第七章體外抗原抗體反應(yīng)概述演示文稿

第七章體外抗原抗體反應(yīng)概述演示文稿本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第1頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分優(yōu)選第七章體外抗原抗體反應(yīng)概述ppt本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第2頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分抗原抗體反應(yīng)：是指抗原與相應(yīng)抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)體內(nèi)殺菌、溶菌、調(diào)理、中和毒素免疫病理?yè)p傷—超敏反應(yīng)、免疫性疾病等體外：凝集、沉淀、溶細(xì)胞、中和毒素、補(bǔ)體結(jié)合等本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第3頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第4頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分第一節(jié)抗原抗體反應(yīng)的原理本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第5頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

抗原抗體結(jié)合反應(yīng)是抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間的相互作用，是一種分子表面的特異的可逆的弱結(jié)合力（只能在極短距離內(nèi)才能發(fā)生效應(yīng)）?？乖贵w結(jié)合反應(yīng)的條件：①抗原與抗體間的特定部位的空間結(jié)構(gòu)必須相互吻合，具有互補(bǔ)性（先決條件）;②抗原決定簇與抗體超變區(qū)必須緊密接觸，才能有足夠的結(jié)合力，使抗原抗體分子結(jié)合在一起。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第6頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分不形成牢固的共價(jià)鍵，通過(guò)非共價(jià)鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力一、抗原抗體的結(jié)合力1、靜電引力2、范德華引力3、氫鍵4、疏水作用力本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第7頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分1、靜電引力概念：抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團(tuán)之間相互的引力。又稱庫(kù)倫引力。靜電引力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)間的距離的平方成反比。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第8頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

二、范德華引力概念：抗原和抗體相互接近時(shí)，各自所攜帶的原子與原子、分子與分子由于分子極化作用而出現(xiàn)的引力。

結(jié)合力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比。

作用力最小

作用大小取決于二者分子空間構(gòu)型的互補(bǔ)性本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第9頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

概念：供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。

三、氫鍵結(jié)合力

供氫體：－COOH、－NH2和－OH

受氫體：氧、氮

氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比。

最具特異性（必須供氫體和受氫體互補(bǔ)才能實(shí)現(xiàn)氫鍵的結(jié)合）本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第10頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分四、疏水作用力（疏水鍵）

概念：兩個(gè)疏水基團(tuán)在水溶液中相互接觸時(shí)，由于對(duì)水分子排斥而趨向聚集的力。

抗原決定簇與抗體上的結(jié)合點(diǎn)靠近，互相間正、負(fù)極性消失，親水層立即失去。

結(jié)合力最強(qiáng)，約占總結(jié)合力的50％。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第11頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分靜電引力：異性相吸（electrostaticforces）范德華引力:作用最?。╲anderWaalsinteractions）氫鍵:最具特異性（hydrogenbond）疏水作用力:作用最大（hydrophobicinteractions）

抗原抗體結(jié)合力示意圖抗原抗體結(jié)合力本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第12頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第13頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

結(jié)合力的大小

親和力（affinity）表示

親合力（avidity）本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第14頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分二、抗原抗體的親和力和親合力

親和力（affinity）：是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與相應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)而結(jié)合的強(qiáng)度，是抗原與抗體間固有的結(jié)合力。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第15頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第16頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分親和常數(shù)（K）：K值越大?抗體的親和力越高?與抗原結(jié)合越牢固抗體與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng)，在平衡時(shí)其本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第17頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分親合力（avidity）：是指一個(gè)抗體分子與整個(gè)抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度，與抗體結(jié)合價(jià)直接相關(guān)。另外也與親和力強(qiáng)弱有關(guān)。與抗體的結(jié)合價(jià)直接相關(guān)。親合力高，與抗原結(jié)合牢固不易解離。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第18頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第19頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見(jiàn)反應(yīng)血清學(xué)反應(yīng)條件下，抗原抗體均帶負(fù)電荷，使極化的水分子在其周?chē)纬伤瘜?，成為親水膠體。

當(dāng)抗原與抗體結(jié)合使表面電荷減少，水化層變薄，失去親水性能，抗原抗體復(fù)合物成為疏水膠體在電解質(zhì)作用下，中和膠體粒子表面的電荷，使各疏水膠體之間靠攏，形成可見(jiàn)的抗原抗體復(fù)合物三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第20頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)1.特異性2.比例性3.可逆性4.階段性本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第21頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

一、特異性（specificity）1、概念：一種抗原分子通常只能與其刺激機(jī)體后產(chǎn)生的抗體結(jié)合，這種抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性稱為特異性。特異性示意圖

本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第22頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分2、決定因素：由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。3、應(yīng)用：由于抗原抗體反應(yīng)具有高度特異性，故可用已知的抗原（抗體）來(lái)檢測(cè)相應(yīng)未知的抗體（或抗原）。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第23頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分概念：兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)。4、交叉反應(yīng)（crossreactions）抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖B本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第24頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分三、比例性（proportionality）1、比例性是指抗原與抗體發(fā)生可見(jiàn)反應(yīng)遵循一定的量比關(guān)系。2、以絮狀沉淀實(shí)驗(yàn)為例，受抗原抗體比例性的影響非常明顯。3、根據(jù)所形成的沉淀物及抗原抗體比例關(guān)系繪制反應(yīng)曲線。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第25頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第26頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第27頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分網(wǎng)格學(xué)說(shuō)（圖）抗體的兩個(gè)Fab段分別結(jié)合兩個(gè)Ag分子，相互交叉結(jié)合連接成巨大的網(wǎng)格狀立體聚合物，（可見(jiàn)）。二者比例合適：本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第28頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分Ab/Ag過(guò)剩過(guò)剩方的結(jié)合價(jià)得不到飽和，大多數(shù)游離存在，只形成小分子復(fù)合物（不可見(jiàn)）。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第29頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分最適比(optimalratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，幾乎無(wú)游離抗原或抗體的抗原抗體濃度比。等價(jià)帶(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現(xiàn)象：在等價(jià)帶前后，由于抗體和抗原過(guò)量，形成的沉淀物少，上清液中可測(cè)出游離的抗體或抗原的現(xiàn)象。

前帶(prozone)抗體過(guò)量時(shí)稱為。

后代(postzone）抗原過(guò)量時(shí)稱為。5、一組概念帶現(xiàn)象包括本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第30頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分在抗原抗體反應(yīng)中，抗體（或抗原）與一定量的對(duì)應(yīng)物結(jié)合出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)所需的最小量稱為效價(jià)（或滴度），一般以最高稀釋倍數(shù)表示，正好是稀釋度的倒數(shù)。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第31頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分

三、可逆性（reversibility)1、概念：是指抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性稱為抗原抗體結(jié)合的可逆性。2、原因：抗原抗體的結(jié)合是分子表面的非共價(jià)鍵結(jié)合，因此形成的復(fù)合物不牢固。3、抗原抗體反應(yīng)動(dòng)態(tài)平衡式如下：本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第32頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分4、決定抗原抗體解離的因素（1）抗體與相應(yīng)抗原的親合力。親合力低的抗體與抗原形成的復(fù)合物較易解離。（2）環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響。

PH過(guò)高或過(guò)低、增加離子強(qiáng)度均可破壞靜電引力，使抗原抗體結(jié)合力下降，促使其解離。注意：解離后的抗原或抗體仍然保持其原有生物活性本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第33頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分四、階段性特異性結(jié)合兩個(gè)階段可見(jiàn)反應(yīng)階段數(shù)秒～數(shù)分鐘，肉眼不可見(jiàn)數(shù)分～數(shù)小時(shí)肉眼可見(jiàn)本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第34頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分第三節(jié)抗原抗體反應(yīng)影響因素一、反應(yīng)物自身因素1.抗原：理化特性、Ag決定簇?cái)?shù)量和種類。例如，可溶性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)沉淀，而顆粒性抗原與相應(yīng)抗體反應(yīng)則出現(xiàn)凝集;單價(jià)抗原與抗體結(jié)合不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng);粗糙型細(xì)菌在生理鹽水中易出現(xiàn)自凝；紅細(xì)胞與IgG類抗體結(jié)合不出現(xiàn)直接凝集等。

本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第35頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分抗體是血清學(xué)反應(yīng)中的關(guān)鍵因素，對(duì)反應(yīng)的影響表現(xiàn)在以下三個(gè)方面:(1)來(lái)源:來(lái)自不同動(dòng)物的免疫血清，其反應(yīng)性有差異。家兔等大多數(shù)動(dòng)物的免疫血清具有較寬的等價(jià)帶，通常在抗原過(guò)量時(shí)才易出現(xiàn)可溶性免疫復(fù)合物;馬等大動(dòng)物和人的免疫血清等價(jià)帶較窄，少量的抗原或抗體過(guò)剩，均可形成可溶性免疫復(fù)合物.2.抗體本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第36頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分(2)特異性與親和力:特異性和親和力是影響血清學(xué)反應(yīng)的兩個(gè)關(guān)鍵因素，它們共同影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確程度。免疫動(dòng)物早期獲得的抗血清特異性較好，但親和力低;后期獲得的抗血清一般親和力較高，但長(zhǎng)期免疫易使免疫血清中抗體的類型和反應(yīng)性變得更為復(fù)雜。因此，用于診斷的試劑必須盡量選用特異性高、親和力強(qiáng)的抗體，才能保證和提高試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第37頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分（3）濃度:

抗體的濃度往往是與抗原相對(duì)而言。合適的濃度才出現(xiàn)明顯的反應(yīng)現(xiàn)象。因此許多試驗(yàn)應(yīng)進(jìn)行抗體預(yù)滴定，找出最適反應(yīng)濃度。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第38頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分電解質(zhì):生理鹽水或緩沖液酸堿度:pH6～pH8溫度:15℃～40℃，37℃最適二、環(huán)境因素本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第39頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分（一）電解質(zhì)

抗原抗體結(jié)合后由親水性變?yōu)槭杷?，此時(shí)易受電解質(zhì)影響，如有適當(dāng)濃度電解質(zhì)存在，就會(huì)使抗原抗體失去一部分電荷而相互凝集或沉淀，出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng);若無(wú)電解質(zhì)存在，則不出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第40頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分通常在血清學(xué)試驗(yàn)中，以8.5g/LNaCl溶液作為抗原抗體的稀釋液及反應(yīng)液，其中Na+和Cl-可分別中和膠體顆粒上的電荷，使膠體顆粒的電勢(shì)下降，形成可見(jiàn)的沉淀物或凝集物。但如果電解質(zhì)濃度過(guò)高，則會(huì)出現(xiàn)非特異性蛋白質(zhì)沉淀，即鹽析。補(bǔ)體參與的溶細(xì)胞反應(yīng)，除需要等滲的NaCl溶液外，還需適雖的Mg2+和Ca2+離子參與。

本文檔共43頁(yè)；當(dāng)前第41頁(yè)；編輯于星期三\9點(diǎn)25分（二）酸堿度Ag、Ab多為蛋白質(zhì)，具兩性電離特性，有其故有的PI,pH過(guò)高或過(guò)低均可影響Ag、Ab反應(yīng)。一般：pH6～8為宜，補(bǔ)體參與時(shí)pH7.2～7.4