藥品微生物檢驗(yàn)現(xiàn)狀及藥典微生物檢查框架詳解演示文稿

藥品微生物檢驗(yàn)現(xiàn)狀及年版藥典微生物檢查框架詳解演示文稿1當(dāng)前第1頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)（優(yōu)選）藥品微生物檢驗(yàn)現(xiàn)狀及年版藥典微生物檢查框架2當(dāng)前第2頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)藥品質(zhì)量體系可控性安全性有效性圖1藥品質(zhì)量體系構(gòu)成與相互關(guān)系3中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第3頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)醫(yī)藥產(chǎn)品是人類與疾病斗爭(zhēng)的工具。在世界各國(guó)的醫(yī)藥實(shí)踐中，由于藥品中污染微生物而引發(fā)的悲劇時(shí)有發(fā)生。藥品中污染的微生物通過(guò)微生物體及其分泌代謝產(chǎn)物導(dǎo)致機(jī)體過(guò)敏、中毒、感染等，嚴(yán)重的可以直接導(dǎo)致菌血癥危及生命。此外，某些藥品中污染微生物通過(guò)代謝活動(dòng)改變藥物組成、破壞有效成份而造成療效改變或喪失。所以，世界各國(guó)高度重視藥品微生物檢查，無(wú)菌/微生物限度檢查均為各國(guó)藥典中的重要內(nèi)容。藥品微生物檢驗(yàn)概況4中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第4頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)我國(guó)開展藥品無(wú)菌檢查和微生物限度檢查已有數(shù)十年的歷史。新中國(guó)第一部藥典（1953年版）收載了無(wú)菌檢查法。我國(guó)開展藥品微生物限度檢查始于1972年。1978年頒發(fā)了第一個(gè)“藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”。1995年版中國(guó)藥典收載微生物限度檢查法。2000年版中國(guó)藥典收載微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。2005年版中國(guó)藥典微生物限度檢查法引入方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)要求。藥品微生物檢驗(yàn)概況5中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第5頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)在中央和各地政府有關(guān)部門的關(guān)懷和重視下，經(jīng)過(guò)我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)工作者幾十年來(lái)的艱苦奮斗，我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)工作不斷發(fā)展，標(biāo)準(zhǔn)不斷完善，逐步建立起了符合我國(guó)國(guó)情的藥品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)體系。至2010版中國(guó)藥典，我國(guó)藥品無(wú)菌、微生物限度檢查方法和標(biāo)準(zhǔn)在科學(xué)性、合理性以及與國(guó)際接軌方面均有了長(zhǎng)足進(jìn)展，使我國(guó)藥品無(wú)菌和微生物限度檢查步入了一個(gè)嶄新的時(shí)期。藥品微生物檢驗(yàn)概況6中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第6頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)2006年7～8月發(fā)生了震驚全國(guó)的“欣弗事件”！2006年11月1日晚，肇事企業(yè)安徽華源生物藥業(yè)有限公司原總經(jīng)理裘祖貽，在公司辦公室自殺身亡。據(jù)推測(cè)，其自殺原因可能是承受不了“欣弗事件”的重壓?！靶栏ナ录敝两裼嗾鸩粩?，將對(duì)我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)及控制工作產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響！“欣弗事件”！7中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第7頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)技術(shù)落后、標(biāo)準(zhǔn)化程度低；重要性被忽視、事故頻繁！——標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)步與標(biāo)準(zhǔn)化滯后的矛盾藥品微生物檢驗(yàn)現(xiàn)狀8中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第8頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)藥品微生物檢驗(yàn)的機(jī)遇與挑戰(zhàn)從“欣弗”到“刺五加”，頻繁的不良事件，把藥品微生物檢驗(yàn)工作推到一個(gè)前所未有的關(guān)注高度，提供了發(fā)展的機(jī)遇；藥品質(zhì)量事故高發(fā)期，如何快速、準(zhǔn)確地獲得檢驗(yàn)結(jié)果，又是對(duì)當(dāng)前藥品微生物檢驗(yàn)工作的一個(gè)挑戰(zhàn)。9中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第9頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)中心任務(wù)

把握機(jī)遇，——全面推進(jìn)我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)工作；迎接挑戰(zhàn)，——在突發(fā)、應(yīng)急檢驗(yàn)中及時(shí)提供一個(gè)可靠的檢驗(yàn)結(jié)論。10中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第10頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)建立合理的藥品微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)體系——企業(yè)：PAT(ProcessingAnalyticalTechnology)建立合理的上市藥品監(jiān)督抽驗(yàn)機(jī)制——監(jiān)督管理部門：以不良反應(yīng)為先導(dǎo)的國(guó)家抽驗(yàn)計(jì)劃建立完善的藥品微生物檢驗(yàn)和控制體系——檢驗(yàn)和質(zhì)控部門：樹立微生物檢驗(yàn)新理念，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)微生物控制體系的認(rèn)證與監(jiān)管——生產(chǎn)部門：生產(chǎn)工藝驗(yàn)證和執(zhí)行監(jiān)管藥品微生物檢驗(yàn)現(xiàn)狀11中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第11頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)無(wú)菌/微生物限度檢查理念環(huán)境保證培養(yǎng)基保證無(wú)菌性檢查靈敏度檢查有效的方法方法驗(yàn)證SOP操作有效的結(jié)果可靠的結(jié)論結(jié)果判斷12中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第12頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)微生物檢驗(yàn)與微生物控制的關(guān)系圖2藥品微生物控制、微生物檢驗(yàn)與參數(shù)放行微生物檢驗(yàn)微生物控制參數(shù)放行13中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第13頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)14中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第14頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)15中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第15頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)中國(guó)藥典2010年版框架2010年版《中國(guó)藥典》已經(jīng)編制完成，由中國(guó)醫(yī)藥科技出版社出版發(fā)行，2010年7月1日正式實(shí)施。2010年版《中國(guó)藥典》是新中國(guó)成立60年來(lái)組織編制的第九版藥典，新版藥典在總結(jié)歷版藥典的基礎(chǔ)上，充分利用近年來(lái)國(guó)內(nèi)外藥品標(biāo)準(zhǔn)資源，注重創(chuàng)新與發(fā)展，實(shí)事求是地反映了我國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)和臨床用藥水平的發(fā)展現(xiàn)狀，為進(jìn)一步加強(qiáng)藥品監(jiān)督管理提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。2010年版《中國(guó)藥典》分為三部出版，一部為中藥，二部為化學(xué)藥，三部為生物制品。一、二、三部共同采用的附錄分別在各部中予以收載，并盡可能做到統(tǒng)一協(xié)調(diào)、求同存異、體現(xiàn)特色。16中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第16頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)中國(guó)藥典2010年版框架2010年版《中國(guó)藥典》關(guān)于微生物檢查有以下主要特點(diǎn)：規(guī)定眼用制劑按無(wú)菌制劑要求，明確用于燒傷或嚴(yán)重創(chuàng)傷的外用劑型均按無(wú)菌要求。中藥橡膠膏劑首次提出不得檢出致病菌檢查要求。新增抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則、藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則、微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則、藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則等，以縮小附錄在微生物方面與國(guó)外藥典的差距。17中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第17頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)中國(guó)藥典2010年版框架USP31-Chart10MicrobiologicalTests<51>AntimicrobialEffectivenessTesting<55>BiologicalIndicators-ResistancePerformanceTests<61>MicrobialLimitTests(<62>)<71>SterilityTests<1111>MicrobiologicalAttributesofNonsterilePharmaceuticalProduct<1112>ApplicationofWaterActivityDeterminationtoNonsterilePharmaceuticalProduct<1116>MicrobiologicalEvalutionofCleanRoomsandOtherControlledEnvironments<1117>MicrobiologicalBestLaboratoryPractices<1223>ValidationofAlternativeMicrobiologicalMethods中國(guó)藥典2010年版無(wú)菌檢查法微生物限度檢查法滅菌法抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則18中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第18頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄XVIIID2010年版《中國(guó)藥典》二部附錄XIXN19中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第19頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則——目的如果藥物本身不含有充分的抗菌力，在正常儲(chǔ)存和使用過(guò)程中可能發(fā)生細(xì)菌污染和大量繁殖；對(duì)患者引起污染或造成藥物變質(zhì)。在生產(chǎn)過(guò)程中添加適合的防腐劑以保證藥品的質(zhì)量。所有防腐劑都具有一定的毒性，而且在貯存過(guò)程中其有效性有可能因藥物的活性成分提高或降低，為保證藥品的質(zhì)量和用藥安全，添加防腐劑的量應(yīng)根據(jù)制劑本身是否具抗菌活性，保持最低有效量。防腐劑效力的測(cè)定可為生產(chǎn)過(guò)程中添加防腐劑提供指導(dǎo)，隨著科學(xué)發(fā)展，新型防腐劑大量出現(xiàn)，防腐劑效力的測(cè)定更為重要；使生產(chǎn)者正確掌握產(chǎn)品中添加防腐劑的效力，有助于選擇合適的防腐劑，也可對(duì)防腐劑使用的正確性給予評(píng)價(jià)。當(dāng)前第20頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則——國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀目前歐洲、美國(guó)、英國(guó)等國(guó)藥典均已在附錄中收載了防腐劑效力測(cè)定，雖然方法不同，但均采用了生物測(cè)定方法。我國(guó)藥典防腐劑效力測(cè)定目前還是空白，有必要經(jīng)過(guò)研究，制訂出科學(xué)、簡(jiǎn)便、易行的測(cè)試方法收載于藥典附錄中。防腐劑效力的測(cè)定，不但為生產(chǎn)者提供正確的使用防腐劑的指導(dǎo)，而且可對(duì)使用防腐劑的正確性給予評(píng)價(jià)。當(dāng)前第21頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則——基本規(guī)定抑菌劑效力檢查法系用于測(cè)定滅菌、非滅菌制劑中抑菌劑的活性，以評(píng)價(jià)最終產(chǎn)品的抑菌效力，同時(shí)也可用于指導(dǎo)生產(chǎn)企業(yè)在研發(fā)階段制劑中抑菌劑的確定。如果藥物本身不具有充分的抗菌活性，那么應(yīng)根據(jù)制劑特性（如水溶液制劑）添加適宜的抑菌劑，以防止制劑在正常貯藏和使用過(guò)程中可能發(fā)生的微生物污染和繁殖使藥物發(fā)生變質(zhì)而對(duì)使用者造成危害，尤其是多劑量包裝的制劑。在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，抑菌劑不能用于替代藥品生產(chǎn)的GMP管理，不能作為非滅菌制劑降低微生物污染的唯一途徑，也不能作為控制多劑量包裝制劑滅菌前的生物負(fù)載的手段。22中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第22頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則——基本規(guī)定所有抑菌劑都具有一定的毒性，制劑中抑菌劑的量應(yīng)為最低有效量。同時(shí)，為保證用藥安全，最終包裝容器中的抑菌劑有效濃度應(yīng)低于對(duì)人體有害的濃度。在制劑通則中要求具有抗菌活性的制劑，不管是添加的抑菌劑，還是藥物本身具有抗菌活性，在藥物研發(fā)階段，均應(yīng)確認(rèn)其抗菌效力。抑菌劑的抗菌效力在貯存過(guò)程中有可能因藥物的成分或包裝容器等因素影響而提高或降低，因此，應(yīng)驗(yàn)證最終容器中的抑菌劑效力在效期內(nèi)不因貯藏條件而降低。本試驗(yàn)方法和抑菌劑抑菌效力判斷標(biāo)準(zhǔn)用于包裝未啟開的成品制劑。23中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第23頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則——實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案；驗(yàn)證計(jì)數(shù)測(cè)定方法；制備濃菌液（108cfu/ml）；原包裝接種；立即計(jì)數(shù)與第7、14、28天計(jì)數(shù)；計(jì)數(shù)結(jié)果的常用對(duì)數(shù)值比較；結(jié)果判斷。24中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第24頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄XVIIIE2010年版《中國(guó)藥典》二部附錄XIXO25中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第25頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則是為所采用的試驗(yàn)方法能否替代藥典規(guī)定方法用于藥品微生物的檢驗(yàn)提供指導(dǎo)。微生物檢驗(yàn)的新技術(shù)基于微生物生長(zhǎng)信息的檢驗(yàn)技術(shù)，如生物發(fā)光技術(shù)、電化學(xué)技術(shù)、比濁法等；直接測(cè)定的被測(cè)介質(zhì)中活微生物的檢驗(yàn)技術(shù)，如固相細(xì)胞計(jì)數(shù)法、流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法等；基于微生物細(xì)胞所含有特定組成成分的分析技術(shù)，如脂肪酸測(cè)定技術(shù)、核酸擴(kuò)增技術(shù)、基因指紋分析技術(shù)等。26中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第26頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則在生物技術(shù)和制藥行業(yè)中，對(duì)微生物質(zhì)量進(jìn)行控制主要有兩方面的工作：過(guò)程監(jiān)控和成品放行。傳統(tǒng)方法的弱點(diǎn)是檢驗(yàn)速度慢。利用傳統(tǒng)方法所得到的微生物質(zhì)量控制信息，只能作為產(chǎn)品放行評(píng)價(jià)的一部分內(nèi)容，而不能用于及時(shí)指導(dǎo)生產(chǎn)過(guò)程中的各工藝環(huán)節(jié)。替代方法的優(yōu)點(diǎn)是檢驗(yàn)速度快，能夠?qū)ιa(chǎn)過(guò)程的關(guān)鍵工藝環(huán)節(jié)作出及時(shí)的微生物質(zhì)量評(píng)價(jià)。在醫(yī)藥行業(yè)完全有必要也有可能使用微生物檢驗(yàn)的替代方法27中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第27頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)參數(shù)定性檢驗(yàn)定量檢驗(yàn)準(zhǔn)確度－＋精密度－＋專屬性＋＋檢測(cè)限＋－定量限－＋線性－＋范圍－＋重現(xiàn)性＋＋耐用性＋＋驗(yàn)證參數(shù)表注：＋表示需要開展－表示不需要開展藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則28中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第28頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)驗(yàn)證參數(shù)與國(guó)外藥典比較，這部分內(nèi)容有所不同。在定性檢驗(yàn)的驗(yàn)證中，借鑒了美國(guó)藥典的規(guī)定，需要開展的驗(yàn)證參數(shù)為專屬性、檢測(cè)限、重現(xiàn)性和耐用性，放棄了歐洲藥典對(duì)準(zhǔn)確度和精密度的規(guī)定。在定量檢驗(yàn)的的驗(yàn)證中，借鑒了歐洲藥典的規(guī)定，除檢測(cè)限外，其他參數(shù)均需要驗(yàn)證。29中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第29頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定性檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證1、專屬性專屬性是指檢測(cè)樣品中可能存在的微生物種類的能力強(qiáng)調(diào)應(yīng)關(guān)注樣品存在對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響研究表明，在使用依賴培養(yǎng)技術(shù)的替代方法時(shí)，樣品的存在會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)出現(xiàn)假陰性對(duì)于不依賴培養(yǎng)技術(shù)的替代方法，樣品的存在還可能導(dǎo)致檢驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)可采用χ2檢驗(yàn)30中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第30頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定性檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證2、檢測(cè)限檢測(cè)限是指在替代方法設(shè)定的檢驗(yàn)條件下，樣品中能被檢出的微生物的最低數(shù)量，該數(shù)量是指在稀釋或培養(yǎng)之前初始樣品所含有的微生物數(shù)量，而不是指檢驗(yàn)過(guò)程中某一環(huán)節(jié)的供試液中所含有的微生物數(shù)量驗(yàn)證的關(guān)鍵是確定接種菌的最低數(shù)量，與國(guó)外藥典規(guī)定相同，要求該數(shù)量應(yīng)能夠在采用藥典方法檢驗(yàn)時(shí)，有50％的檢出率對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)可采用χ2檢驗(yàn)31中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第31頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定性檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證3、重現(xiàn)性重現(xiàn)性是指相同的樣品在正常的實(shí)驗(yàn)條件（如實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所、實(shí)驗(yàn)人員、儀器、試劑的批次等）發(fā)生變化時(shí)，所得檢驗(yàn)結(jié)果的精密度，反映了微生物檢驗(yàn)方法在檢驗(yàn)結(jié)果上抵抗操作和環(huán)境變化的能力驗(yàn)證的關(guān)鍵是使接種菌的量在檢測(cè)限以上評(píng)價(jià)驗(yàn)證結(jié)果時(shí)，應(yīng)排除樣品均一性的影響對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)可采用χ2檢驗(yàn)32中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第32頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定性檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證4、耐用性耐用性是指當(dāng)方法參數(shù)有小的刻意變化時(shí)，檢驗(yàn)結(jié)果不受影響的能力，為方法正常使用時(shí)的可靠性提供依據(jù)對(duì)替代方法進(jìn)行耐用性評(píng)價(jià)，確定方法操作的關(guān)鍵注意點(diǎn)在開展了上述評(píng)價(jià)后，可以不必比較替代方法的耐用性與藥典方法的差異對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)可采用χ2檢驗(yàn)33中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第33頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定量檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證1、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度是指替代方法的檢驗(yàn)結(jié)果與藥典方法檢驗(yàn)結(jié)果的一致程度。準(zhǔn)確度的確認(rèn)應(yīng)在檢驗(yàn)的范圍內(nèi)。通常用微生物的回收率（％）來(lái)表示準(zhǔn)確度。驗(yàn)證的菌濃度應(yīng)該在檢測(cè)范圍內(nèi)，并且至少應(yīng)該有5種濃度以上，每種濃度重復(fù)檢驗(yàn)5次。替代方法的回收率應(yīng)該達(dá)到70％以上當(dāng)替代方法并不依賴微生物生長(zhǎng)出菌落或出現(xiàn)混濁來(lái)進(jìn)行定量時(shí)，可能出現(xiàn)回收率高于藥典方法的情況。對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)應(yīng)進(jìn)行必要的數(shù)學(xué)處理，如對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換，然后對(duì)上述數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)分析處理。34中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第34頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定量檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證2、精密度精密度是指在檢驗(yàn)范圍內(nèi)，對(duì)同一個(gè)均勻的樣品多次重復(fù)取樣，其檢驗(yàn)結(jié)果的一致程度。微生物定量檢驗(yàn)的精密度通常采用標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（變異系數(shù)）來(lái)表示。驗(yàn)證的菌濃度應(yīng)該在檢測(cè)范圍內(nèi)，并且至少應(yīng)該有5種濃度以上，每種濃度重復(fù)檢驗(yàn)10次?？梢越邮艿南鄬?duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于35％。在該項(xiàng)目上，USP的規(guī)定是15％～35％，研究表明，當(dāng)含菌濃度在30～300cfu/ml時(shí)，計(jì)數(shù)結(jié)果的RSD完全可能在15％以內(nèi)，因此，指導(dǎo)原則中對(duì)該指標(biāo)作了修改。替代方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)不大于藥典方法。對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)可采用t檢驗(yàn)分析處理。處理時(shí)，應(yīng)分別評(píng)價(jià)每種濃度下兩種方法計(jì)數(shù)結(jié)果的差異以及兩種方法在不同濃度下獲得的RSD值的差異。35中國(guó)藥品生物制品檢定所當(dāng)前第35頁(yè)\共有40頁(yè)\編于星期四\12點(diǎn)定量檢驗(yàn)的方法驗(yàn)證3、專屬性專屬性是指通過(guò)檢測(cè)適宜的試驗(yàn)菌，以證明檢驗(yàn)方法與其設(shè)定目的相適應(yīng)的能力。例如，菌落計(jì)數(shù)平皿法其設(shè)定目的在于檢出一定數(shù)量的微生物，則其專屬性驗(yàn)證應(yīng)證明當(dāng)樣品中存在一定數(shù)量的試驗(yàn)菌時(shí)，通過(guò)平皿法檢驗(yàn)，能夠檢出試驗(yàn)菌，而樣品的存在不會(huì)對(duì)結(jié)果造成影響。驗(yàn)證的關(guān)鍵是合理評(píng)價(jià)樣品的存在對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響，當(dāng)替代方法不依賴微生物生長(zhǎng)出菌落或出現(xiàn)混濁就可以定量時(shí)，這種評(píng)價(jià)顯得尤為必要。對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)可采用雙因素方差分析的方