保健食品毒理和功能

關(guān)于保健食品毒理和功能第1頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三主要內(nèi)容提綱中國保健食品簡介保健食品安全性毒理學(xué)檢驗(yàn)與評價保健食品新原料安全性毒理學(xué)評價原則保健食品安全性毒理學(xué)評價中存在的問題保健食品功能性檢驗(yàn)與評價保健食品功能評價方法更改情況第2頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三第一部分中國保健食品簡介第3頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三第二部分保健食品安全性毒理學(xué)

檢驗(yàn)及評價第4頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三主要內(nèi)容檢驗(yàn)評價依據(jù)審評基本要求選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則實(shí)驗(yàn)動物的選擇樣品的預(yù)處理原則毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目要點(diǎn)介紹毒理學(xué)安全性評價時應(yīng)考慮的問題審評結(jié)論的判定第5頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三毒性及功能檢驗(yàn)評價依據(jù)1996年3月衛(wèi)生部《保健食品的管理方法》

保健食品的標(biāo)準(zhǔn)、功能評價、審批程序和監(jiān)督管理辦法1996年7月GB15193《食品安全性毒理學(xué)評價程序和方法》

衛(wèi)生部《保健食品功能學(xué)評價程序和檢驗(yàn)方法》

僅包含了12項(xiàng)功能檢驗(yàn)及評價方法2001年7月衛(wèi)生部《保健食品功能學(xué)評價程序和檢驗(yàn)方法》

可受理和評價的功能調(diào)整到31項(xiàng)2003年2月衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評價技術(shù)規(guī)范》

將功能學(xué)、毒理學(xué)、功效成分及衛(wèi)生指標(biāo)檢驗(yàn)評價方法三者合一第6頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三審評的基本要求1.配方原（輔）料、用量、理化性質(zhì)2.劑量食用方法及用量3.工藝規(guī)格化產(chǎn)品符合配方、工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)4.批號注意批號是否一致,益生菌、奶制品等保質(zhì)期短的除外第7頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三1.毒理學(xué)評價的四個階段第一階段：急性毒性試驗(yàn)經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)：LD50，聯(lián)合急性毒性，一次最大耐受量試驗(yàn)第二階段：遺傳毒性試驗(yàn)，30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)遺傳毒性試驗(yàn)：原核細(xì)胞和真核細(xì)胞，體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)相結(jié)合Ames或基因突變試驗(yàn)；微核試驗(yàn)或染色體畸變試驗(yàn)；精子畸變試驗(yàn)等第三階段：亞慢性毒性試驗(yàn)

90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)第四階段：慢性毒性試驗(yàn)（包括致癌試驗(yàn)）選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則第8頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三2.無需進(jìn)行毒性試驗(yàn)的保健食品以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)為原料生產(chǎn)的；

1）以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式與傳統(tǒng)方式相同的

2）以水提物配制生產(chǎn)、服用量為原料常規(guī)用量，且資料未提示具有不安全性用已列入營養(yǎng)強(qiáng)化劑或營養(yǎng)素補(bǔ)充劑名單的營養(yǎng)素化合物為原料的，如其原料來源、生產(chǎn)工藝和產(chǎn)品質(zhì)量均符合國家有關(guān)要求；選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則第9頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三3.需進(jìn)行一階段和三項(xiàng)致突變毒性試驗(yàn)的保健食品屬于普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源的物質(zhì)且用水提以外的其它常用工藝生產(chǎn)的：（1）服用量與常規(guī)用量相同急性毒性、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)（2）服用量大于常規(guī)用量還需加做30天喂養(yǎng)試驗(yàn)，必要時進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)和第三階段毒性試驗(yàn)選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則第10頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則4.

需進(jìn)行一、二階段毒性試驗(yàn)的保健食品

以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)以及允許用作保健食品的物質(zhì)以外的動植物或動植物提取物、微生物、化學(xué)合成物等為原料生產(chǎn)的保健食品，原則上須進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗(yàn)，必要時進(jìn)行下一階段的毒性試驗(yàn)。衛(wèi)生部規(guī)定允許使用的動植物及其提取物或微生物為原料的。第11頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三5.需進(jìn)行一至三階段毒性試驗(yàn)的情況：一、二階段試驗(yàn)結(jié)果與國外產(chǎn)品不一致的國外少數(shù)國家或地區(qū)食用的原料或成分水提取物，大于常規(guī)服用量用水提以外的其它常用工藝生產(chǎn)的，大于常規(guī)用量選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則第12頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三6.需進(jìn)行一至四階段毒性試驗(yàn)的原料和成分

國內(nèi)外均無食用先例7.敏感指標(biāo)及敏感試驗(yàn)的保健食品

不同食用人群和（或）不同功能的保健食品選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的基本原則第13頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三對受試保健食品的要求單一已知化學(xué)成分，應(yīng)提供物理和化學(xué)性質(zhì)多種原料的配方產(chǎn)品，應(yīng)提供配方配方產(chǎn)品，必要時還應(yīng)提供各組分，功效成分的物理和化學(xué)性質(zhì)及其檢測報告提供原料來源、生產(chǎn)工藝、人的可能攝入量。使用說明書等有關(guān)資料受試物應(yīng)符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化產(chǎn)品第14頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三實(shí)驗(yàn)動物的選擇及給樣量1.根據(jù)各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的具體要求，合理選擇實(shí)驗(yàn)動物

常用大鼠和小鼠，品系不限，推薦使用近交系。2.動物應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l例》

清潔級或清潔級以上動物合格證號及動物實(shí)驗(yàn)室合格證號3.灌胃量

大鼠：10ml/kg?BW（若以水為溶劑，推薦20ml/kg?BW）小鼠：20ml/kg?BW第15頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三樣品的預(yù)處理原則1.介質(zhì)的選擇

應(yīng)選擇適合于受試動物的溶劑、乳化劑、助懸劑，要求無毒、與受試物不發(fā)生反應(yīng)、穩(wěn)定性好。常用的介質(zhì)有：蒸餾水、食用植物油、淀粉、明膠及羧甲基纖維素等。2.液體類

受試物濃縮倍數(shù)應(yīng)符合試驗(yàn)要求。濃縮方法不應(yīng)破壞其有效成份，常用的有60℃～70℃減壓或常壓蒸發(fā)、冷凍干燥。按工藝要求。第16頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三樣品的預(yù)處理原則3.袋泡茶類

處理方法與產(chǎn)品推薦飲用方法相同推薦用：80℃--90℃常壓用水浸泡30min

水量為受試物的10倍，提取2次，2次提取液合并濃縮至所需濃度標(biāo)明該濃縮液與受試物的比例第17頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三樣品的預(yù)處理原則4.含乙醇類（1）不需濃縮的受試物乙醇濃度<15％直接進(jìn)行試驗(yàn)乙醇濃度>15％乙醇濃度應(yīng)調(diào)至15％（2）需濃縮的受試物乙醇濃度<15％濃縮后調(diào)至原乙醇濃度乙醇濃度>15％濃縮后調(diào)至15％乙醇濃度在進(jìn)行乙醇濃度調(diào)整時必須用原酒基第18頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三樣品的預(yù)處理原則5.膨脹系數(shù)較高的受試物選擇可溶性介質(zhì)給受試物的方法：灌胃其最高濃度最大灌胃量時達(dá)不到人體推薦量的100倍，按采用實(shí)際達(dá)到的倍數(shù)標(biāo)明受試物的膨脹系數(shù)第19頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三樣品的預(yù)處理原則6.益生菌等微生物類保健食品在進(jìn)行Ames試驗(yàn)或體外細(xì)胞試驗(yàn)時需將受試物滅活。需濃縮的應(yīng)采用低溫干燥法或由企業(yè)提供所需濃度的受試物（附方法、技術(shù)參數(shù)）。7.以食品為載體的受試物

（1）有營養(yǎng)價值：按設(shè)計量進(jìn)行飼料的營養(yǎng)成份調(diào)整，提供詳細(xì)的說明。（2）大豆蛋白、乳清蛋白如質(zhì)量、工藝等符合食品標(biāo)準(zhǔn)和安全要求，允許去除。如僅以該原料生產(chǎn)的，可申請免做毒理學(xué)試驗(yàn)。第20頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目要點(diǎn)介紹急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗(yàn)骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)小鼠精子畸形試驗(yàn)小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)

30天喂養(yǎng)試驗(yàn)第21頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)?zāi)康模簻y定LD50，毒性分級。了解毒性強(qiáng)度、性質(zhì)和可能的靶器官，為進(jìn)一步的毒性試驗(yàn)提供劑量和觀察指標(biāo)的選擇依據(jù)。原理：急性毒性：經(jīng)口一次性、24h內(nèi)多次給予，短時間內(nèi)的毒性反應(yīng)。致死劑量通常用半數(shù)致死劑量LD50表示。急性聯(lián)合毒性：兩種或兩種以上的受試物，可能發(fā)生拮抗、相加或協(xié)同的聯(lián)合方式，可以根據(jù)一定的公式計算和判定標(biāo)準(zhǔn)來確定這三種不同的作用。第22頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)時間周期：一般為3周

3-5天，大、小鼠適應(yīng)期

7-14天，染毒及實(shí)驗(yàn)觀察期 發(fā)生動物死亡時，應(yīng)進(jìn)行大體解剖觀察和評價指標(biāo)：毒性反應(yīng)癥狀：各器官系統(tǒng)的異常表現(xiàn)（中樞、自主神經(jīng)、呼吸、心血管、胃腸、生殖泌尿系統(tǒng)、皮毛、粘膜等）及體重變化死亡情況：死亡的時間、數(shù)量、性別、表現(xiàn)等。大體尸檢結(jié)果：如果發(fā)生死亡動物第23頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三急性毒性（LD50）劑量分級表級別大鼠口服LD50，mg/kg相當(dāng)于人的致死量mg/kgg/人極毒<1稍嘗0.05劇毒1-50500-40000.5中等毒51-5004000-300005低毒501-500030000-25000050實(shí)際無毒5001500000500無毒>15000>5000002500第24頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果的判定：1.LD50＜人可能攝入量的100倍，放棄；反之繼續(xù)下一步試驗(yàn)。2.LD50≥10g/kgbw或按最大耐受量染毒而未出現(xiàn)動物死亡的，可繼續(xù)下一步試驗(yàn)。第25頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗(yàn)?zāi)康模簷z測受試物的誘變性，預(yù)測其遺傳危害和潛在致癌作用的可能性。時間周期：一般為2周

第一周，鼠傷寒沙門氏菌種、試劑、培養(yǎng)基準(zhǔn)備 第二周，染毒，培養(yǎng)48h，菌落計數(shù)劑量設(shè)計：決定受試物最高劑量的因素是對細(xì)菌的毒性及其溶解度。最低劑量為0.2ug/皿；最高劑量為5mg/皿，或最大溶解劑量，最大飽和劑量以及最小毒性劑量?？稍O(shè)五個劑量組，組間距不超過5倍。同時設(shè)：陽性對照組，溶劑對照組和未處理對照組。第26頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三鼠傷寒沙門氏菌（Ames）試驗(yàn)觀察及評價指標(biāo)：各受試物組及三個對照組的四種菌株（TA97a，TA98，TA100和TA102）分別在加和不加S9情況下的菌落計數(shù)。結(jié)果評價（摻入法）：受試物組回變菌落數(shù)增加一倍以上（即回變菌落數(shù)≥2×未處理對照組數(shù)），并有劑量反應(yīng)關(guān)系或有可重復(fù)的陽性反應(yīng)，即可判試驗(yàn)陽性。第27頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)?zāi)康模簷z測整體動物體內(nèi)骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核發(fā)生率，以評價受試物致突變的可能性。原理：微核是在細(xì)胞有絲分裂后期染色體有規(guī)律地進(jìn)入子細(xì)胞形成細(xì)胞核時，仍然留在細(xì)胞質(zhì)中的色單體或染色體的無著絲點(diǎn)斷片。末期之后，單獨(dú)形成一個或幾個規(guī)則的次核，被包含在細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，因比主核小，故稱為微核。第28頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)時間周期：一般為2周

3-5天適應(yīng)期 小鼠經(jīng)口染毒，30h給受試物法 取胸骨或股骨，收集骨髓，涂片，染色，鏡檢劑量設(shè)計：至少設(shè)置3個劑量，最高劑量組為動物出現(xiàn)嚴(yán)重中毒表現(xiàn)和/或個別動物出現(xiàn)死亡的劑量。低劑量組應(yīng)不出現(xiàn)毒性反應(yīng)。一般取LD50的1/2、1/4、1/8作為三個劑量。當(dāng)受試物的LD50≥10g/kg.bw時，最高劑量通常采用10g/kg.bw。同時設(shè)陽性對照組和溶劑對照組。第29頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)觀察及評價指標(biāo)：每只動物計數(shù)1000個嗜多染紅細(xì)胞，記錄含有微核的細(xì)胞數(shù)，并計算微核千分率。同時觀察嗜多染紅細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的比例。結(jié)果評價：受試物組與對照組微核率相比，增高呈劑量反應(yīng)關(guān)系并有統(tǒng)計學(xué)意義，試驗(yàn)結(jié)果為陽性。第30頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)?zāi)康模簷z測受試物對整體動物骨髓細(xì)胞染色體畸變的致突變性，以評價其致突變的可能性。原理：當(dāng)受試物作用于細(xì)胞周期G1期和S期時，可誘發(fā)染色體型畸變，而作用于G2期時則誘發(fā)染色體單體型畸變。給動物腹腔注射秋水仙素，抑制細(xì)胞分裂時紡錘體的形成，增加中期分裂相細(xì)胞的比例，并使染色體絲縮短、分散，輪廓清晰。在顯微鏡下便可觀察染色體數(shù)目和形態(tài)。第31頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)時間周期：一般為3周

3-5天適應(yīng)期 小鼠或大鼠經(jīng)口染毒2-4次，每次間隔24h，在末次染毒18-24h進(jìn)行取材（取材前2-4h，腹腔注射秋水仙素）。 取股骨，收集骨髓，制片，染色，鏡檢劑量設(shè)計：同骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)第32頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)觀察及評價指標(biāo)：每只動物分析100個中期相細(xì)胞，每個劑量組不少于1000個。記錄染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果評價：受試物組與對照組染色體畸變率相比，增高呈劑量反應(yīng)關(guān)系并有統(tǒng)計學(xué)意義，試驗(yàn)結(jié)果為陽性。第33頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三小鼠精子畸形試驗(yàn)?zāi)康模簷z測整體動物體內(nèi)精子畸形發(fā)生率，以評價受試物對體內(nèi)生殖細(xì)胞的致突變作用。原理：小鼠精子畸形受基因控制，具有高度遺傳性，許多常染色體及X、Y性染色體基因決定精子形態(tài)。精子的畸形主要是指形態(tài)的異常，已知精子的畸形是決定精子形成的基因發(fā)生突變的結(jié)果。因此形態(tài)的改變提示有關(guān)基因及其蛋白產(chǎn)物的改變。第34頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三小鼠精子畸形試驗(yàn)時間周期：一般為7周

3-5天適應(yīng)期 小鼠經(jīng)口連續(xù)染毒5天，于首次給樣后的35天處死動物 取兩側(cè)附睪，收集精子，滴片，染色，鏡檢劑量設(shè)計：同骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)第35頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三小鼠精子畸形試驗(yàn)觀察及評價指標(biāo)：每只動物檢查1000個精子，記錄精子畸形數(shù)目及類型。結(jié)果評價：受試物組與對照組精子畸變率相比，增高呈劑量反應(yīng)關(guān)系并有統(tǒng)計學(xué)意義，試驗(yàn)結(jié)果為陽性。第36頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)?zāi)康模簷z測整體動物睪丸染色體畸變發(fā)生率，以評價受試物對整體哺乳動物睪丸生殖細(xì)胞的致突變性。原理：不同周期的雄性生殖細(xì)胞對化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，多數(shù)情況下化學(xué)誘變劑誘發(fā)染色體畸變必須經(jīng)過DNA復(fù)制期，故在前細(xì)線期處理。第12～14d采樣，以觀察作用于前細(xì)線期引起的精母細(xì)胞染色體畸變效應(yīng)。第37頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)時間周期：一般為7周

3-5天適應(yīng)期 小鼠經(jīng)口連續(xù)染毒5天，與首次給樣后的12-14天處死動物取材，（取材前6h，腹腔注射秋水仙素）。取兩側(cè)睪丸，收集生殖細(xì)胞，滴片，染色，鏡檢劑量設(shè)計：同骨髓細(xì)胞微核試驗(yàn)第38頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三小鼠睪丸染色體畸變試驗(yàn)觀察及評價指標(biāo)：每只動物分析100個中期相細(xì)胞，記錄染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的改變（包括斷片、易位、畸變細(xì)胞率、常染色體單價體、性染色體單價體等）。結(jié)果評價：受試物組與對照組的斷片、易位、畸變細(xì)胞率、常染色體單價體、性染色體單價體等差異有統(tǒng)計學(xué)意義，試驗(yàn)結(jié)果為陽性。第39頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三遺傳毒性試驗(yàn)組合試驗(yàn)結(jié)果的判定：如三項(xiàng)致突變試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)，微核或骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn)，精子畸形或睪丸染色體畸變試驗(yàn)）中，體外或體內(nèi)有一項(xiàng)或以上陽性，一般應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。如三項(xiàng)試驗(yàn)均為陰性，則可繼續(xù)進(jìn)行下一步的毒性試驗(yàn)。第40頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三30天喂養(yǎng)試驗(yàn)?zāi)康模杭毙远拘栽囼?yàn)的基礎(chǔ)上，此試驗(yàn)可進(jìn)一步了解毒性作用，特別是觀察對生長發(fā)育的影響，并可初步估計最大觀察到的無作用劑量，估計亞慢性攝入的危害性。原理：以不同劑量受試物每日經(jīng)口給予各組實(shí)驗(yàn)動物，連續(xù)30天。染毒期間每日密切觀察動物的毒性反應(yīng)，染毒結(jié)束后進(jìn)行大體解剖、血生化及病理檢查，以此觀察重復(fù)喂食不同劑量的受試物對動物引起的有害作用。第41頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三30天喂養(yǎng)試驗(yàn)時間周期：在獲得了急性毒性數(shù)據(jù)后，一般為2月

3-5天，大鼠適應(yīng)期

30天，染毒及實(shí)驗(yàn)觀察期 再進(jìn)行大體解剖、血液、生化、器官病理檢查。第42頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三30天喂養(yǎng)試驗(yàn)劑量設(shè)計：至少設(shè)三個劑量組和一個對照組。高劑量應(yīng)能引起動物明顯毒效應(yīng)但不造成動物死亡。低劑量應(yīng)不出現(xiàn)任何毒作用，同時在這二劑量之間設(shè)幾個中間劑量組。

對于能獲得LD50的受試物：最高劑量為10％～25％的LD50，最低劑量組至少為人可能攝入量的3倍。

對于不能獲得LD50的受試物：最高劑量為人可能攝入量的100倍，或按最大灌胃劑量或在飼料中的最大摻入量。第43頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三30天喂養(yǎng)試驗(yàn)觀察及評價指標(biāo)：一般情況觀察：每日的表現(xiàn)、行為、中毒和死亡情況。每周1次體重及2次食物攝入量，計算食物利用率。血液學(xué)指標(biāo)：喂養(yǎng)結(jié)束后測定血紅蛋白、紅和白細(xì)胞總數(shù)及分類，必要時測定血小板或網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)等指標(biāo)。生化學(xué)指標(biāo)：喂養(yǎng)結(jié)束后測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌肝、血糖、白蛋白、總蛋白、膽固醇和甘油三酯。病理檢查：大體解剖、臟器稱重、組織病理學(xué)檢查。第44頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三30天喂養(yǎng)試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果的判定：對于只要求進(jìn)行一、二階段試驗(yàn)者，最大未觀察到有害作用劑量≥人可能攝入量的100倍，綜合其它試驗(yàn)結(jié)果可初步做出安全性評價。最小觀察到有害作用劑量≤人可能攝入量的100倍，或觀察到毒性反應(yīng)的最小劑量組其受試物在飼料中比例≤10％，放棄。在中低劑量組中個別指標(biāo)與對照組相比有差異，應(yīng)綜合分析，決定取舍或進(jìn)行下一步毒理試驗(yàn)。第45頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三其它試驗(yàn)結(jié)果判斷

傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)：需大于或等于人攝入量的100倍。在50倍至100倍之間需進(jìn)行安全性評價，小于50倍需放棄。

90天喂養(yǎng)試驗(yàn)、繁殖試驗(yàn)：1.僅在國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，需大于或等于人攝入量的100倍。2.國內(nèi)外均無食用歷史的原料或成分時，需大于或等于人攝入量的300倍。在100倍至300倍之間需進(jìn)行慢性毒性試驗(yàn)，小于100倍需放棄。第46頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三其它試驗(yàn)結(jié)果判斷慢性毒性試驗(yàn)：以LD50或30天喂養(yǎng)試驗(yàn)的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計受試物各劑量組，未見有毒性作用。

致癌試驗(yàn)陽性判定依據(jù)：腫瘤只發(fā)生在實(shí)驗(yàn)組動物，對照組中無腫瘤發(fā)生。實(shí)驗(yàn)組和對照組均發(fā)生腫瘤，但實(shí)驗(yàn)組發(fā)生率高。實(shí)驗(yàn)組和對照組腫瘤發(fā)生率無明顯差異，但實(shí)驗(yàn)組發(fā)生時間較早。符合以上三項(xiàng)中的情況之一，并經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理有統(tǒng)計學(xué)意義，可認(rèn)為致癌試驗(yàn)陽性。第47頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三安全性評價的科學(xué)性和藝術(shù)性安全性評價的藝術(shù)性：1.動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推到人必須考慮動物與人的種屬差異；2.安全性標(biāo)準(zhǔn)與社會經(jīng)濟(jì)基礎(chǔ)、技術(shù)能力的相符性；3.安全性標(biāo)準(zhǔn)與社會和公眾利益之間的平衡性。結(jié)論：在對化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行科學(xué)地安全性評價之后，應(yīng)結(jié)合試驗(yàn)的局限性，社會經(jīng)濟(jì)狀況，人們的生活習(xí)慣等因素，對評價結(jié)果作出一個合理的分析，為衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的制定提供具有實(shí)際指導(dǎo)意義的依據(jù)。第48頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三應(yīng)綜合考慮的問題1.試驗(yàn)指標(biāo)的統(tǒng)計學(xué)意義和生物學(xué)意義在分析試驗(yàn)組與對照組指標(biāo)統(tǒng)計學(xué)的顯著性時，應(yīng)根據(jù)其有無劑量反應(yīng)關(guān)系及與本實(shí)驗(yàn)室的歷史性對照值范圍比較的原則,來綜合考慮指標(biāo)差異有無生物學(xué)意義。2.生理作用與毒性作用對實(shí)驗(yàn)中某些指標(biāo)的異常改變，在結(jié)果分析時要注意區(qū)分是生理學(xué)表現(xiàn)還是受試物的毒性作用。第49頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三應(yīng)綜合考慮的問題3.時間-毒性效應(yīng)關(guān)系對由受試物引起的毒性效應(yīng)進(jìn)行分析評價時，要考慮在同一劑量水平下毒性效應(yīng)隨時間的變化情況。4.特殊人群和敏感人群對孕婦、乳母或兒童食用的保健食品，應(yīng)特別注意其胚胎毒性或生殖發(fā)育毒性、神經(jīng)毒性和免疫毒性。第50頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三應(yīng)綜合考慮的問題5.人的可能攝入量較大的保健食品應(yīng)考慮給予受試物量過大時，可能影響營養(yǎng)素攝入量及其生物利用率，從而導(dǎo)致某些毒理學(xué)表現(xiàn)，而非受試物本身的毒性作用所致。6.含乙醇的保健食品對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的某些指標(biāo)的異常改變，在結(jié)果分析評價時應(yīng)注意區(qū)分是乙醇本身還是其它成分的作用。第51頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三應(yīng)綜合考慮的問題7.動物年齡對試驗(yàn)結(jié)果的影響

對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的某些指標(biāo)的異常改變，要考慮是否因動物年齡選擇不當(dāng)所致。8.安全系數(shù)

鑒于動物、人的種屬和個體之間的生物學(xué)差異，安全系數(shù)通常為100。第52頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三應(yīng)綜合考慮的問題9.人體資料

在評價保健食品的安全性時，應(yīng)盡可能收集人群食用受試物后反應(yīng)的資料。10.綜合評價

在對保健食品進(jìn)行最后評價時，必須綜合考慮受試物的原料來源、理化性質(zhì)、毒性大小、代謝特點(diǎn)、蓄積性、接觸的人群范圍、食品中的使用范圍、人的可能攝入量及保健功能等因素，確保其對人體健康的安全性。第53頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三應(yīng)綜合考慮的問題11.保健食品安全性的重新評價：很早的毒性評價可能因?yàn)楫?dāng)時科學(xué)水平和技術(shù)條件的限制，現(xiàn)已不適用需重新評價。12.若受試物摻入飼料的最大加入量（10％）或液體受試物經(jīng)濃縮后仍達(dá)不到最大觀察到有害作用劑量為人的可能攝入量的規(guī)定倍數(shù)時，如何綜合其它的毒性試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行安全性評價。第54頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三審評結(jié)論的判定1.認(rèn)可毒理學(xué)試驗(yàn)：試驗(yàn)設(shè)計合理，操作規(guī)范，試驗(yàn)結(jié)果能夠證明受試物的安全性。2.屬以下幾種情況之一，補(bǔ)充資料后建議批準(zhǔn)：（1）檢驗(yàn)報告格式不規(guī)范，需要重新出具檢驗(yàn)報告毒理學(xué)試驗(yàn)報告。（2）數(shù)據(jù)偏離歷史對照較大，需檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)做出解釋。（3）未提供某些試驗(yàn)數(shù)據(jù)，需要補(bǔ)充提供。第55頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三審評結(jié)論的判定3.重做試驗(yàn)，大會再審，屬以下幾種情況之一：（1）由于實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范，根據(jù)提供的檢驗(yàn)報告無法評價產(chǎn)品的安全性，需要做除30天/90天喂養(yǎng)試驗(yàn)以外的毒理學(xué)試驗(yàn)；（2）已有數(shù)據(jù)提示可能存在安全性問題，但難以下結(jié)論，需要重復(fù)試驗(yàn)。第56頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三（1）毒理學(xué)評價的結(jié)果表明產(chǎn)品在推薦劑量下對人體具有一定的毒性，存在安全性問題。（2）產(chǎn)品的原料、配方存在明顯的安全性問題，如配方含有“可用于保健食品的原料”名單以外的原料，且未進(jìn)行新資源食品安全性毒理學(xué)評價。（3）選擇安全性毒理學(xué)試驗(yàn)不符合程序規(guī)定，未完成相應(yīng)階段的毒理學(xué)試驗(yàn)。4.對產(chǎn)品的安全性不予認(rèn)可的情況如下（一）：第57頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三（4）毒理、功能、興奮劑與衛(wèi)生學(xué)、穩(wěn)定性試驗(yàn)樣品的批號不一致。（5）未按規(guī)定提供安全性毒理學(xué)評價資料的。（6）30天/90天喂養(yǎng)試驗(yàn)劑量設(shè)計不合理或某些指標(biāo)異常，結(jié)果不可信。4.對產(chǎn)品的安全性不予認(rèn)可的情況如下(二)：第58頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三第三部分保健食品新原料安全性

毒理學(xué)評價原則第59頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三保健食品新原料（以下簡稱新原料）是指不在國家食品藥品監(jiān)督管理局公布的可用于保健食品、衛(wèi)生部公布或批準(zhǔn)可以食用以及生產(chǎn)普通食品的范圍內(nèi)，擬用于保健食品的原料。國家食品藥品監(jiān)督管理局和國家有關(guān)部門規(guī)定的不可用于保健食品以及禁止使用的物品，不得作為新原料。保健食品新原料定義第60頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三在已批準(zhǔn)的保健食品中使用過，或衛(wèi)生部已批準(zhǔn)為新資源食品的原料，符合以下情況的仍按新原料進(jìn)行管理：未列入國家食品藥品監(jiān)督管理局公布的可用于保健食品的物品名單；尚未列入衛(wèi)生部公布或批準(zhǔn)的食品新資源或新資源食品名單內(nèi)；衛(wèi)生部已批準(zhǔn)為食品新資源或新資源食品，但保健食品注冊申請人與食品新資源或新資源食品生產(chǎn)批件中載明的申報單位不一致。保健食品新原料定義第61頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三評價新原料安全性的基本原則符合國家標(biāo)準(zhǔn)和衛(wèi)生要求，無國家標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)當(dāng)提供行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或自行制定并在相關(guān)部門備案的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；新原料的名稱、物種（基源）、生物學(xué)或生態(tài)學(xué)特征、來源及使用部位應(yīng)確切；加工工藝安全合理，質(zhì)量穩(wěn)定、可控；主要成分（或組成）、化學(xué)結(jié)構(gòu)明確，含量穩(wěn)定；適宜人群范圍和可能攝入量明確，確定依據(jù)充分；第62頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三評價新原料安全性的基本原則國內(nèi)外安全性毒理學(xué)文獻(xiàn)資料、人體食用情況的檢索報告及流行病學(xué)資料顯示，該新原料無食用中毒或有害作用史；安全性毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果顯示，該原料在可能攝入量下對人體不產(chǎn)生急性、慢性或其它潛在的健康危害；微生物類新原料必須有食用習(xí)慣和安全食用歷史，培養(yǎng)基、菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害。第63頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇①無食用史需做四階段試驗(yàn)②局部地區(qū)有食用史需做三階段試驗(yàn)

可只做一、二階段實(shí)驗(yàn)的包括

1）推薦食用量未超過人群常規(guī)用量的新原料，若根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)資料及成分分析，未發(fā)現(xiàn)有毒或毒性甚微不至對健康構(gòu)成損害，或者較大數(shù)量人群有長期食用歷史且未發(fā)現(xiàn)有害作用的

2）已有權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行系統(tǒng)的毒理學(xué)安全性評價，且有資料證明所用原料與其一致

如試驗(yàn)結(jié)果與權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行的評價不一致，需進(jìn)入下階段的試驗(yàn)新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求

第64頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇③多個國家或國內(nèi)多數(shù)地區(qū)廣泛食用

1）推薦食用量未超過人群常規(guī)用量：先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒理學(xué)試驗(yàn)

2）推薦食用量超過人群常規(guī)用量：進(jìn)行第一、二、三階段的毒性試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果決定是否進(jìn)行第四階段毒性試驗(yàn)。

新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求第65頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇④根據(jù)新原料的特性、作用機(jī)制、已有的試驗(yàn)資料及產(chǎn)品的適宜人群等信息，有針對性地選擇敏感試驗(yàn)、敏感動物、敏感指標(biāo)，以全面了解新原料的毒性。

新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求第66頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇⑤微生物類新原料除按上述要求進(jìn)行安全性毒理學(xué)試驗(yàn)外，還應(yīng)進(jìn)行以下試驗(yàn)：

1）菌種毒力試驗(yàn)；

2）耐藥性試驗(yàn)；

3）有可能產(chǎn)生抗菌素、真菌毒素或其他活性物質(zhì)的菌種，應(yīng)進(jìn)行有關(guān)抗菌素、真菌毒素或其他活性物質(zhì)的檢測；

4）菌種代謝產(chǎn)物分析及其不產(chǎn)生有毒有害作用的試驗(yàn)。

第67頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求毒性試驗(yàn)的劑量設(shè)計1、高劑量組應(yīng)出現(xiàn)毒性作用但不引起動物死亡，低劑量組應(yīng)不出現(xiàn)毒性作用，并求出未觀察到有害作用劑量（NOAEL）。2、若根據(jù)已掌握的資料（包括第一、二階段的毒性試驗(yàn)及預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果等）判定新原料毒性較小，或人體推薦量較大，則試驗(yàn)最高劑量應(yīng)為可給予的最大劑量（即：飼料中最大摻入量或最大灌胃濃度下一次最大灌胃量）。第68頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三新原料安全性毒理學(xué)試驗(yàn)要求毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果新原料的未觀察到有害作用劑量（NOAEL）應(yīng)大于或等于人群可能攝入量的100倍；如果人體推薦攝入量較大，試驗(yàn)中可給予的最大劑量小于人群可能攝入量的100倍，則在可給予的最大劑量下不應(yīng)觀察到有害作用。第69頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三第四部分保健食品安全性毒理學(xué)

評價中存在的問題第70頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題鑒于制訂此程序的歷史背景與目前情況有所不同，因此，對保健食品的安全性評價時，出現(xiàn)了選擇毒理試驗(yàn)的項(xiàng)目、劑量、樣品前處理等問題，現(xiàn)就上述問題一并提出供討論。第71頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題

充分了解受試物1.要求提供規(guī)格化產(chǎn)品，至少是中試產(chǎn)品。符合既定的配方，生產(chǎn)工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。2.仔細(xì)閱讀配方以了解受試物的物理、化學(xué)性質(zhì)（包括化學(xué)結(jié)構(gòu)、純度、穩(wěn)定性等）。3.了解生產(chǎn)工藝。4.按產(chǎn)品說明書的最大人體推薦量進(jìn)行劑量設(shè)計。第72頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題

動物年齡主要指30天和90天喂養(yǎng)試驗(yàn)，“程序”中規(guī)定用離乳大鼠，而保健食品應(yīng)視具體情況而異。最典型的是人參、鹿茸、減肥產(chǎn)品，并非受試物本身有毒影響了動物的生長發(fā)育，而是因?yàn)檫@類產(chǎn)品的服用對象是成人，所用的動物是離乳大鼠。第73頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇配方中含有僅限局部地區(qū)人群食用而又不在“51號”名單上的原料，只對產(chǎn)品進(jìn)行了兩階段毒理試驗(yàn)，而未對原料本身按要求進(jìn)行毒理學(xué)評價，有的進(jìn)行了評價但給予動物受試物的方式與實(shí)際食用方式不一樣，如袋泡茶摻在飼料中給予動物。含“51號”文附錄二名單上原料的產(chǎn)品只做了LD50和三項(xiàng)致空變試驗(yàn)。第74頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的選擇藥食同源產(chǎn)品經(jīng)有機(jī)溶劑提取未做毒理試驗(yàn)，或只做LD50和微核試驗(yàn)。從食品中提取某一成分的粗提物只做了LD50和三項(xiàng)致突變試驗(yàn)，如大豆異黃酮。配方中僅有單一成分，如人參、西洋參、蜂王漿不必進(jìn)行全部二階段毒理試驗(yàn)。第75頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題樣品前處理（一）液體類（二）酒類（三）固體類（四）菌類（五）以某些食品為載體的保健食品：如富含微量元素的雞蛋、南瓜粉等第76頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題LD50中存在的問題

1.經(jīng)口LD50還用對照組。

2.不寫禁食時間。

3.做到了21.5g/KgBW,結(jié)論是﹥10g/KgBW。

4.將受試物摻入飼料吃24小時。第77頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題Ames實(shí)驗(yàn)

1.以油為載體的產(chǎn)品直接倒入平皿

2.工藝是低溫提取或低溫冷凍干燥的產(chǎn)品用8磅15分鐘高壓滅菌。

3.有溶劑對照而無自發(fā)回變對照。

4.菌落回變數(shù)隨劑量的增加而增多已超過正常值而不是二倍而出具了合格的報告第78頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題Ames實(shí)驗(yàn)

5.有抑菌作用的產(chǎn)品不進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)找出抑菌劑量而出具了5mg/皿菌落回變數(shù)正常的報告。

6.產(chǎn)品中明顯含有組氨酸，而不進(jìn)行除組氨酸的前處理。

7.應(yīng)該用XAD-2樹脂對樣品進(jìn)行前處理

8.沒有理解5mg/皿含義：系指有效成份，如某些產(chǎn)品含有80%的糖，沒進(jìn)行樣品前處理或向送樣方提出要求，直接用產(chǎn)品做5mg/皿，實(shí)際上是1mg/皿。第79頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題微核、精子畸形以及睪丸染色體畸變試驗(yàn)

1.微核試驗(yàn)：幾份報告中都有陽性對照的數(shù)據(jù)，而這幾份原始記錄中皆無陽性對照。

2.精子畸形試驗(yàn)：陽性對照組精子畸形率﹤3.4%，即判斷陰性對照組與陽性對照組相比差異有顯著性P﹤0.05。（正?；温蕿?.8-3.4%）。

3.睪丸染色體畸變試驗(yàn)：陽性對照持續(xù)應(yīng)用一年以上。第80頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題

30天或90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1.雌性鼠的體重比雄性鼠還重或一樣重

148.33±8.38172.28±10.93194.82±10.92215.46±14.68231.50±15.15189.83±14.66239.52±17.56288.33±16.92324.14±19.80357.24±22.7267891014.03±2.0330.68±3.2247.61±5.3579.52±6.70118.53±7.1214.44±2.0730.62±4.5649.02±6.1986.86±8.98137.72±11.6912345雄（n=30)雌（n=30)雄（n=30)雌（n=30)體重(g)周齡（周）體重(g)周齡（周）上表為SD大鼠正常體重第81頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題

30天或90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)2.食物利用率雌雄分不開，或?yàn)閷⒋?、雄性大鼠食物利用率拉開差距，雌性和雄性大鼠的進(jìn)食量基本一致。3.大鼠的進(jìn)食量越來越高，雌性大鼠700多克、4.雄性大鼠600多克，而體重與食物利用率和以前的差不多。5.劑量設(shè)計：相當(dāng)于推薦量（以g/KgBW計）的6.56、26和105倍，這是先設(shè)計再做試驗(yàn)，還是先做試驗(yàn)再設(shè)計？6.受試物摻入飼料的量高達(dá)18%，袋泡茶摻入飼料給予動物。

第82頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題

30天或90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)7.動物攝入飼料的量在30天喂養(yǎng)試驗(yàn)以體重的10%計，90天喂養(yǎng)試驗(yàn)以體重的8%計，這是經(jīng)過大量資料統(tǒng)計得出，但將受試物以10-20%的濃度飲水給予動物，又不計飲水量，與報告的劑量設(shè)計是否基本一致？有的按每100gBw給10ml含有受試物的水，飲畢再給飲用水？8.有的試驗(yàn)動物體重增長緩慢，解釋是受試物不好吃。9.生化指標(biāo)：不做TG、AST；TC高達(dá)2.8mmol/L；BUN12.9mmol/L。第83頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題

30天或90天喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)10.以大鼠為試驗(yàn)動物測尿酸，大鼠的代謝與人不完全一樣，可將尿酸轉(zhuǎn)化為尿囊素排出。11.病理報告：心肝脾無毒性損傷，兩個產(chǎn)品，兩份報告來自同一檢測單位；A4紙寫了一大篇，詳細(xì)描述了病理組織結(jié)構(gòu)，沒有一點(diǎn)異常，四個產(chǎn)品、四份報告來源同一檢驗(yàn)單位；寫一小段也比較詳細(xì)的描述了病理組織結(jié)構(gòu)，亦無任何異常三個產(chǎn)品、三份報告亦來源于同一檢驗(yàn)單位。第84頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)其劑量設(shè)計比30天喂養(yǎng)還高，程序已明確以亞急性試驗(yàn)的最大無作用劑量為高劑量，目的是：找強(qiáng)致畸物，即具有致畸作用，但無母體毒性出現(xiàn)，這種受試物致畸作用往往較強(qiáng)第85頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三存在的問題其他典型問題推薦量較大的產(chǎn)品，同一檢測單位，30天喂養(yǎng)試驗(yàn)進(jìn)行了樣品前處理達(dá)到足夠倍數(shù)，但LD50、三項(xiàng)致突變試驗(yàn)未進(jìn)行樣品前處理，相當(dāng)于人推薦量的倍數(shù)很低；樣品進(jìn)行了前處理但折合到樣品的量不一致；樣品進(jìn)行了前處理，但報告中寫取一定量的樣品用回旋蒸發(fā)儀濃縮至所需濃度，劑量設(shè)計寫的是25、50、100ml/KgBw；有的報告要從字里行間為依據(jù)替檢測單位計算出劑量設(shè)計是否正確；Ames試驗(yàn)的劑量以每皿百分之多少計。第86頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三第五部分保健食品功能性檢驗(yàn)及評價第87頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三主要內(nèi)容基本要求（一般程序）動物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求各功能學(xué)試驗(yàn)主要指標(biāo)評審要求第88頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三保健食品功能評價的基本要求1.對受試樣品的要求提供樣品物理、化學(xué)性質(zhì)的有關(guān)資料必須是規(guī)格化的定型產(chǎn)品提供衛(wèi)生學(xué)和毒理學(xué)檢驗(yàn)報告，樣品必須同一批次提供功效成分和特征成分或營養(yǎng)成分的名稱及含量2.對受試樣品載體的要求以乙醇和糖為載體的樣品必須提供乙醇和糖的含量第89頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三1.受試物所提供的受試物為組成成分、比例及純度與實(shí)際產(chǎn)品相同的樣品；必須在保質(zhì)期內(nèi)。2.受試物的預(yù)處理（具體方法同安全性毒理學(xué)評價）處理方法需在試驗(yàn)報告中詳細(xì)描述必須說明受試物濃縮或稀釋倍數(shù)、濃度，據(jù)此計算出的給予劑量動物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求第90頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三

3.實(shí)驗(yàn)動物、受試物給予方式及時間（1）實(shí)驗(yàn)動物：性別單一性別年齡依試驗(yàn)要求進(jìn)行選擇數(shù)量大鼠每組8-12只小鼠每組10-15只其余要求同安全性毒理學(xué)評價要求動物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求第91頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三（2）受試物給予方式：必須經(jīng)口給予，首選灌胃；若選擇飲水或摻入飼料，最高劑量不超過10％；提供每日每劑量組平均飲水量、食物攝入量及周食物利用率（3）給樣時間：根據(jù)具體功能主要指標(biāo)而定，7天-120天，一般為30天。動物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求第92頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三

4.劑量設(shè)計原則（1）根據(jù)產(chǎn)品說明書注明的食用方法及用量，確定功能學(xué)試驗(yàn)劑量設(shè)計是否合理。（2）進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)時至少設(shè)三個劑量組，一個陰性對照組，必要時設(shè)陽性對照組或空白對照組。以大鼠為實(shí)驗(yàn)動物必須有相當(dāng)于人體推薦量（折算為每公斤體重）的5倍劑量組。以小鼠為實(shí)驗(yàn)動物必須有相當(dāng)于人體推薦量（折算為每公斤體重）的10倍劑量組。最高劑量組不超過30倍，還必須在毒理學(xué)評價確定的安全劑量范圍內(nèi)。當(dāng)載體或輔料本身可能具有與受試物相同的功能時，應(yīng)設(shè)載體對照。動物功能學(xué)試驗(yàn)基本要求第93頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求1.觀察對象的選擇

（1）合理選擇受試者按照《保健食品檢驗(yàn)與評價技術(shù)規(guī)范（2003年）》規(guī)定的試驗(yàn)對象納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，并同時考慮試食設(shè)計要求、受試樣品的性質(zhì)等因素。（2）人數(shù)試食組和對照組的有效例數(shù)不少于50人，且試驗(yàn)的脫離率一般不得超過10%。試驗(yàn)報告中必須注明脫離率，否則應(yīng)予以補(bǔ)充說明。（3）均衡性試驗(yàn)組間年齡、性別、社會狀況構(gòu)成、身體狀況以及試驗(yàn)開始時各項(xiàng)功能主要指標(biāo)均衡可比。第94頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求2.倫理學(xué)審查要點(diǎn)（1）保證受試對象的食用安全。必須在衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn)、動物毒理學(xué)安全性試驗(yàn)及興奮劑檢測（僅限改善生長發(fā)育、減肥功能)完成之后確定產(chǎn)品是安全的，符合有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求的情況下再進(jìn)行。原則上還應(yīng)在動物功能學(xué)試驗(yàn)證明其有效的前提下進(jìn)行。注意：報告中應(yīng)注明試驗(yàn)開始日期和報告日期。開始時間應(yīng)晚于其它試驗(yàn)報告時間。如果試驗(yàn)在不同單位進(jìn)行的，必須提供同批號的受試樣品。人體試驗(yàn)必須得到檢查單位倫理學(xué)審查委員會的批準(zhǔn)方能進(jìn)行，送審資料必須有審查委員的簽字。第95頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求（2）受試者在試驗(yàn)開始前應(yīng)進(jìn)行常規(guī)體檢主觀感覺生理指標(biāo)，癥狀和體征。常規(guī)的血液學(xué)指標(biāo)生化指標(biāo)功效性指標(biāo)，即與保健作用有關(guān)的指標(biāo)，如抗氧化、減肥等方面的指標(biāo)。兒童一般不要求測心電圖、胸透、腹部B超及肝、腎功能項(xiàng)改善生長發(fā)育、緩解視疲勞、輔助改善記憶功能不要求便常規(guī)，其他人體試驗(yàn)便常規(guī)為必做項(xiàng)目。第96頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三人體功能學(xué)試驗(yàn)基本要求（3）報告中需提供必要的體檢常規(guī)項(xiàng)目資料及詳細(xì)的數(shù)據(jù)。（4）對于選擇的受試人群需要長期服藥的試驗(yàn)，受試者必須在服藥的基礎(chǔ)上進(jìn)行試食試驗(yàn)。（5）如需與醫(yī)院共同完成的試驗(yàn)，必須選擇三級甲等醫(yī)院，報告中應(yīng)同時加蓋兩單位公章，同時需提供三級甲等醫(yī)院的等級證明。（6）改善生長發(fā)育和減肥功能的產(chǎn)品在人體功能試驗(yàn)進(jìn)行前需提供興奮劑檢測報告。第97頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)（一）只要求動物實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目有：1.增強(qiáng)免疫力功能檢驗(yàn)方法主要指標(biāo)：細(xì)胞免疫功能體液免疫功能單核－巨噬細(xì)胞功能

NK細(xì)胞活性測定判定：四項(xiàng)指標(biāo)中任兩項(xiàng)結(jié)果陽性。注意事項(xiàng)：不認(rèn)可增強(qiáng)單項(xiàng)免疫力功能。第98頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)2.改善睡眠功能檢驗(yàn)方法主要指標(biāo)：戊巴比妥納睡眠時間實(shí)驗(yàn)巴比妥鈉睡眠潛伏期實(shí)驗(yàn)戊巴比妥鈉（或巴比妥鈉）閾下劑量催眠實(shí)驗(yàn)判定：3項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任2項(xiàng)陽性，且直接睡眠作用。注意事項(xiàng)：對動物進(jìn)行直接睡眠實(shí)驗(yàn)時，也要同樣注意進(jìn)行30天灌胃。第99頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)3.緩解體力疲勞檢驗(yàn)方法主要指標(biāo)：血乳酸血清尿素肝糖原/肌糖原動物負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)判定：負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，血乳酸曲線下面積、血清尿素、肝糖/肌糖原3項(xiàng)生化指標(biāo)中任2項(xiàng)指標(biāo)陽性。注意事項(xiàng)：（1）對同批受試樣品進(jìn)行違禁藥物的檢測。（2）在負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)時，酒類樣品測試當(dāng)天可以不灌胃。第100頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)4.提高缺氧耐受力功能檢驗(yàn)方法主要指標(biāo)：常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)亞硝酸鈉中毒存活實(shí)驗(yàn)急性腦缺血性缺氧實(shí)驗(yàn)判定：三項(xiàng)試驗(yàn)中任二項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。注意事項(xiàng)：每批實(shí)驗(yàn)動物的體重盡量保持一致。第101頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)5.對輻射危害有輔助保護(hù)功能檢驗(yàn)方法主要指標(biāo)：外周血白細(xì)胞計數(shù)骨髓細(xì)胞DNA含量或骨髓有核細(xì)胞數(shù)小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)血/組織中SOD活性實(shí)驗(yàn)血清溶血素含量實(shí)驗(yàn)判定：以上5項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任3選項(xiàng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，3項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任何2項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。注意事項(xiàng)：選用小鼠，受試樣品于照射前給予14～30天，照射后仍然給予受試物，必要時可延至45天。第102頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)6.增加骨密度功能檢驗(yàn)方法根據(jù)受試樣品作用的原理不同，分為方案一（補(bǔ)鈣為主的受試物）和方案二（不含鈣或不以補(bǔ)鈣為主的受試物）兩種。主要指標(biāo)：體重骨鈣含量骨密度判定：（方案一）骨鈣含量/骨密度顯著高于低鈣對照組且不低于相應(yīng)劑量的碳酸鈣對照組，鈣的吸收率不低于碳酸鈣對照組。第103頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)（方案二）①不含鈣的產(chǎn)品：骨鈣含量/骨密度較模型對照組明顯增加，其它指標(biāo)（體重除外）不顯著低于卵巢切除＋溶劑組。②不以補(bǔ)鈣為主（可少量含鈣）的產(chǎn)品：骨鈣含量/骨密度較模型對照組明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且不低于相應(yīng)劑量的碳酸鈣對照組，其它指標(biāo)（體重除外）不顯著低于卵巢切除＋溶劑組。注意事項(xiàng)：（1）使用未批準(zhǔn)用于食品的鈣的化合物，除必做主要指標(biāo)外，還必須進(jìn)行鈣吸收率的測定；使用屬營養(yǎng)強(qiáng)化劑范圍內(nèi)的鈣源及來自普通食品的鈣源可以不進(jìn)行鈣的吸收率實(shí)驗(yàn)。（2）必須使用單光子骨礦密度儀或雙能X線骨密度儀或其它相關(guān)儀器測量股骨中點(diǎn)及股骨遠(yuǎn)心端的單位面積骨礦含量。第104頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)7.對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用檢驗(yàn)方法根據(jù)樣品的用途進(jìn)行選擇，方案一（四氯化碳肝損傷模型）和方案二（酒精肝損傷模型）方案一主要指標(biāo)：谷丙轉(zhuǎn)氨酶+谷草轉(zhuǎn)氨酶+肝組織病理學(xué)檢查判定：模型成立的前提下，ALT或AST任一項(xiàng)指標(biāo)陽性，病理結(jié)果陽性。方案二主要指標(biāo)：丙二醛+還原型谷胱甘肽+甘油三酯+肝組織病理學(xué)檢查判定：滿足以下任一條件，可判定該受試物具有對酒精性肝損傷有輔助性保護(hù)作用①肝臟MDA、GSH、TG三項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果陽性；②肝臟MDA、GSH、TG三指標(biāo)中任2項(xiàng)指標(biāo)陽性，且肝臟病理結(jié)果陽性。注意事項(xiàng)：報告中需提供列表詳細(xì)描述肝臟病理情況。第105頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)（二）只要求人體實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目有：1.緩解視疲勞功能試驗(yàn)受試對象：為兒童、青少年或成人，長期用眼，視力易疲勞者。排除患有眼部疾病者、短期內(nèi)服用與受試物功能有關(guān)的物品者或長期服用其它有關(guān)治療視力的藥物或使用其它治療方法者。要求：考慮年齡、性別等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。第106頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)2.祛痤瘡功能試驗(yàn)受試對象：選擇臨床痤瘡I－III度的自愿健康受試者，排除因病理性原因及妊娠及哺乳期婦女。要求：盡可能考慮年齡、性別、病程等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)受試者在試驗(yàn)期間停止使用其它口服及外用有關(guān)養(yǎng)顏祛痤瘡的用品。第107頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)3.祛黃褐斑功能試驗(yàn)受試對象：選擇無明顯自覺癥狀，無明顯內(nèi)分泌疾病，并排除其它疾病引起的色素沉著健康受試者。要求：盡可能考慮戶外活動、年齡、性別等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。受試者在試驗(yàn)期間停止使用其它口服及外用有關(guān)養(yǎng)顏祛斑的用品。自身前后對照，不產(chǎn)生新的黃褐斑。第108頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)4.改善皮膚水份功能試驗(yàn)受試對象：受試者的年齡為30～50歲，皮膚水分≦12。要求：盡可能考慮年齡等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。在試驗(yàn)期間不得服用其它保持皮膚水分的物品及影響結(jié)果判定的化妝品。測定前額眉間皮膚的水份。第109頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)5.改善皮膚油份功能試驗(yàn)受試對象：受試者的年齡為30～50歲，皮膚油份≦10或皮膚油份≥27。要求：考慮年齡等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。受試者在試驗(yàn)期間不得服用其它保持保持油份的物品及影響結(jié)果判定的化妝品。測定前額眉間皮膚的油份。第110頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)（三）動物實(shí)驗(yàn)和人體實(shí)驗(yàn)都要求的項(xiàng)目有：1.輔助降血脂功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇判定：任兩項(xiàng)指標(biāo)成立，輔助降血脂功能成立。注意事項(xiàng)：（1）保留降低甘油三酯和血清總膽固醇單項(xiàng)功能。（2）實(shí)驗(yàn)開始前，所選動物的血清總膽固醇一定要均衡，喂飼高脂飼料后，總膽固醇與甘油三酯一定都要陽性。人體試驗(yàn)受試對象：單純血脂異常的人群，最好為非住院的高血脂癥患者。要求：（1）在試驗(yàn)分組時，盡可能考慮如年齡、性別、飲食等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)（2）受試期間受試者保持平日的生活和飲食習(xí)慣，空腹取血測定各項(xiàng)主要指標(biāo)。第111頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)2.輔助降血糖功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：空腹血糖、糖耐量判定：在模型成立的前提下，兩項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)陽性，且對正常動物空腹血糖無影響。注意事項(xiàng)：在糖耐量實(shí)驗(yàn)中，不僅要計算血糖值，更要對血糖曲線下面積進(jìn)行計算。人體試驗(yàn)受試對象：選擇經(jīng)飲食控制或口服降糖藥治療后病情較穩(wěn)定，不需要更換藥物品種及劑量，僅服用維持量的成年Ⅱ型糖尿病病人。要求：（1）在試驗(yàn)分組時，盡可能考慮如病程、服藥種類等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。（2）試食間堅持飲食控制。第112頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)3.抗氧化功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：過氧化脂質(zhì)含量（MDA等）抗氧化酶活性（SOD、GSH-Px）判定：過氧化脂質(zhì)含量中任一指標(biāo)和抗氧化酶活性中任一指標(biāo)同為陽性。注意事項(xiàng)：選用12月齡以上老齡大鼠或8～12月齡老齡小鼠，也可用成年小鼠造模。人體試驗(yàn)受試對象：選則年齡在45－65歲身體健康者要求：（1）盡可能考慮如年齡、性別、飲食等因素。（2）與動物試驗(yàn)不同，過氧化質(zhì)含量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶三項(xiàng)試驗(yàn)中任一項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果陽性，可判定受試物具有抗氧化功能。第113頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)4.輔助改善記憶功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要實(shí)驗(yàn)：跳臺實(shí)驗(yàn)避暗實(shí)驗(yàn)穿梭箱實(shí)驗(yàn)水迷宮實(shí)驗(yàn)判定：4項(xiàng)動物實(shí)驗(yàn)中任2項(xiàng)陽性,重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致（所重復(fù)的同一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)兩次結(jié)果均為陽性）。注意事項(xiàng)：（1）用于改善兒童記憶的產(chǎn)品須用斷乳鼠；用于改善老年人記憶的產(chǎn)品必須采用成年鼠。（2）實(shí)驗(yàn)動物不可以重復(fù)使用，重復(fù)實(shí)驗(yàn)時必須采用另外一批動物。第114頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)4.輔助改善記憶功能檢驗(yàn)方法人體試驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計：對照、雙盲、隨機(jī)受試對象：從比較集中、各方面影響因素大致相同的群體中挑選受試者，比如學(xué)校、部隊。文化程度基本一致，且未接受過類似測試。要求：（1）分組時考慮如年齡、性別、文化水平、工作性質(zhì)等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。（2）屬同一年齡組，如不在同一年齡組，則應(yīng)對量表分進(jìn)行校正。（3）施測順序是先聽覺測試后視覺測試。第115頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)5.促進(jìn)排鉛功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)：預(yù)防性高鉛動物模型和治療性高鉛動物模型選其一主要指標(biāo)：血鉛骨鉛肝組織鉛判定：骨鉛或肝組織鉛有一項(xiàng)陽性。注意事項(xiàng)：設(shè)陽性對照時，推薦使用二丁基巰二酸或Na2CaEDTA。人體試驗(yàn)受試對象：選擇血鉛含量較高的自愿受試者，兒童血鉛100μg/L以上，成人血鉛200μg/L以上。要求：盡可能考慮如鉛接觸史、年齡、性別等因素，進(jìn)行均衡檢驗(yàn)。第116頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)6.清咽功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)：大鼠棉球植入實(shí)驗(yàn)或大鼠足趾腫脹實(shí)驗(yàn)任選其一主要指標(biāo)：肉芽腫凈量（棉球植入實(shí)驗(yàn)）致炎劑刺激前后足跖厚度差異（足趾腫脹實(shí)驗(yàn)）判定：肉芽腫凈量或致炎劑刺激前后足跖厚度差異陽性。注意事項(xiàng)：動物攝食量的降低和體重的減輕，亦可降低肉芽重量，故應(yīng)以mg（肉芽腫）/100g（體重）表示。人體試驗(yàn)受試對象：慢性咽炎人群，咽炎的急性發(fā)作期及病變轉(zhuǎn)移至咽部的人應(yīng)排除。要求：盡可能考慮如病程、年齡、性別等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。第117頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)7.輔助降血壓功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：血壓、心率判定：實(shí)驗(yàn)動物血壓明顯低于模型對照組，差異具有顯著性，且對實(shí)驗(yàn)組動物心率和正常動物血壓及心率無影響。注意事項(xiàng)：首選自發(fā)高血壓大鼠，雌雄可以兼用。其次為腎血管型高血壓大鼠。人體試驗(yàn)受試對象：觀察受試者為原發(fā)性高血壓患者，繼發(fā)性高血壓患者應(yīng)排除。要求：（1）受試者在試食觀察期間不該變原有抗高血壓藥物治療方案。（2）可能考慮如病程、病情、服用藥類、年齡、性別等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。第118頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)8.促進(jìn)泌乳功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)：選超負(fù)荷哺乳或乳缺模型任一種主要指標(biāo)：母鼠體重仔鼠體重判定：鼠體重顯著增加，差異具有顯著性。注意事項(xiàng)：（1）選用3日內(nèi)產(chǎn)仔的第二胎母鼠及其仔鼠，每窩仔鼠數(shù)目應(yīng)相同。（2）推薦使用飲水或加入飼料的方式給予受試樣品。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束期限為仔鼠斷乳（出生21天左右）。人體試驗(yàn)受試對象：乳母年齡<35歲，乳量不足，嬰兒吃不飽，母子身體均健康的志愿受試者。因病理性原因?qū)е氯比榈氖茉囌邞?yīng)該排除。要求：盡可能考慮如乳母年齡、嬰兒出生天數(shù)、飲食情況、家庭經(jīng)濟(jì)狀況等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。第119頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)9.減肥功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：體重、攝食量、體內(nèi)脂肪重量、脂/體比判定：（體重和體內(nèi)脂肪重量）或（體重和脂/體比）陽性，攝食量不顯著低于模型對照組。注意事項(xiàng)：（1）選用雄性大鼠。（2）該實(shí)驗(yàn)經(jīng)常存在著毒理學(xué)與功能學(xué)食物利用率不一致的現(xiàn)象。毒理學(xué)上動物食物利用率在把握上可以適當(dāng)放寬。動物起始體重也可以適當(dāng)放寬。（3）必須對同批受試樣品進(jìn)行違禁藥物的檢測，引起腹瀉或抑制食欲的受試樣品不能作為減肥功能食品。（4）不替代主食的減肥功能食品，動物試驗(yàn)和人體實(shí)驗(yàn)必做。替代主食的減肥功能食品，可以不做動物實(shí)驗(yàn)，僅進(jìn)行人體試食試驗(yàn)。第120頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)9.減肥功能檢驗(yàn)方法人體試驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計：不替代主食的減肥功能試驗(yàn)采用自身對照及組間對照。替代主食的減肥功能試驗(yàn)只設(shè)單一試食組。受試對象：單純性肥胖人群，排除病理性肥胖的人群。要求：有違禁藥物檢測報告、規(guī)范的膳食、運(yùn)動調(diào)查及評價方法。①在報告中提供完整的膳食分析（于試驗(yàn)開始前、結(jié)束前進(jìn)行三天的詢問法膳食調(diào)查）。②報告中應(yīng)有對運(yùn)動狀況的描述。運(yùn)動耐力測試方法為功率自行車試驗(yàn)，不認(rèn)可其它試驗(yàn)方法。③生化主要指標(biāo)增做血尿酸、尿酮體主要指標(biāo)，④體內(nèi)脂肪總量和脂肪占體重百分率，用水下稱重法或電阻抗法。皮下脂肪厚度用B超測定法或皮卡鉗法。⑤同時報告中還要求有對其它不良發(fā)應(yīng)觀察描述。第121頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)10.改善生長發(fā)育功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：體重、身長、食物利用率判定：（1）體重、身長增加明顯高于對照組，差異具有顯著性，（2）食物利用率不顯著低于對照組。注意事項(xiàng)：（1）選用斷乳大鼠。（2）如果食物利用率顯著低于對照組，則該樣品含有不利于動物生長發(fā)育的成分，則不具備改善生長發(fā)育功能。第122頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)10.改善生長發(fā)育功能檢驗(yàn)方法人體試驗(yàn)受試對象：選擇無器質(zhì)性疾病，身高或體重低于同年齡組平均水平1個標(biāo)準(zhǔn)差范圍內(nèi)6-10歲兒童。要求：（1）提供興奮劑檢測報告（2）分組時考慮胸圍、上臂圍、體內(nèi)脂肪含量以及年齡運(yùn)動和家庭經(jīng)濟(jì)水平等，進(jìn)行組間均衡性檢驗(yàn)。（3）受試物給予時間：不少于3個月，必要時延長至6個月。第123頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)11.改善營養(yǎng)性貧血功能檢驗(yàn)方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：體重血紅蛋白紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉判定：血紅蛋白和紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉2項(xiàng)主要指標(biāo)陽性注意事項(xiàng)：（1）本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于貧血模型的建立。（2）低鐵飼料含量最好控制在9mg/kg以下。（3）動物飲用水應(yīng)為去離子水或雙蒸水。第124頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)11.改善營養(yǎng)性貧血功能檢驗(yàn)方法人體試驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計：采用自身和組間兩種對照設(shè)計。受試對象：為小細(xì)胞低色素貧血，且有明確的缺鐵原因和臨床表現(xiàn)的成人和兒童。排除因病理性原因?qū)е仑氀皣?yán)重貧血患者。要求：（1）分組時考慮年齡、性別、經(jīng)濟(jì)狀況等因素，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)。（2）于試驗(yàn)開始前、結(jié)束前進(jìn)行三天的詢問法膳食調(diào)查，觀察飲食因素對試驗(yàn)結(jié)果的影響。（3）報告中應(yīng)體現(xiàn)篩除其類型貧血方法。第125頁，講稿共139頁，2023年5月2日，星期三各功能試驗(yàn)審評要點(diǎn)12.調(diào)節(jié)腸道菌群功能檢測方法動物實(shí)驗(yàn)主要指標(biāo)：雙歧桿菌、