自然殺傷細(xì)胞

自然殺傷細(xì)胞血液細(xì)胞01簡介細(xì)胞表型細(xì)胞來源活化途徑目錄03020405細(xì)胞功能其他相關(guān)活性測定目錄0706基本信息自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell，NK)是機體重要的免疫細(xì)胞，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生，能夠識別靶細(xì)胞、殺傷介質(zhì)。簡介簡介自然殺傷細(xì)胞(naturalkillercell,NK細(xì)胞)來源于骨髓淋巴樣干細(xì)胞，其分化、發(fā)育依賴于骨髓及胸腺微環(huán)境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴結(jié)。NK細(xì)胞不同于T、B細(xì)胞，是一類無需預(yù)先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的淋巴細(xì)胞

。細(xì)胞來源細(xì)胞來源NK細(xì)胞確切的來源還不十分清楚，一般認(rèn)為直接從骨髓中衍生，其發(fā)育成熟依賴于骨髓的微環(huán)境。小鼠和人的體外實驗表明，胸腺細(xì)胞在體外IL-2等細(xì)胞因子存在條件下培養(yǎng)也可誘導(dǎo)出NK細(xì)胞。小鼠脾臟在體內(nèi)IL-3誘導(dǎo)下可促進NK細(xì)胞的分化。NK細(xì)胞主要分布于外周血中，占PBMC5～10%，淋巴結(jié)和骨髓中也有NK活性，但水平較外周血低。自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞）由于NK細(xì)胞具有部分T細(xì)胞分化抗原，如80～90%NK細(xì)胞CD2+，20～30%NK細(xì)胞CD3+（表達CD3ζ鏈），30%NK細(xì)胞CD8+（α/α）和75～90%NK細(xì)胞CD38+，而且NK細(xì)胞具有IL-2中親和性受體，在IL-2刺激下可發(fā)生增殖反應(yīng)，活化NK細(xì)胞可產(chǎn)生IFN-γ，因此一般認(rèn)為NK細(xì)胞與T細(xì)胞在發(fā)育上關(guān)系更為密切。細(xì)胞表型細(xì)胞表型與T細(xì)胞、B細(xì)胞相比，NK細(xì)胞表面標(biāo)志的特異性是相對的。人NK細(xì)胞mIg-，部分NK細(xì)胞CD2、CD3和CD8陽性，表達IL-2受體β鏈（P75,CD122），CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細(xì)胞的標(biāo)記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一種穩(wěn)定表達在NK和LAK細(xì)胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK細(xì)胞在IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性，而HNK-1（CD57）和CD16部分消失。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1McAb所抑制?；罨緩交罨緩酵ㄟ^CD3分子的ζ鏈NK細(xì)胞不表達TCR/CD3復(fù)合物，但部分NK細(xì)胞表達CD3ζ鏈，當(dāng)用CD16抗體刺激NK細(xì)胞活化時，ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化，引起胞漿內(nèi)Ca2+濃度升高，IP3水平增加，促進細(xì)胞因子合成和ADCC作用。通過CD2分子CD2與CD58相互作用或用CD2McAb刺激可活化NK細(xì)胞，CD3ζ鏈發(fā)生酪氨酸磷酸化。自然殺傷細(xì)胞刺激因子自然殺傷細(xì)胞刺激因子（naturalkillercellstimulatoryfactor,NKSF）對NK細(xì)胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(leukoregulin,LR)對NK細(xì)胞的活化和分化有正調(diào)節(jié)作用，體外培養(yǎng)時加入上述細(xì)胞因子可明顯提高NK的殺傷活性。前列腺素(PG)E1、E2、D2和腎上腺皮質(zhì)激素等對NK細(xì)胞的活性有抑制作用。NK細(xì)胞表面具有IL-2中親和性受體，IL-2誘導(dǎo)NK的殺傷活性約需18～24小時。此外，IL-2還可誘導(dǎo)NK細(xì)胞的增殖，一般在刺激后3～4天開始發(fā)生增殖，其機理為IL-2可誘導(dǎo)NK細(xì)胞表達IL-2Rα鏈，新表達的α鏈與原先細(xì)胞表面的β鏈和γ鏈結(jié)合形成高親和性受體，在IL-2存在下刺激NK細(xì)胞發(fā)生增殖。細(xì)胞功能細(xì)胞功能自然殺傷活性由于NK細(xì)胞的殺傷活性無MHC限制，不依賴抗體，因此稱為自然殺傷活性。NK細(xì)胞胞漿豐富，含有較大的嗜天青顆粒，顆粒的含量與NK細(xì)胞的殺傷活性呈正相關(guān)。NK細(xì)胞作用于靶細(xì)胞后殺傷作用出現(xiàn)早，在體外1小時、體內(nèi)4小時即可見到殺傷效應(yīng)。NK細(xì)胞的靶細(xì)胞主要有某些腫瘤細(xì)胞（包括部分細(xì)胞系）、病毒感染細(xì)胞、某些自身組織細(xì)胞（如血細(xì)胞）、寄生蟲等，因此NK細(xì)胞是機體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素，也參與第Ⅱ型超敏反應(yīng)和移植物抗宿主反應(yīng)。⒈識別靶細(xì)胞NK細(xì)胞識別靶細(xì)胞是非特異性的，這與CTL識別靶細(xì)胞機理不同，但確切的機理尚未明了。現(xiàn)已知淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-1（LFA-1）與靶細(xì)胞表面的細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）的作用參與NK細(xì)胞的識別過程，抗LFA-1或抗ICAM-1McAb可抑制NK細(xì)胞的殺傷活性。此外CD2與LFA-3（CD58）結(jié)合以及CD56也可能介導(dǎo)NK細(xì)胞與靶細(xì)胞的結(jié)合。有關(guān)白細(xì)胞分化抗原和粘附分子分別參見第一章和第二章。⒉殺傷介質(zhì)主要有穿孔素、NK細(xì)胞毒因子和TNF等。⑴穿孔素：穿孔素是一種由NK、CTL、LAK等殺傷細(xì)胞胞漿顆粒釋放的殺傷靶細(xì)胞的介質(zhì)，有關(guān)穿孔素的結(jié)構(gòu)和功能參見本章第二節(jié)。從胞漿顆粒中純化的穿孔素在體外能溶解多種腫瘤細(xì)胞，抗穿孔素抗體可抑制殺傷活性。IL-2可提高穿孔素基因的轉(zhuǎn)錄。IL-6可以促進IL-2對穿孔素基因轉(zhuǎn)錄的誘導(dǎo)作用?；钚詼y定活性測定【中文名稱】自然殺傷細(xì)胞活性測定【概述】自然殺傷細(xì)胞（NK）介導(dǎo)天然免疫應(yīng)答，它不依賴抗體和補體，即能直接殺傷靶細(xì)胞，如腫瘤細(xì)胞或受病毒感染的細(xì)胞等；此外，尚有免疫調(diào)節(jié)功能，也參與移植排斥反應(yīng)和某些自身免疫病的發(fā)生發(fā)展。【參考值】51Cr釋放法：自然釋放率<10%～15%；自然殺傷率為47.6%～76.8%；51Cr利用率為6.5%～47.8%。酶釋放法：細(xì)胞毒指數(shù)為27.5%～52.5%。流式細(xì)胞術(shù)法為13.8%±5.9%。【臨床意義】NK細(xì)胞活性可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標(biāo)之一。在血液系統(tǒng)腫瘤、實體瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某些病毒感染患者，NK活性減低；宿主抗移植物反應(yīng)者，NK活性升高。其他相關(guān)其他相關(guān)圣祖德兒童研究醫(yī)院的坎帕納博士等人在新一期《血液》雜志絡(luò)版上發(fā)表論文說，此前用自然殺傷細(xì)胞治療白血病的研究進展不快，主要是因為自然殺傷細(xì)胞對白血病細(xì)胞不敏感，也難以在實驗室大量培養(yǎng)，而他們在這兩個方面都取得了進展。研究人員首先使用了含有各種免疫細(xì)胞的血樣，將其與經(jīng)過轉(zhuǎn)基因處理的K562人類白血病細(xì)胞混合培養(yǎng)。這種白血病細(xì)胞經(jīng)轉(zhuǎn)基因處理后，表面帶有“4－1BBL”和“IL－15”兩種蛋白質(zhì)。研究人員發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因白血病細(xì)胞能刺激血樣中自然殺傷細(xì)胞大量生長，其數(shù)量很快達到原先的1萬倍，這使得自然殺傷細(xì)胞能提純出來。此后，研究人員對自然殺傷細(xì)胞進行轉(zhuǎn)基因處理，使其表面生成能識別白血病細(xì)胞的受體蛋白。這種受體蛋白能與白血病細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)“CD19”結(jié)合，促使自然殺傷細(xì)胞溶解白血病細(xì)胞。坎帕納等人在論文中說，他們的方法能從少量血樣中培養(yǎng)大量自然殺傷細(xì)胞，從而使自然殺傷細(xì)胞能實際應(yīng)用于白血病治療，這尤其適用于