分解纖維素的微生物的分離知識點(diǎn)

關(guān)于分解纖維素的微生物的分離知識點(diǎn)第1頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三纖維素酶：

纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素C1酶Cx酶纖維二糖葡萄糖苷酶葡萄糖第2頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三甲乙在2支20mL的試管中，分別放入1×6cm的濾紙條，再分別加入pH為4.8、物質(zhì)的量濃度為0.1mol/L的醋酸-醋酸鈉緩沖液10mL、11mL。在加入10mL緩沖液的試管中加入1mL纖維素酶（70~80U/mL）。將二支試管固定在50mL的錐形瓶中，在搖床上以140r/min的轉(zhuǎn)速振蕩反應(yīng)1h，觀察結(jié)果。4、纖維素酶活性的測定實(shí)驗(yàn)：第3頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三.纖維素分解細(xì)菌的篩選：1.方法：剛果紅染色法這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進(jìn)行篩選

剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。2.原理：第4頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（此步可以省略）第5頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三2、選擇培養(yǎng)的操作方法將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)1-2d，直至培養(yǎng)液變混濁。吸取一定量的培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移至另一瓶新鮮的選擇培養(yǎng)基中，以同樣的方法培養(yǎng)到培養(yǎng)液變混濁。選擇培養(yǎng)（富集培養(yǎng)）增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離所需要的微生物。1、目的：第6頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時(shí)就加入剛果紅第7頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三為了確定分離得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行_____________實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有______發(fā)酵和______發(fā)酵。纖維素酶測定方法是對纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的________含量進(jìn)行定量測定。課題延伸發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶液體固體葡萄糖第8頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三碳源氮源生長因子無機(jī)鹽水微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)（一）微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能第9頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三概念來源常見的生長因子微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物酵母膏、蛋白胨、動植物組織的提取液維生素、氨基酸、堿基等生長因子思考是否培養(yǎng)所有微生物的培養(yǎng)基中都需要加生長因子？第10頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三1、碳源2、自養(yǎng)型微生物利用無機(jī)碳源，異養(yǎng)型微生物利用有機(jī)碳源；有機(jī)碳源：如糖類無機(jī)碳源：如CO25自養(yǎng)型微生物的能源是光能或無機(jī)物氧化釋放的化學(xué)能；異養(yǎng)型微生物的能源是和碳源一樣（有機(jī)碳源）3、自養(yǎng)型微生物利用無機(jī)氮源，異養(yǎng)型微生物可能利用無機(jī)氮源也可能利用有機(jī)氮源4、有機(jī)碳源也是異養(yǎng)型微生物的主要能源第11頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三8．有些微生物能合成纖維素酶，通過對這些微生物的研究和應(yīng)用，使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精，用纖維素酶處理服裝面料等。纖維素酶可以通過微生物發(fā)酵來生產(chǎn)，為了提高酶的產(chǎn)量，請你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，利用誘變育種的方法，獲得產(chǎn)生纖維素酶較多的菌株。(1)寫出實(shí)驗(yàn)步驟：①______________________________________________.②制備含有___________的固體培養(yǎng)基。③_________________________________________________________________________.④__________________________________________________________________________.(2)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)論：第12頁，講稿共14頁，2023年5月2日，星期三〖8.答案〗（1）①將培養(yǎng)好的菌株分為兩組，一組用一定劑量的誘變劑處理，另一組不處理作對照。③把誘變組的大量菌株接種到多個(gè)含有纖維素的固體培養(yǎng)基上，同時(shí)對照組接種未處理的菌株。把它們置于相同的條件下