電鏡技術(shù)及超薄切片技術(shù)醫(yī)學(xué)課件

電子顯微鏡室簡介我室的電鏡型號(hào)和性能如下H6004型透射電鏡,購于1989年,最大點(diǎn)分辨率為0.36nm,有效放大倍數(shù)達(dá)30萬倍。H-7500型透射電鏡,購于2019年,最大點(diǎn)分辨率為0.24nm,有效放大倍數(shù)達(dá)60萬倍S-300N型掃描電鏡,購于2019年,有效放大倍數(shù)達(dá)30萬倍。電鏡的發(fā)展歷程1924年,法國物理學(xué)家Broglie提出了“電子與光一樣,具有波動(dòng)性“的假說,并計(jì)算出電磁波長為0005m1926年,德國科學(xué)家Busch發(fā)現(xiàn)了帶電粒子在電場或磁場中偏轉(zhuǎn)聚焦的現(xiàn)象,類似于光線通過透鏡可被聚焦一樣19281931年間,德國年輕的大學(xué)生Ruska測量了磁透鏡的聚焦特性,并開展了電子放大成像的研究,終于在1938年成功研制了世界上第一臺(tái)真正的電子顯微鏡,放大倍數(shù)為1200倍,被譽(yù)為電子顯微鏡之父。,并在1986年獲得諾貝爾獎(jiǎng)20世紀(jì)50年代初到60年代末期,電鏡發(fā)展很快,從性能到構(gòu)造都得到很大的改進(jìn),特別是分辨本領(lǐng)得到大幅度提高達(dá)到lnm左右,到80年代的點(diǎn)分辨率已接近01nm,最新研制的超高壓透射電鏡的點(diǎn)分辨率可達(dá)0.005nm電鏡的基本類型:1、透射電子顯微鏡2、掃描電子顯微鏡3、分析電子顯微鏡4、超高壓電子顯微鏡5、掃描探針顯微鏡(掃描隧道顯微鏡、原子力顯微鏡、掃描光子顯微鏡等)電子顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu)光的衍射現(xiàn)象由于光具有波動(dòng)性,當(dāng)光線通過小孔或小孔光源經(jīng)光學(xué)系統(tǒng)成象會(huì)生衍射。其圖案是:中央部分一個(gè)亮斑,在其周圍有明暗交替的園環(huán)。◎6AvDD可以這么說,顯微鏡分辯本領(lǐng)是由其產(chǎn)生的衍射圖中央亮斑半徑D(分辨能力)而定:阿貝公式0.6DENSINa光的波長為A=500nm=05m介質(zhì)折射率N(油)=1.5物體與物鏡所形成夾角的半數(shù)a<90中央亮斑的半徑D=200mm=02um分辨本領(lǐng)測算1、人眼在明視距離250mm處能分辨0.2mm的兩點(diǎn)。油鏡最小能分辨0.2μm的兩點(diǎn)。則油鏡理論最大放大能力為:0.2mm/0.2um=1000、假如一臺(tái)電鏡的點(diǎn)分辨率為0.nm,則其理論放大倍數(shù)為:0.2mm/0.1nm=2x103、H7500型透射電鏡的點(diǎn)分辨率為0.24mm,則其理論放大倍數(shù)為:0.2mm/0.24nm=0.83x10°。而其有效放大倍數(shù)為0.6x106瑞利準(zhǔn)則光線通過二個(gè)比較靠近的小孔時(shí),這個(gè)小孔的衍射圖會(huì)重疊在一起衍射圖的中央亮斑正好落在另一個(gè)行射圖的第一暗環(huán)中心時(shí),這二個(gè)點(diǎn)剛可以分辯這就是顯微鏡分辯本領(lǐng)的瑞利準(zhǔn)則運(yùn)動(dòng)著的電子所產(chǎn)生電磁波長為1.226m)如V=50000v則=0005m=000005m是光的入=500nm的10萬分之大大減少了衍射光斑D的值光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡在工作原理上的比較光學(xué)顯微鏡是利用玻璃制作的透鏡對(duì)光進(jìn)行折射,將一物點(diǎn)發(fā)出不同角度的光線最終會(huì)聚成一個(gè)像點(diǎn)。