,中性粒細胞上方也有少量散點,IMI散點圖也出現(xiàn)大量紅色散點,儀器報警提示有大量原始細胞和幼稚粒細胞。NRBC散點圖:紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)38.5%的原始細胞,幼稚粒細胞和幼稚的單核細胞。酯酶染色陰性或弱陽性,可被氟化鈉抑制。這是一例慢粒急單變。本文檔共28頁;當前第20頁;編輯于星期一\21點8分MDSDIFF:淋巴細胞和單核細胞之間界限不清,提示出現(xiàn)原始細胞。中性粒細胞散點向左下方延伸到嗜堿區(qū)域。IMI:少量紅點NRBC:幼紅鏡檢:原始:1%,BASO:5%,NRBC:2.5/100WBC本文檔共28頁;當前第21頁;編輯于星期一\21點8分
范**,女,67y。2016.11,診斷為MDS伴原始細胞增多(10%)DIFF散點圖淋巴與單核區(qū)域融合,提示出現(xiàn)原始細胞報警提示異常淋巴細胞/原始細胞,異淋?鏡檢:47%原始淋巴細胞,未見異淋。血片POX(-)。
急淋變MDS急淋變本文檔共28頁;當前第22頁;編輯于星期一\21點8分急性T淋巴細胞白血病DIFF散點圖淋巴與單核完全融合,IMI散點圖幾乎沒有紅色散點,儀器提示異常淋巴/原始淋巴細胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有59.5%的異常淋巴細胞。本例被診為ATL。本文檔共28頁;當前第23頁;編輯于星期一\21點8分CLL淋巴與單核區(qū)域分界不清,儀器提示淋巴細胞增多/原始淋巴。
鏡檢:L:86.5%,幼淋2.0%本文檔共28頁;當前第24頁;編輯于星期一\21點8分異型淋巴細胞異型淋巴細胞增高與多種病毒感染及變態(tài)反應(yīng)有關(guān)。常見有:傳染性單核細胞增多癥、病毒性肺炎、病毒性肝炎、腎綜合征出血熱等病毒性感染。特點:胞體增大,胞質(zhì)增多、嗜堿性增強,細胞核母細胞化,熒光強度最強。本文檔共28頁;當前第25頁;編輯于星期一\21點8分散點圖特點:嗜酸性粒細胞群向中性粒細胞靠攏,間距小。原因:瘧原蟲裂殖體破裂,瘧色素從感染的血細胞中釋放出來,繼而被白細胞吞噬,吞噬了瘧色素的白細胞側(cè)向散射光強度改變,顯示在散點圖靠近中性粒細胞一側(cè),但也被儀器以Eo特有的紅色標示出來。張時民等.血細胞分析儀測定瘧原蟲感染患者特征二例.中華臨床醫(yī)師雜志,2011,5(2):633-635瘧原蟲感染的散點圖(一)本文檔共28頁;當前第26頁;編輯于星期一\21點8分從儀器報警EO增高或無EO分類結(jié)果的1501份標本中發(fā)現(xiàn)有9份瘧原蟲標本,6份散點圖表現(xiàn)為EO與NEG之間間距縮小(圖1),3份報警白細胞散點圖異常,且散點圖顯示EO與NEG之間無間距(圖2)。其他1492份散點圖基本正常。因為是
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