2023年生物高考總復(fù)習(xí)第二部分考點(diǎn)培優(yōu)訓(xùn)練 檢測(cè)案39微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

課后定時(shí)檢測(cè)案39微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

［基礎(chǔ)鞏固練］——學(xué)業(yè)水平一、二

考點(diǎn)一微生物的分離和培養(yǎng)

i.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.操作順序?yàn)橛?jì)算一稱量一溶化一倒平板一滅菌

B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯

C.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)倒平板

D.待平板冷卻凝固后將平板倒過(guò)來(lái)放置

2.下列關(guān)于“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）

A.高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋

B.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上

C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落

D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上

3.［2022?衡水中學(xué)全國(guó)高三聯(lián)考］秸稈還田可增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。為分離分解

纖維素的微生物菌種，實(shí)現(xiàn)廢物的資源化利用，研究人員設(shè)計(jì)了“土壤取樣一選擇培養(yǎng)一梯度

稀釋f涂布平板一挑選菌株”的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之后調(diào)節(jié)pH

B.選擇培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源培養(yǎng)基

C.進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作

D.挑選菌株后，應(yīng)將使用過(guò)的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄

考點(diǎn)二某種微生物數(shù)量的測(cè)定

4.能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是（）

A.稀釋涂布平板法B.直接計(jì)數(shù)法

C.重量法D.比濁法

5.取9個(gè)潔凈培養(yǎng)皿，均分為三組（I、II、HI）,各組分別加入等量的不同培養(yǎng)基，每

個(gè)平板均用涂布法接種0.1mL大腸桿菌菌液，37℃培養(yǎng)3611后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)（見(jiàn)表）。下列相

關(guān)敘述正確的是（）

1

各平板的菌落數(shù)

組別培養(yǎng)基

123

I瓊脂、C6Hl2。6、NH4NO3303127

瓊脂、C6Hl2。6、NH4NO3、維生

II169178193

素

III瓊脂、NH4NO3、維生素001

A.I組和n組說(shuō)明維生素可以促進(jìn)大腸桿菌生長(zhǎng)

B.I組和III組說(shuō)明大腸桿菌正常生長(zhǎng)需要糖類物質(zhì)

C.三組實(shí)驗(yàn)均使用了液體培養(yǎng)基，以方便菌落計(jì)數(shù)

D.三組實(shí)驗(yàn)所使用的培養(yǎng)基均需62°C、30min消毒

考點(diǎn)三培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用

6.通過(guò)選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)

基上，大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng)；在培養(yǎng)

基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分

離出（）

①大腸桿菌②霉菌③放線菌④固氮細(xì)菌

A.④②③B.①②③

C.①③④D.只有③④

7.［2022.青島模擬］高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩

選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時(shí)含有葡

萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如圖2所示

情況。下列分析錯(cuò)誤的是（）

QR

挑出菌生周圍顯藍(lán)

eM

一①U丁色的菌落

UL周圍不顯

甲

乙

培養(yǎng)基培養(yǎng)基藍(lán)色的菌落

圖1圖2

A.過(guò)程①②合稱為稀釋涂布平板法

B.甲、乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基

c.n號(hào)培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法

D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種

［提能強(qiáng)化練］.學(xué)業(yè)水平三、四

2

8.菌種M和菌種N在發(fā)酵工程應(yīng)用上具有不同的優(yōu)越性，為了獲得具有它們共同優(yōu)良

性狀的融合菌，進(jìn)行了下圖所示的實(shí)驗(yàn)。已知菌種M為組氨酸依賴（組氨酸合成相關(guān)基因突變

為B）,菌種N為色氨酸依賴（色氨酸合成相關(guān)基因突變?yōu)锳）,下列分析錯(cuò)誤的是（）

停一?產(chǎn)

舟）一?J―^基x篇。

A.菌種M和N可通過(guò)人工誘變和選擇性培養(yǎng)篩選獲得

B.用PEG誘導(dǎo)融合之前需要去除菌種M和N的細(xì)胞壁

C.在培養(yǎng)基X中添加組氨酸和色氨酸以篩選出雜種融合菌

D.從培養(yǎng)基X中分離出的雜種融合菌P對(duì)兩種氨基酸均不依賴

9.幽門(mén)螺桿菌（含有胭酶）感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)

采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。下列有關(guān)敘述不正確的是（）

A.分離純化幽門(mén)螺桿菌時(shí)應(yīng)使用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基

B.鑒別幽門(mén)螺桿菌時(shí)應(yīng)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑和緩沖物質(zhì)

C.可用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作對(duì)照證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用

D.對(duì)幽門(mén)螺桿菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)可用稀釋涂布平板法

10.養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)主要是氨及亞硝酸，這兩種物質(zhì)可被硝化細(xì)菌吸收利用。在

“養(yǎng)殖池底泥中硝化細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中，下列說(shuō)法正確的是（）

A.需要配制添加一定濃度錢(qián)鹽的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，以篩選硝化細(xì)菌

B.應(yīng)對(duì)采集底泥使用的工具進(jìn)行滅菌，全部接種過(guò)程均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行

C.可以采用平板劃線法進(jìn)行接種，還需與未接種的空白培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng)

D.應(yīng)將接種后的培養(yǎng)皿放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，原因是硝化細(xì)菌為自養(yǎng)微生物

11.苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)

生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯

酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述不正確的是（）

A.使用平板劃線法可以在⑥上獲得單個(gè)菌落

B.如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用平板劃線法

3

C.圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源

D.微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌處理

12.研究者分別將B半乳糖昔酶基因和四環(huán)素降解酶基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌中，獲得了能利用

乳糖和對(duì)四環(huán)素有抗性的兩種大腸桿菌。將兩種菌單獨(dú)接種于特定的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，兩種

菌均不能生長(zhǎng)；但將兩種菌混合接種于該培養(yǎng)基中，兩種菌均能生長(zhǎng)。下列說(shuō)法不正確的是

()

A.需選擇不能利用乳糖并對(duì)四環(huán)素?zé)o抗性的大腸桿菌作為受體

B.該實(shí)驗(yàn)可選用添加有四環(huán)素并以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

C.含四環(huán)素降解酶基因的大腸桿菌可通過(guò)降解四環(huán)素獲取物質(zhì)和能量用于生長(zhǎng)

D.兩種菌混合培養(yǎng)時(shí)，兩種菌的代謝分別為對(duì)方提供生存條件

13.經(jīng)人工誘變獲得的天冬氨酸缺陷型菌株，菌體自身不能合成天冬氨酸，必須從外界環(huán)

境中獲取天冬氨酸才能生長(zhǎng)繁殖。如圖是科研人員利用“影印法”篩選天冬氨酸缺陷型菌株的

部分過(guò)程(注：基本培養(yǎng)基中不含氨基酸，完全培養(yǎng)基中含所有種類的氨基酸)?；卮鹣铝袉?wèn)題：

無(wú)菌的絲絨布

揭起絲絨布

經(jīng)誘變處待測(cè)絲絨布

理的菌液培養(yǎng)皿吸附菌體

完全培養(yǎng)基

(1)過(guò)程①接種時(shí)，必需使用的工具是;待測(cè)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是(填“基

本”或“完全”)培養(yǎng)基。

(2)過(guò)程②是將印在同一塊絲絨布上的菌落，先后轉(zhuǎn)印至兩個(gè)不同的平板上。該過(guò)程應(yīng)該

先轉(zhuǎn)印到培養(yǎng)基上，原因是

(3)經(jīng)過(guò)程②，完全培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落A和菌落B中，不可能含天冬氨酸缺陷型菌株的

是________菌落。為了進(jìn)一步鑒定篩選到的菌株確實(shí)是天冬氨酸缺陷型菌株，科研人員又制備

了甲、乙兩個(gè)平板，這兩個(gè)平板培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的差異是0

(4)下列對(duì)上述“影印法”篩選天冬氨酸缺陷型菌株過(guò)程的敘述，錯(cuò)誤的是o(填

字母)

4

A.過(guò)程①接種前還需對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋，每次接種時(shí)取菌液0.1mL

B.過(guò)程①、②中菌落培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將平板倒置并放在28℃恒溫培養(yǎng)箱中

C.過(guò)程②絲絨布在兩個(gè)培養(yǎng)基上覆蓋的方向和角度可不必相同

D.影印和接種等操作均最好在超凈臺(tái)的酒精燈火焰旁進(jìn)行

14.［2021?四川省遂寧市高三三診］幽門(mén)螺桿菌(Hp菌)因?yàn)槠鋵?dǎo)致胃痛、胃癌，成為最臭名

昭著的細(xì)菌之一。它是一種異養(yǎng)微厭氧菌，胃里面還有胃酸(pH為1.5左右)，絕大部分的細(xì)菌

都適應(yīng)不了。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：

患者取樣麗羸］一廊度麗~展祎］一隔弄1T計(jì)數(shù)觀察I

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)上述培養(yǎng)過(guò)程中，能夠“濃縮”幽門(mén)螺桿菌的步驟是o梯度稀釋操作

時(shí)如何防止雜菌污染：

(2)有的化工廠會(huì)產(chǎn)生尿素廢水，研究者提出用幽門(mén)螺桿菌來(lái)處理廢水，如果該方法可行，

根據(jù)題干信息可知，該處理過(guò)程對(duì)溫度和氧氣的要求是

(3)實(shí)踐證明有一種尿素分解菌比幽門(mén)螺桿菌處理尿素廢水的能力強(qiáng)很多，最可能的原因

是前者比后者產(chǎn)生的多。

(4)為了證明不分餐能導(dǎo)致胃幽門(mén)螺桿菌交叉?zhèn)鞑ィ芯空咛崛×四澄秆谆颊呒彝サ?00g

剩菜，加入無(wú)菌水稀釋。取上述稀釋液分別接種到3個(gè)適宜的培養(yǎng)基中置于適宜的條件下進(jìn)行

培養(yǎng)，三個(gè)平板上胃幽門(mén)螺桿菌菌落數(shù)均介于30?300之間且相差不大，求平均值得到菌落數(shù)

為B個(gè)。根據(jù)上述情景不能計(jì)算出每克剩菜中的幽門(mén)螺桿菌的數(shù)量，原因是

15.微生物的生長(zhǎng)繁殖需要不同種類的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，若培

養(yǎng)基中的某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不能被微生物利用，微生物便不能生長(zhǎng)。根據(jù)這一特性，可將微生物接

種在只缺少某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，再將所缺的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)點(diǎn)植于平板上，該營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)便

逐漸擴(kuò)散于點(diǎn)植周圍。該微生物若需要此種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，便在這種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)擴(kuò)散處生長(zhǎng)繁殖，形

成肉眼可見(jiàn)的菌落圈，這種測(cè)定微生物營(yíng)養(yǎng)需求的方法稱為生長(zhǎng)譜法。某興趣小組嘗試用生長(zhǎng)

譜法測(cè)定某種大腸桿菌對(duì)糖類(碳源)的需求情況，操作流程如下：

5

I.培養(yǎng)基的制備。該小組所用無(wú)碳培養(yǎng)基配方如下(加水定容至1L)：

成分瓊脂

NaClKH2PO4K2HPO4(NH4)2SO4MgSO4-7H2O

質(zhì)量/g10.50.520.220

同時(shí)配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL。

II.將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至50℃的固體培養(yǎng)基混勻，倒平板。

III.將已凝固的平板背面用記號(hào)筆劃分為四個(gè)區(qū)，并注明要點(diǎn)植的糖類名稱。

IV.通過(guò)無(wú)菌操作分別加入蘸有不同糖類的無(wú)菌濾紙片，待平板吸收干燥后倒置培養(yǎng)24小

時(shí)。

結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答相關(guān)的問(wèn)題：

(1)無(wú)碳培養(yǎng)基配方中加入(NH4)2SO4的目的是。對(duì)培養(yǎng)基及糖溶液通常采用

的滅菌方法是。倒平板后用法進(jìn)行接種。

(2)該小組發(fā)現(xiàn)最終在培養(yǎng)基的四個(gè)區(qū)內(nèi)均有菌落圈產(chǎn)生，但大小不同，據(jù)此得到的初步

結(jié)論是。______________________________________________________________________________

(3)如果在此實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)某一不被該大腸桿菌利用的碳源的點(diǎn)植區(qū)域也長(zhǎng)出菌落圈，試分

析可能的原因：o(寫(xiě)出2條即可)

(4)生長(zhǎng)譜法還可用于某些營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株(失去合成某種生長(zhǎng)因子能力的菌株)的篩選和

鑒定，例如，大腸桿菌經(jīng)紫外線誘變處理后會(huì)產(chǎn)生一些營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變個(gè)體，現(xiàn)己純化并制備

出某營(yíng)養(yǎng)缺陷型的菌懸液，但不清楚是氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸維生素缺陷型,

請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出用生長(zhǎng)譜法進(jìn)行鑒定的思路，并預(yù)期可能的結(jié)果及結(jié)論。

課后定時(shí)檢測(cè)案39

i.解析：制備牛肉膏蛋白豚固體培養(yǎng)基的步驟是：計(jì)算稱量-溶化滅菌-倒平板，

其順序不能顛倒；牛肉膏容易吸潮，所以稱好后需將稱量紙一同放入燒杯，當(dāng)牛肉膏溶化并與

稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙；待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙

6

手，并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)時(shí)開(kāi)始倒平板，平板冷卻凝固后才能倒置。

答案：A

2.解析：在高壓蒸汽滅菌的操作過(guò)程中，加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待壓

力表的指針指到零時(shí)，打開(kāi)放氣閥，旋松螺栓，打開(kāi)蓋子；倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一

條稍大于瓶口的縫隙，而不是完全取下放到一邊；接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后，

再用其挑取菌落；在微生物的培養(yǎng)中，一般將培養(yǎng)皿倒置，在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。

答案：D

3.解析：配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前調(diào)節(jié)pH,避免滅菌之后調(diào)pH造成雜菌

污染，A錯(cuò)誤；選擇培養(yǎng)時(shí)，為分離分解纖維素的微生物菌種，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培

養(yǎng)基，B正確；進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，為了無(wú)菌操作，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作，C正確；

挑選菌株后，為了防止造成污染，應(yīng)將使用過(guò)的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄，D正確。

答案：A

4.解析：利用稀釋涂布平板法能夠在不影響細(xì)菌生存的情況下將細(xì)菌從固體培養(yǎng)基上分

離出來(lái)，并可根據(jù)菌落數(shù)測(cè)定出樣品活菌數(shù)，A正確。直接計(jì)數(shù)法是利用特定的計(jì)數(shù)板，在顯

微鏡下計(jì)算一定容積內(nèi)樣品中微生物的數(shù)量，不能區(qū)分死菌與活菌；質(zhì)量法是用于微生物生長(zhǎng)

測(cè)定的一種方法，有濕重法和干重法，也可以通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)和DNA含量的測(cè)定以反應(yīng)細(xì)胞的

物質(zhì)質(zhì)量；比濁法是在一定范圍內(nèi)，懸液中細(xì)胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌

越多，光密度越大；活菌在適宜培養(yǎng)基和良好生長(zhǎng)條件下通過(guò)生長(zhǎng)形成菌落，此法又稱活菌計(jì)

數(shù)法，可采用稀釋涂布平板法接種。

答案：A

5.解析：由表格分析可知，I組和H組說(shuō)明維生素可以促進(jìn)大腸桿菌生長(zhǎng)；II組和III組

作對(duì)照，自變量是葡萄糖的有無(wú)，說(shuō)明大腸桿菌正常生長(zhǎng)需要葡萄糖；由題意可知，每個(gè)平板

都含有瓊脂，屬于固體培養(yǎng)基；三組實(shí)驗(yàn)所使用的培養(yǎng)基均需高壓蒸汽滅菌。

答案：A

6.解析：缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)，而固氮細(xì)菌能生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中

加青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌等原核生物細(xì)胞壁的合成，而霉菌屬于真核生物，故能生長(zhǎng);

在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)，對(duì)放線菌的生長(zhǎng)無(wú)影響。

答案：A

7.解析：根據(jù)I號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知，①②過(guò)程為稀釋涂布平板法，A正確；

甲、乙試管中的液體是用于樣品稀釋，應(yīng)為無(wú)菌水，B錯(cuò)誤；由n號(hào)培養(yǎng)基上的劃線區(qū)域可知，

7

從I號(hào)培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法，c正確；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色，

但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需

菌種，D正確。

答案：B

8.解析：人工誘變可獲得不同類型的突變體，再利用選擇培養(yǎng)基從中選取組氨酸依賴型

和色氨酸依賴型的菌種，即為M、N菌種，A正確；M、N菌均為有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物，再由

圖示流程可知，M、N菌經(jīng)處理后得到與之前形態(tài)不同的原生質(zhì)體，再用PEG處理，B正確；

培養(yǎng)基X篩選的菌種是M菌和N菌融合后的細(xì)胞，同時(shí)含有M、N兩種菌的基因，即基因型

為A+B+,故培養(yǎng)基X中不應(yīng)添加組氨酸和色氨酸，C錯(cuò)誤；培養(yǎng)基X篩選的菌種是M菌和

N菌融合后的細(xì)胞，同時(shí)含有M、N兩種菌的基因，即基因型為A'B，,對(duì)組氨酸和色氨酸均

不依賴，D正確。

答案：C

9.解析：幽門(mén)螺桿菌合成腺酶，可以利用尿素，所以分離純化幽門(mén)螺桿菌時(shí)應(yīng)使用以尿

素為唯一氮源的培養(yǎng)基，A正確；鑒別幽門(mén)螺桿菌時(shí)應(yīng)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，但不能加

緩沖物質(zhì)，B錯(cuò)誤；為了證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用，可用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作對(duì)照，C正

確；對(duì)幽門(mén)螺桿菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)可用稀釋涂布平板法，D正確。

答案：B

10.解析：要分離硝化細(xì)菌，應(yīng)該用以鐵鹽為唯一氮源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中不能加入牛肉

膏、蛋白腺，A錯(cuò)誤；獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌污染，因此，應(yīng)對(duì)采集底泥使用

的工具進(jìn)行滅菌，全部接種過(guò)程均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行，B正確；對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)該

采用的接種方法是稀釋涂布平板法，C錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌能進(jìn)行化能合成作用，不能利用光能,

故不需在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

答案：B

11.解析：分析題圖可知，實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得目的菌株，然后經(jīng)過(guò)⑤的純化培

養(yǎng)，使用平板劃線法可以在⑥上獲得單個(gè)菌落，A正確；如果要測(cè)定②中的活細(xì)菌數(shù)量，常采

用稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；要篩選獲得能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，圖中②培養(yǎng)目的菌株的

選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源，C正確；微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行

嚴(yán)格的滅菌處理，D正確。

答案：B

12.解析：根據(jù)題意可知，轉(zhuǎn)基因后獲得了能利用乳糖和對(duì)四環(huán)素有抗性的兩種大腸桿菌，

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因此可推測(cè)轉(zhuǎn)基因的受體菌為不能利用乳糖并對(duì)四環(huán)素?zé)o抗性的大腸桿菌，A正確；該實(shí)驗(yàn)可

選用添加有四環(huán)素并以乳糖為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，從而將兩組轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌選擇

出來(lái)，B正確；含四環(huán)素降解酶基因的大腸桿菌可通過(guò)降解四環(huán)素而破壞四環(huán)素的結(jié)構(gòu)，避免

了四環(huán)素對(duì)自身的傷害,C錯(cuò)誤；兩種菌混合培養(yǎng)時(shí)，兩種菌的代謝分別為對(duì)方提供生存條件，

從而實(shí)現(xiàn)了共同生長(zhǎng)，D正確。

答案：C

13.解析：（1）從圖中看出，過(guò)程①后菌落均勻分布，因此采用的接種方法為稀釋涂布平

板法，所用的接種工具是涂布器；根據(jù)圖中結(jié)果可知，待測(cè)培養(yǎng)皿中的菌落分布與完全培養(yǎng)基

中相同，可見(jiàn)待測(cè)培養(yǎng)皿中是完全培養(yǎng)基。（2）過(guò)程②應(yīng)將印在絲絨布上的菌落先轉(zhuǎn)印至基本

培養(yǎng)基上，原因是防止基本培養(yǎng)基中混入特殊的營(yíng)養(yǎng)成分。（3）比較基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基

中的菌落可知，B菌落在基本培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)繁殖，說(shuō)明它能合成天冬氨酸，不可能是天冬氨

酸缺陷型菌株。為了進(jìn)一步鑒定篩選到的菌株確實(shí)是天冬氨酸缺陷型菌株，對(duì)照實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)平

板中營(yíng)養(yǎng)成分的差異是是否含有天冬氨酸，接種后若兩個(gè)平板中菌落的生長(zhǎng)情況是含有天冬氨

酸的平板上生長(zhǎng)有菌落，另一個(gè)平板上不能生長(zhǎng)，則說(shuō)明該菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。（4）

過(guò)程①接種前還需對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋，每次接種時(shí)取菌液0.1mL,A正確；過(guò)程①、②中

菌落培養(yǎng)時(shí)應(yīng)將平板倒置并放在28℃恒溫培養(yǎng)箱中，B正確；過(guò)程②絲絨布在兩個(gè)培養(yǎng)基上

覆蓋的方向和角度都要相同，C錯(cuò)誤；影印和接種等操作均最好在超凈臺(tái)的酒精燈火焰旁進(jìn)行,

D正確。

答案：（1）涂布器完全（2）基本防止基本培養(yǎng)基中混入特殊的營(yíng)養(yǎng)成分（3）B是否

含有天冬氨酸（4）C

14.解析：（1）據(jù)圖分析可知，“選擇培養(yǎng)”為“濃縮”幽門(mén)螺桿菌的過(guò)程。梯度稀釋操

作時(shí)，無(wú)菌操作很關(guān)鍵，要注意試管口和移液管應(yīng)該在離火焰1?2cm處（或者火焰附近）進(jìn)行

實(shí)驗(yàn)操作。（2）胃幽門(mén)螺桿菌是一種異養(yǎng)微厭氧菌，生活環(huán)境具有胃酸（pH為1.5左右），故用幽

門(mén)螺桿菌來(lái)處理廢水應(yīng)該在37℃左右、低氧（或無(wú)氧）環(huán)境中進(jìn)行。（3