生物安全及生物安全概論

生物安全及生物安全概論第一頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三地址：傳染病大學醫(yī)院

Mirogojska8

10000薩格勒布克羅地亞alemka.markotic@bfm.hralemka.markotic@第二頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三生化危機第三頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三表格

1.以高危人群分類的傳染性微生物高危人群

1(沒有或者較低個人及社會風險)一種不可能對人類或者動物致病的微生物。高危人群2(中等個人風險，較低社區(qū)風險)一種對人類或動物可致病的病原體，但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜及環(huán)境不具顯著危害性。實驗室解除可能導致嚴重感染，但通過有效治療及預防措施可以控制感染傳播危險性。高危人群3(高度個人風險，較低社會風險)一種通常會導致人類或動物嚴重疾病，但一般不會造成個體間傳播的病原體。針對該種類具有有效治療及預防措置。高危人群

4(高度個人及社會風險)一種通常會引起人類或動物嚴重疾病并且會直接或間接在個體間傳播的病原體。通常不具有有效治療措施及預防措施。第四頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三高危人群分類

美國國立衛(wèi)生研究院有關DNA分子重組研究準則2002年版世界衛(wèi)生組織有關實驗室生物安全手冊2004年第三版高危人群1與健康成年人有關疾病無關的介質(zhì)（不具有或者具有較低個人和社會風險）不可能導致人類或動物疾病的微生物。高危人群2鮮少具有危險性并通常具有預防及干預治療措施的人類疾病相關介質(zhì)（具有中等個人風險及較低社會風險）一種對人類或動物可致病的病原體，但對實驗室工作人員、社區(qū)、牲畜及環(huán)境不具顯著危害性。實驗室解除可能導致嚴重感染，但通過有效治療及預防措施可以控制感染傳播危險性。高危人群3嚴重及致命并可能具有預防措施或干預治療措施的人類疾病相關介質(zhì)（高度個人風險但具有較低社會風險）。（高度個人風險，較低社會風險）一種通常會導致人類或動物嚴重疾病，但一般不會造成個體間傳播的病原體。針對該種類具有有效治療及預防措置。高危人群4一種通常會引起人類或動物嚴重或致命疾病，并且通常不具有有效治療措施及預防措施的相關介質(zhì)。（高度個體風險及高度社會風險）（高度個人風險及社會風險）一種通常會引起人類或動物嚴重疾病并且會直接或間接在個體間傳播的病原體。通常不具有有效治療措施及預防措施。表格1以高危人群分類的傳染微生物分類第五頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三實驗室設施被指定為基礎——生物安全水平1,基礎——生物安全水平2，封閉——生物安全水平以及最高水平封閉——生物安全水平針對各種風險人群分類下不同介質(zhì)工作要求的設計特點、建造、封閉設施、設備、做法及業(yè)務程序等各種因素進行綜合考慮，對生物安全水平級別進行分類。表格2中相關高危人群，與各高危人群內(nèi)，指定進行相關有機物工作的實驗室生物安全水平所指高危人群類似，但不相同。第六頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三表格2.高危人群與生物安全水平、準則及設備儀器的關系高危人群生物安全水平實驗室類型實驗室規(guī)范安全設備1基礎——生物安全水平1基本教學及研究GMT(良好微生物學儀器)無；開放式工作平臺2基礎——生物安全水平2初級健康服務；診療服務及研究GMT(良好微生物學儀器)附加防護服及生化危險標志開放式工作平臺附加BSC(生物安全柜)以應對潛在氣溶膠3封閉——生物安全水平3特殊診療服務及研究水平2相關措施附加特殊著裝、訪問控制及定向氣流等BSC(生物安全柜)以及\或者所有行為相關初級設備4最高水平封閉——生物安全水平4危險病原體單位水平3基礎上附加艙入口、淋浴出口及特殊廢料處理第三級BSC(生物安全柜)，或與正壓服相結合的第二級BSC(生物安全柜)，雙端高雅過濾空氣（通過墻面）BSC指生物安全柜GMT指良好微生物學儀器（見手冊第四部分）第七頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三生物安全水平1.有機體致病性2.傳播方式和有機體宿主范圍。將受到已存有的當?shù)厝巳好庖吡Α⒓闹魅巳好芏燃斑w移、適當載體表現(xiàn)及環(huán)境衛(wèi)生標準等各種因素的影響。3.當?shù)赜行ьA防措施措施。將包括以下內(nèi)容：以免疫抗體或者管理抗體進行預防（被動免疫）；衛(wèi)生措施，例如：食物及水源衛(wèi)生；動物水庫及節(jié)肢動物媒介控制。4.當?shù)赜行е委煷胧?。將包括被動免疫，暴露后預防接種及抗菌藥運用，抗病毒藥物和化療藥物，并且考慮耐藥菌株出現(xiàn)的可能性。第八頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三生物安全水平實驗室工作中指定給各介質(zhì)的生物安全水平須以風險評估為基礎。該評估將綜合考慮包括高危人群在內(nèi)的其他因素以建立相應的生物安全水平。例如，為保證安全工作行為，分配給高危人群2的相關介質(zhì)可能通常需要生物安全水平2相關設施、設備、準則及程序。盡管如此，如果相關實驗需要提供新一代的高濃度氣溶膠，那么生物安全水平3對于保障必要安全程序可能更為合適，因為該水平可以更好的保障實驗室工作環(huán)境中的遏制氣溶膠。所以，對于相關工作的生物安全水平指定將由風險評估為基礎的專業(yè)評價進行決定，而非根據(jù)對將要使用的致病劑的特定高危人群指定，對實驗室生物安全水平進行自動指定。第九頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三生物安全水平1234實驗室分離否否是是防止感染的房間密封性否否是是通風——外來氣流否需要是是——通風系統(tǒng)控制否需要是是——高效空氣過濾否否是/否是雙門入口否否是是氣壓過濾艙否否否是帶淋浴氣壓過濾艙否否否是休息室否否是——帶淋浴休息室否否是/否否污水處理否否是/否是高壓滅菌器——現(xiàn)場否需要是是——實驗室內(nèi)否否需要是——雙頭否否需要是生物安全柜否需要是是個人安全監(jiān)控能力否否需要是表格3.生物安全水平要求概要

[1]

針對一般交通的環(huán)境及功能性隔離[2]

根據(jù)排氣設備位置確定（見第四部分）[3]

根據(jù)試驗中使用介質(zhì)確定[4]

例如：窗戶、閉路電視及雙向溝通第十頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估進行微生物風險評估最有效的方法之一即為對相關微生物介質(zhì)的高危人群進行列表。盡管如此，對相關介質(zhì)的高危人群的簡單列舉并不足以進行風險評估。還需要對以下因素予以考慮：1、致病介質(zhì)及感染劑量2、暴露的可能性結果3、天然傳播方式4、由于實驗室操作（腸外傳播、空氣傳播及攝取傳播）而造成的其他傳播方式5、特定環(huán)境中的穩(wěn)定劑6.劑量濃度及所需集中材料數(shù)量7.合適寄主的存在（人類或動物）8.從動物學研究和實驗室所需報告或者臨床報告中獲得的信息9.計劃實驗活動（超聲、氣溶膠化及離心分離等方法）10.所有可能擴大介質(zhì)寄主范圍或者改變介質(zhì)敏感度的對有機體基因的操控，以及有效治療方案。11.當?shù)氐挠行ьA防及干預治療措施。第十一頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估有限信息條件下的標本如果信息充足，那么上述風險評估程序?qū)⒌玫搅己玫膱?zhí)行。盡管如此，某些情況下由于信息不充分將導致無法適當執(zhí)行風險評估，例如，在野外收集臨床標本及流行病學樣本。在此情況下，應謹慎的對標本進行如下操作：1、應當遵守標準預防措施（2）的規(guī)定，當樣本取自病人時，應當使用障礙保護規(guī)定（手套、長袍及護眼罩）。2、基礎密封——對于標本處理，生物安全水平2的操作及程序為最低要求。3.樣本運輸須遵守國家及/或者國際規(guī)范及規(guī)則。第十二頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估以下信息可能得以獲知以協(xié)助確定這些標本處理風險：1.病患醫(yī)療數(shù)據(jù)2.流行病學資料（發(fā)病率和死亡率數(shù)據(jù)，懷疑的傳播途以及其他流行暴發(fā)調(diào)查數(shù)據(jù)）3.標本地理來源信息。在爆發(fā)病因不明疾病時，將由國家主管當局以及/或者世界衛(wèi)生組織在世界范圍網(wǎng)站上發(fā)布適當及特許的行為指南以指導如何對樣品進行委托托運或者根據(jù)其應當被分析的程度進行生物安全水平指定。（適用于2003年嚴重急性呼吸系統(tǒng)綜合癥SARS的爆發(fā)）第十三頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估在實驗室中得以傳播的主要可能方式為：與相關介質(zhì)進行直接的皮膚、眼睛或者黏膜接觸以注射器針頭或者其他被污染銳器進行腸外接種，或者被已感染動物和節(jié)肢動物媒介咬傷；3)一種被感染介質(zhì)懸浮液的吸入，或者被污染手部與嘴部的接觸；4)感染性氣溶膠吸入對于天然人類疾病的傳播方式的了解，有助于辨認實驗室中可能的傳播方式以及對于公共健康的潛在風險。例如，與被感染患者的呼吸道粘膜流出物的接觸可以導致被感染介質(zhì)的傳播，這可充分說明實驗室工作人員在對相關介質(zhì)進行處理時由于粘膜暴露于處理過程中產(chǎn)生的液滴，從而處于被感染的風險之中。第十四頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估對于處理相關介質(zhì)的人員以及其他實驗室使用人而言，一種可以通過粘膜暴露于被感染氣溶膠從而得以傳播的傳染疾病是一種嚴重的實驗室危險。由于被感染氣溶膠可能不是一種對于天然性疾病傳播的公認方法，這種危險需要進行特殊的預防措施。對于建立起通過空氣傳播的疾病的風險評定感染劑量以介質(zhì)穩(wěn)定劑非常重要。例如，在運用貝氏柯克斯體下實驗室中發(fā)生的多重感染報告中，低量吸入感染劑量（估計其

吸入感染顆粒為10）、以及相關介質(zhì)在環(huán)境壓力的抵抗力使其介質(zhì)可以在生活寄主或者傳播媒介之外長時間生存以至于成為一種氣溶膠危害。第十五頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估在涉及試驗用動物的情形下，人畜共患劑的危險特征需要進行審慎的風險評估。在實驗中試驗用動物的唾液，尿液或糞便可以散發(fā)人畜共患劑以及其他感染性介質(zhì)是一種重要的危險信號。一靈長類研究中心實驗室工作人員由于Cercopithecine皰疹病毒1型感染而導致的死亡，是由于眼部飛濺接觸到由恒河猴帶來的生物材料，該案例說明了該危害的嚴重性。對于這種潛在危險的忽視將導致實驗室員工對于涉及不可預料的多重感染的暴發(fā)不具抵抗力。通過7次試驗，來自被感染動物的傳染疾病傳染給了同籠健康動物是該危害的可靠證明。上述實驗中沒有傳染性的案例并不能排除改為還行。例如，被感染弗朗西斯tularensis菌、貝氏柯克斯體、Coccidioides絲蟲或者衣原體鸚鵡熱的試驗用動物以及可以導致多種LAIs的介質(zhì)鮮少感染同籠物種。第十六頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三評估風險轉(zhuǎn)基因介質(zhì)危害。對于轉(zhuǎn)基因介質(zhì)危害特征的確認和評估涉及因素與野生型動物風險評估考慮因素相同。其中需要重視的是，轉(zhuǎn)基因?qū)е陆橘|(zhì)致病性可能性提高或者可能導致對藥物或者其他有效治療的抗藥性。對于新設計介質(zhì)而言，由于某些重要信息的缺失，可能導致風險評估非常困難或者不甚完整。一些調(diào)查研究人員對于新設計介質(zhì)的最新研究中報告，觀察到預料之外的毒性增強。上述觀察研究為應對毒力基因可能導致風險提升的可能性保持警覺提供理由。上述研究還說明風險評估是一項持續(xù)性過程，要求其根據(jù)研究進展不斷更新。第十七頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估

細胞培養(yǎng)。如果暴露于包含在細胞和組織中的潛伏期感染介質(zhì)以及偶然劑之下，處理或者操作上述人類或者動物細胞及組織的工作人員面臨風險。美國民眾眾被感染個體中存在的，潛伏期皰疹病毒恢復、對于器官接受者非故意性疾病傳播以及人類免疫缺陷病毒（HIV）、乙肝病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）的持續(xù)性對該風險予以了說明。另外，人類腫瘤移植意外的傳染給健康接受者的案例表明，對于處理上述細胞的實驗室工作人員而言具有潛在危害性。此外，如果人類和動物細胞系未經(jīng)特色化或者來自二手資料可能對實驗室產(chǎn)生感染危害。例如，在裸鼠腫瘤細胞系接種過程中，如該細胞系已不知不覺中受淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒的感染將導致多種LIAs。第十八頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估

實驗室流程危險特征

包括：利用注射器針頭或者其他被污染銳器進行腸外接種、溢漏和飛濺到皮膚和粘膜上傳播、通過口部吸液的攝入、動物叮咬和劃傷以及感染氣溶膠的吸入性接觸。上述四種實驗室傳播途徑容易被檢測，但是只占報告LAIs情形中的20%。這種感染的絕大部分報告中，并不包括充分的信息以確認傳染傳播途徑。研究表明可能感染源（動物或體外寄生物、臨床標本、機制以及氣溶膠）在將近50%的情形下是非常明顯的。第十九頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估

實驗室流程危險特征由于氣溶膠在試驗中無處不在、不易察覺并且極易蔓延，氣溶膠是一項嚴重危險，使得實施相關程序的實驗室工作人員以及其他實驗室人員處于受感染的風險之下。在生物安全學界已達成共識，對由于相關程序和操作產(chǎn)生的LAIs氣溶膠進行調(diào)查的實驗室負責人和主要調(diào)查人員，尤其在涉及相關工作人員僅知道風險因素來自于其工作相關介質(zhì)或者工作完成區(qū)域的情況下，上述人員是許多LAIs的主要傳染源。第二十頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估

實驗室流程危險特征

對微生物懸架傳遞能量的程序?qū)a(chǎn)生氣溶膠。在實驗室中日常運用于傳染性介質(zhì)處理的相關程序和設備，如吸液、攪拌機、非自備離心機、近距離聲波定位器和旋渦混合器被證明為氣溶膠來源。這些程序和設備將產(chǎn)生可吸入尺寸的顆粒，可在空氣中長期存在傳播。當被吸入后，這些顆粒將滯留在肺部，并對執(zhí)行操作工作的人員、實驗室同事以及使用相連空間從而與實驗室空氣相接觸的人員產(chǎn)生危害。一些調(diào)查人員已經(jīng)確定普通實驗室流程過程中的氣溶膠輸出量。另外，調(diào)查人員已經(jīng)提出對實驗室來源氣溶膠吸入量的估量模式。氣溶膠危害特征的參數(shù)包括感染性介質(zhì)吸入量、氣溶膠生存能力、氣溶膠濃度以及顆粒尺寸。第二十一頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估

實驗室流程危險特征

可產(chǎn)生可吸入尺寸顆粒的流程及設備也可產(chǎn)生可以含有一種感染性介質(zhì)多種類型版本的較大尺寸的滴液。較大尺寸滴液可以迅速擴散到空氣中，污染手套和工作表面并且可能污染到執(zhí)行流程工作人員的粘膜。對實驗室操作中可吸入顆粒及滴液兩種物質(zhì)的釋放的估算中，可確定可吸入性組成部分相對較小并且變化較少；相對而言，手部和表面的污染較為嚴重且變化很多。滴液污染接觸的潛在風險要求其得到與可吸入氣溶膠風險評估一樣的關注。第二十二頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三風險評估

實驗室流程危險特征

所用設備將顯著影響氣溶膠輸出和劑量。仔細優(yōu)秀的工作人員將大大降低氣溶膠的產(chǎn)生。粗心急躁的工作人員將大大的增加氣溶膠危害。例如，急躁的工作人員在聲波均質(zhì)操作中可能會導致最高曝氣，而細心的工作人員會時刻把握器械以降低曝氣。實驗表明最大曝氣下的氣溶膠負擔是最小曝氣下氣溶膠負擔的200倍。在泡沫吸液及最少泡沫的試驗中，具有相同的結果。密封得當及運用得當?shù)膶嶒灢僮饕嗫山档惋L險。第二十三頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

與工作操作、安全設備及設施安全保障相關的潛在風險

工作人員保護其自身、實驗室其他人員及公眾暴露于危險介質(zhì)的第一道防線。良好微生物準則是否得到良好及熟練地遵守，以及安全設備的是否正確使用決定著保護措施的有效性。風險評估需要確認在實驗室工作人員操作程序中潛在的所有缺陷。粗心大意是最嚴重的問題，因為他將減弱所有實驗室安全保障設施的功效并且增加對工作同事的風險。對于與危險介質(zhì)打交道的人員來說，培訓、經(jīng)驗、關于相關介質(zhì)和流程危害的了解、良好的習慣、慎重、關注以及對于工作伙伴健康的關注都是一位實驗室工作人員所必備的先決品質(zhì)，以將降低固有風險。盡管擁有優(yōu)秀的科學知識，但并非所有實驗室工作人員擁有上述先決條件。實驗室負責人或者主要調(diào)查人員應當對新進員工進行多次培訓以保證無菌技術和安全預防措施成為第二天性。第二十四頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

與工作操作、安全設備及設施安全保障相關的潛在風險

某些危害需要在安全玻璃、實驗室長袍以及手套之外附加特殊個人防護設備。例如，具有飛濺危險的操作流程可能需要口罩及面罩的使用以提供充分的保護。個人保護型設備的培訓不足可能降低其使用有效性，或者導致錯誤的安全感，還可能增加實驗室工作人員的風險。例如，獨立于操作用介質(zhì)，呼吸器配搭者可能會產(chǎn)生風險。第二十五頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

與工作操作、安全設備及設施安全保障相關的潛在風險

如生物安全柜（BSC）、離心機安全杯以及密封轉(zhuǎn)子類的安全設備，被運用于向?qū)嶒炇夜ぷ魅藛T提供高度的安全保護，以防止其與微生物和液滴進行接觸。為正常運作的安全設備具有危害性，尤其在使用者沒有注意到機器失常的時候。由于錯誤的安裝位置、房間空間循環(huán)、下降氣流、漏水的過濾器、開啟的窗扇、擁擠的工作表面以及較差的使用技巧將會減低生物安全柜（BSC）的密封能力。只有在正確操作相關設備的前提下，現(xiàn)代離心機的安全性能才能有效。針對設備正確使用、正確流程、日常監(jiān)測以及潛在機器失常，以及設備定期再認證的必要培訓是非常重要的。第二十六頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

與工作操作、安全設備及設施安全保障相關的潛在風險

安全保證設置防止實驗室相關介質(zhì)意外外泄事故的發(fā)生。在BSL-3和BSL-4的情況下，他們的使用尤其關鍵，因為在此情況下指定到該水平的相關介質(zhì)可以通過吸入途徑進行疾病傳播或者將導致致命疾病。例如，一種定向氣流安全保障設施。該保障設施可以防止氣溶膠從實驗室傳播到建筑物的其他區(qū)域。由實驗室取暖設備的操作性能、通風設備以及空調(diào)系統(tǒng)（HVAC）決定氣流定向。HVAC系統(tǒng)要嚴格監(jiān)控以及定期維護以保持其操作性能。定向氣流的缺乏將減低安全實驗室操作。BSL-4密封設施提供更為完備的安全保障，這要求更為專業(yè)的設計和操作。第二十七頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

與工作操作、安全設備及設施安全保障相關的潛在風險

設施安全保障是風險評估不可或缺的一個考慮因素。安全生物安全專業(yè)、建筑和配備人員以及IBC將抱住設置向計劃工作提供相應保護，并在必要時提出改變建議。在舊BSL-3設施重建或者翻修的基礎上，風險評估可以提供包括附加設施安全保障在內(nèi)的需求。第二十八頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

評估風險及選擇合適安全保障措施的途徑

生物風險評估是一個需要考慮各種介質(zhì)和流程諸多危險特性的主管過程，并且通常在不甚完全的信息基礎上作出判斷。在此，對于執(zhí)行生物風險評估并沒有一個標準途徑，但是在知道過程中一些結構具有借鑒意義。第二十九頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

評估風險及選擇合適安全保障措施的途徑

首先，確認介質(zhì)危險性并且作出初步風險評估?？紤]相關介質(zhì)的主要危險特征，其中包括在易感人群宿主中的傳染能力和致病力，疾病嚴重程度以及預防措施和有效治療方式的可行性。第三十頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

評估風險及選擇合適安全保障措施的途徑

第二，確認實驗室流程中的危險。主要實驗室流程危險包括介質(zhì)濃度、懸浮量、在設備和操作流程中產(chǎn)生的細小顆粒氣溶膠以及較大空氣顆粒（滴液），以及銳器的使用。涉及動物的流程中存在咬傷和劃痕、與動物介質(zhì)相解除，以及試驗中產(chǎn)生感染性氣溶膠的處理在內(nèi)的諸多危險，復雜的實驗操作流程也存在危險。對于介質(zhì)處理中所用典型日常流程相關的主要實驗室危險，相關介質(zhì)綜述提供了相關信息。在流程危險不同于相關介質(zhì)情況綜述的擬議試驗流程時，或者無法獲取相關介質(zhì)簡要說明的情況下，風險評估需要指出相關程序的具體危險。第三十一頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

評估風險及選擇合適安全保障措施的途徑

第三，最后確定合適的生物安全水平并且根據(jù)風險評估顯示選擇附加的預防措施。最終選定的合適生物安全水平以及任何附加實驗預防措施都要求綜合考慮所有操作流程、安全設備以及安全保障設施的配合。另外，還需注意實驗室工作人員在疾病易感性上存在個體差異。已患疾病、藥物、免疫力降低以及可能提高嬰兒接觸某些介質(zhì)可能性的妊娠或哺乳，都是可能提高個體得到LAI風險的情形。在此情況下，建議與具有傳染疾病方面執(zhí)業(yè)醫(yī)師知識的人員進行咨詢。第三十二頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

評估風險及選擇合適安全保障措施的途徑

第四，根據(jù)安全操作準則以及安全設備統(tǒng)一性的考慮對員工資質(zhì)進行評估。對于實驗室工作人員、實驗室相關其他人員以及公眾的保護最終依靠于實驗室工作人員自身。在執(zhí)行風險評估時，實驗室負責人或者主要調(diào)查人員需要保證，在處理相關介質(zhì)時，相關實驗室工作人員已經(jīng)取得執(zhí)行微生物準則和安全設施所需資質(zhì)，并且已經(jīng)養(yǎng)成在上述準則執(zhí)行中保持良好表現(xiàn)的習慣。個人培訓、處理受感染介質(zhì)經(jīng)驗、運用無菌技術及BSC的相關資質(zhì)、危機應對能力以及保護自身及其他人員的責任感都是非常重要的評估因素，以保障實驗室工作人員能夠安全進行工作。實驗室負責人或者主要調(diào)查人員還應當保證必須安全設備以及予以適當操作。例如，一個生物安全柜并不能充分代表其對于實驗室使用工作人員以及其他人員具有顯著的危害性。負責人應當在開始處理相關介質(zhì)前修復所有的設備缺陷。第三十三頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

風險評估

評估風險及選擇合適安全保障措施的途徑

第五，將風險評估提交一位具有生物安全專業(yè)知識在標的物領域進行研究的專家以及國際生物倫理委員會(IBC)進行復審。由具有相關知識的個人對風險評估以及選定安全保障措施進行復審十分有益，并且符合一些相關規(guī)范機構的要求。由當?shù)貒H生物論理委員會（IBC）對潛在高度風險議定書進行復審應當成為操作標準。對于該步驟的自愿履行，將促進在微生物和生物醫(yī)學實驗室中危險介質(zhì)處理工作安全準則的運用。第三十四頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

生物安全

生物安全原則所有生物安全項目的基本目標在于對潛在危害性生物介質(zhì)的密封。術語“密封”運用于描述在實驗室環(huán)境中，對于受感染材料進行處理或者保存時，所需的安全方法、設施以及設備。密封的目的在于減小或者消除對于實驗室工作人員、其他人員以及潛在危害介質(zhì)外部環(huán)境的接觸暴露。疫苗的使用可能提供更高水平的個人保護。對于具體介質(zhì)風險評估工作的完成將決定這些因素的適當組合。第三十五頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

生物安全

實驗室操作準則及技巧密封措施中最為關鍵的因素在于嚴格遵守標準微生物操作準則和技巧。與受感染介質(zhì)或者潛在受感染材料進行工作的個體必須對潛在危險保持警惕，并且必須經(jīng)過相應培訓且具有實踐操作的相應資質(zhì)，另外還需要能夠安全處理這種材料的技巧。實驗室負責人對提供或者安排適當?shù)膫€人培訓負有責任。所有實驗室應當指定或者采納一種生物安全或者操作指南，以確認將會或者可能遭遇的危險，以及能夠降低或者消除暴露于這種危害之中的具體操作和流程。必須指派一位經(jīng)過培訓，對實驗技巧、安全流程以及在處理受感染介質(zhì)過程中相關危險具有相應知識的科學家，對所有受感染介質(zhì)或者材料的工作進行負責。此人須與生物安全或其他健康安全專業(yè)人士就風險評估進行咨詢。第三十六頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

生物安全

如果標準實驗操作準則不足以控制某種介質(zhì)或者試驗流程有關的危險，那么則需要附加相關措施。實驗室負責人須負責選定附加的安全操作流程，以控制相關介質(zhì)或流程造成的危害。實驗室人員、安全操作準則以及技巧須輔以適當設施設計以工程特點、安全設備以及管理操作進行。第三十七頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

生物安全

安全設備（主要障礙以及個人防護設備）安全設備包括生物安全柜（BSC）、密封容器以及其他工程控制，以消除或者減小與危險性生物材料的接觸。對于由微生物操作流程中產(chǎn)生的容易造成感染的飛濺或者氣溶膠，生物安全柜（BSC）是對其進行密封的主要設備。在附錄A中，對三種生物安全柜（分類Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）在微生物實驗室中的運用進行了闡述和說明。開放額生物安全柜分類Ⅰ、Ⅱ作為主要的障礙物，在運用良好微生物技巧時對于實驗室工作人員以及相關環(huán)境提供關鍵水平的保護。生物安全柜類別Ⅱ通過柜內(nèi)的操作，從材料的外部密封提供保護措施（例如：細胞培育，微生物儲存）。氣密生物安全柜類別Ⅲ對于個人和環(huán)境提供可實現(xiàn)的最高水平的保護措施。第三十八頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

生物安全

另外一項重要的安全障礙措施范例為離心杯，這是一種設計來在離心過程中阻止氣溶膠泄漏的密封容器為減少氣溶膠的危害性，在處理受感染介質(zhì)的過程中必須使用如生物安全柜或者離心杯之類的容器控制。安全設備可能還包括個人防護道具，如手套、大衣、長袍、鞋套、靴子、呼吸器、面罩、安全玻璃罩或者護目鏡等。在處理相關介質(zhì)、動物或者材料時，個人防護設備通常與生物安全柜和其他設備結合使用。在一些情形下，如果不能使用生物安全柜，那么個人防護設備可能組成個人與受感染材料之間的主要障礙。事例包括對某些動物的研究、動物尸檢、介質(zhì)繁殖活動以及與實驗室設施維護、服務或者支持有關的活動。第三十九頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

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設施設計和施工（第二重障礙）相關設施的設計與施工對實驗室工作人員的保護具有重大意義，他對于實驗室以外的人們提供了一層障礙，保護了社會中的個人及動物不受到可能從實驗室中意外泄露的受感染介質(zhì)的威脅。實驗室負責人有責任提供與實驗室功能以及相關介質(zhì)推薦生物安全水平相稱的保護設施。被推薦的第二重障礙將根據(jù)具體介質(zhì)的傳播風險決定。例如，在BSL-1和BSL-2設施中絕大多數(shù)實驗室工作中產(chǎn)生的暴露風險將與相關介質(zhì)，或者通過工作環(huán)境受到感染的非故意性接觸暴露直接相關。在這些實驗室中的第二重障礙可能包括實驗室工作區(qū)域與公共通道之間的隔離，凈化設施（例如：高壓消毒設施）以及手部清潔設施。第四十頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

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當暴露于傳染病氣溶膠從而導致傳染病風險時，更高水平的主要密封措施和多種第二重障礙可能成為防止受感染介質(zhì)泄漏到外部環(huán)境的必要措施。這種設計特征包括特殊的培峰系統(tǒng)以保證定向氣流，空氣處理系統(tǒng)以從肺氣腫凈化或者消除相關介質(zhì)，存取控制區(qū)，實驗室入口氣艙，或者單獨建筑物或者模塊以與實驗室相隔離。實驗室設計工程可能提及由美國社會制冷與空調(diào)工程師協(xié)會出版社（ASHRAE）出版的《實驗室設計指導》中的具體通風設計建議。第四十一頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

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生物安全水平1操作準則，安全設備和設施設計及施工在本科教育及第二教育培訓與教學中較為合適，還合適于其他已界定的和已特征化的多樣微生物鏈相關實驗室工作，而上述多樣微生物是與健康成年人中一貫造成疾病的相關微生物所不同的?？莶菅挎邨U菌、(非致病性)感染鼠（naegleriagruberi）、犬傳染性肝炎以及根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）指南免除的生物體是符合這些標準的代表性微生物。許多介質(zhì)與人類患疾病通常不具關聯(lián)，盡管如此，這些介質(zhì)為機會性病原體并且可能傳染給年輕、年老以及患有免疫缺陷或者免疫抑制的個人。經(jīng)過多重體內(nèi)通道的疫苗株不應當因為其是疫苗株而被認為是無毒的。BSL-1代表著基礎性密封水平，其由標準微生物操作規(guī)則所決定，不具有被推薦的特殊第一或第二重障礙，除了洗手之外。第四十二頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

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生物安全水平2操作規(guī)則、設備以及設施設計和施工適用于臨床、診斷、教學和其他實驗室工作，這些工作在固有中等風險介質(zhì)（該介質(zhì)出現(xiàn)在社會中，且與不同程度的人類疾病相關聯(lián)）的廣譜范圍內(nèi)完成?；诹己梦⑸锛记桑@些介質(zhì)可被安全的運用于開放式工作臺上進行的活動中，過程中產(chǎn)生飛濺或者氣溶膠的可能性較低。乙型肝炎病毒、HIV、沙門菌以及屬弓形蟲是指定在這個密封水平內(nèi)的微生物代表物。當工作是以任何一種人源性血、體液、組織或者主要人類細胞系完成，那么BSL-2是可適用的，在這種情況下出現(xiàn)的傳染病介質(zhì)可能是未知的。（運用人源材料進行的實驗室個人工作需要根據(jù)職業(yè)安全與衛(wèi)生署(OSHA)規(guī)定的具體防范措施進行）。與這些介質(zhì)相關的個人工作的主要危險在于意外經(jīng)皮或黏膜接觸，或者對于傳染性材料的攝入。當使用被污染的枕頭或者尖銳器械時，需要極度小心。盡管通常而言BSL-2水平中的有機物被認為不會通過氣溶膠途徑傳播，帶有氣溶膠或者高飛濺可能性的程序可能會增加這種個體接觸風險，所以必須使用初級密封設備，或者使用如生物安全柜或者安全離心杯等類設備進行實驗。應當正確使用個人防護設備，如飛濺防護罩、面罩、長袍以及手套。第二重防護，必須安裝如洗手槽、廢物凈化設施類的設施以減低環(huán)境污染。第四十三頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

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生物安全水平3操作準則、安全設備以及設施設計與施工可適用于臨床、診斷、教學、研究或者培育設施，這些工作以固有或者外來介質(zhì)進行，具有呼吸道傳播可能性，并且可能導致嚴重甚至致命性的傳染病。結核分枝桿菌、圣路易斯腦炎病毒以及貝氏柯克斯體是指定到該水平的微生物代表物。從事該介質(zhì)工作的個體主要危害在于自體疫苗接種、攝入以及傳染性氣溶膠接觸。在BSL-3水平中，更加重視第一重和第二重防護，以保護毗鄰區(qū)、社會以及可能接觸潛在傳染性氣溶膠的環(huán)境中的個體。例如，所有實驗工作不惜在生物安全柜或者其他密封設備中進行，如氣密氣溶膠培育室。這一水平的第二重防護包括實驗室入口控制以及通風要求以降低傳染性氣溶膠從實驗室中泄露的危險。第四十四頁，共四十九頁，編輯于2023年，星期三

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生物安全水平4操作準則、安全設備以及設施設計與施工可適用于危險外來介質(zhì)相關工作，這些介質(zhì)可能導致高度致命個人疾病風險，通過氣溶膠途徑進行傳播，并且不具有疫苗或者治療方法。與BSL-4水平介質(zhì)具有接近或者相同抗原的相關介質(zhì)也需要以此水平標準進行處理。當獲得充分數(shù)據(jù)后，可能繼續(xù)使