針葉天藍(lán)繡球組培繁殖技術(shù)規(guī)程

針葉天藍(lán)繡球組培繁殖技術(shù)規(guī)程范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了針葉天藍(lán)繡球（PhloxsubulataL.）組培繁殖的環(huán)境與設(shè)備消毒、培養(yǎng)基配制、外植體選擇與消毒、外植體接種、繼代增殖、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、培養(yǎng)條件、移栽及生產(chǎn)檔案。本標(biāo)準(zhǔn)適用于針葉天藍(lán)繡球的種苗生產(chǎn)。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3環(huán)境與設(shè)備消毒3.1接種室消毒接種室消毒按NY/T2306-2013中8.6進(jìn)行。3.2超凈工作臺(tái)消毒超凈工作臺(tái)消毒按NY/T2306-2013中8.5、8.6進(jìn)行。3.3培養(yǎng)室消毒培養(yǎng)室消毒按NY/T2306-2013中8.7進(jìn)行。3.4接種器具消毒接種器具按NY/T2306-2013中8.4進(jìn)行。4培養(yǎng)基配制4.1母液配制培養(yǎng)基母液配制按NY/T2306-2013中7.3執(zhí)行。4.2培養(yǎng)基配制4.2.1培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配制成分如下：a）接種培養(yǎng)基：MS＋NAA0.5mg/L+6BA1mg/L+蔗糖30g/L＋X脂粉5g/L，pH值6.0。b）繼代增殖培養(yǎng)基：MS+NAA0.5mg/L+6BA2mg/L+蔗糖30g/L＋X脂粉5g/L，pH值6.0。c）壯苗培養(yǎng)基：MS++蔗糖30g/L＋X脂粉5g/L，pH值6.0。d）生根培養(yǎng)基：1/2MS+IBA1mg/L＋NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L＋X脂粉5g/L+活性炭3g/L，pH值6.0。4.2.2培養(yǎng)基配制方法培養(yǎng)基配制方法按NY/T2306-2013中7.4執(zhí)行。4.3培養(yǎng)基滅菌及保存培養(yǎng)基滅菌及保存方法按LY/T1882-2010中4.2進(jìn)行。5外植體選擇、消毒與接種5.1外植體選擇春季從生長(zhǎng)健壯無病蟲害的母株上剪當(dāng)年生的粗壯嫩莖作為外植體，應(yīng)晴天進(jìn)行。5.2外植體消毒將外植體置于500mL燒杯中，燒杯口套紗網(wǎng)，加2滴～4洗潔精，先用自來水浸泡8min～10min后，再?zèng)_洗30min，倒凈水，在超凈工作臺(tái)上用75%酒精清洗10s～15s后取出，浸泡于0.1%氯化汞溶液中6min～8min，輕搖，倒掉消毒液后用無菌水沖洗3次～5次，再用無菌濾紙吸干表面的水分備用。5.3接種與誘導(dǎo)培養(yǎng)將消毒后的外植體切成1cm～2cm的莖段，每段至少帶有1個(gè)～2個(gè)葉芽，將切好的外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，注明接種物名稱和日期，培養(yǎng)21d～28d，記錄誘導(dǎo)情況。6繼代增殖、壯苗與生根培養(yǎng)6.1繼代增殖培養(yǎng)切分誘導(dǎo)分化的不定芽接入繼代增殖培養(yǎng)基中，約8個(gè)/瓶，培養(yǎng)28d～35d，每個(gè)莖段萌發(fā)出5個(gè)～8個(gè)不定芽，分割新長(zhǎng)出的不定芽，可按需求重復(fù)繼代。6.2壯苗培養(yǎng)切取繼代增殖培養(yǎng)中長(zhǎng)1.0cm以上的不定芽，轉(zhuǎn)接至壯苗培養(yǎng)基中，約8個(gè)/瓶，培養(yǎng)14d～21d。6.3生根培養(yǎng)壯苗培養(yǎng)基中組培苗長(zhǎng)到2.0cm以XX度時(shí)，將小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，約10株/瓶，培養(yǎng)7d～10d，當(dāng)小苗基部長(zhǎng)出健壯的不定根3條以上，大部分苗根長(zhǎng)為0.5cm～2.0cm時(shí)，即可進(jìn)行移栽。7培養(yǎng)條件無菌培養(yǎng)室白天的溫度控制在23±2℃，夜間不低于15℃，相對(duì)空氣濕度控制在60%～80%，光照強(qiáng)度為2000Lux～3000Lux，光照時(shí)間為12h/d～14h/d，黑暗時(shí)間為10h/d～12h/d。8移栽8.1煉苗將生根培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到過渡培養(yǎng)間，半開瓶口1d～2天后，敞開瓶口煉苗2d～3d后可移栽。8.2移栽基質(zhì)的制備基質(zhì)選擇草炭、珍珠巖和蛭石混合，體積比約為2:2:1，栽植前用0.5%的高錳酸鉀溶液澆透消毒24h。8.3組培苗移栽在溫室取出生根的小苗，用清水洗凈根部培養(yǎng)基，清洗時(shí)應(yīng)避免傷根。將洗凈的生根苗移栽至裝基質(zhì)的128穴盤，移栽后壓實(shí)小苗周圍的基質(zhì)，澆透水，覆70%遮陽網(wǎng)。8.4移栽苗管理保證溫室內(nèi)幼苗水分供需平衡，育苗水分管理按GB/T6001執(zhí)行。移栽5d～7d后，去掉遮陽網(wǎng)，澆1/2MS營(yíng)養(yǎng)液1次，溫度22℃～28℃，相對(duì)空氣濕度60%～80%，溫室環(huán)境應(yīng)保持清潔，21d～28