藥理實驗設計

阿司匹林與可待因的聯(lián)合鎮(zhèn)痛作用研究藥理實驗設計聯(lián)系效果美國藥典收載有復方阿司匹林膠囊，由阿司匹林、可待因和咖啡因組成，其中的阿司匹林和磷酸可待因的比例為25：1，臨床用于各種疼痛和發(fā)燒，療效較好。相同鎮(zhèn)痛效果降低兩藥的使用劑量減輕了兩藥的副作用背景鄭惠玲藥理實驗設計、藥理實驗設計是美國政府對藥品質(zhì)量標準和檢定方法作出的技術規(guī)定，也是藥品生產(chǎn)、使用、管理、檢驗的法律依據(jù)。NF收載了美國藥典(USP)尚未收入的新藥和新制劑。美國藥典正文藥品名錄分別按法定藥名字母順序排列，各藥品條目大都列有藥名、結構式、分子式、CAS登記號、成分和含量說明、包裝和貯藏規(guī)格、鑒定方法、干燥失重、熾灼殘渣、檢測方法等常規(guī)項目，正文之后還有對各種藥品進行測試的方法和要求的通用章節(jié)及對各種藥物的一般要求的通則。美國藥典藥理實驗設計★一個國家記載藥品標準、規(guī)格的法典，一般由國家藥品監(jiān)督管理局主持編纂、頒布實施，國際性藥典則由公認的國際組織或有關國家協(xié)商編訂。藥典由國家藥品監(jiān)督管理局主持編纂、頒布實施，國際性藥典則由公認的國際組織或有關國家協(xié)商訂。制定藥典是從本草學、藥物學以及處方集的編著演化而來。藥典的重要特點是它的法定性和體例的規(guī)范化。特點藥理實驗設計藥理實驗設計我們根據(jù)國外上市品種的處方比例設計了復方阿司匹林片，并通過幾種動物模型對阿司匹林與磷酸可待困的鎮(zhèn)痛協(xié)同作用進行了研究。阿司匹林可待因7藥理實驗設計阿司匹林的鎮(zhèn)痛機制唐廣博藥理實驗設計阿司匹林主要是通過抑制前列腺素及其他能使痛覺對機械性或化學性刺激敏感的物質(zhì)(如緩激肽、組胺)的合成，屬于外周性鎮(zhèn)痛藥。PG是一族含有一個五碳環(huán)和兩條側鏈的二十碳不飽和脂肪酸，多種細胞都可合成。細胞中的花生四烯酸以磷脂的形式存在于細胞膜中。多種刺激因素可激活磷脂酶A，使花生四烯酸從膜磷脂中釋放出來。

游離的花生四烯酸經(jīng)細胞微粒體內(nèi)環(huán)氧酶（COX)的催化生成各種PG，其中PGE2主要參與疼痛的調(diào)節(jié)。藥理實驗設計

COX是前列腺素類化合物生物合成的關鍵酶，在體內(nèi)有兩種同工酶：COX-1與COX-2，COX-1是結構酶，正常生理情況下即存在，主要介導生理性前列腺素類物質(zhì)形成。COX-2是誘導酶，在生理狀態(tài)下基本不表達，在炎性刺激（如發(fā)熱）的刺激下大量生成，介導花生四烯酸轉化產(chǎn)生的PGE2和PGI2，具有很強的制痛作用。藥理實驗設計可待因的鎮(zhèn)痛機制藥理實驗設計在體內(nèi)存在有“抗痛系統(tǒng)”，它由腦啡肽神經(jīng)元、腦啡肽及阿片受體共同組成。去極化或刺激腦啡肽神經(jīng)通路可引起腦啡肽釋放，并依賴于鈣離子。在正常情況下約有20%～30%的阿片受體與腦啡肽結合，起著疼痛感覺的調(diào)控作用，維持正常痛閾，發(fā)揮生理性止痛機能，可待因的作用是激動阿片受體，激活了腦內(nèi)“抗痛系統(tǒng)”，阻斷痛覺傳導，產(chǎn)生中樞性鎮(zhèn)痛作用。藥理實驗設計脊髓水平上的網(wǎng)狀結構、丘腦、大腦皮層等均參與疼痛的調(diào)節(jié)機制，其通路復雜，也需要多種神經(jīng)遞質(zhì)傳遞信號，在這些部位，阿片受體極為豐富，是可待因參與調(diào)節(jié)疼痛的重要基礎。藥理實驗設計熱板致痛原理于帆藥理實驗設計痛反應閾值：又稱痛閾值，是疼痛刺激引起應激組織反應的最低值，為臨界值的意思。也就是刺激生物體系時，雖然對小刺激不反應，但當超過某限度時就會激烈反應的界限值。是機體對外力刺激最大的承受能力，痛閾值越高，承受疼痛的能力越強，反之越弱。間接測量藥理實驗設計痛閾值提高是身體的正常調(diào)節(jié)機制，是合理的、有益的調(diào)節(jié)。痛閾值的提高，并不表示刺激也要相應增強。如果刺激量超出了正常范圍，但尚未達到痛閾值，很有可能會在感覺不痛的情況下受傷。不可盲目用藥藥理實驗設計將小鼠置于一定溫度的熱板上，熱刺激小鼠足部產(chǎn)生痛反應，即舔足反應。以小鼠出現(xiàn)舔足的時間作用為痛反應指標，判斷藥物鎮(zhèn)痛作用好壞。熱板致痛法控溫精確計時精確發(fā)熱均勻藥理實驗設計選取生長狀況相近且適于實驗的小鼠并分組測定給藥前各組動物的痛反應閾值分別給予不同劑量的阿司匹林、磷酸可待因和復方混合物熱板測痛儀測其用藥后痛閾值（指標）記錄并分析思路藥理實驗設計實驗動物、器材和藥品肖健林藥理實驗設計實驗動物：雌性昆明小鼠（18g—22g)藥理實驗設計一般實驗選擇小鼠的原因：1.哺乳動物，解剖和生理結構與人較相似2.體型小，飼養(yǎng)管理方便3.生長期短，成熟早，繁殖力強4.性情溫順，膽小怕驚，對環(huán)境變化敏感5.種系純，容易作比較，可以排除不同種系的干擾因素藥理實驗設計選擇昆明小鼠（Kunmingmice，KM小鼠）的原因：來源：1926年美國Rockfeller研究所從瑞士引入白化小鼠培育成Swiss小鼠

。1944年3月17日由湯飛凡教授從印度Hoffkine研究所引進Swiss小鼠，飼養(yǎng)在昆明中央防疫處。由于該小鼠起初引入地是昆明，故稱之為昆明小鼠。解放后中央防疫處遷回北京天壇，更名為衛(wèi)生部生物制品研究所。1950年小鼠隨之引到北京天壇（檢定所現(xiàn)址），當時保種9對。1953年10月移至北京東郊，1954年擴種，相繼引到其他單位，現(xiàn)已遍布全國各地。藥理實驗設計主要特性：KM小鼠是我國生產(chǎn)量、使用量最大的遠交群小鼠?；驇齑?，基因雜合率高，我國學者已從KM小鼠遠交群中先后培育出不少近交系小鼠。經(jīng)50多年的選育，現(xiàn)在KM小鼠腫瘤自發(fā)率極低。不同地飼養(yǎng)的昆明小鼠封閉群的生長發(fā)育與繁殖性能存在一定差異，但其共同特點是抗病力和適應力很強，繁殖率和成活率高。它在我國生物醫(yī)學動物實驗中約為小鼠總用量的70%。藥理實驗設計選擇雌性小鼠的一般原因1.雌鼠性情溫順，公鼠易打斗2.雌鼠免疫反應強本實驗選擇雌性小鼠的原因是？藥理實驗設計實驗器材YLS-6B智能熱板儀、1mL注射器、12號灌胃針頭三個關鍵1.表面的導熱性和光潔度2.溫度控制3.計時的準確程度藥理實驗設計藥品配制75mg/mL阿司匹林溶液、3mg/mL磷酸可待因溶液，兩者按1：1體積比配制混合溶液（25:1）、生理鹽水藥理實驗設計實驗步驟與分組宋毅涵藥理實驗設計實驗步驟與分組1）先測定給藥前各組動物的痛反應閾值，選取體重在18g一22g，痛閾值在5～30s的雌性小鼠，隨機分成15組,并編號1—20，每組20只小鼠。實驗室溫度控制在20℃～25℃。藥理實驗設計2）1-5組、5-10組、11-15組、15-20組分別注射0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.40mL、0.50mL的阿司匹林溶液（50mg/mL）、磷酸可待因溶液（2mg/mL）、混合溶液（25：1）和生理鹽水3）于給藥后1h分別將各組小鼠置于55℃±0．5℃的熱板測痛儀的金屬板上，以舔后足作為痛反應指標，記錄小鼠投入熱板至舔后足的時間作為痛反廟閨值，以痛反應閾值超過60S作為有效指標，計數(shù)痛反應時間超過60s的動物數(shù)，藥理實驗設計小鼠捉拿從籠盒內(nèi)將小鼠尾部捉住并提起，放在籠蓋(或表面粗糙的物體)上，輕輕向后拉鼠尾，在小鼠向前掙脫時，用左手(熟練者也可用同一只手)拇指和食指抓住兩耳和頸部皮膚，無名指，小指和手掌心夾住背部皮膚和尾部，并調(diào)整好動物在手中的姿勢。藥理實驗設計小鼠灌胃1.

準備灌胃針頭。一般可以從市場上面買到，實在沒有的話，可以用12號的針頭，剪去針尖，用砂紙將頭端磨平，也可以用。但是買的灌胃針頭的頭端用錫或者適宜的方法處理了針頭的銳口，自己用砂紙不可能將所有的銳口都磨掉，用這樣的針頭灌胃，損失小鼠食道的可能性比較大。藥理實驗設計2.

抓住小鼠，使其頭、頸和身體呈一直線。抓小鼠的動作很簡單，左手的小指和無名指抓住小鼠的尾巴，另外三個手指抓住小鼠的頸部即可。因為小鼠始終在活動中，若一次抓的感覺不是很順手，要放開重新抓，不要逞強進行下一步操作。藥理實驗設計3.

抓好小鼠就可以灌胃了，一般用1ml的注射器配灌胃針頭。灌胃針頭從小鼠的嘴角進入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進，進入食管后會有一個刺空感，進入食道后就可以推注藥液了。4.灌胃容積一般是0.1～0.2ml/10g，最大0.35ml/10g，每只小鼠的灌胃最大容積不超過0.8ml。

藥理實驗設計結果分析張敏潔藥理實驗設計結果分析生理鹽水（mg/kg）痛反應時間超過60S的動物數(shù)（只）鎮(zhèn)痛有效率（%）表1.生理鹽水灌胃小鼠熱板致痛反應（n=20）藥理實驗設計結果分析阿司匹林（mg/kg）痛反應時間超過60S的動物數(shù)（只）鎮(zhèn)痛有效率（%）表2.阿司匹林對小鼠熱板致痛反應的鎮(zhèn)痛作用（n=20）藥理實驗設計結果分析磷酸可待因（mg/kg）痛反應時間超過60S的動物數(shù)（只）鎮(zhèn)痛有效率（%）表3.磷酸可待因對小鼠熱板致痛反應的鎮(zhèn)痛作用（n=20）藥理實驗設計結果分析復方混合物（阿司匹林：磷酸可待因=25：1）（mg/kg）痛反應時間超過60S的動物數(shù)（只）鎮(zhèn)痛有效率（%）表4.復方混合物對小鼠熱板致痛反應的鎮(zhèn)痛作用（n=20）藥理實驗設計對比表1.表2.&表3.若復方混合物的鎮(zhèn)痛有效率大于阿司匹林、磷酸可待因的鎮(zhèn)痛有效率，則兩種藥物之間具有協(xié)同鎮(zhèn)痛作用。若復方混合物的鎮(zhèn)痛有效率小于阿司匹林、磷酸可待因的鎮(zhèn)痛有效率，則兩種藥物之間具有拮抗鎮(zhèn)痛作用。若復方混合物的鎮(zhèn)痛有效率等于阿司匹林、磷酸可待因的鎮(zhèn)痛有效率，則兩種藥物之間無相互作用。

在對應藥物劑量比條件下，比較鎮(zhèn)痛有效率。藥理實驗設計結果分析受試藥品名ED50（mg/kg）95%可倍限（mg/kg）阿司匹林磷酸可待因復方混合物生理鹽水表5.阿司匹林、磷酸可待因以及兩者的復方對小鼠熱板致痛反應的鎮(zhèn)痛ED50ED50：半數(shù)有效量。在量反應中指能引起50%最大反應強度的藥量，在質(zhì)反應中指引起50%實驗對象出現(xiàn)陽性反應時的藥量。LD50：半數(shù)驚厥量或半數(shù)致死量。（藥物的ED50越小，LD50越大說明藥物越安全。）95%可倍限：在此劑量范圍內(nèi)95%的實驗對象出現(xiàn)陽性反應。藥理實驗設計注意事項選擇雌性小鼠以避免雄性小鼠陰囊與Woolfe熱板接觸而影響實驗結果為盡量減少個體差異，應事先篩選痛閾小于30秒的小鼠作為實驗鼠實驗室室溫應在15℃左右，Woolfe熱板溫度55℃左右；痛閾超過60秒的小鼠應立即取出以免燙傷各組給藥后觀察痛閾的時間要一致吳紫薇藥理實驗設計可行性分析羅欣然藥理實驗設計1.本實驗操作簡單，不需要過多的專業(yè)操作技術；通過舔后足、扭體反應和痛反應時間作為效應指標，直觀、易測；2.熱板測痛儀能較精確地調(diào)定溫度，且溫度較恒定，不會因為溫度過高而使小鼠提前死亡，同時能較少實驗誤差；3.阿司匹林和可待因有較好的鎮(zhèn)痛作用，效果明顯，而且有明顯的濃度梯度差異，在本實驗中能在較短時間內(nèi)觀察到隨著濃度變化而變化的鎮(zhèn)痛有效率。技術可行性藥理實驗設計1.本實驗用的昆明種小鼠和Wistar大鼠容易購得、繁殖能力強，個體差異相對較小，適合用于本實驗；2.阿司匹林和可待因是常用鎮(zhèn)痛藥，價格低廉，容易獲得，可購置充足藥品用于實驗；經(jīng)濟可行性藥理實驗設計討論&小結閆睿藥理實驗設計

熱板致痛模型主要用于篩選中樞性鎮(zhèn)痛藥，對于解熱鎮(zhèn)痛藥的篩選可使用化學性致痛模型----扭體反應模型。藥理實驗設計

扭體反應

將某些化學物質(zhì)，如強酸、強堿、鉀離子、緩激肽等，涂布于動物的的某些敏感部位或腹腔注射。腹腔注射損傷物質(zhì)引起受試動物腹痛，動物表現(xiàn)出“扭體反應”（即腹部內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臀部高起）藥理實驗設計選取體重在18～22g的小鼠，雌雄各半，隨機分成15組，每組20只動物。同上一實驗方法給藥，給藥后30min腹腔注射0.6％的醋酸溶液0.2ml／只，記錄15min內(nèi)小鼠的扭體反應，以15min內(nèi)小鼠不出現(xiàn)扭體反應作為鎮(zhèn)痛有效指標，計數(shù)不扭體的小鼠數(shù)，計算藥物鎮(zhèn)痛的的ED50)并進行結果分析。實驗步驟概述藥理實驗設計選取體重在18～22g